糖類藥物的分析

糖類藥物的分析第1頁(yè)糖類物質(zhì)：是多羥基（2個(gè)或以上）醛類或酮類化合物，在水解后能變成以上二者之一有機(jī)化合物。在化學(xué)上，因?yàn)槠溆商?、氫、氧元素組成，在化學(xué)式表現(xiàn)上類似于“碳”與“水”聚合，故又稱之為碳水化合物。生物學(xué)功效：1.提供能量。植物淀粉和動(dòng)物糖原都是能量?jī)?chǔ)存形式。2.細(xì)胞骨架。纖維素、半纖維素、木質(zhì)素是植物細(xì)胞壁主要成份，肽聚糖是原核生物細(xì)胞壁主要成份。3.細(xì)胞間識(shí)別和生物分子間識(shí)別。細(xì)胞膜表面糖蛋白寡糖鏈參加細(xì)胞間識(shí)別。紅細(xì)胞表面ABO血型決定簇就含有巖藻糖。人體吸收：糖包含蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖、淀粉、糊精等。除了葡萄糖、果糖和半乳糖能被人體直接吸收，其余糖都要在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為基本單糖后，才能被吸收利用。糖類藥物的分析第2頁(yè)糖分類（依據(jù)結(jié)構(gòu)單元數(shù)目）1.單糖：不能被水解成更小分子糖。常見(jiàn)單糖有葡萄糖、果糖、核糖和脫氧核糖。2.低聚糖，又稱寡糖：由2～10個(gè)單糖分子脫水縮合而成。含有營(yíng)養(yǎng)意義低聚糖是雙糖。常見(jiàn)雙糖有：①蔗糖，一個(gè)葡萄糖分子和一個(gè)果糖分子縮合而成。②麥芽糖，甜度約為蔗糖二分之一。兩個(gè)葡萄糖分子脫水縮合而成。③乳糖，因存在于哺乳動(dòng)物乳汁中而得名。由一個(gè)葡萄糖分子和一個(gè)半乳糖分子結(jié)合而成。3.多糖：由幾百個(gè)乃至幾萬(wàn)個(gè)單糖分子縮合生成，通式為(C6H10O5)n，最主要是淀粉與纖維素。4.結(jié)合糖(復(fù)合糖，糖綴合物)：糖脂、糖蛋白、糖-核苷酸等。5.糖衍生物：糖醇、糖酸、糖胺、糖苷等。糖類藥物的分析第3頁(yè)葡萄糖單糖蔗糖乳糖

賦形劑和矯味劑一、藥品結(jié)構(gòu)與性質(zhì)雙糖淀粉多糖第一節(jié)葡萄糖及其制劑分析

醫(yī)學(xué)上糖類：葡萄糖屬單糖，是人體能量主要起源之一。乳糖、蔗糖，淀粉常被用作藥品制劑賦形劑或矯味劑。

糖類藥物的分析第4頁(yè)葡萄糖葡萄糖為醛糖，含有還原性；有多個(gè)不對(duì)稱碳原子，含有旋光性，為右旋體；在水中易溶，在乙醇中微溶。無(wú)色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末；無(wú)嗅，味甜糖類藥物的分析第5頁(yè)

OH

H

C

|

H—C—OH

|OH—C—HO

|

H—C—OH

|

H—C

|

CH2OH

H

OH

C

|

H—C—OH

|OH—C—HO

|

H—C—OH

|

H—C

|

CH2OH

CHO

|

H—C—OH

|OH—C—H

|

H—C—OH

|

H—C—OH

|

CH2OH

a-葡萄糖開(kāi)鏈葡萄糖?-葡萄糖葡萄糖投影結(jié)構(gòu)式示意圖糖類藥物的分析第6頁(yè)二、判別試驗(yàn)（一）比旋度測(cè)定旋光度：直線偏振光經(jīng)過(guò)光學(xué)活性化合物液體或溶液時(shí)，能引發(fā)旋光現(xiàn)象，使偏振光平面向左或右旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)度數(shù)稱旋光度。有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)中含有手性碳原子，含有旋光現(xiàn)象。利用測(cè)定藥品旋光度進(jìn)行定性、雜質(zhì)檢驗(yàn)和定量分析方法，稱為旋光度測(cè)定法。手性碳原子，是指和四個(gè)不一樣原子或基團(tuán)連接碳原子。在一定條件下測(cè)得旋光度稱為比旋度，以[α]表示。比旋度能夠反應(yīng)其純度，故藥典對(duì)葡萄糖原料不作專題含量測(cè)定，只要求比旋度范圍糖類藥物的分析第7頁(yè)影響旋光度測(cè)定原因：

１.物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)

