第三章-生物堿第五節(jié)課件

第三章生物堿31生物堿概述生物堿的結(jié)構(gòu)與分類生物堿的理化性質(zhì)生物堿的檢識(shí)生物堿的提取和分離2433356生物堿的提取和分離實(shí)例用途：鑒別：檢查生物堿有無（定性反應(yīng)）；顯色劑：薄層色譜，紙色譜提取分離：檢查是否提取完全。第四節(jié)生物堿的檢識(shí)一、化學(xué)檢識(shí)1.沉淀反應(yīng)生物堿在酸性水溶液中，與某些試劑生成難溶于水的復(fù)鹽或分子復(fù)合物的反應(yīng)。分離純化：雷氏銨鹽用于季銨堿的分離常用生物堿沉淀劑碘化物復(fù)鹽類：碘化鉍鉀試劑：桔紅色沉淀碘—碘化鉀：紅棕色沉淀碘化汞鉀：類白色沉淀（若加過量試劑，沉淀溶解）重金屬鹽類：磷鉬酸試劑：白色或黃褐色沉淀硅鎢酸試劑：淡黃或灰白色沉淀大分子酸類：苦味酸試劑：黃色結(jié)晶其它：硫氰酸鉻鉀（雷氏銨鹽）：紅色沉淀或結(jié)晶（季銨堿）第四節(jié)生物堿的檢識(shí)一、化學(xué)檢識(shí)1.沉淀反應(yīng)結(jié)果判斷a.鑒別生物堿的存在，需要采用三種以上生物堿試劑。b.排除假陽性反應(yīng)，除去水提液中含有的蛋白質(zhì)、多肽、鞣質(zhì)等雜質(zhì)。c.仲胺類不易與生物堿沉淀試劑反應(yīng)，如麻黃堿。

（如何排除水溶性成分的干擾？）常規(guī)提純方法（排除水溶性成分的干擾）中草藥水提液CHCl3H2OH+/H2OOH-/CHCl3萃取H2OCHCl3氨基酸、蛋白質(zhì)多糖、鞣質(zhì)等測(cè)定液第四節(jié)生物堿的檢識(shí)二、色譜檢識(shí)薄層色譜、紙色譜（一）薄層色譜法吸附劑：硅膠、氧化鋁展開劑：三氯甲烷、苯極性很弱的生物堿：加入極性小的有機(jī)溶劑（石油醚、環(huán)己烷）極性較強(qiáng)的生物堿：加入極性較大的有機(jī)溶劑（甲醇、乙醇）第四節(jié)生物堿的檢識(shí)二、色譜檢識(shí)（一）薄層色譜法吸附劑：硅膠（弱酸性）堿性較強(qiáng)的生物堿易在硅膠板上產(chǎn)生拖尾，形成復(fù)斑。解決方法：①堿液制板（0.1～0.5mol/LNaOH）②展開劑中加入少許二乙胺或氨水③在層析槽中放一小杯氨水，使氨氣飽和展開缸。在展開前先用氨氣飽和薄層板。第四節(jié)生物堿的檢識(shí)二、色譜檢識(shí)（一）薄層色譜法結(jié)果觀察：①可見光下觀察有色斑點(diǎn)（例如小檗堿顯黃色）。②紫外光下觀察。③噴顯色劑(碘化鉍鉀，對(duì)大多數(shù)生物堿顯橘紅色）硅膠和氧化鋁色譜(吸附色譜）適用于檢識(shí)脂溶性生物堿。第四節(jié)生物堿的檢識(shí)二、色譜檢識(shí)（一）紙色譜法正相色譜，分配色譜適用：水溶性生物堿、脂溶性生物堿、生物堿鹽檢識(shí)水溶性生物堿，樣品液為酸水溶液固定相水展開劑偏酸性（使生物堿以鹽的狀態(tài)存在）、極性較大的有機(jī)溶劑（正丁醇—冰醋酸—水4：1：5上層，即BAW系統(tǒng)）第四節(jié)生物堿的檢識(shí)二、色譜檢識(shí)（一）紙色譜法適用：水溶性生物堿、脂溶性生物堿、生物堿鹽檢識(shí)游離態(tài)生物堿（脂溶性、極性?。┑臋z識(shí)，樣品液為氯仿溶液。

固定相甲酰胺（有機(jī)堿）展開劑偏堿性（使生物堿以游離狀態(tài)存在）、極性較小的有機(jī)溶劑（甲酰胺飽和的苯、三氯甲烷、乙酸乙酯）第四節(jié)生物堿的檢識(shí)二、色譜檢識(shí)（一）紙色譜法多層緩沖紙色譜：

固定相酸性緩沖溶液堿性強(qiáng)的生物堿Rf值小。紙色譜顯色劑：

與薄層色譜相同，但試劑中不可含有硫酸。第五節(jié)生物堿的提取和分離提取方法水蒸氣蒸餾法溶劑法酸水提取法乙醇提取法親脂性有機(jī)溶劑提取法第五節(jié)生物堿的提取和分離（一）酸水提取法基本原理：生物堿與酸形成易溶于水的生物堿鹽。常用酸水：0.5~1%硫酸、鹽酸操作方法：滲濾法，浸漬法酸水提取法提取液1.離子交換法2.萃取法3.沉淀法第五節(jié)生物堿的提取和分離1.離子交換法酸水提取液陽離子交換樹脂樹脂柱（含BH＋）NH4OH堿化，CHCl3洗脫（也可以用EtOH）

