中藥及其制劑分析-課件

【大綱要求】1、熟悉中藥及其制劑的定型鑒別方法。2、熟悉中藥及其制劑的雜質(zhì)檢查方法。3、掌握中藥制劑的定量分析和指紋圖譜質(zhì)量控制方法。十四章中藥及其制劑分析概論【大綱要求】1、熟悉中藥及其制劑的定型鑒別方法。十四章中1中藥TraditionalChineseMedicine(TCM)天然產(chǎn)物NaturalProductsNPs中藥復(fù)方ChineseMedicineCompoundPrescription中成藥ChineseTraditionalPatentmedicine中藥制劑TraditionalChineseMedicines(TCMs）第一節(jié)：概述中藥TraditionalChineseMedici2中藥及其制劑分析-課件3中藥及其制劑分析-課件4中藥及其制劑分析的特點(diǎn)1、化學(xué)成分復(fù)雜，有效成分難以確定2、中藥制劑是按照中意理論組成，要根據(jù)組方規(guī)則建立分析方法3、藥材來(lái)源差異很大，應(yīng)考慮藥材來(lái)源和炮制對(duì)分析的影響4、針對(duì)不同制劑輔料，選擇適宜的分析方法5、中藥中的雜質(zhì)來(lái)源是多方面的，應(yīng)有目的去控制6、中藥制劑含有多種有效成分，應(yīng)檢測(cè)多中成分的含量中藥及其制劑分析的特點(diǎn)1、化學(xué)成分復(fù)雜，有效成分難以確定5中藥及其制劑分析-課件6中藥及其制劑分析-課件7中藥及其制劑分析-課件8中藥及其制劑的分類及質(zhì)量分析要點(diǎn)1、中藥材及其炮制品的質(zhì)量控制液體制劑半固體制劑固體制劑氣體制劑2、劑型分類中藥及其制劑的分類1、中藥材及其炮制品的質(zhì)量控制液體制劑2、9中藥材及其炮制品在中藥質(zhì)量控制中的重要性應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)化中藥材及其炮制品在中藥質(zhì)量控制中的重要性應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)家藥品標(biāo)10中藥液體制劑合劑與口服液酒劑和酊劑注射劑合劑：是指藥材用水或其他溶劑提取，提取液經(jīng)濃縮制成的內(nèi)服液體制劑?？诜海?jiǎn)蝿┝堪b的合劑稱為口服液。常用的提取方法：煎煮法、滲漉法、蒸餾法檢查項(xiàng)目：酸敗、氣味、相對(duì)密度和pH值等檢查項(xiàng)目。中藥液體制劑合劑與口服液合劑：是指藥材用水或其他溶劑提取，提11酒劑：是指藥材用蒸餾酒精提取而制成的澄清液體制劑。其特點(diǎn)為使用白酒為提取溶劑，可加糖等矯味劑。酊劑：是指藥物用規(guī)定濃度的乙醇浸出或溶解而制成的澄清液體制劑。取特點(diǎn)為提取溶劑為乙醇，不加矯味劑，處方簡(jiǎn)單。酒劑：是指藥材用蒸餾酒精提取而制成的澄清液體制劑。其特點(diǎn)為使12酒劑的檢查：一般應(yīng)進(jìn)行“總固體”的檢查，檢查方法是：對(duì)不含糖的酒劑，精密量取供試品50ml，置于稱定重量的蒸發(fā)皿內(nèi)，水浴上揮干，在105℃干燥3h，再置于干燥器內(nèi)放置30min后稱重，殘?jiān)鼞?yīng)符合規(guī)定。對(duì)于含糖的酒劑：精密量取供試品50ml，置水浴上揮干，加無(wú)水乙醇攪拌提取4次，每次10ml，合并濾液，再按照相同的方式進(jìn)行。酒劑和酊劑都應(yīng)采用GC法進(jìn)行“乙醇量”檢查、還有甲醇限量和裝樣量檢查。酒劑的檢查：一般應(yīng)進(jìn)行“總固體”的檢查，檢查方法是：對(duì)不含糖13注射劑：是指從藥材中提取的有效物質(zhì)制成的可供注入人體內(nèi)的滅菌溶液或乳狀液，以及供臨用前配成溶液的無(wú)菌粉末或濃溶液。檢查項(xiàng)目：裝量差異、澄明度、無(wú)菌、不溶性微粒、pH值需要制訂中藥材、有效部位或中間體、注射劑的指紋圖譜《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求（暫行）》《中藥注射劑指紋圖譜實(shí)驗(yàn)研究技術(shù)指南（試行）》注射劑：是指從藥材中提取的有效物質(zhì)制成的可供注入人體內(nèi)的滅菌14半固體制劑煎膏劑浸膏劑和流浸膏劑是指藥材煎煮、去渣濃縮后，加煉蜜或糖制成的半流體制劑是指用適宜的溶劑浸出藥材中的有效成分，蒸去部分溶劑，調(diào)整濃度至規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)而制成的制劑半固體制劑煎膏劑浸膏劑和流浸膏劑是指藥材煎煮、去渣濃縮后，加15固體制劑丸劑是指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的粘合劑或輔料制成的球形或類球形制劑顯微組織鑒別、水分、重量差異、無(wú)菌散劑是指一種或多種藥材混合制成的粉末狀制劑均勻度、水分、裝量差異≤9.0％固體制劑丸劑是指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的粘合劑顯微組織鑒16中藥及其制劑分析-課件17顆粒劑是指用適宜輔料與藥材提取物或藥材細(xì)粉制成的顆粒狀制劑粒度、水分（≤6.0％)