物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)不一樣，旋光性也不一樣：

相同條件下，有旋轉(zhuǎn)角度大，有旋轉(zhuǎn)角度??；

有呈左旋（“-”表示），有呈右旋（“+”表示）；

有些物質(zhì)無(wú)手性碳原子，無(wú)旋光性。

２.溶液濃度

溶液濃度越大，其旋光度也越大。

在一定濃度范圍內(nèi)，藥品溶液濃度和旋光度呈線性關(guān)系。

測(cè)比旋度時(shí)，要求在一定濃度溶液中進(jìn)行。

３.溶劑

溶劑對(duì)旋光度影響比較復(fù)雜，隨溶劑與藥品而有所不一樣。

測(cè)定藥品旋光度和比旋度時(shí)，應(yīng)注明溶劑名稱。糖類藥物的分析第8頁(yè)４.光線經(jīng)過(guò)液層厚度光線經(jīng)過(guò)液層厚度越厚，旋光度越大除另有要求外，中國(guó)藥典（年版）采取1dm長(zhǎng)測(cè)定管５.光波長(zhǎng)波長(zhǎng)越短，旋光度越大。中國(guó)藥典（年版）采取鈉光譜D線（589.3nm）測(cè)定旋光度。６.溫度普通情況下，溫度影響不是很大，對(duì)于大多數(shù)物質(zhì)，在黃色鈉光情況下，溫度每升高1℃，比旋度約降低千分之一。糖類藥物的分析第9頁(yè)Ch.P.（）計(jì)算：g/mlg/100ml糖類藥物的分析第10頁(yè)(二)與斐林（Fehling）試液反應(yīng)葡萄糖醛基還原性水、△Cu2O↓

Fehling試液(三)IR中國(guó)藥典要求本品紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照?qǐng)D譜一致。

糖類藥物的分析第11頁(yè)三、雜質(zhì)檢驗(yàn)

（一）葡萄糖檢驗(yàn)葡萄糖制備工藝1、酸度：目標(biāo)：控制本品酸性雜質(zhì)。原因：內(nèi)在：因?yàn)槠咸烟侵杏腥┗?，易被氧化成葡萄糖酸?/p>

外在：水解過(guò)程中加入酸。方法：取本品2.0g,加新沸過(guò)冷蒸餾水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴與氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）0.20ml，應(yīng)顯粉紅色。糖類藥物的分析第12頁(yè)2、溶液澄清度與顏色目標(biāo)：檢驗(yàn)水中不溶性雜質(zhì)或有色雜質(zhì)。3、乙醇溶液澄清度目標(biāo)：檢驗(yàn)乙醇中不溶性雜質(zhì)，如糊精。原理：糊精在熱乙醇中溶解度小，使澄清度變差。方法：取本品1.0g，加90%乙醇30ml，置水浴上加熱回流約10min，溶液應(yīng)澄清。糖類藥物的分析第13頁(yè)4、亞硫酸鹽與可溶性淀粉原理及現(xiàn)象：因?yàn)椴糠至蛩嵩谒膺^(guò)程中被還原，可能產(chǎn)生亞硫酸鹽，而可溶性淀粉則是未反應(yīng)原料。供試品試驗(yàn)結(jié)果顯黃色，為合格。供試品中如有亞硫酸鹽存在，因?yàn)閬喠蛩嵊羞€原性，會(huì)使碘褪色，如有可溶性淀粉存在，則遇碘顯藍(lán)色。糖類藥物的分析第14頁(yè)

5、蛋白質(zhì)原理：制備葡萄糖原料多為淀粉，它來(lái)自于植物根莖或種子，因而在提取過(guò)程中常有蛋白質(zhì)被同時(shí)提出，利用蛋白質(zhì)類雜質(zhì)遇酸產(chǎn)生沉淀性質(zhì)可對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)（不得發(fā)生沉淀）6、氯化物、硫酸鹽、鈣鹽、鋇鹽等糖類藥物的分析第15頁(yè)（二）葡萄糖注射液檢驗(yàn)1.特殊雜質(zhì)：5-羥甲基糠醛(5-HMF)檢驗(yàn)葡萄糖易分解產(chǎn)生5-羥甲基糠醛，其本身是無(wú)色，它可再分解為乙酰丙酸與甲酸或聚合，其聚合物為一個(gè)有色物質(zhì)。葡萄糖遇強(qiáng)熱使溶液變黃，最少有一部分顏色是因?yàn)槠咸烟欠纸猱a(chǎn)物5-羥甲基糠醛聚合物作用所致；而且葡萄糖注射液色澤深淺與5-羥甲基糠醛產(chǎn)生量成正比。所以，能夠用5-羥甲基糠醛形成速度來(lái)檢驗(yàn)葡萄糖分解速度。糖類藥物的分析第16頁(yè)5-羥甲基糠醛(5-HMF)：對(duì)人體橫紋肌及內(nèi)臟有損害引入路徑：高溫消毒時(shí)分解產(chǎn)生檢驗(yàn)原理：利用雜質(zhì)有共軛雙烯結(jié)構(gòu)，采取UV-Vis進(jìn)行檢驗(yàn)要求：A284nm≤0.32