樹脂柱流出液（雜質(zhì)）CHCl3溶液（游離生物堿）回收CHCl3總生物堿適用于水溶性較大的生物：苦參堿、麻黃堿第五節(jié)生物堿的提取和分離2.萃取法酸水提取液氨水堿化，三氯甲烷萃取三氯甲烷層堿水層（水溶性雜質(zhì)）（水溶性生物堿）回收CHCl3總生物堿第五節(jié)生物堿的提取和分離3.沉淀法酸水提取液堿化，過濾沉淀（總生物堿）季銨堿：雷氏銨鹽沉淀法雷氏銨鹽（硫氰酸鉻）：能與季銨型生物堿生成難溶于水的雷氏復(fù)鹽沉淀第五節(jié)生物堿的提取和分離（二）乙醇提取法基本原理：生物堿及其鹽可溶于乙醇。常用溶劑：60%~95%乙醇操作方法：滲濾法，回流法優(yōu)點(diǎn)：適用范圍廣、易濃縮、水溶性雜質(zhì)少缺點(diǎn)：脂溶性雜質(zhì)多提取流程（二）乙醇提取法提取流程：藥材乙醇回流或滲濾乙醇提取液減壓回收乙醇濃縮液酸水液加稀酸放置，過濾沉淀（脂溶性雜質(zhì)）堿化，過濾①沉淀（總生物堿）堿水液（水溶性生物堿或雜質(zhì)）②堿化，有機(jī)溶劑萃取有機(jī)溶劑層總生物堿回收溶劑第五節(jié)生物堿的提取和分離（三）親脂性有機(jī)溶劑法基本原理：游離生物堿易溶于親脂性有機(jī)溶劑。常用溶劑：三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯操作方法：回流法，連續(xù)回流法提取流程（三）親脂性有機(jī)溶劑提取法提取流程：藥材少量氨水或石灰水潤濕親脂性有機(jī)溶劑回流有機(jī)溶劑提取液酸水萃取酸水液有機(jī)層堿水層有機(jī)溶劑層總生物堿回收溶劑堿化，有機(jī)溶劑萃取第五節(jié)生物堿的提取和分離二、分離總生物堿酸水溶解、濾過酸水溶液氯仿萃取酸水層（強(qiáng)堿、中強(qiáng)堿）氯仿層（弱堿性生物堿）堿水層（強(qiáng)堿性生物堿）有機(jī)溶劑層（中強(qiáng)堿性生物堿）氨水調(diào)pH9~10，有機(jī)溶劑萃?。ㄒ唬┥飰A的初步分離第五節(jié)生物堿的提取和分離二、分離（二）生物堿單體的分離1.利用堿性的差異2.利用游離生物堿在有機(jī)溶劑中溶解性不同3.利用生物堿鹽在水中溶解度的差異4.利用生物堿特殊官能團(tuán)性質(zhì)不同5.利用色譜法（二）生物堿單體的分離

1.利用堿性的差異PH梯度萃取法方法1、混合生物堿溶于氯仿中逐步加酸性緩沖液(PH由高至低)生物堿依鹽的形式由強(qiáng)至弱被依次分離預(yù)試：PH緩沖紙色譜（二）生物堿單體的分離

1.利用堿性的差異PH梯度萃取法

方法2、混合生物堿溶于酸水中逐步加堿(氨水等)每調(diào)一次pH(pH由低至高)，用有機(jī)溶劑萃取一次.生物堿由弱至強(qiáng)依次被分離預(yù)試：PH緩沖紙色譜（二）生物堿單體的分離2.利用游離生物堿在有機(jī)溶劑中溶解性不同苦參堿

氧化苦參堿

氧化苦參堿的N→O半極性配位鍵，極性大，在水中溶解度較大，在乙醚中溶解度較小。將總生物堿溶于氯仿，加入10倍量乙醚，氧化苦參堿沉淀析出。（二）生物堿單體的分離2.利用游離生物堿在有機(jī)溶劑中溶解性不同漢防己甲素和漢防己乙素混合物冷苯溶解不溶物防己諾林堿（漢防己乙素）

冷苯液回收冷苯溶劑粉防己堿（漢防己甲素）（二）生物堿單體的分離2.利用游離生物堿在有機(jī)溶劑中溶解性不同粉防己堿R=CH3防己諾林堿R=H防己諾林堿比粉防己堿多一個(gè)酚羥基，故極性較大，在冷苯中的溶解度小于粉防己堿。（二）生物堿單體的分離3.利用生物堿鹽在水中溶解度的差異溶解度：鹽酸士的寧<鹽酸馬錢子堿硫酸士的寧>硫酸馬錢子堿草酸麻黃堿<草酸偽麻黃堿（二）生物堿單體的分離4.利用生物堿特殊官能團(tuán)性質(zhì)不同（1）.含酚羥基的生物堿可用氫氧化鈉水溶液萃取分離。原理：含酚羥基的生物堿具有堿性和弱酸性，既可溶于酸水，又可溶于堿水。而非酚性生物堿不溶于堿水。例如：嗎啡和可待因的分離例如：嗎啡和可待因的分離

嗎啡R=H可待因R=CH3

三氯甲烷層（可待因）混合物溶于三氯甲烷5%NaOH萃取堿水層（嗎啡）（二）生物堿單體的分離4.利用生物堿特殊官能團(tuán)性質(zhì)不同（2）.有內(nèi)酯和內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)的生物堿用熱的氫氧化鈉開環(huán)，加酸環(huán)合的性質(zhì)予以分離。例如：喜樹堿（二）生物堿單體的分離5.利用色譜法生物堿（游離）為脂溶性成分，適合于采用吸附原理進(jìn)行分離，吸附劑多用硅膠、氧化鋁，流動(dòng)相為中性的苯，氯仿，乙醚等有機(jī)溶劑或混合有機(jī)溶劑。課堂練習(xí)：說出下列各混合物的提取方法：