、溶化性、裝量差異片劑是指藥材細(xì)粉或浸膏加輔料壓制而成的片狀制劑裝量差異崩解時(shí)限顆粒劑是指用適宜輔料與藥材提取物或粒度、水分（≤6.0％)18中藥片劑中藥片劑19膠囊劑是指將一定量的藥材提取物加藥粉或輔料制成粉末或顆粒，填充于空心膠囊中制成的或?qū)⑺幉姆勰┲苯友b于空心膠囊中制成的崩解時(shí)限、硬膠囊水分（≤9.0％)

、裝量差異膠囊劑是指將一定量的藥材提取物加藥粉或崩解時(shí)限、硬膠囊水分20中藥及其制劑分析中待測(cè)成分的提取分離與純化方法萃取法冷浸法回流提取法連續(xù)回流提取法水蒸氣蒸餾法SD超聲提取法UAE微波輔助萃取法MAE超臨界流體萃取法SFE中藥及其制劑分析中待測(cè)成分的提取分離與純化方法萃取法21萃取法：是利用溶質(zhì)在兩種互不相容的溶劑中溶解度的不同，使物質(zhì)從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，經(jīng)過(guò)多次萃取后將測(cè)定組分提取出來(lái)的方法。

萃取法：是利用溶質(zhì)在兩種互不相容的溶劑中溶解度的不同，使物質(zhì)22冷浸法：使將溶劑加入樣品粉末中，室溫下放置一定時(shí)間，組分因?yàn)閿U(kuò)散而從樣品粉末中提取出來(lái)的方法。冷浸法：使將溶劑加入樣品粉末中，室溫下放置一定時(shí)間，組分因?yàn)?3回流提取法：是將樣品粉末置于燒瓶等提取容器中，加入一定量的有機(jī)溶劑，加熱進(jìn)行回流提取的方法。回流提取法：是將樣品粉末置于燒瓶等提取容器中，加入一定量的有24連續(xù)回流提取法－索氏提取法：是利用有機(jī)溶劑的揮發(fā)性而進(jìn)行連續(xù)提取的一種方法。連續(xù)回流提取法－索氏提取法：是利用有機(jī)溶劑的揮發(fā)性而進(jìn)行連續(xù)25水蒸氣蒸餾法：利用揮發(fā)性成分能隨著水蒸氣揮發(fā)出來(lái)的一種提取方法超聲提取法（Ultrasound-assistedextractionUAE）：是利用超聲波的頻率將植物細(xì)胞破碎而使成分從組織中釋放出來(lái)的一種方法。水蒸氣蒸餾法：利用揮發(fā)性成分能隨著水蒸氣揮發(fā)出來(lái)的一種提取方26微波輔助萃?。∕icrowave-assistedextractionMAE）：是利用微波產(chǎn)生的能量快速破碎植物細(xì)胞而使化學(xué)成分釋放進(jìn)入溶劑中的一種方法。微波輔助萃?。∕icrowave-assistedextr27超臨界流體萃?。⊿upercriticalfluidextractionSFE）任何一種物質(zhì)都存在三種相態(tài)-氣相、液相、固相。三相呈平衡態(tài)共存的點(diǎn)叫三相點(diǎn)。液、氣兩相呈平衡狀態(tài)的點(diǎn)叫臨界點(diǎn)。在臨界點(diǎn)時(shí)的溫度和壓力稱為臨界溫度和臨界壓力。不同的物質(zhì)其臨界點(diǎn)所要求的壓力和溫度各不相同。超臨界流體(SCF)是指在臨界溫度（Tc）和臨界壓力(Pv)以上的流體。高于臨界溫度和臨界壓力而接近臨界點(diǎn)的狀態(tài)稱為超臨界狀態(tài)。