第二十章 病原性真菌

第二十章病原性真菌第1頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月一、表面感染真菌

主要寄居于人體皮膚和毛干的最表層，在我國主要是糠秕馬拉色菌，為條件致病菌，是一種嗜脂性酵母樣菌。它侵犯皮膚角質(zhì)層引起一種慢性、無癥狀的淺部真菌病，即汗斑，無明顯炎癥反應。主要是色素異常性改變，由淡變深，而老斑疹色素由深轉(zhuǎn)淺，成為白斑。還可引起毛囊炎、脂溢性皮炎等。第2頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物檢驗

1．直接顯微鏡檢查可采用透明膠帶粘貼取材法，將透明膠帶直接貼于皮膚表面，數(shù)分鐘后揭下，直接貼于載玻片上鏡檢或經(jīng)棉藍染色或革蘭染色后鏡檢?？梢婃咦雍途z。孢子為圓形或卵形，厚壁，芽頸較寬，常成簇分布；菌絲粗短，呈臘腸樣。第3頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2．分離培養(yǎng)與鑒定將鱗屑接種于含菜籽油的培養(yǎng)基，37℃孵育3d后，在培養(yǎng)基上開始生長，20d左右菌落約lOmm乳酪色酵母型菌落，表面光滑。取菌落作涂片染色鏡檢，觀察真菌形態(tài)。第4頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月二、皮膚癬真菌寄生于皮膚角蛋白組織的淺部真菌稱為皮膚癬菌，又稱皮膚絲狀菌。約有45種，一部分僅感染動物，對人致病的約有20余種。無性階段屬于半知菌門，而有性型則屬于子囊菌門。分為毛癬菌屬、表皮癬菌屬和小孢子癬菌屬等三個菌屬。第5頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(一)臨床意義皮膚癬菌易侵犯人體皮膚、指甲、毛發(fā)的角蛋白組織并生長繁殖致病，是因為其能產(chǎn)生角質(zhì)溶解酶。皮膚癬菌是接觸傳染，只要反復接觸患者均有可能被感染。在同一病人有不同的臨床表現(xiàn)，如毛癬菌屬可引起發(fā)癬、體癬、甲癬；而相同部位的病可由不同皮膚癬菌引起，如甲癬(俗稱灰指甲)可由毛癬菌屬和表皮癬菌屬引起。第6頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1．毛癬菌屬有20種，其中有13種對人致病。常見的有紅色毛癬菌、紫色毛癬菌、須毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌和許蘭毛癬菌等。毛癬菌感染的皮屑、甲屑或病發(fā)10％KOH溶液消化后鏡檢，可見有菌絲，病發(fā)內(nèi)、外可見菌絲或孢子。在沙氏培養(yǎng)基上可白、紅、橙或棕色，表面呈絨毛狀、粉末狀或蠟狀菌落。鏡下可見梳狀、球拍、螺旋或鹿角菌絲；葡萄狀或梨狀小分生孢子，細長薄壁大分生孢子。第7頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2.表皮癬菌屬對人致病的只有絮狀表皮癬菌,感染的皮屑和甲屑經(jīng)10％KOH液消化后鏡檢，可見分枝斷裂的有隔菌絲，少見孢子。在沙氏培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，菌落初為白色鵝毛狀，以后轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色粉末狀。鏡下可見球拍狀菌絲、卵圓形或巨大棒狀薄壁大分生孢子，無小分生孢子，在陳舊培養(yǎng)物中可見厚膜孢子。第8頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3．小孢子癬菌屬有15種，對人致病的有8種，常見的有鐵銹色小孢子菌、石膏樣小孢子菌和狗小孢子菌等。小孢子菌感染的皮屑和毛發(fā)經(jīng)10％KOH處理后鏡檢，皮屑中有分枝斷裂菌絲，在毛發(fā)中呈現(xiàn)小孢子鑲嵌的鞘包裹著發(fā)干。在沙氏培養(yǎng)基中可見白色、棕黃色或黃褐色、粉末或絨毛狀菌落。鏡下可見梳狀、球拍狀或結(jié)節(jié)狀菌絲，卵圓形小分生孢子、厚壁梭形(紡錘形)大分生孢子。第9頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(三)微生物檢驗1．標本采集采集新發(fā)生的皮膚損害邊緣皮屑；指甲近尖端下面甲屑；拔取無光澤病發(fā)，黃癬采集黃癬痂。將標本盛于清潔紙袋，鱗屑要用黑紙包好。第10頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2．直接顯微鏡檢查皮屑標本用10％KOH液制成濕片，指甲用25％KOH或25％NaOH含5％甘油處理。鏡檢可見透明、有隔，常有分支的菌絲及成鏈的關(guān)節(jié)孢子，三個癬菌屬難以鑒別。毛癬菌屬感染病發(fā)有發(fā)外型和發(fā)內(nèi)型孢子，而小孢子菌屬只有發(fā)外型孢子。第11頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3．分離培養(yǎng)與鑒定

