免疫組織化學(xué) 考試重點

2012年周未班復(fù)習(xí)要點第一部分名詞解釋IHC免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry;IHC)或稱免疫細胞化學(xué)(ICC)是根據(jù)特異性抗原抗體反應(yīng)的原理來定位組織或細胞內(nèi)的抗原或抗體成分。2、CB檸檬酸緩沖液(O.Olmol/LpH6.0,CB),主要用于免疫組織化學(xué)抗原修復(fù)的緩沖液。3、AR抗原修復(fù)(antigenretrieval;AR)是以高溫、高壓對常規(guī)固定石蠟切片進行抗原修復(fù)，可以提高抗原抗體陽性檢測率的方法。4、TBSTris-HCI緩沖液，常用濃度為0.02M,pH7.8主耍用于IHC的沖洗和底物溶液的配制。5、PBS為0.01mol/L,pH7.4磷酸鹽緩沖液，主耍用于免疫組織化學(xué)的洗滌。6、酶消化酶消化主耍用于IHC前暴露抗原決定簇，有利于抗原抗體的檢測，提高陽性檢測率的方法。7、抗原決定簇抗原決定簇(antigenicdeterminant)又稱抗原表位(epitope)，是可與相應(yīng)抗體或淋巴細胞抗原識別受體相結(jié)合的部位，是決定和控制抗原特異性的特殊化學(xué)基因。8、基因工程抗體基因工程抗體又稱重組技術(shù)，它是在充分認識Ig基因結(jié)構(gòu)與功能基礎(chǔ)上，應(yīng)用DNA重組技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，按照客觀需求在基因水平上對Ig分子進行切割、拼接或修飾，重新組裝成的新型抗體分子。9、功能性決定簇在一個具有三維空間結(jié)構(gòu)的天然蛋白質(zhì)抗原分子中,由于存在于抗原分子表面的抗原決定簇易被免疫細胞所識別，故此稱為功能性決定簇。10、單克隆抗體單克隆抗體是通過細胞融合技術(shù)使小鼠脾免疫細胞與小鼠骨髓瘤細胞相互融合形成的雜交瘤細胞，在體外培養(yǎng)的條件下分泌產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇，由單個B淋巴細胞增殖而形成的細胞純系產(chǎn)生的抗體。11、多克隆抗體多克隆抗體(polyclonalantibodies,PcAb)為免疫動物的全血清(抗血清)含有多個抗原決定簇。12、隱蔽性抗原決定簇抗原決定簇則被抗原分子本身包繞掩蓋在內(nèi)部，正常情況下不能被免疫細胞所識別，稱此為隱蔽性抗原決定簇。13、免疫優(yōu)勢決定簇在某些因素的影響下，這些隱蔽性抗原決定簇可以暴露出來，刺激機體免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答，稱此為免疫優(yōu)勢決定簇(immuno-dominantdeterminant)014、抗體抗體（antibody）是機體通過體液免疫應(yīng)答，由B淋巴細胞活化增殖、分化的漿細胞合成和分泌，并能與刺激抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白（Ig）。15、抗原抗原是指進入機體能刺激機體的免疫系統(tǒng)發(fā)生反應(yīng)，從而引起機體產(chǎn)生或形成致敏淋巴細胞，并能和這些抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。16、石蠟切片新鮮經(jīng)適當固定、脫水、透明、浸蠟后用石蠟包埋的組織蠟塊，用石蠟切片機切成一定厚度（2-5um）的組織切片形式，是常規(guī)病理中的重要切片形式，也是免疫組化研究中較常用的切片形式，它能滿足免疫組化的連續(xù)切片要求。17、冰凍切片將新鮮組織置于-25°C左右的恒溫箱中，待組織完全冷凍后，即可連續(xù)切片。優(yōu)點是能較完整地保存抗原性。18、細胞涂片是將細胞培養(yǎng)的活細胞或穿刺細胞，通過一定方式轉(zhuǎn)移到干凈的載玻片上的過程。19、切片粘合劑免疫組化染色時間長，需高溫、高壓抗原修復(fù)或酶消化等前處理，并要反復(fù)洗滌，切片在試劑中長時間浸泡經(jīng)多次洗滌，極易造成脫片而影響實驗的成敗。因而需截玻片上涂一層具粘附力的化學(xué)試劑，例如多聚賴氨酸、APES等。20、PLP液PLP液（過碘酸鹽-賴氨酸-多聚甲醛固定液），該固定液適于含糖類組織，對超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存較好。21、PFG液PFG液含對苯醌、多聚甲醛、25%戊二醛、0.1mol/L二甲胂酸鈉緩沖液,適于多種肽類抗原的免疫細胞化學(xué)，尤其是免疫電鏡的研究。22、載體把一個目的DNA片段從基因組或DNA中切割下來以后，在連接酶作用下和外源DNA片段或基因拼接，起運送的DNA稱載體。23、引物所謂引物，實際上就是兩段與待擴增靶DNA序列互補的寡核苷酸片段，兩引物間距離決定擴增片段的長度，兩引物的5'端決定擴增產(chǎn)物兩端的位置。24、探針在化學(xué)及生物學(xué)意義上的探針，是指能與特定的靶分子發(fā)生特異性相互作用的分子，并可以被特殊的方法所探知。25、EnVision法又稱ELPS法，EnVision復(fù)合物是利用一種具有惰性的多聚化合物（葡聚糖），將HRP或AKP和第二抗體標記在一個多聚化合物上，即形成酶-多聚化合物-第二抗體巨大復(fù)合物。26、Epos法是采用一種具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）為骨架，將特異性抗體和HRP結(jié)合在一起，形成HRP—多聚化合物一特異性抗體巨大復(fù)合物，該復(fù)合物內(nèi)不含第二抗體及親和素。27、CSA法也稱酪胺信號放大，主要原理是酪胺的過氧化物酶反應(yīng)即HRP在H202存在下催化酪胺鹽,形成共價鍵結(jié)合位點，而產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物,如經(jīng)幾次這樣的循環(huán)放大,可以網(wǎng)絡(luò)許許多多的酶分子，最后通過顯色反應(yīng)，其敏感性得到幾何級放大。28、UIP法其基本原理及工作流程與EnVision法相似。不同的是UIP復(fù)合物為HRP-氨基酸-抗鼠或抗兔IgG復(fù)合物（N-Histofine復(fù)合物），因N-Histofine復(fù)合物分子量較EnVision復(fù)合物分子量稍小，理論上具有更強的穿透力。29、PowerVision法原理是連接抗體上緊密地連接上許許多多的酶分子，呈串珠狀排列，由于利用了一種小的呈線性或很小枝狀多功能試劑作為骨架分子與酶和免疫球蛋白交聯(lián)，排列緊密，形成串珠狀多聚物，因此分子量較小。其特點是簡便、敏感。30、免疫熒光直接法用已知特異性抗體與熒光素結(jié)合，制成特異性熒光抗體。直接用于細胞或組織抗原的檢查，此法特異性高，其缺點是一種熒光抗體只能檢查一種抗原，敏感性較差。31、免疫熒光間接法先用特異性抗體與組織標本反應(yīng)，隨后用緩沖鹽水洗去未與抗原結(jié)合的抗體，再用間接熒光抗體與結(jié)合在抗原上的抗體結(jié)合，形成抗原抗體-熒光抗體的復(fù)合物。