超臨界流體萃取（Supercriticalfluidex28超臨界流體萃取分離過(guò)程的原理是利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關(guān)系，即利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行的。在超臨界狀態(tài)下，超臨界流體具有很好的流動(dòng)性和滲透性，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小的成分依次萃取出來(lái)。當(dāng)然，對(duì)應(yīng)各壓力范圍所得到的萃取物不可能是單一的，但可以控制條件得到最佳比例的混合成分，然后借助減壓、升溫的方法使超臨界流體變成普通氣體，被萃取物質(zhì)則完全或基本析出，從而達(dá)到分離提純的目的，所以在超臨界流體萃取過(guò)程是由萃取和分離組合而成的。超臨界流體萃取分離過(guò)程的原理是利用超臨界流體的溶解能力與其密29常見(jiàn)的純化方法Liquid-liquidextractionColumnchromatographySolid-phaseextractionSolid-phasemicro-extractionMacroporousresin

常見(jiàn)的純化方法Liquid-liquidextractio30第二節(jié)：中藥及其制劑的分析方法取樣與樣品保存鑒別檢查含量測(cè)定檢驗(yàn)記錄第二節(jié)：中藥及其制劑的分析方法取樣與樣品保存31中藥材取樣1、中藥材應(yīng)注意規(guī)格和產(chǎn)地等樣品信息2、<100件，取5件；100～1000件，取5％；≥1000件的，超過(guò)部分按1％取樣；<5件，全部取樣3、對(duì)細(xì)小顆粒的藥材，用采樣器取樣，每包在2～3個(gè)不同部位取樣，大包件的硬從10cm的深處取樣。4、對(duì)所取得樣品采用四分法混合均勻，總量應(yīng)為試驗(yàn)用量的3倍，1/3供分析檢測(cè)、1/3供必需時(shí)復(fù)核、1/3為保留保存和備查中藥材取樣1、中藥材應(yīng)注意規(guī)格和產(chǎn)地等樣品信息32中藥制劑取樣法1、粉末狀，一般取樣100g2、液體制劑，一般取樣200ml3、固體制劑，一般取樣200片，未成片顆粒100g，丸劑10丸，膠囊20個(gè)4、注射劑應(yīng)經(jīng)過(guò)兩次取樣，滅菌前取樣和滅菌后取樣，滅菌前一般取樣200支中藥制劑取樣法1、粉末狀，一般取樣100g33鑒別：性狀鑒別、顯微鑒別（淀粉粒，韌皮纖維，孔紋導(dǎo)管，木纖維）、理化鑒別、色譜鑒別光譜鑒別顯微組織結(jié)構(gòu)各不相同鑒別：顯微組織結(jié)構(gòu)各不相同34色譜鑒別法色譜鑒別法35中藥及其制劑分析-課件36具體的鑒別與比較方法：1、對(duì)照品對(duì)照法2、對(duì)照藥材對(duì)照法3、陽(yáng)性對(duì)照法4、陰性對(duì)照法具體的鑒別與比較方法：371、制備供試品溶液2、色譜條件的選擇Stationaryphase和展開(kāi)系統(tǒng)