皮屑、甲屑和病發(fā)標本，先用70％乙醇或在青、鏈霉素混合液內(nèi)處理5min，再用生理鹽水洗3次，然后接種沙氏瓊脂斜面，25℃培養(yǎng)，每周觀察菌落形態(tài)及顏色，直至第四周。挑取菌落鏡檢菌絲和孢子，也可作棉蘭染色后鏡檢或作小培養(yǎng)后鏡檢。必要時作其他鑒定如毛發(fā)穿孔試驗、脲酶試驗和特殊營養(yǎng)需要試驗等來鑒定皮膚癬菌。第12頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月毛發(fā)穿孔試驗是將頭發(fā)發(fā)剪成lcm長，置于已加入25ml蒸餾水和2—3滴10％酵母浸膏液的平皿內(nèi)，高壓滅菌。將待檢皮膚真菌接種于平皿內(nèi)，置25℃孵育四周，每周檢查一次，每次取數(shù)根毛發(fā)置載玻片上，經(jīng)乳酚棉藍染色后，置低倍鏡下觀察。若毛發(fā)有裂口或陷凹者為陽性，否則為陰性。第13頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月4．藥物敏感試驗皮膚癬菌對灰黃霉素、伊曲康唑等藥物敏感。第14頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月三、皮下組織感染真菌主要有著色真菌和孢子絲菌。一般經(jīng)外傷感染后，在局部皮下組織繁殖，并緩慢向周圍組織擴散，還可經(jīng)淋巴、血液向全身擴散。第15頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(一)著色真菌

是自然界的腐生菌，經(jīng)破損皮膚而感染，引起病損皮膚變黑，引起著色真菌病。主要真菌有卡氏枝孢霉、裴氏著色真菌、緊密著色真菌和疣狀瓶霉。第16頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1．臨床意義常在患者外傷后感染，多發(fā)生四肢暴露部位，開始為小丘疹，表面干燥或濕潤，有鱗屑或鱗痂，逐漸形成斑塊結(jié)節(jié)，呈疣狀增殖。皮損反復發(fā)生，且長期不愈，可致畸致殘。免疫功能低下時可侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)或經(jīng)血流擴散。病理變化主要為角化過度及角化不全。第17頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2．微生物特性著色真菌菌絲短粗分隔，呈棕色，有三型分生孢子：①樹枝型：菌絲末端有分生孢子柄，柄端分叉長出孢子；②劍頂型：圍繞菌絲末端或菌絲橫隔處長有一圈分生孢子；③花瓶型：在菌絲分隔處長出花瓶狀的分生孢子柄，在瓶口長出成叢的小分生孢子。在葡萄糖蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)1周，出現(xiàn)灰黑色菌落，隨之菌落表面出現(xiàn)絨毛狀或天鵝絨狀氣生菌絲，菌落色素加深。第18頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3.微生物檢驗

(1)直接顯微鏡檢查皮屑用10％—20％KOH溶液加熱處理后鏡檢，可見單個或成群厚壁孢子，有橫隔或中間十字分隔。取乳頭狀增殖的病損擠壓出的分泌物鏡檢陽性率最高。膿汁、腦脊液或活組織也可做鏡檢。鏡檢結(jié)果結(jié)合臨床可確定診斷。第19頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)分離培養(yǎng)與鑒定1)將標本接種沙氏培養(yǎng)基，生長緩慢，菌落從灰黑色至黑色，有氣生菌絲。菌落涂片鏡檢可見三種類型的分生孢子，有鑒定價值。2)明膠液化試驗：致病性菌株均不液化明膠。3)其他生化反應：不能水解淀粉，不凝固牛奶，能同化硝酸鹽，需維生素B1。第20頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月4．藥物敏感試驗對5-FC、伊曲康唑、氟康唑敏感，