由于結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上的熒光抗體顯著多于直接法，從而提高了敏感性。32、PAP法抗HRP抗體與HRP交聯(lián)，制備成五環(huán)的PAP復(fù)合物（3個HRP和2個IgG分子），PAP復(fù)合物中的抗HRP抗體和第一抗體必需為同一種屬動物的IgG，這樣橋抗體才能作為“橋”將PAP復(fù)合物連接在第一抗體上，如特異性一抗為鼠來源的，那么PAP復(fù)合物必須用鼠的。33、APAAP法抗AKP抗體與AKP交聯(lián)，制備成五環(huán)的APAAP復(fù)合物（3個HRP和2個IgG分子），APAAP復(fù)合物中的抗HRP抗體和第一抗體必需為同一種屬動物的IgG，這樣橋抗體才能作為“橋”將APAAP復(fù)合物連接在第一抗體上,如特異性一抗為鼠來源的,那么APAAP復(fù)合物必須用鼠的。34、ABC法ABC是親和素、生物素、過氧化酶復(fù)合物法（avidinbiotin-peroxidasecomplex，ABC）在BAB法和LAB法的基礎(chǔ)上改良的，其特點是利用親和素分別連接生物素標記的第二抗體和生物素標記的酶。生物素標記的第二抗體與ABC復(fù)合結(jié)合，酶顯色反應(yīng)。35、LSAB法LSAB法或稱S-P法、SABC法，它是采用生物素標記的第二抗體與結(jié)合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素（streptavidin，連接來測定細胞及組織中的抗原，與ABC法最大的區(qū)別是將酶直接連到鏈霉親和素上。36、APAAP一種堿性磷酸酶(AKP)抗堿性磷酸酶方法，先制備成抗AKP酶抗體，該抗體再與AKP結(jié)合，形成APAAP復(fù)合物，用于IHC-APAAP法的檢測。37、酶標記抗體法酶標記抗體法是將酶(HRP或AKP)結(jié)合在特異性一抗或二抗上，制備成酶標記抗體，通過抗原抗體反應(yīng)使抗原抗體復(fù)合物上帶有酶分子，再借助酶對底物的特異性催化作用，在抗原抗體反應(yīng)部位形成不溶性有色產(chǎn)物。38、酶標直接法直接法是將酶標記在特異性抗體上，然后用酶標記抗體直接與組織細胞內(nèi)相應(yīng)抗原特異性結(jié)合，形成抗原-抗體-HRP復(fù)合物，最后用酶底物顯色。39、酶標間接法間接法是將酶標記在二抗上，再與第一抗體(已與相應(yīng)抗原反應(yīng)形成復(fù)合物的IgG)反應(yīng)，然后進行顯色反應(yīng)。此法要求第二抗體與特異性抗體(一抗)應(yīng)是不同種屬的動物產(chǎn)生。40、非標記抗體免疫酶法該方法先用酶(HRP或AKP)去免疫動物(羊，兔和鼠等)，使其產(chǎn)生高效價、特異性的抗酶抗體，再將該抗酶抗體與酶結(jié)合，是酶標記抗體法的重大改進。41、酶橋法酶免疫動物制備成效價高，特異性強的抗酶抗體。在特異性抗體與抗酶抗體之間利用第二抗體作“橋梁”，將他們連接起來，再將酶結(jié)合在抗酶抗體上，經(jīng)顯色顯示抗原的定位。42、DAB/H2O2為HRP免疫組化染色的底物(H2O2)和供氫體(DAB)，其濃度為0.05%DAB和0.03%H2O2最終產(chǎn)生棕黃色或棕褐色，如在DAB/H2O2加入一定量的重金屬離子，可改變終產(chǎn)物的顏色。43、AEC/H2O2AEC(3—氨基一9—乙基卡吧唑)為HRP的顯色液,AEC為供氫體,^0?為底物,終顏色為紅色，不能用醇溶性膠封片。44、NBT/BCIP主要用于IHC(AKP)或ISH堿性磷酸酶檢測的底物-供氫系統(tǒng)，終產(chǎn)物為紫藍色。NBT即四氮唑藍(Nitro-Blue-Tetrazolium)。BCIP即5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸鹽(5-bromo-4-chioro-3-indolyl-phosphate)。45、HRP為辣根過氧化物酶是免疫酶組織化學(xué)常用酶，其供氫體/底物有好幾種類型，常用DAB、AEC/H2O2。2246、AKP堿性磷酸酶是IHC顯示系統(tǒng)常用的酶，NBT/BCIP是該酶的底物-供氫系統(tǒng)，終產(chǎn)物為紫藍色。47、SPA葡萄球菌A蛋白主耍用于免疫組化的連接二抗。48、PAG15nm金標記葡萄球菌A蛋白(SPA),顆粒大小為20nm的金標復(fù)合物，主要用于光鏡和免疫電鏡IGS和IGSS法的主要標記探針。49、IGSS免疫金銀染色(Immunogold-silverstaining)，是免疫組織化學(xué)最為敏感的方法之一,首先用金標抗體與特異性一抗或抗原特異性結(jié)合，再用銀進行增強。50、熒光有些物質(zhì)，當用紫外線照射時，它吸收了某種波長的光后還會發(fā)射出各種顔色和不同強度的光，而當紫外線停止照射后，這種光也隨之消失，這種光稱為熒光(fluorescence)。51、熒光抗體用一定的方法將熒光素或熒光蛋白結(jié)合到特異性一抗或二抗上用于免疫熒光組化染色的直接法或間接法。52、自發(fā)性熒光組織在短波長光照射下自行發(fā)射出的熒光。組織中的蛋白質(zhì)和脂類在紫外線照射下能發(fā)射出微弱的淡藍色熒光。53、stokes移位光子能量hv發(fā)射后，返回?zé)晒鈭F基態(tài)So。由于在激發(fā)態(tài)壽命過程EM中能量損耗，光子能量降低，因此波長比激發(fā)態(tài)光子hv更長。用(hv—hV)表示的能量EXEXEM或波長的不同稱為stokes移位54、免疫熒光組化免疫熒光組化技術(shù)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗體，再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢測組織或細胞內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。55、熒光色素能夠產(chǎn)生熒光并能作為染料的化合物稱為熒光色素，熒光色素必須具備吸收激發(fā)光的光能并發(fā)射熒光，具有吸收一定頻率光能的生色團和能產(chǎn)生一定光量子的熒光團。.56、FITC異硫氰酸熒光黃(Fluorescicnisothiocyanate,FITC)純品為黃色粉末，最大吸收光譜為490?495nm,最大發(fā)射光譜為520?530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。57、TRITC四甲基異硫氰酸羅達明(Tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC)是一種紫紅色粉末，較穩(wěn)定，是羅達明(Rhodamine)的衍生物，易溶于水。最大吸收光譜為550nm，最大發(fā)射光譜為620nm,呈橙紅色熒光。58、藻紅蛋白藻紅蛋白或稱藻膽蛋白是一種來源于藻青菌(Cyanobacteria)和真核菌類相當穩(wěn)定的具有很強溶解性的熒光蛋白F/P值F(熒光素)和P(抗體蛋白)的克分子比值反映熒光抗體的特異性染色質(zhì)量，一般要求F/P的克分子比值為1?2。