普通化合物－G、GF254、GF365

生物堿－氧化鋁板黃酮－聚酰胺板3、對(duì)照物的選擇具體的實(shí)驗(yàn)操作1、制備供試品溶液具體的實(shí)驗(yàn)操作38顯色與檢視方法1、直接日光下檢視－對(duì)有顏色的成分2、噴霧顯色法－與試劑反應(yīng)產(chǎn)生有顏色的斑點(diǎn)3、置365nm下檢視－對(duì)有熒光吸收的物質(zhì)4、置254nm下檢視－在紫外光下有吸收的物質(zhì)顯色與檢視方法39中藥及其制劑的雜質(zhì)檢查水分測(cè)定－烘干法、甲苯法、減壓干燥法、氣相色譜法總灰份和酸不溶性灰份測(cè)定法重金屬檢查砷鹽檢查農(nóng)藥殘留量檢查－GC法中藥及其制劑的雜質(zhì)檢查水分測(cè)定－烘干法、甲苯法、減壓干燥法、40中藥及其制劑分析-課件41中藥及其制劑的含量測(cè)定含測(cè)目標(biāo)的選取原則：1、弄清楚成分類別、有效成分和指標(biāo)性成分2、復(fù)方制劑應(yīng)首選君藥及貴重藥建立含量測(cè)定方法3、含有毒性藥材的必須建立含測(cè)項(xiàng)目，應(yīng)進(jìn)行重點(diǎn)研究4、有效成分或指標(biāo)成分清楚的，應(yīng)首選測(cè)定其含量5、測(cè)定成分應(yīng)盡量與中醫(yī)理論、用藥的功能主治相近6、測(cè)定成分應(yīng)考慮與生產(chǎn)工藝的關(guān)系7、測(cè)定應(yīng)歸屬于某單一藥材，若復(fù)方中多種藥材都含有則不應(yīng)選為定量指標(biāo)8、確實(shí)無(wú)法知道成分的，可測(cè)定藥物的總固體量中藥及其制劑的含量測(cè)定含測(cè)目標(biāo)的選取原則：42含量測(cè)定方法高效液相色譜法氣相色譜法薄層色譜法化學(xué)分析法含量測(cè)定方法高效液相色譜法43總皂苷的比色法測(cè)定高氯酸－冰醋酸顯色后比色法測(cè)定1、配置人參皂苷對(duì)照品溶液2、配置樣品溶液3、顯色4、測(cè)定對(duì)照品樣品1樣品2總皂苷的比色法測(cè)定高氯酸－冰醋酸顯色后比色法測(cè)定1、配置人參44中藥及其制劑分析-課件45薄層色譜掃描法測(cè)定刺五加注射液中紫丁香苷的含量薄層色譜掃描法測(cè)定刺五加注射液中紫丁香苷的含量46TraditionalChinesemedicinefingerprint（TCMFP）TraditionalChinesemedicinef47制訂指紋圖譜的意義：通過(guò)定性鑒別和定量分析來(lái)控制中間體、成品的一致性，減少批間差異，主要用于中藥質(zhì)量控制的補(bǔ)充和提高。制訂指紋圖譜的意義：48制訂指紋圖譜的原則：1、系統(tǒng)性－應(yīng)包含大多數(shù)組分或指標(biāo)成分的全部2、特征性－反應(yīng)的化學(xué)信息應(yīng)具有高度的選擇性3、重現(xiàn)性－不同實(shí)驗(yàn)條件、不同分析人員對(duì)樣品的測(cè)定誤差的允許范圍－用相似度表示制訂指紋圖譜的原則：49二、指紋圖譜的類型1、按測(cè)定手段分類中藥化學(xué)成分指紋譜－采用色譜、光譜及其他分析方法建立的用以表征中藥化學(xué)成分特征的指紋圖譜。中藥生物指紋譜－利用生物技術(shù)建立的中藥DNA、中藥基因組學(xué)和中藥蛋白組學(xué)指紋圖譜。