2.pH值：pH值3.2-6.53.重金屬：≤5ppm4.細(xì)菌內(nèi)毒素、無(wú)菌等糖類藥物的分析第17頁(yè)四、含量測(cè)定（一）原料：比旋度（二）葡萄糖注射液*≤10%葡萄糖注射液直接測(cè)定*＞10%葡萄糖注射液可加氨試液后測(cè)定

加氨試液可加速

、

兩種異構(gòu)體抵達(dá)旋光平衡加熱、加酸亦可加速平衡抵達(dá)糖類藥物的分析第18頁(yè)計(jì)算WZZ-3自動(dòng)旋光儀糖類藥物的分析第19頁(yè)結(jié)構(gòu)原理光源起偏鏡偏振光盛液管旋轉(zhuǎn)后偏振光檢偏鏡經(jīng)過(guò)檢偏鏡偏振光糖類藥物的分析第20頁(yè)（三）葡萄糖氯化鈉注射液含量測(cè)定1.葡萄糖

取本品，照葡萄糖注射液項(xiàng)下方法測(cè)定，即得。

2.氯化鈉（銀量法）

精密量取本品20ml，加水30ml，加2％糊精溶液5ml、2.5％硼砂溶液2ml與熒光黃指示液5～8滴，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于5.844mgNaCl。

糖類藥物的分析第21頁(yè)吸附指示劑變色原理：

化學(xué)計(jì)量點(diǎn)后，沉淀表面荷電狀態(tài)發(fā)生改變，指示劑在沉淀表面靜電吸附造成其結(jié)構(gòu)改變，進(jìn)而造成顏色改變，指示滴定終點(diǎn)。AgCl︱Cl-+FI-AgCl︱Ag+FI-Ag

+滴定前滴定中滴定終點(diǎn)熒光黃變色過(guò)程:

糖類藥物的分析第22頁(yè)滴定開(kāi)始前：Cl-FI-FI-Cl-Cl-Cl-Cl-FI-Cl-SP前：AgClCl-Cl-Cl-Cl-FI-FI-FI-SP及SP后：AgClAg+Ag+Ag+Ag+FI-FI-FI-糖類藥物的分析第23頁(yè)第二節(jié)右旋糖酐20、40及其制劑分析

起源：系蔗糖經(jīng)腸膜狀明串珠菌發(fā)酵后生成一個(gè)高分子葡萄糖聚合物，經(jīng)處理精制而得。因?yàn)榫酆掀咸烟欠肿訑?shù)目不一樣，而產(chǎn)生不一樣分子量產(chǎn)品。有高分子(平均分子量10-20萬(wàn)）、中分子（6-8萬(wàn)）、低分子（2-4萬(wàn)）、小分子（1-2）。性狀：為白色或類白色無(wú)定形粉末，無(wú)臭，無(wú)味。易溶于熱水，不溶于乙醇。其水溶液為無(wú)色或微帶乳光澄明液體。用途：是當(dāng)前最正確血漿代用具之一。臨床上慣用有中分子右旋糖酐，用于出血性、創(chuàng)傷性及燒傷性休克等。低、小分子右旋糖酐，能改進(jìn)微循環(huán)，亦有擴(kuò)充血容量作用。注:右旋糖酐70（中分子）；右旋糖酐40（低分子）；右旋糖酐10（小分子）糖類藥物的分析第24頁(yè)糖類藥物的分析第25頁(yè)糖類藥物的分析第26頁(yè)水、△Cu2O↓

一、比旋度測(cè)定右旋糖苷為旋光性物質(zhì)，含有旋光性。比旋度應(yīng)符合要求。二、化學(xué)判別反應(yīng)右旋糖苷20含有還原性，能與堿性酒石酸銅試液反應(yīng)。三、檢驗(yàn)項(xiàng)目：氯化物、氮、干燥失重、熾灼殘?jiān)?、重金屬、分子量和分子量分布等。糖類藥物的分析?7頁(yè)四、含量測(cè)定右旋糖苷20氯化鈉注射液含量測(cè)定1、右旋糖苷測(cè)定本品為復(fù)方制劑，右旋糖苷20有旋光性，而氯化鈉無(wú)旋光性，不干擾測(cè)定，用旋光度法測(cè)定右旋糖苷20含量。2、氯化鈉測(cè)定用鉻酸鉀法測(cè)定氯化鈉，右旋糖苷20不干擾，可直接測(cè)定。滴定反應(yīng)：Ag++C1-→AgCl↓（白色）終點(diǎn)反應(yīng)：2Ag++Cr042-→Ag2Cr04↓（磚紅色）

糖類藥物的分析第28頁(yè)1、葡萄糖酸鈣中蔗糖或還原糖類檢驗(yàn)用試劑是A、堿性焦性沒(méi)食子酸試液B、堿性亞硝基鐵氰化鈉試液C、堿性

-萘酚試液D、堿性碘化汞鉀試液E、堿性酒石酸銅試液

糖類藥物的分析第29頁(yè)2、葡萄糖中存在特殊雜質(zhì)為：A、糊精

B、氯化物C、砷鹽

D、酒精

E、鹽酸3、葡萄糖注射液含量測(cè)定方