過高時，非特異性染色增強；過低時，熒光很弱，敏感性低。60.DAPIDAPI是經(jīng)典的免疫熒光組化細胞核復(fù)染劑,為藍色。工作濃度為1/1000,直接用于甘油封片介質(zhì)中。Hoechst33342染料該染料已經(jīng)廣泛用于活細胞細胞核、免疫熒光組化和FISH后的襯染，其工作濃度為0.2“g/ml,為藍色。PI碘化丙錠（propidiumiodide,PI）是細胞核和染色體首選的紅色熒光復(fù)染劑。PI是進行綠色熒光標記，例如AlexaFluor488、俄勒岡綠、BodipyFL、熒光黃等熒光素的復(fù)染劑。63.膠體金膠體金是指金的水溶膠，它具有一般溶膠的特性，一種物質(zhì)以或大或小的微小粒子分散在另一種物質(zhì)中所形成的體系。64.IGS免疫金染色（Immunogoldstaining;IGS是當特異性抗體與抗原結(jié)合后，用金標二抗與特異性抗體結(jié)合，形成抗原抗體、金標抗體復(fù)合物，在光鏡（10X100倍）下可見紅色顆粒物，即為抗原抗體結(jié)合物。雙重或多重免疫組化染色應(yīng)用IHC的方法在同一張組織切片上同時或先后顯示兩種或兩種以上的抗原成分。顯示的水平可以是光鏡，也可以是電鏡。雙重或多重免疫熒光染色采用呈現(xiàn)不同顏色的熒光色素配伍，分別標記不同的抗體，再通過各自與同一切片上的相應(yīng)抗原特異性結(jié)合而加以區(qū)別顯示所建立起來的雙重或多重免疫熒光組化染色技術(shù)。雙重或多重免疫酶染色指以酶催化不同底物呈現(xiàn)不同顏色產(chǎn)物標示同一切片內(nèi)兩種或兩種以上抗原為理論基礎(chǔ)所建立起來的多重免疫標記染色方法。陽性對照陽性對照是指用已證實含靶抗原的標本片與待檢標本片同時作同樣處理、染色的組織對照，其目的在于證實所用免疫組化染色流程的有效性,排除假陰性的可能。陰性對照陰性對照是指證實不含靶抗原或缺少免疫試劑的同步處理和標記染色的免疫組化染色對照，包括有陰性組織對照和陰性試劑對照二類。陰性組織對照指以確知不含有靶抗原的組織（或細胞）標本片與待檢標本片同時染色的對照，結(jié)果應(yīng)為陰性，以排除假陽性情況。試劑陰性對照指用于證實免疫組化染色所用試劑，尤其是特異性抗體試劑的有效性和可靠性的同步對照標本片染色，它是每一批免疫組化染色中絕不可缺少的對照設(shè)置,目的在于除外假陽性和證實所用免疫組化試劑及其技術(shù)方法的有效性和待檢標本片陽性結(jié)果的可靠性。72.空白或替代對照指以緩沖液（如PBS、TBS等）或以第一抗體同源動物未免疫的正常血清取代第一抗體，其他各步不變的對照染色，結(jié)果應(yīng)為陰性。必要時還可分別對第二抗體、橋抗體作相應(yīng)的空白或替代對照試驗。吸收試驗第一抗體經(jīng)用相應(yīng)的過量純化抗原中和吸收，使其結(jié)合點全部被外源性抗原結(jié)合封閉，不能再與組織內(nèi)的靶抗原反應(yīng)，用這種吸收后的上清液替代原先的第一抗體作免疫組化染色的對照，結(jié)果應(yīng)為陰性。抑制試驗指待檢標本先與未標記的特異性抗體反應(yīng)而影響了再與標記的特異性抗體結(jié)合，使染色結(jié)果明顯減弱或轉(zhuǎn)陰的對照，該試驗對照適用于直接法。自身對照在同一標本片上，靶抗原的陽性反應(yīng)與其他無關(guān)結(jié)構(gòu)或成分的陰性結(jié)果可形成鮮明對照，謂之自身對照。IHC非特異染色非特異染色是指免疫組化染色過程中產(chǎn)生的非靶抗原(或抗體)的呈色結(jié)果，屬假陽性，又稱背景著色，它的存在干擾著對特異性靶抗原顯色結(jié)果的判斷。完全陰性，組織片中所有細胞均為陰性染色，提示組織細胞中缺乏目標抗原；部分陰性，部分細胞標記陰性，僅少數(shù)細胞陽性或弱陽性，提示這些細胞低度表達目標抗原，也可能丟失了目標抗原。組織片中顯示目標細胞陰性，而非目標細胞陽性，這在淋巴瘤中最為常見。79、替代對照指以緩沖液(如PBS、TBS等)或以第一抗體同源動物的正常血清取代第一抗體，其他各步不變的對照染色，結(jié)果應(yīng)為陰性。80、TMA:組織微陣列(tissuemicro-array，組織芯片)是用大量組織樣本高密度排列在載體上，組織芯片的特點是信息含量大，具有高通量的優(yōu)勢，可用于組織細胞內(nèi)DNA、RNA和蛋白質(zhì)的檢測和定位，可供常規(guī)染色、組織化學(xué)染色、免疫組化染色、原位雜交、熒光原位雜交及原位PCR等實驗用。81、腫瘤標記物是指與腫瘤發(fā)生相關(guān)的一類大分子物質(zhì)，可以通過各種方法檢測到，主要是大分子蛋白質(zhì)，包括腫瘤相關(guān)抗原、異位激素、酶和宿主抗腫瘤免疫級聯(lián)反應(yīng)的改變等PCK廣譜細胞角蛋白(PCK)中既含高分子角蛋白，又含低分子角蛋白，故它可標記所有上皮細胞，即所有單層上皮、復(fù)層上皮、尿路上皮細胞及各種上皮細胞來源的良惡性腫瘤。HCK高分子角蛋白(HCK)主要標記復(fù)層鱗狀上皮及鱗狀細胞腫瘤，此外HCK(34BE12)常用于標記前列腺基底細胞，通常前列腺良性增生病變，其基底細胞保存完整，而前列腺癌基底細胞消失，因此借助于34BE12來觀察基底細胞存在與否有助于前列腺癌的診斷。LCK低分子細胞角蛋白(LCK)主要存在于單層上皮及腺上皮細胞，鱗狀上皮及角化鱗狀上皮和這些細胞發(fā)生的腫瘤表達極弱或呈陰性表達。因此，LCK主要用于內(nèi)臟腺上皮腫瘤的診斷，并有助于腺癌與鱗狀細胞癌的鑒別診斷。ESA上皮特異性抗原(EpithelialSpecificAntigen,ESA)為分子量40KD的細胞表面糖蛋白，屬較廣譜的上皮細胞標志，大多數(shù)上皮細胞為陽性反應(yīng)，在腫瘤細胞中，腺癌細胞表達強于鱗狀細胞癌細胞。ESA標記譜系似EMA。P65p63屬p53家族成員，其蛋白表達于復(fù)層鱗狀細胞的基底細胞和前期細胞。它定位于細胞核。前列腺、乳腺和唾液腺腫瘤的診斷與鑒別診斷中，常用p63顯示基底細胞或肌上皮細胞。它特異性強，敏感性高，定位準確，是十分理想的上皮標志。VillinVillin是一種肌動蛋白相關(guān)鈣調(diào)節(jié)蛋白，定位于細胞質(zhì)和胞膜，尤見于腺腔面。APO-D載脂蛋白D(Apolipoprotein-D,APO-D)作為人血漿脂質(zhì)轉(zhuǎn)運系統(tǒng)的一種糖蛋白，參與膽固醇酯化及其產(chǎn)物的轉(zhuǎn)運，定位于胞質(zhì).表達于類固醇反應(yīng)組織，在早期前列腺癌和進展期前列腺癌中表達。HPC肝細胞標志物(Hepatocyte,HPC)是肝細胞特異性標志，定位于胞質(zhì)，陽性顆粒呈粗顆粒狀。正常肝細胞陽性，肝膽管上皮陰性。約80%肝細胞癌為HPC陽性，不足5%非肝細胞癌表達HPC。Vimentin波形蛋白(Vimentin)主要分布于間葉細胞及其起源的腫瘤組織，而上皮細胞及其腫瘤一般不含此蛋白。常用于間葉來源的惡性腫瘤如間皮瘤、滑膜肉瘤、腦膜瘤等診斷，該抗體對癌與肉瘤、惡性黑色素瘤與癌、胸腺瘤與淋巴瘤、未分化癌與小細胞間葉腫瘤的鑒別診斷具有重要參考意義。Desmin結(jié)蛋白(Desmin)是一種中間絲蛋白，廣泛分布于平滑肌細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞和肌上皮細胞。