但易產(chǎn)生耐藥性。第21頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(二)孢子絲菌

孢子絲菌屬于腐生性真菌，廣泛分布于土壤、塵埃、木材上。主要病原真菌是申克孢子絲菌。第22頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月孢子絲菌病是人獸共患性疾病，傳染源是人和動物，傳播途徑主要經(jīng)破損皮膚接觸感染。經(jīng)微小創(chuàng)口侵入皮膚后，創(chuàng)口局部出現(xiàn)炎癥性小結(jié)，增大形成炎癥性斑塊或增生性糜爛?？裳亓馨凸芊植?，引起亞急性和慢性肉芽腫，稱為孢子絲菌性下疳。經(jīng)呼吸道引起肺孢子絲菌病，并可沿血行播散至其他器官如骨、眼等。第23頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

申克孢子絲菌是二相性真菌。在自然環(huán)境中或沙氏培養(yǎng)基上25℃～28℃培養(yǎng)時呈霉菌型(菌絲相)，而在組織內(nèi)或在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時為酵母型(組織相)。菌絲相可見菌絲兩側(cè)伸出細長分生孢子柄，末端長出成群梨狀小分生孢子。組織相則可見卵圓形小體，形似雪茄煙狀，常位于中性粒細胞或單核細胞內(nèi)。在沙氏培養(yǎng)基上形成黑褐皺褶薄膜菌落，而在胱氨酸葡萄糖血瓊脂培養(yǎng)基上則形成灰黃色柔軟的類酵母型菌落。第24頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3．微生物檢驗(1)直接昆微鏡檢查：取患者膿、痰、血、痂皮或病理組織塊等作涂片或切片，革蘭或PAS染色，在巨噬細胞或中性粒細胞內(nèi)、外，可見G+或PAS陽性(紫紅色)卵圓形的孢子。第25頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)分離培養(yǎng)與鑒定：將標本接種于沙氏培養(yǎng)基上25℃培養(yǎng)，2-3d開始生長，初為白色濕潤的酵母型菌落，以后變?yōu)榈Х壬辽詈稚?。涂片染色鏡檢，可見典型的菌絲相的申克孢子絲菌。接種于胱氨酸葡萄糖血瓊脂培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)2-3d，可形成乳白色或淡褐色酵母型菌落。鏡下可見G+卵圓形的孢子。第26頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(3)藥物敏感試驗：對碘化鉀、伊曲康唑、特比萘芬等藥物敏感。(4)抗體檢測：取患者血清做凝集試驗，若抗體效價大于l：320有診斷意義。(5)動物接種：將標本接種小白鼠腹腔內(nèi)，2周內(nèi)引起腹腔炎，取膿汁作涂片染色鏡槍，可見革蘭陽性、卵圓形或梭形小體。第27頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)深部感染真菌

深部感染真菌是指能侵襲深部組織和內(nèi)臟及全身的真菌，主要有假絲酵母菌、隱球菌、曲霉、毛霉、組織胞漿菌和卡氏肺孢菌等，其中以隱球菌感染較常見。組織胞漿菌為二相性真菌，假絲酵母菌、曲霉、毛霉和卡氏肺孢菌等為條件致病性真菌，只有在一定的條件下才引起機體致病。第28頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月一、假絲酵母菌俗稱念珠菌，有81個種，其中有11種對人有致病性：白假絲酵母菌、為最常見的致病菌。此外，熱帶假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌也較多引起疾病。第29頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(一)白假絲酵母菌通常存在于人的口腔、上呼吸道、腸道和陰道粘膜上，當機體發(fā)生菌群失調(diào)或抵抗力降低時，可引起念珠菌病。如嬰兒的鵝口瘡、假絲酵母菌性陰道炎、龜頭炎、腸炎、肺炎、膀胱炎、腎孟腎炎和中樞神經(jīng)系統(tǒng)白假絲酵母菌病，如腦膜炎、腦膜腦炎、腦膿腫等。此外，因心瓣膜手術(shù)而引發(fā)心內(nèi)膜炎、長期用靜脈內(nèi)導管而引起全身性假絲酵母菌病，病死率極高。第30頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1．微生物特性

