苯磺酸氨氯地平片固體制劑的一致性評價(jià)

苯磺酸氨氯地平片固體制劑的一致性評價(jià)

苯磺酸銨（氨基丙烯酸鹽）是美國phfiner公司開發(fā)的第三代長效二羥吡啶（dph）鈣抗劑。這是國家基本藥物目錄（2012年版）（以下簡稱“目錄”）中的一個(gè)品種。近年來，它是世界上最大的抗高血壓藥物之一。國家食品藥品監(jiān)督管理總局(CFDA)在2016年明確要求,《目錄》中2007年10月1日前批準(zhǔn)上市的化學(xué)藥品仿制藥口服固體制劑,應(yīng)在2018年底前完成一致性評價(jià)1料藥及對照品1200/1260型高效液相色譜儀(美國Agilent公司);FADT-1202RC型自動(dòng)溶出儀(上海富科思分析儀器有限公司)。1苯磺酸鹽原料藥(印度CadilaPharmaceuticalLtd.,含量99.6%,批號15AD026);1苯磺酸鹽對照品(中國食品藥品檢定研究院,含量99.9%,批號100374-201204);1苯磺酸鹽片[受試制劑,大連輝瑞制藥有限公司,規(guī)格5mg(以1計(jì)),批號M16685;參比制劑,美國Pfizer制藥公司,規(guī)格5mg(以1計(jì)),批號L57540];甲醇、乙腈均為色譜純,水為超純水,其他試劑均為分析純。2方法和結(jié)果2.1溶出介質(zhì)和介質(zhì)參考ChP2015、美國藥典及日本橙皮書中的溶出度試驗(yàn)方法,采用槳法、75r/min、介質(zhì)500ml的條件進(jìn)行試驗(yàn),并采用pH1.0鹽酸、pH4.0乙酸鹽緩沖液(ABS)、pH6.8磷酸鹽緩沖液(PBS)和水作為溶出介質(zhì)2.21溶液ph-溶解度法參照ChP2015四部通則配制pH值分別為1.0、2.0、4.0、5.5、6.8、7.0的溶出介質(zhì)。精密稱取1苯磺酸鹽原料藥細(xì)粉350mg,置具塞瓶中,分別加入上述溶出介質(zhì)或水50ml,各3份,37℃水浴振搖24h,其中pH1.0、2.0介質(zhì)中樣品分別于0.17、0.5、1、4、6和24h時(shí)取樣,pH4.0、5.5、6.8、7.0介質(zhì)和水中樣品分別于3、6、12和24h時(shí)取樣,過濾,取續(xù)濾液用HPLC法測定,計(jì)算溶解度,繪制“pH-溶解度”曲線,結(jié)果見表1。2.3分析方法的建立參考ChP2015二部收載的1苯磺酸鹽片項(xiàng)下的溶出度檢測方法,為了實(shí)現(xiàn)快速分析,本試驗(yàn)根據(jù)普通色譜柱與快速色譜柱的洗脫條件轉(zhuǎn)換關(guān)系,經(jīng)過條件優(yōu)化,最終確定本研究中快速HPLC方法的色譜條件如下。色譜柱PhenomenexKinetexC常規(guī)和快速HPLC法所得的典型色譜圖見圖1。2.3.1空白試樣色譜測定空白輔料溶液:稱取按處方比例混合均勻的空白輔料混粉適量,置100ml量瓶中,加不同的溶出介質(zhì)定容,即得。對照品溶液:精密稱取1苯磺酸鹽對照品適量,加甲醇1ml溶解,分別用“2.1”項(xiàng)下4種溶出介質(zhì)制成濃度為0.22mg/ml的溶液,作為1對照品貯備液。精密量取該貯備液1ml,用相應(yīng)介質(zhì)稀釋至20ml,即得。供試品溶液:取本品1片,置100ml量瓶中,加溶出介質(zhì)溶解并定容;精密量取該溶液2ml,用相應(yīng)介質(zhì)稀釋至10ml,即得。分別取空白溶出介質(zhì)、空白輔料溶液、對照品溶液和供試品溶液,過濾后進(jìn)樣,按“2.3”項(xiàng)下色譜條件測定,記錄色譜圖。結(jié)果(圖2)表明,空白輔料及溶出介質(zhì)均不影響1的測定。2.3.2線性回歸分析取上述1對照品貯備液適量,用4種溶出介質(zhì)稀釋成1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0和16.0μg/ml的系列濃度對照品溶液。分別過濾后進(jìn)樣測定,記錄色譜圖。