主要用于平滑肌腫瘤、橫紋肌肉瘤和肌上皮腫瘤、部分肌纖維母細胞腫瘤的診斷和鑒別診斷。MSA肌特異性肌動蛋白(MuscleSpecialActin;MSA)是一種具有收縮能力的微絲蛋白，廣泛分布于幾乎所有的肌型細胞中。主要表達于骨骼肌、平滑肌、心肌和肌上皮細胞、肌纖維母細胞，肌源性腫瘤包括平滑肌瘤，平滑肌肉瘤和橫紋肌肉瘤以及肌上皮腫瘤、肌纖維母細胞腫瘤等均可呈陽性反應(yīng)。MyoDI橫紋肌核蛋白(MyoDl)是MyoDl基因所編碼的45KD的磷酸化蛋白，只在胚胎橫紋肌細胞中表達，正常成人橫紋肌細胞不表達，是橫紋肌腫瘤的一種非常特異的標志。免疫表型為胞核型。主要用于橫紋肌肉瘤的診斷。肌生成素因子Myf-3是橫紋肌肉瘤有用的標志物，有助于橫紋肌腫瘤與神經(jīng)母細胞瘤、Wilm's瘤、肝母細胞瘤、淋巴瘤和平滑肌肉瘤的鑒別。肌紅蛋白(Myoglobin)肌紅蛋白存在于骨骼肌和心肌中，是橫紋肌的特異性標記物。主要用于橫紋肌腫瘤的診斷與鑒別診斷，少數(shù)惡性中胚葉混合瘤，睪丸畸胎瘤、腎母細胞瘤中肌母細胞亦可見陽性表達。TPO甲狀腺過氧化物酶(TPO)是一種分子量為107KD轉(zhuǎn)膜蛋白，是甲狀腺素合成的主要酶。TPO是甲狀腺良惡性腫瘤鑒別診斷的早期標記物，惡性甲狀腺腫瘤細胞中TPO表達水平下降，若TPO低表達則強烈提示異型增生。TTF-1甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1(TTF-1)定位于胞核，表達于肺和甲狀腺上皮細胞及其腫瘤。肺小細胞癌，非典型類癌，腺癌常為TTF-1陽性，而肺鱗狀細胞癌和類癌則陰性反應(yīng)。甲狀腺乳頭狀癌和濾泡癌陽性。98.SP-A/B肺表面活性蛋白A(SP-A/B)是II型肺泡上皮細胞分泌的一種表面磷脂，在呼氣末期具有保持肺泡擴張的作用。是肺泡上皮特異的標志物，定位于胞質(zhì)。有助于惡性間皮瘤和肺腺癌的鑒別。PSA前列腺特異抗原(PSA)表達于正常前列腺腺泡細胞、導(dǎo)管上皮細胞及腔內(nèi)分泌物。它是目前認為具有特異性的腫瘤標記物之一。主要用于前列腺癌和轉(zhuǎn)移性前列腺癌的診斷，但不能作為良、惡性前列腺疾病的鑒別診斷。PSAP前列腺酸性磷酸酶(PSAP)是由前列腺上皮細胞分泌的一種酸性磷酸酶的同功酶。常用于前列腺癌和轉(zhuǎn)移性前列腺癌的診斷，但不能作為良、惡性前列腺疾病的鑒別診斷。AMACR(P504S)AMACR是脂肪酶支鏈B氧化酶中重要的酶。前列腺腺癌和不典型增生，P504S均為陽性表達。34BE12或p63觀察基底細胞是否存在，則有助于前列腺癌的診斷與鑒別診斷。PIP前列腺抑制肽(PIP)在前列腺增生上皮、原發(fā)及轉(zhuǎn)移的前列腺癌中表達，低分化癌陽性程度較高分化者弱，可作為前列腺癌診斷的腫瘤標志物，且不受雄激素減少和缺乏的影響，但在前列腺良惡性鑒別中不如P504S重要。Myogenin肌細胞生成素為肌細胞生成調(diào)節(jié)家族成員，是橫紋肌及其腫瘤較特異的標記物，與MyoD1有一定互補作用。是橫紋肌腫瘤最理想的標志。Tropomysion原肌球蛋白與肌細胞細絲和非肌細胞微絲相關(guān)，定位于胞質(zhì)。它強表達于橫紋肌，包括心肌a原肌球蛋白和骨骼肌a和B原肌球蛋白。主要用于橫紋肌腫瘤的診斷。a-SMA平滑肌肌動蛋白(SmoothmuscleActin)是一種標記平滑肌的肌動蛋白，主用于檢測血管平滑肌、平滑肌瘤和平滑肌肉瘤、肌上皮細胞和肌上皮瘤等?？勺鳛槿橄倌[瘤的一個重要的參考指標。在平滑肌腫瘤的診斷中應(yīng)結(jié)合其它標記物聯(lián)合應(yīng)用。平滑肌肌球蛋白平滑肌肌球蛋白(Smoothmusclemyosin)主要用于標記血管和內(nèi)臟平滑肌細胞以及肌上皮細胞，它被認為是平滑肌較為特異和可靠的標記，有助于間葉腫瘤的診斷和分類，亦可用于乳腺肌上皮細胞的標記，有助于原位癌和浸潤癌的區(qū)別。Caldesmon鈣調(diào)素結(jié)合蛋白是一種與肌動蛋白和原肌球蛋白結(jié)合的鈣結(jié)合蛋白,具有調(diào)節(jié)平滑肌收縮的功能。用于良惡性平滑肌腫瘤的診斷與研究。Calponin(CALP)是一種34KD的多肽，與肌動蛋白、原肌球蛋白及肌鈣蛋白相互作用，定位于胞質(zhì)，肌上皮亦陽性，有助于乳腺癌和硬化性腺病的鑒別診斷。CD31主要表達于內(nèi)皮細胞、血小板、單核細胞、粒細胞、B淋巴細胞。常用于良惡性血管源性腫瘤的診斷和鑒別診斷，亦可用于各種腫瘤間質(zhì)中血管生成的研究。CD34表達于早期淋巴造血干細胞、祖細胞、內(nèi)皮細胞、胚胎纖維母細胞和某些神經(jīng)組織細胞?，F(xiàn)多用于標記血管內(nèi)皮細胞，良惡性血管源性腫瘤的診斷和鑒別診斷。亦可用于各種腫瘤間質(zhì)中血管生成的研究。也是胃腸道間質(zhì)瘤較理想的標志物。血栓調(diào)節(jié)素(Thrombomodulin)是一種內(nèi)皮細胞跨膜糖蛋白，分布于內(nèi)皮細胞、間皮細胞、滑膜細胞、合體滋養(yǎng)葉細胞、巨核細胞和血小板。間皮瘤與肺腺癌的鑒別中是較理想的標記物。RCCM腎細胞癌標志物(RenalCellCarcinomaMarker，RCCM)定位于近端小管曲部及直部的刷狀緣，Bowman's囊腔緣有局灶表達。該抗體主要用于腎細胞癌的標記。Mesothelin間皮素(Mesothelin)表達于間皮細胞、間皮瘤、卵巢上皮性癌和某些鱗狀細胞癌。有助于以上腫瘤與其它實體瘤的鑒別。ON骨連接素(Osteonectin,ON)也稱BM-40或SPARC(富于半胱氨酸的酸性分泌蛋白)，是一種多功能的糖蛋白。ON由發(fā)育中骨的骨母細胞和發(fā)育中牙齒的成牙質(zhì)細胞大量分泌。腫瘤組織中，肝細胞癌表達,正常肝無表達。骨肉瘤特別是骨母細胞型骨肉瘤表達ON,而軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、平滑肌肉瘤均無表達。Nestin巢蛋白(Nestin)是一種新型中間絲蛋白，較為特異神經(jīng)干細胞標記物。該抗原定位于胞質(zhì)，在PNET、星形膠質(zhì)細胞瘤中常呈陽性反應(yīng)。外周蛋白(Peripherin)外周蛋白是一種57KD的III型中間絲蛋白，是外周神經(jīng)包括腸神經(jīng)節(jié)細胞的特異性標志物，定位于胞質(zhì)。也是診斷神經(jīng)嵴來源的腫瘤，如神經(jīng)母細胞瘤、節(jié)細胞神經(jīng)母細胞瘤的有用標志物。GFAP膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)為中間絲蛋白之一，主要用于星形膠質(zhì)瘤包括星形細胞瘤、星形母細胞瘤、混合性膠質(zhì)瘤、多形性膠質(zhì)母細胞瘤、多數(shù)室管膜瘤等中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的診斷和鑒別診斷。星形細胞AstrocytesAstrocytes定位于細胞膜，適用于星形細胞及星形膠質(zhì)細胞瘤的診斷與鑒別診斷，該抗體特異性強。