藏藥綠蘿花超臨界co

藏藥綠蘿花超臨界co

藏藥綠濕花，又名金柿子、石雞子、馬蹄金，產(chǎn)于西藏寒冷地區(qū)。它的性質(zhì)很冷，聞起來(lái)很香。是西藏特有的珍貴植物,民間用于治療糖尿病、冠心病、高血壓及各種血管炎癥,具有良好的效果,在當(dāng)?shù)貞?yīng)用較為普遍。但目前尚未見(jiàn)綠蘿花提取工藝及藥理作用的研究報(bào)道。作者采用超臨界二氧化碳流體萃取技術(shù)提取綠蘿花中的脂溶性成分,并優(yōu)化工藝,參考相關(guān)文獻(xiàn)1儀器、試劑和動(dòng)物1.1儀器1.2氧氧化酶及甲苯磺丁脲綠蘿花(西藏福神藥材開(kāi)發(fā)有限公司);四氧嘧啶為BDH公司產(chǎn)品(英國(guó));甲苯磺丁脲為廣東華南藥業(yè)有限公司產(chǎn)品;血清葡萄糖測(cè)定試劑盒為浙江溫州東歐生物工程有限公司產(chǎn)品。1.3醫(yī)用動(dòng)物Wistar大鼠(合格證號(hào):26-2003A002),體重(200±20)g,雌雄各半,由廣東省衛(wèi)生廳醫(yī)用動(dòng)物中心提供。2方法和結(jié)果2.1fe-co將200g綠蘿花粉末投入萃取釜中,對(duì)萃取釜、解析釜Ⅰ、貯罐分別進(jìn)行加熱,當(dāng)達(dá)到所選定的溫度時(shí),開(kāi)啟CO2.2正交試驗(yàn)選擇最佳工藝選擇萃取壓力(A)、萃取溫度(B)、解析壓力(C)、解析溫度(D)4個(gè)主要因素,各設(shè)定三個(gè)水平,設(shè)計(jì)4因素3水平正交試驗(yàn)L以萃取率為指標(biāo),則優(yōu)化工藝為A2.3中試放大實(shí)驗(yàn)取綠蘿花藥材5kg(n=3)按最佳工藝條件進(jìn)行中試放大實(shí)驗(yàn),各批次的萃取率分別為2.50%、2.54%及2.48%,表明重復(fù)性良好,該工藝切實(shí)可行。2.4綠葡萄提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血糖的影響2.4.1單次抗糖試驗(yàn)2.4.1.空腹血糖測(cè)定取Wistar大鼠30只,雌雄各半,隨機(jī)分為綠蘿花組、甲苯磺丁脲組和鹽水組,每組10例,各組禁食20h后斷尾取血,測(cè)定空腹血糖。單次灌胃給藥后1.5、3、5h斷尾取血測(cè)血糖,結(jié)果見(jiàn)表3。2.4.1.目標(biāo)血的測(cè)定取Wistar大鼠50只,雌雄各半,尾靜脈注射2.5%四氧嘧啶35mg/kg,1周后斷尾取血測(cè)血糖。凡血糖低于2g/L者剔除,將血糖>2g/L隨機(jī)分為綠蘿花組、甲苯磺丁脲組和鹽水組,斷尾取血測(cè)單次灌胃給藥后1.5,3,5h血糖,結(jié)果見(jiàn)表4。2.4.2多次給藥以降低血糖2.4.2.連續(xù)給藥后各時(shí)間點(diǎn)血糖的測(cè)定取Wistar大鼠30只,雌雄各半,隨機(jī)分為綠蘿花組、甲苯磺丁脲組和鹽水組,每天2次,連續(xù)灌胃給藥20d,分別在給藥后第5、10、15、20d斷尾取血測(cè)血糖,結(jié)果見(jiàn)表5。2.4.2.制備致糖尿病模型取Wistar大鼠80只,雌雄各半,用四氧嘧啶制備實(shí)驗(yàn)性糖尿病模型,方法同前。將1周后血糖超過(guò)2g/L大鼠取出,其余隨機(jī)分為綠蘿花組、甲苯磺丁脲組和鹽水組,給藥方法和測(cè)定血糖時(shí)間同前,結(jié)果見(jiàn)表6。2.4.2.有效作用時(shí)間確定取Wistar大鼠(用四氧嘧啶制備實(shí)驗(yàn)性糖尿病)30只,雌雄各半,連續(xù)灌胃20d,在末次給藥不同時(shí)間測(cè)血糖,以測(cè)定有效作用時(shí)間,結(jié)果見(jiàn)表7。3超臨界萃取藥物的性質(zhì)、作用藏藥綠蘿花香氣濃烈,含有較多的揮發(fā)性成分,因此我們選擇超臨界二氧化碳萃取技術(shù)提取藥材中的親脂性有效成分,并對(duì)提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化,得到了最佳工藝參數(shù):萃取壓力20MPa、萃取溫度45℃、解析壓力8MPa、解析溫度50℃。對(duì)于超臨界萃取后的藥渣,我們將進(jìn)一步采用水提或低濃度醇提的方式研究其親水性成分。藥理研究結(jié)果表明,綠蘿花超臨界提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠血糖有顯著的降血糖作用,并呈良好的劑量相關(guān)性,有效作用時(shí)間在6小時(shí)以上,但對(duì)正常大鼠的血糖無(wú)明顯影響。但其提取物中的降血糖作用的化學(xué)成分,還有待進(jìn)一步研究。綠蘿花在當(dāng)?shù)刭Y源豐富,民間應(yīng)用廣泛,