以峰面積A為縱坐標(biāo),1濃度c為橫坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,所得回歸方程見表2。結(jié)果表明,1濃度在1.0~16.0μg/ml范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。2.3.3進(jìn)樣穩(wěn)定性測定取“2.3.2”項(xiàng)下配制的以水為介質(zhì)的對照品溶液(8.0μg/ml),連續(xù)進(jìn)樣6次,記錄色譜圖,結(jié)果峰面積的RSD為0.88%(n=6)。2.3.4活性組分穩(wěn)定性測定取“2.3.2”項(xiàng)下以pH6.8PBS為介質(zhì)的對照品溶液(8.0μg/ml)適量,離心(301.86×g)10min或經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)過濾,分別取上清液和續(xù)濾液進(jìn)樣測定。結(jié)果表明經(jīng)微孔濾膜過濾并棄去初濾液6ml后檢測,基本不影響測定。2.3.5平均加標(biāo)回收率分別稱取空白輔料混粉適量,共9份,加入1苯磺酸鹽對照品貯備液適量,用pH1.0和pH4.0介質(zhì)配制相當(dāng)于1標(biāo)示量(10μg/ml)40%、80%和120%的溶液,進(jìn)樣測定。結(jié)果1的平均回收率(n=9)為98.8%(RSD=0.8%)和98.7%(RSD=1.7%)。分別稱取空白輔料混粉適量,共9份,加入1苯磺酸鹽對照品貯備液適量,分別用pH6.8介質(zhì)和水配制相當(dāng)于1標(biāo)示量(10μg/ml)約20%、60%和100%的溶液,進(jìn)樣測定。結(jié)果1的平均回收率(n=9)為97.1%(RSD=1.4%)和97.6%(RSD=1.4%)。2.3.6對照品溶液穩(wěn)定性對照品溶液穩(wěn)定性:取“2.3.2”項(xiàng)下各介質(zhì)線性溶液中100%濃度(8.0μg/ml)的對照品溶液,8℃避光放置,分別于0、1、2、4、6和8h時(shí)進(jìn)樣測定,記錄峰面積。結(jié)果表明,對照品溶液在8℃避光條件下,在pH4.0介質(zhì)和水中于8h內(nèi)穩(wěn)定,RSD為0.58%和0.85%;在pH1.0和pH6.8介質(zhì)中于4h內(nèi)穩(wěn)定,RSD為1.1%和1.0%。供試品溶液穩(wěn)定性:取本品1片,置溶出介質(zhì)500ml中,超聲溶解,8℃避光放置,過濾后分別于0、1、2、4、6和8h時(shí)進(jìn)樣測定,記錄峰面積。結(jié)果表明,供試品溶液在8℃避光條件下,在pH4.0介質(zhì)和水中于8h內(nèi)穩(wěn)定,RSD為0.45%和0.53%;在pH1.0和pH6.8介質(zhì)中于4h內(nèi)穩(wěn)定,RSD為1.4%和1.3%。2.4溶出介質(zhì)的選擇每種產(chǎn)品各取12片,參照ChP2015四部通則0931第二法進(jìn)行。分別以pH1.0鹽酸、pH4.0ABS、pH6.8PBS和水500ml為溶出介質(zhì),在轉(zhuǎn)速75r/min、溫度37℃下試驗(yàn)。分別于5、10、15、30、45、60、90和120min時(shí)取樣1ml,在線過濾后進(jìn)樣測定峰面積,按外標(biāo)法計(jì)算1濃度和溶出率。采用相似因子(f3提高了檢測效率對藥物進(jìn)行多種pH值溶出介質(zhì)中的溶出曲線研究能較好地揭示口服固體制劑的內(nèi)在品質(zhì),是指導(dǎo)仿制藥研發(fā)及提高人體生物等效性(BE)試驗(yàn)成功率必須進(jìn)行的研究內(nèi)容,也是對終產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量評估的重要手段本研究采用新型快速色譜柱,在不影響分離度和檢測靈敏度的條件下,將單個(gè)樣品的分析時(shí)間從20min縮短至3min,極大地縮短了溶出樣品的檢測時(shí)間,提高了檢測