NF神經(jīng)纖維細絲蛋白(NF)是神經(jīng)元特異性中間絲蛋白，其陽性見于節(jié)細胞神經(jīng)瘤，副節(jié)瘤，小腦或外周神經(jīng)母細胞瘤，腎上腺嗜鉻細胞瘤，亦有助于某些神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷。CgA鉻粒素A(CgA)是人類腎上腺髓質(zhì)中含量最高的一種可溶性酸性蛋白，廣泛存在于神經(jīng)元、神經(jīng)內(nèi)分泌細胞及其腫瘤細胞中。主要用于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤如垂體腫瘤、胰島細胞瘤、嗜鉻細胞瘤、甲狀腺髓樣癌、類癌等的診斷。SY突觸素(SY)存在于神經(jīng)元突觸前囊泡膜上，腎上腺髓質(zhì)細胞和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞的胞漿內(nèi)，主要用嗜鉻細胞瘤、節(jié)細胞神經(jīng)瘤、副節(jié)瘤以及APUD系統(tǒng)腫瘤的診斷和鑒別診斷。NGFR神經(jīng)生長因子受體(NGFR)定位于細胞膜和胞質(zhì)。我們發(fā)現(xiàn)多數(shù)神經(jīng)纖維瘤和神經(jīng)鞘瘤為NGFR陽性，而肌源性腫瘤和纖維源性腫瘤不表達。MBP髓磷脂堿性蛋白(MB)是髓鞘結(jié)構(gòu)蛋白的主要成分。主要用于顱內(nèi)少突膠質(zhì)細胞及其腫瘤，外周雪旺細胞等腦神經(jīng)系統(tǒng)疾病以及相應(yīng)腫瘤的診斷和鑒別診斷。胰多肽(Pancreaticpolypeptide,PP)PP是由胰島PP細胞分泌的一種激素。主要用于胰島細胞瘤的功能性分類和多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤的輔助診斷。是胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌細胞及其腫瘤的廣譜標記物。胰島素(Insulin)Insulin是由胰島B細胞分泌的一種激素，主要用于胰島細胞瘤的功能性分類和多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤的輔助診斷。126.生長抑素(Somatostatin)生長抑素是胰島D細胞分泌的一種多肽激素。主要用于胰島細胞的功能性分類和消化道粘膜中內(nèi)分泌細胞及腫瘤的研究。胰高血糖素(Glucagon)胰高血糖素是胰島A細胞合成和分泌的一種激素，主要用于胰島細胞瘤的功能性分類和胰高血糖素瘤的診斷。血管活性腸肽(VIP)VIP是胰島D1細胞分泌的一種激素，有調(diào)節(jié)水電解質(zhì)平衡的作用。主要用于胰島細胞瘤的功能性分類和診斷。胃泌素(Gastrin)胃泌素是一種多肽激素，主要用于胃泌素瘤和G細胞增生癥的診斷以及部分神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的檢測，是胰島細胞瘤常用的標記物。降鈣素(Calcitotin,CT)CT是血液中能夠降低鈣含量的一種多肽，主要用于C細胞增生和甲狀腺髓樣癌的診斷。甲狀旁腺激素(PH)正常甲狀旁腺細胞陽性表達，甲狀腺濾泡上皮陰性表達，常用于甲狀旁腺腫瘤的診斷與鑒別診斷。TdT末端脫氧核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)是一種核酶，定位于胞核，主要用于診斷淋巴母細胞淋巴瘤(LL)或淋巴母細胞白血病的診斷，而其它淋巴瘤常不表達。LATT細胞活化連接子(LAT),在正常組織中，胸腺、淋巴結(jié)、脾臟的T細胞區(qū)及小腸、骨髓的T細胞區(qū)、NK細胞、肥大細胞陽性表達。腫瘤組織中，主要表達于T細胞淋巴瘤。其敏感性非常高，T淋巴母細胞淋巴瘤也可陽性，優(yōu)于CD3。CD1aCD1a表達于皮質(zhì)胸腺細胞、表皮朗格罕細胞，真皮樹突網(wǎng)狀細胞，它還表達于真皮汗腺導(dǎo)管和小腸上皮細胞，定位于胞質(zhì)和胞膜，主要用于朗格罕氏組織細胞增生癥(LCH)和T淋巴母細胞淋巴瘤的診斷。CD2T細胞CD2定位于胞膜，表達于外周淋巴組織的大部分T細胞、NK細胞。大部T細胞淋巴瘤為CD2陽性。鼻腔和腸型的NK/T細胞淋巴瘤，CD2優(yōu)于其它細胞標記。CD10急性淋巴母細胞性白血病共同抗原(CD10)表達于濾泡中心母細胞及其相應(yīng)的濾泡性淋巴瘤。CD10是B淋巴母細胞淋巴瘤和濾泡性B細胞淋巴瘤有用的標志物。CD11a(LFA-1)CDlla是LFA-1(淋巴細胞功能相關(guān)抗原-1)異二聚體糖蛋白的a-1鏈，表達于單核細胞、粒細胞和NK細胞膜表面，可用于白血病和淋巴瘤的鑒別診斷。CD13CD13表達于粒細胞-單核細胞系的前體細胞以及成熟細胞、淋巴細胞，血小板和紅細胞均不表達,可用于標記急性粒細胞白血病和骨髓增生不良綜合癥等疾病。CD14單核細胞(CD14)表達于單核細胞、巨噬細胞，弱表達于粒細胞，主要用于標記單核細胞，為急性髓性白血病的免疫分型診斷提供依據(jù)。CD15粒細胞相關(guān)抗原(CD15)，表達于霍奇金氏病中R-S細胞，主要用于霍奇金淋巴瘤和少數(shù)大細胞性淋巴瘤的診斷。CD19CD19是B細胞標記物，表達于早期B細胞和成熟的B細胞膜表面，與B細胞活化調(diào)節(jié)和發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)，主要用于標記正常B細胞及腫瘤性B細胞。CD20CD20是B細胞標記物，主要分布在外周B細胞、前B細胞后期和漿細胞之前的B細胞，一般不與T細胞呈交叉反應(yīng)。對B細胞淋巴瘤和慢性淋巴細胞白血病等有較好的細胞特異性，因此在惡性淋巴瘤尤其是T或B細胞淋巴瘤的分類上，CD20是最常用的B細胞標記CD21B細胞標記物，主要用于標記B細胞及其來源的腫瘤。CD21是淋巴結(jié)中樹突網(wǎng)狀細胞的標記物，可與CD35聯(lián)合標記樹突網(wǎng)狀細胞及其腫瘤。CD23CD23是B細胞標記物，為膜型表達。它是B慢性淋巴細胞白血病/小B細胞淋巴瘤診斷與鑒別診斷有用的標記物。CD30/Ki-1Antigen主要用于檢測霍奇金淋巴瘤中的R-S細胞和不典型R-S細胞，故認為CD30是霍奇金淋巴瘤的一個特異性標記。CD43CD43主要標記T細胞，顆粒細胞、部分單核細胞和B細胞亦可陽性。該抗體用于T細胞淋巴瘤的輔助診斷，但應(yīng)與其它T細胞標記如CD3或CD7聯(lián)合應(yīng)用。CD45CD45為白細胞共同抗原（LCA）,是造血細胞的特異性標記，主要分布在T、B細胞、單核細胞、粒細胞和前體細胞表面。是區(qū)別淋巴瘤，白血病和非造血組織腫瘤的一個良好的標記物。值CD45RBCD45RB主要標記B細胞（80%）和少數(shù)T細胞（10%）。常與其它B細胞標記如CD20或CD79a聯(lián)合檢測，用于B細胞淋巴瘤的輔助診斷。CD45ROCD45RO主要標記T細胞（80%）和少數(shù)B細胞（10%）。常與其它T細胞標志如CD3或CD43聯(lián)合標記，用于T細胞淋巴瘤的輔助診斷。CD56CD56為神經(jīng)細胞粘附分子，也稱為肺小細胞癌（SLCL）標記，主要分布于大多數(shù)神經(jīng)外胚層來源的細胞和組織中，這些細胞來源的腫瘤可呈陽性表達，是NK細胞腫瘤的重要標記物。