微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室假單胞菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室假單胞菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1．概述假單胞菌屬包括銅綠假單胞菌、熒光假單胞菌、惡臭假單胞菌、斯氏假單胞菌等。銅綠假單胞菌是假單胞菌屬的代表菌種。2．標(biāo)本類型血液、尿液、痰、腦脊液、穿刺液、膿液等標(biāo)本。3．鑒定3.1形態(tài)與染色革蘭陰性桿菌。3.2培養(yǎng)特性在血瓊脂平板上35℃培養(yǎng)18~24小時(shí)，形成藍(lán)綠色、透明溶血環(huán)的菌落，有生姜味。在麥康凱瓊脂平板上，可形成5種不同的菌落。①典型型：菌落不規(guī)則，邊緣呈傘狀伸展；②大腸菌樣型：菌落圓形凸起，無(wú)色透明，似大腸埃希菌菌落；③粗糙型：菌落呈鈕扣狀，表面粗糙，或菌落中央隆起邊緣扁平；④黏液型：菌落光滑，隆起，呈粘液狀，嵌入培養(yǎng)基中，不易挑起，似肺炎克雷伯菌，但是無(wú)色；⑤侏儒型：生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)18小時(shí)尚不見(jiàn)菌落，24小時(shí)后才有細(xì)小菌落。3.3生化特性氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性；分解葡萄糖，不分解乳糖、麥芽糖、甘露醇和蔗糖；動(dòng)力、枸櫞酸鹽、精氨酸雙水解酶和硝酸鹽還原試驗(yàn)均為陽(yáng)性；吲哚、賴氨酸和鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)陰性。3.4鑒別要點(diǎn)3.4.1本菌屬特征藍(lán)綠色或熒光色菌落、有生姜味，動(dòng)力和氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，在4℃時(shí)不生長(zhǎng)而在42℃時(shí)可以生長(zhǎng)。3.4.2與熒光假單胞菌和惡臭假單胞菌的鑒別三者均可產(chǎn)生熒光色素，但銅綠假假單胞42℃時(shí)生長(zhǎng)，后兩者則不能生長(zhǎng)。3.5操作步驟3.5.1氧化酶試驗(yàn)參見(jiàn)《氧化酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》3.5.2鑒定從麥康凱瓊脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鑒定儀或傳統(tǒng)生化反應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定。4．質(zhì)控參見(jiàn)《藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》及CLSIM100-S20最新版本文件。5．質(zhì)量控制見(jiàn)《質(zhì)量管理程序》6．檢驗(yàn)結(jié)果解釋與分析感染銅綠假單胞菌的病人，經(jīng)抗生素治療3-4日后，易產(chǎn)生耐藥性。因此對(duì)銅綠假單胞菌要經(jīng)常做抗生素藥敏試驗(yàn)。7．臨床意義銅綠假單胞菌廣泛分布于水、空氣、土壤以及正常人體皮膚、呼吸道與腸道黏膜中，為條件致病菌。當(dāng)手術(shù)、化療、放療、激素治療等原因使人體抵抗力下降時(shí)容易引起感染?？梢馃齻麆?chuàng)面感染、肺部感染、泌尿道感染、中耳炎、腦膜炎、菌血癥等。8．鑒定流程血液、尿液、痰等血液、尿液、痰等挑取麥康凱或血瓊脂平板可疑菌落挑取麥康凱或血瓊脂平板可疑菌落菌菌落氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性儀器鑒定或手工生化鑒定并做藥敏試驗(yàn)儀器鑒定或手工生化鑒定并做藥敏試驗(yàn)假單胞菌屬假單胞菌屬參考文獻(xiàn)1]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì).CNAS-GL23；2008醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南.2008[2]周庭銀編著.《臨床微生物學(xué)診斷與圖解》.第二版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2007[3]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第三版.南京：東南大學(xué)出版社，2006[4]MurrayPR.ManualO/FClinicalMircrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,2007[5]ISO15189:2007醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則.2007