白假絲酵母菌呈圓形或卵圓形，直徑3-6μm。革蘭陽性，著色不均勻。出芽方式繁殖，在組織內(nèi)可見芽生孢子、假菌絲，在玉米粉培養(yǎng)基中可產(chǎn)生假菌絲和厚膜孢子。第31頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2．微生物檢驗

1)直接顯微鏡檢查：取膿汁、痰和局部炎癥性分泌物直接涂片，革蘭染色后鏡檢，顯微鏡見到革蘭陽性(著色不均勻)、圓形或卵圓形菌體或孢子及假菌絲，可確認為假絲酵母菌感染。2)抗原檢測：取病人血清作ELISA、免疫印跡法等檢測白假絲酵母菌抗原。3)核酸檢測：用PCR法將白假絲酵母菌DNA分子擴增后以分子探針檢測，具有較好的敏性和特異性。第32頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月4)分離培養(yǎng)將標本接種在沙氏培養(yǎng)基上，25℃或37℃培養(yǎng)1～４d后，可出現(xiàn)奶油色類酵母型菌落。鏡檢可見假菌絲和芽生孢子。第33頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月鑒定1)芽管形成試驗：將假絲酵母菌接種于0.2～0.5m|血清中，37℃孵育1.5～４h觀察有無芽管形成。白假絲酵母菌可形成芽管，其他假絲酵母菌不形成芽管。2)厚膜孢子形成試驗：將假絲酵母菌接種于玉米粉培養(yǎng)基25℃孵育1-2d后，白假絲酵母菌在菌絲頂端、側(cè)緣或中間形成厚膜孢子。第34頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3)糖同化或發(fā)酵試驗凡發(fā)酵某種糖一定能同化該糖，故只需做那些不發(fā)酵糖的同化試驗。將假絲酵母菌接種糖發(fā)酵管，25℃孵育，一般觀察2～3d，對不發(fā)酵或弱發(fā)酵管可延長至10d或2—4周。觀察有無酵母生長或液體培養(yǎng)基是否變混濁?，F(xiàn)在商品化的產(chǎn)色培養(yǎng)基可快速鑒定白假絲酵母菌和其他假絲酵母菌。第35頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(3)藥物敏感試驗：對二性霉素B、5-FC等藥物敏感，但對5-FC極易產(chǎn)生耐藥性。(4)抗體檢測：早期診斷可用ELlSA夾心法、免疫酶斑點試驗，方法簡便。也可用乳膠凝集試驗和對流免疫電泳試驗等檢測血清中抗白假絲酵母菌抗體。(5)動物試驗：將假絲酵母菌懸液注射1ml于家兔耳靜脈或注射0.2ml于小白鼠尾靜脈，假絲酵母菌對動物無致病性。第36頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(二)熱帶假絲酵母菌

廣泛分布于自然界，在人體表和外界相通的腔道中也存在。熱帶假絲酵母菌可引起皮膚、粘膜和內(nèi)臟假絲酵母菌病。它除可在粘膜細胞上增殖引起感染外，其產(chǎn)生的毒素可引起過敏反應及產(chǎn)生的水解酶類引起組織損傷。第37頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物檢驗(1)直接顯微鏡檢查：將標本作涂片革蘭染色后鏡檢，觀察Ｇ+假絲酵母菌。(2)分離培養(yǎng)與鑒定：將標本接種在沙氏培養(yǎng)基上形成色暗而干燥的菌落,取菌落作TZC反應。