CD57CD57為自然殺傷細胞（NK細胞）標記，或稱Leu-7,NK細胞淋巴瘤常陽性反應(yīng)，某些神經(jīng)內(nèi)分泌細胞瘤亦呈陽性表達。CD57主要用于NK細胞腫瘤和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷與研究。CD68CD68為骨髓和各神經(jīng)組織中的巨噬細胞，包括肝臟的Kuffer細胞，常用于粒細胞性白血病、各種單核組織細胞來源的腫瘤，包括惡性纖維組織細胞瘤的診斷。Oct-2Oct-2是屬于POU同源家族的一種轉(zhuǎn)錄因子，是診斷B細胞淋巴瘤和鑒定B細胞有用的標志物乳腺癌抗原（CA15-3）CA15-3是一種粘液樣糖蛋白，主要用于乳腺癌的研究，對診斷轉(zhuǎn)移性乳腺癌有參考價值。消化道癌抗原（CA19-9）CA19-9是一種腫瘤相關(guān)的糖類抗原。是胰腺癌診斷的一種較好的標記。156?癌相關(guān)粘液抗原（CA50）CA50主要用于各種上皮源性癌包括胃腸道癌、胰腺癌、膽囊癌、卵巢癌、子宮癌、肺癌和乳腺癌等的鑒別診斷。卵巢癌抗原（CA125）CA125是一種糖蛋白，是卵巢漿液性腺癌的重要標記。對漿液性囊腺癌和粘液性囊腺癌的鑒別診斷有參考價值。黑素A（Melan-A）Melan-A亦稱T細胞1識別的黑色素瘤抗原。主要用于惡性黑色素瘤和伴有黑色素細胞分化腫瘤的診斷與鑒別診斷。黑色素瘤（Melanoma,HMB45）HMB45是黑色素瘤相關(guān)抗原，主要用于惡性黑色素瘤，以及軟組織透明細胞肉瘤的診斷和鑒別診斷。TAG-72TAG-72是一種高分子量的腫瘤相關(guān)糖蛋白，定位于細胞質(zhì)及腺腔緣。對于肺腺癌與間皮瘤及胸腺瘤之間的鑒別診斷是理想的標記物。EBC胚胎性癌（EBC）是一種細胞表面糖抗原,主要用于胚胎癌和其它生殖細胞腫瘤的鑒別診斷。CyclinA周期素A(CyclinA)是周期素依賴激酶的調(diào)節(jié)因子，不同的細胞周期素控制著細胞周期中不同的特定階段。CyclinA為S期和G2期的周期素，它在S期和G2期高水平表達。主要用于各種惡性腫瘤的增值活性研究。CyclinBI周期素B1(CyclinB1)是周期素依賴基酶的調(diào)節(jié)因子，不同的細胞周期素控制著細胞周期中不同的特定階段。CyclinBI為G2期和M期的周期素，G2期和M期高度表達。主要用于各種惡性腫瘤的增殖活性研究。CyclinD1周期素D1(CyclinD1)是細胞周期關(guān)鍵因子，在多種人類腫瘤中過表達。定位于胞核，用于套細胞淋巴瘤(MCL)的診斷和細胞周期的研究。CyclinE周期素E(CyclinE)為細胞周期中G1期進入S期的一個重要調(diào)控因子，正常組織一般不表達。主要用于各種惡性腫瘤的增值活性研究，可作為一種預(yù)后判斷指標。Ki-67Ki67Antigen為細胞增殖的一種標記，在細胞周期G1、S、G2、M期均有表達，G0期則缺如。Ki-67增殖指數(shù)高低與許多腫瘤的分化程度、浸潤、轉(zhuǎn)移以及預(yù)后密切相關(guān)，作為各種惡性腫瘤的必檢項目之一。PcNA增殖細胞核抗原(PCNA)是一種僅在增殖細胞中DNA合成或表達的核內(nèi)多肽，其表達和合成與細胞周期有關(guān)。主要表達于增殖細胞的S期、G1期和G2初期。主要作為判斷各種惡性腫瘤(包括胃腸道癌腫、乳腺癌、肝癌、膀胱癌等)細胞增殖和其惡性度的一種指標。Cdk家族CdK為周期素依賴激酶家族(Cyclin-DependentKinase)，主要參與細胞周期的調(diào)控，在細胞分化、有絲分裂中起重要作用。目前主要用于各種腫瘤的研究。BC1-2Bcl-2是B細胞淋巴瘤-2的縮寫，是細胞凋亡的一種抑制因子，參與細胞凋亡的調(diào)控。目前主要用于濾泡性淋巴瘤的診斷及其與反應(yīng)性濾泡增生的鑒別診斷，亦可用于各種惡性腫瘤細胞凋亡的研究。BCL-6Bcl-6是一個轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)基因蛋白，具有誘導(dǎo)細胞凋亡的作用?？贵w定位于胞核。Bcl-6主要用于淋巴結(jié)反應(yīng)性增生、濾泡性淋巴瘤的診斷和惡性腫瘤細胞凋亡的研究。Bcl-10是一種凋亡調(diào)節(jié)因子，與存在t(1;14)易位的MALT淋巴瘤相關(guān)。主要用于MALT型邊緣區(qū)B細胞淋巴瘤的診斷與鑒別診斷。RB視網(wǎng)膜母細胞瘤基因蛋白(RbGeneProtein)是一種腫瘤抑制基因,Rb基因的突變可能與許多惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。目前主要用于食管癌、胃癌、膀胱癌等惡性腫瘤的研究。p27Kipip27Kip1是一種細胞周期調(diào)節(jié)有絲分裂抑制因子和腫瘤抑制基因，目前主要用于各種惡性腫瘤的研究。p53是一種抑癌基因，有野生型和突變型兩種亞型。免疫組化所檢測的p53為突變型p53。主要用于各種惡性腫瘤的研究，可作為一種預(yù)后指標°P53陽性者強烈提示細胞有異型增生或惡性變。MDM2ProteinMDM2廣泛分布于人體正常組織中，能與突變型和野生型p53結(jié)合，抑制p53介導(dǎo)的反式活化作用，使p53失活，并與腫瘤細胞的耐藥有關(guān)。p16INK4a/MTSIpl6lNK4a/MTSl是一種腫瘤抑制基因，定位于細胞核和胞質(zhì)。是宮頸鱗狀皮腫瘤性增生的重要標記物。是子宮頸上皮性腫瘤首選標志，與p53聯(lián)合應(yīng)用可以明確診斷。BRCA1BRCA-1是一個乳腺癌易感基因，定位于染色體17q21,在細胞核中表達，為腫瘤抑制蛋白°BRCA-1主要用于腫瘤研究，檢測BRCA-1可用于預(yù)測患乳腺癌危險和早期乳腺癌個體，并對患者的長期存活非常重要。C-erbB-2C-erbB-2亦稱neu或p185，其結(jié)構(gòu)類似上皮生長因子受體EGFR。C-erbB-2陽性者預(yù)后不良，可作為惡性腫瘤的一個預(yù)后判斷指標。是臨床藥物靶向冶療的重要靶點。C-fosc-fos是一種轉(zhuǎn)錄活化因子(AP-1)，與C-jun原癌基因產(chǎn)物形成一種復(fù)合物，參與多個基因的轉(zhuǎn)錄和調(diào)節(jié)。主要用于各種類型的惡性腫瘤的研究。C-kit(CD117)CD117是一種跨膜酪氨酸激酶受體，定位于細胞質(zhì)，主要用于胃腸道間質(zhì)瘤的診斷與鑒別診斷，它是GISTs最特異和敏感的標志。GSTn谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶(GSTn)是GST家族中的一種主要的同工酶，具有解毒功能，是腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥的一種標記，所介導(dǎo)的抗癌藥物主要為順鉑等。對判斷腫瘤細胞是否產(chǎn)生耐藥更具有臨床意義。P-gpP-糖蛋白(Pgp)是多藥耐藥(MDR)基因編碼的分子量為170KD的一種膜型糖蛋白，腫瘤細胞P170高度表達，提示腫瘤細胞對部分親脂性藥物產(chǎn)生耐藥性。對腫瘤病人選擇化療方案和預(yù)后的判斷具有重要的臨床意義。