生物活性指紋圖譜：是指中藥或中藥制劑作用于某特定細(xì)胞或動(dòng)物后，引起基因和蛋白的復(fù)雜變化二、指紋圖譜的類型1、按測(cè)定手段分類502、按應(yīng)用對(duì)象分類中藥材指紋圖譜中藥原料藥指紋圖譜生產(chǎn)中間體指紋圖譜中藥制劑指紋圖譜2、按應(yīng)用對(duì)象分類51三、中藥指紋圖譜研究的關(guān)鍵技術(shù)（一）研究思路1、確定研究對(duì)象應(yīng)充分了解前期研究文獻(xiàn)，藥材、中間體及成品所含的成分、有效成分及其理化性質(zhì)，并應(yīng)了解中藥復(fù)方配伍的基本原則2、確定研究?jī)?nèi)容需要制訂中藥材、有效部位、中間體、成品的指紋圖譜三、中藥指紋圖譜研究的關(guān)鍵技術(shù)（一）研究思路1、確定研究對(duì)象52（二）研究方案1、樣品的選擇與采集2、供試品的制備3、參照物的制備4、研究方法的選擇5、色譜條件的優(yōu)化6、指紋特征的選擇與技術(shù)參數(shù)（二）研究方案1、樣品的選擇與采集53樣品的選擇與采集1、藥材應(yīng)盡可能的固定產(chǎn)地、采收時(shí)間和炮制加工方法2、應(yīng)結(jié)合臨床對(duì)已使用的藥材進(jìn)行考察3、應(yīng)收集不同產(chǎn)地和不同采收期的藥材樣品的選擇與采集1、藥材應(yīng)盡可能的固定產(chǎn)地、采收時(shí)間和炮制加54供試品的制備應(yīng)根據(jù)有效成分的理化性質(zhì)和檢測(cè)方法的具體要求，選擇適當(dāng)?shù)臉悠诽崛『图兓椒▍⒄瘴锏闹苽涓鶕?jù)檢測(cè)方法，選擇樣品所含化學(xué)成分或內(nèi)標(biāo)物作為參照物供試品的制備應(yīng)根據(jù)有效成分的理化性質(zhì)和檢測(cè)方法的具體要55研究方法的選擇測(cè)定方法，測(cè)定儀器設(shè)備、試劑，分析條件最常用的是色譜分析法必須固定色譜柱、薄層板、試劑、測(cè)定條件HPLC和GC記錄60min的圖譜TLC記錄從原點(diǎn)至溶劑前沿的圖譜研究方法的選擇測(cè)定方法，測(cè)定儀器設(shè)備、試劑，分析條件最常用的56色譜條件的優(yōu)化Column－長(zhǎng)短、填料、顆粒粗細(xì)Mobilephase-MeOH、CH3CN、H20Detector-UV,DAD,VWD,MS,ELSD,ECDColumntemperature-roomtemperatureSamplesize-適當(dāng)加大進(jìn)樣量，減少基線漂移，但應(yīng)注意色譜柱的超載色譜條件的優(yōu)化Column－長(zhǎng)短、填料、顆粒粗細(xì)57Detectionwavelength:1、參照樣品和對(duì)照品的全波長(zhǎng)紫外光譜來(lái)選擇2、根據(jù)中藥復(fù)方的組方理論來(lái)選擇，盡可能的兼顧3、可以建立多個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng)下的指紋圖譜4、可用多個(gè)檢測(cè)手段來(lái)建立指紋圖譜Detectionwavelength:58指紋圖譜的選擇與技術(shù)參數(shù)1、共有指紋峰的確定2、共有指紋峰峰面積的比值中藥材供試品的圖譜中各共有峰峰面積的比值與指紋圖譜中各共有峰峰面積的比值比較

As/At≥20%RSD%≤±20%

20%>As/At≥10%RSD%≤±25%

As/At<10%峰面積比值不作要求，但必須標(biāo)定tR