LRP肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)其作用通過細胞核與細胞間藥物運轉(zhuǎn)障礙，或藥物進入胞質(zhì)囊泡成房性分隔，使靶點藥物有效濃度下降而產(chǎn)生耐藥，對藥物的選擇具有重要意義。5-FU耐藥標記5-Fu耐藥標記亦稱為胸苷酸合酶(TS)，是廣泛用于治療實體瘤的抗癌藥物氟尿嘧啶的重要靶點，TS的表達與5-Fu藥物療效明顯相關(guān)，主要用于結(jié)、直腸癌、胃癌、頭頸癌和乳腺癌的研究。Laminin層粘蛋白(Laminin)是基底膜中的一種糖蛋白，正常分布于基底膜和細胞外基質(zhì)內(nèi)，成纖維細胞、內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞，間接區(qū)分血管內(nèi)皮和外皮源性腫瘤，間接提示該腫瘤的分化程度和浸潤情況。第二部分填空題目前免疫熒光組化標記染色中應(yīng)用最多的熒光素，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)明顯的色熒光。常用的免疫酶組化標記染色的方法有和兩大類，前者又可分TOC\o"1-5"\h\z和法，后者又可分為和。單克隆抗體主要是應(yīng)用技術(shù)制備的，其制備過程包括、、、、和原位PCR的基本步驟包括、、、和。5.免疫酶組化常用的酶有和。免疫組化前處理的方法之一，酶消化最常用的酶、和。EnVision法檢測組織抗原A,采用的主要試劑為a.DAB/^2O;b.EnVision試劑;c.抗A抗原特異性抗體；d.蘇木精。其滴加順序為：第一步加，第二步加，第三步加，第四步加。若切片中抗原存在，則呈現(xiàn)。請敘述常用的免疫組化方法、、、和。IHC抗原暴露常用有哪幾種酶、和。以及胰酶的消化條件和。免疫組化前處理的方法之一，酶消化最常用的酶、和。EnVision法檢測組織抗原CK，采用的主要試劑為a.DAB/^2O;b.EnVision試劑;c.抗CK抗原特異性抗體d.蘇木精。其滴加順序為：第一步加，第二步加，第三步加，第四步加。若切片中抗原存在，則呈現(xiàn)。用LsAB間接法檢測組織抗原x,采用的主要試劑為：a.BCIP/NBT;b.抗x特異性抗體McAb;c.Streptavidin-AKP結(jié)合物和d.b-SAMIgG,在切片上滴加試劑的順序為：第一步加，第二步加，第三步加，第四步加。若切片中有抗原x存在，則呈。13.常用的免疫組化對照染色有、和等。14.上皮源性腫瘤標志物、、和等。15.原位PCR的設(shè)計思想是將與相結(jié)合，原位檢測組織細胞中低拷貝或單拷貝的特定序列，目前常用的技術(shù)有、、等。16.S-P法檢測組織抗原CK,采用的主要試劑為a.streptavidin-HRP；b.NBT/BCIP；c.CK;d.b-SAMIgG和e.核固紅。其滴加順序為：第一步加，第二步加，第三步加，第四步加，第五步加。若切片中抗原存在，則呈現(xiàn)。17.T細胞淋巴瘤標記的常用抗體、、、、和等。18.常見的非特異性染色染色有等。、、和用LsAB法檢測組織抗原x,采用的主要試劑為：（1）AEC/HO；（2）.抗x特異性McAb；⑶.Streptavidin-HRP；（4）b-SAMG；⑸蘇木素；⑹抗原修復(fù)；（7?.3%電O:⑻非免疫正常血清；（9）Bio-HRP在切片上滴加試劑的順序為：第一步力，第二步力，第三TOC\o"1-5"\h\z步加，第四步加，第五步加，第六步加，第七步加，第八步—，第九步加，等。若切片中有抗原x存在，則呈現(xiàn)顏色。原位PCR的設(shè)計思想是將與相結(jié)合，原位檢測組織細胞中低拷貝或單拷貝的特定序列，目前常用的技術(shù)有、、等。一個抗原往往有個抗原決定簇，用它免疫動物得到的抗體抗體，用其免疫小鼠脾細胞與小鼠骨髓細胞融合的雜交瘤技術(shù)篩選產(chǎn)生的抗體。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)構(gòu)步驟，免疫熒光染色中以分為和免疫組織化學(xué)常用的組織固定液主要有，和免疫組化染色中，其所用抗體的稀釋度（工作濃度）主要與，，，，和等因素相關(guān)。免疫組化假陰性染色主要與，，和等因素有關(guān)。TOC\o"1-5"\h\z按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)構(gòu)步驟，免疫熒光染色中以分為和0原位雜交技術(shù)的基本方法步驟分固定、玻片和組織切片的處理、,對照實驗和結(jié)果的判斷。目前原位雜交組化常用的探針有、,和29.目前原位雜交組化探針的標記方法有,,,和化學(xué)修飾標記法。在進行RNA原位雜交時，必須注意以下幾點：,,,,,，,細胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測方法有、、和透射電鏡觀察方法。熒光顯微鏡可以觀察到、、等染色陽性的凋亡細胞。細胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測方法有等方法。常用廣譜上皮標志有常用廣譜間葉標志有Vimentin、Desmin,、和a-SMA等。常用的血管內(nèi)皮標志有、、、,和D2/40、CD31等。常見神經(jīng)性標志有、、、和Nestin等。TOC\o"1-5"\h\z廣譜淋巴細胞標志有、、、、和CD138、CD5等。中間絲由不同的蛋白質(zhì)組成，依據(jù)其化學(xué)組成可分為六類，其中III型有四種蛋白組成，分另U為、、、。利用人體的某些細胞存在特定的細胞表面抗原，而在該細胞系之外很少表達。它具一定特異性，這些細胞發(fā)生腫瘤時，可高表達特異性抗原，成為腫瘤特異性抗體的結(jié)合標靶，利用腫瘤單抗可有效抑制和殺傷腫瘤細胞。這些標靶有、、、、和CD52等。用免疫組織化學(xué)CSA法檢測組織中P16抗原，采用的主要試劑和步驟為：①McAbP16;②.10%正常羊血清；③AR;④HRP標記兔抗小鼠IgG;⑤FITC標記酪胺一屯02；⑥Streptavidin-AKP;⑦NBT/BCIP:⑧2%卵蛋白；⑨0.05MpH9.0TBS(內(nèi)含氯化鎂和左旋咪唑)；⑽羊抗FITC二抗;(11)2%核固紅;(12)生物素化AKP;(13)生物素化馬抗羊IgG,在切片上滴加試劑的順序和操作流程為：第一步，第二步，第三步，第四步,第五步，第六步，第步，第八步,第九i1tH.步,第丨步,第十一步,第十二步」第十三步-若切片中有P16抗原存在，則呈現(xiàn),背景為。用免疫組織化學(xué)CSA法檢測組織中P53抗原，采用的主要試劑和步驟為：SFITC標記酪胺一H202；②.10%正常羊血清；③AR;④HRP標記兔抗小鼠IgG;⑤McAbP53;⑥Streptavidin-AKP;⑦NBT/BCIP:⑧2%卵蛋白；⑨0.05MpH9.0TBS(內(nèi)含氯化鎂和左旋咪唑)；⑽羊抗FITC二抗;(11)2%核固紅;2生物素化AKP;3生物素化馬抗羊IgG,在切片上滴加試劑的順序和操作流程為:第一步，第二步，第三_lB少，第四步,第五步，第六_lB步，第七步，第八步,第九_lB步,第十步,第十一步,第十二_lB步,第十三步,若切片中有P53抗原存在，則呈現(xiàn),背景為依據(jù)IHC陽性標記的顯色程度常分為、和三種。第三部分選擇題（單選五選一）免疫組化的主要任務(wù)是（）對疾病進行分類了解疾病機體的代償功能描述疾病病體內(nèi)變化示蹤體內(nèi)大分子或外來致病物質(zhì)，輔助疾病診斷和預(yù)后評估揭示疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律和機制抗原的特異性決定于（）抗原的分子量B.抗原決定簇的性質(zhì)，數(shù)目的空間構(gòu)型抗原的化學(xué)性質(zhì)D.抗原的免疫反應(yīng)性E.抗原異物性下列有關(guān)免疫球蛋白與抗體關(guān)系敘述中，哪一種說法是正確的（）抗體就是免疫球蛋白B.抗體不是免疫球蛋白抗體就是免疫球蛋白，而免疫球蛋白也就是抗體所有抗體都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白不一定都是抗體免疫球蛋白與抗體無關(guān)TOC\o"1-5"\h\z下列哪一項不屬于肌源性腫瘤標記物（）A.SMAB.EMAC.MyosinD.DesminE.MSA哪種酶不能用于抗體免疫球蛋白的標記（）辣根過氧化物酶B.堿性磷酸酶C.葡萄糖氧化酶胰蛋白酶E.酸性磷酸酶.CSA法的敘說哪項不正確（）A.其原理完全不同于LSAB法B.可用于原位雜交和免疫組化的檢測其敏感性要高于PAP法和IGSS法D.是目前免疫酶組化最為敏感的方法之一CSA法是一種催化信號放大系統(tǒng)胃蛋白酶常用的條件（）A.0.4%濃度，酸性,37°CB.1%濃度，中性，37°CC.0.4%濃度，中性，37°C0.4%濃度，堿性，37CE.0.01%濃度，酸性，室溫為免疫組化制作石蠟包埋組織塊，哪項操作不合適？（）A.用中性緩沖福爾馬林固定B.組織塊厚度1.5?2.0mm為宜脫水、透明等操作在4°C或室溫下進行用低溶點石蠟（60C以下）E.脫水、透明、包埋等時間應(yīng)比常規(guī)縮短用IgG的Fab片段做免疫組化試劑時，其特點描述中哪項不對（）A.對細胞膜穿透力強B.可對亞細胞抗原定位完整保留了與相應(yīng)抗原有反應(yīng)能力可避免與淋巴組織中的許多細胞產(chǎn)生假陽性E.能做一抗，不能做二抗下列哪一項措施對保存抗體效價不利（）A.保持抗血清或腹水原液B.加50%甘油和0.2%疊氮鈉小量分裝，低溫保存D.已稀釋的抗體，用不完時可冰凍保存E.冷凍干燥TOC\o"1-5"\h\z下列免疫組化方法的靈敏度由高到低的順序應(yīng)為（）A.ABC、IGSS、PAP、EnVisionB.ABC、PAP、IGSS、EnVisionIGSS、EnVision、ABC、PAPD.IGSS、PAP、ABC、EnVisionPAP、ABC、IGSS、EnVision、在免疫熒光組化的反應(yīng)緩沖液中加伊文氏蘭的目的是為（）A.消除非特異背景和襯托組織細胞結(jié)構(gòu)B.延緩熒光衰減C.增加熒光效率抑制游離的FITCE.保持標記FITC的抗體活性為了增加外加抗體與組織抗原的接觸，下列哪個辦法不可?。ǎ〢.組織切片用蛋白酶消化B.用非離子型表面活化劑提高反應(yīng)溫度到42CD.熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)延長孵育時間找出CSA法與S-P法的主要區(qū)別點（）A.親和反應(yīng)B.抗原抗體反應(yīng)C.正負離子結(jié)合Streptavidin上標記多聚物酶復(fù)合物E.利用HRP催化酪胺基團.下列哪一種方法屬于免疫金銀組化技術(shù)（）A.EnVisionB.EposC.ABCD.IGSSE.SABC.下列哪種試劑不屬于上皮細胞標志物（）A.EMAB.CKC.PCKD.ESAE.Vimentin關(guān)于IGSS法的描述哪項不正確（）A.膠體金顆粒大小可控制B.膠體金與Ig的結(jié)合不是共價鍵作用在免疫電鏡和光鏡中可廣泛應(yīng)用金顆粒用銀增強E.價格昂貴，不易推廣DAB不具有的特點是（）是供氫體B.其氧化產(chǎn)物不溶解C.無潛在的致癌性可長久保存其反應(yīng)結(jié)果E.可與活化加大電子密度在Epos方法中，HRP應(yīng)結(jié)合到（）A.抗原B.多聚螯合物C.AvidinD.特異性二抗上E.biotin下列哪種金屬離子加入到DAB中，使終產(chǎn)物呈紫藍色（）AgB.SiC.CuD.NiE.Fe免疫組化是一門（）研究利用酶化學(xué)原理追蹤組織或細胞內(nèi)大分子物質(zhì)變化規(guī)律的應(yīng)用科學(xué)研究利用免疫學(xué)反應(yīng)原理，通過特定的標記抗體示蹤或細胞內(nèi)相應(yīng)抗原大分子物質(zhì)變化規(guī)律的應(yīng)用科學(xué)研究利用金屬離子的高電子密度追蹤顯示組織或細胞內(nèi)大分子復(fù)合物質(zhì)變化規(guī)律的應(yīng)用科學(xué)研究利用堿基配對規(guī)律，標記示蹤組織或細胞內(nèi)核酸分子序列的應(yīng)用科學(xué)研究利用放射性核素顯影原理追蹤組織或細胞內(nèi)大分子物質(zhì)變化規(guī)律的應(yīng)用科學(xué)下列哪種方法不屬與多聚螯合物酶法（E）A.EnVisionB.EposC.UIP法D.PowerVision法E.SABC23下列哪種方法屬以碳鏈為骨架的多聚螯合物方法？（A）PowerVision法UIP法EnVision法IGSS法EPOS法下列哪一項措施對保存抗體效價不利（）A.保持抗血清或腹水原樣B.加50%甘油和疊氮鈉小量分裝，低溫保存D.已稀釋的抗體，用不完時再冰凍保存冷凍干燥最有利于抗原抗體復(fù)合物形成的緩沖液組合是（）中性或偏堿性，低離子濃度，加溫B.酸性PH,高離子濃度，加溫酸性PH,低離子強度，加溫D.中性或強堿，高離子強度，加溫酸性PH,高離子強度處理冰凍組織塊時，哪種方法是合適的（）新鮮組織放入盛有固定液的小瓶內(nèi)或新鮮組織立即送病理科作進一步的處理將新鮮組織塊立即投入液氮中C.先在-50°C冰箱內(nèi)慢慢冷卻再入液氮標本盒底部接觸液氮，待組織冰結(jié)后再入液氮經(jīng)固定長期存放于-70C內(nèi)長期保存對于EnVision的描述不正確項（）IHC染色時間短B.穩(wěn)定性差EnVision試劑上可標記HRP,也可以標記AKPEnVision試劑可商品化獲得E.具有很低的背景染色TOC\o"1-5"\h\z下列哪種方法屬以葡聚糖作為骨架的多聚螯合物方法？（）ABCB.LSABC.EnVisionD.PAPE.UIP下列哪種方法屬以氨基酸為骨架的多聚螯合物方法？（）ABCB.LSABC.EnVisionD.PAPE.UIP下列哪種方法屬以氨基酸為骨架的多聚螯合物方法？（）A.ABC法B.PowerVision法C.EnVision法D.IGSS法E.EPOS法下列免疫酶組化方法的敏感度由高到低應(yīng)為（）A.ABC、LSAB、EnVision、PAPB.EnVision、LSAB、ABC、PAPPAP、LSAB、ABC、EnVisionD.LSAB、ABC、PAP、EnVisionEnVision、PAP、LSAB、ABC哪個條件不符合標記用熒光素（）A.能與蛋白質(zhì)形成共價鍵B.光致發(fā)光C.與自發(fā)熒光的波長差別小標記對Ig活性影響小E.游離的熒光素容易排除下