第38頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月TZC反應即在葡萄糖蛋白胨瓊脂內(nèi)加入0．05g／L氯化三苯基四氮唑(TZC)，熱帶假絲酵母菌在此培養(yǎng)基上生長后使培養(yǎng)基變?yōu)樯罴t色或紫色，而白假絲酵母菌不使培養(yǎng)基變色(淡紅)，其他假絲酵母菌使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。再取菌落做糖發(fā)酵或同化試驗、芽管形成較遲(血清中6h以上)，不形成厚膜孢子、動物試驗陰性。第39頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月二、隱球菌屬

包括17個種和7個變種，廣泛分布于自然界，人體體表、口腔和腸道中。外源性感染,經(jīng)呼吸道侵入，由肺經(jīng)血行播散,可侵犯肺、腦及腦膜、皮膚、骨和關(guān)節(jié)。好發(fā)于細胞免疫功能低下者，如AIDS、惡性腫瘤、糖尿病、器官移植及大劑量使用糖皮質(zhì)激素者?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)新生隱球菌、淺白隱球菌和羅倫隱球菌有致病性。第40頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(１)微生物特性

在組織中呈圓形或卵圓形，直徑一般在4～6μm，外周有寬厚莢膜，莢膜較菌大1～3倍，折光性強，一般染色法不易著色而難以發(fā)現(xiàn)而得名。常采用墨汁負染色法，在黑色景下可鏡檢到透亮菌體和寬厚莢膜。非致病性隱球菌無莢膜。第41頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月（２）生物學多態(tài)性有A、B、C、D等4個血清型，歸入兩個變種組：①新生隱球菌新生變種，有性階段為新生線黑粉菌，血清型為A、D；②新生隱球菌格特變種，有性階段為棒桿孢線黑粉菌，血清型為B、C。用含刀豆氨酸、甘氨酸、溴麝香草酚藍培養(yǎng)基可區(qū)分兩個種，B、C型可使培養(yǎng)基由黃色變藍色，而A、D型則無此作用。在沙氏培養(yǎng)基上形成白色粘稠菌落。第42頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(３)微生物檢驗

(1)標本直接鏡檢：用病人腦脊液作墨汁負染色檢查是診斷隱球菌腦膜炎最簡便、快速方法。常規(guī)細胞染色可發(fā)現(xiàn)隱球菌，但易誤診和漏診。如用PAS染色后新生隱球菌呈紅色。第43頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)抗原檢測

用乳膠凝集試驗、ELISA、和單克隆抗體法等免疫學方法檢測隱球菌莢膜多糖特異性抗原，已成為臨床上的常規(guī)診斷方法，其中以乳膠凝集試驗最為常用，此法簡便、快速。特別對直接鏡檢和分離鑒定陰性者更有診斷價值。ELISA敏感性和特異性都較高。單克隆抗體法除有較高敏感性和特異性外，標本無須稀釋和預先處理的優(yōu)點。第44頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(3)核酸檢測可用痰液、支氣管吸出物等標本核酸檢測方法有DNA探針法、PCR探針法等，用于檢測的探針、引物主要選自保守區(qū)的重復序列?？蓹z出新生隱球菌，并可區(qū)別類型，是新生變種還是格特變種。非致病性隱球菌不被檢出。此方法不受藥物治療的影響，還能正確評價臨床療效和預后等。

第45頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月（４）分離培養(yǎng)

將標本接種在沙氏培養(yǎng)基上，病原性隱球菌在25℃和37℃生長，而非病原性隱球菌在37℃時不生長。培養(yǎng)2—5d后觀察菌落形態(tài)特點，并取菌落作印度墨汁負染色鏡檢。第46頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(５)鑒定1）酚氧化酶試驗：接種L-多巴枸櫞酸鐵和咖啡酸培養(yǎng)基中，經(jīng)2～5d培養(yǎng)，呈棕黑色菌落。2）脲酶試驗：能產(chǎn)生脲酶分解尿素瓊脂培養(yǎng)基中的尿素形成NH4和CO2，使pH升高，培養(yǎng)基可由黃色變粉紅色，而白假絲酵母菌為陰性。第47頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3）糖同化及發(fā)酵試驗：能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能發(fā)酵糖類，不能同化硝酸鹽。非致病性隱球菌不能同化肌醇。第48頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月三、曲霉廣泛分布于自然界，達900余種，分為18個群，對工業(yè)和醫(yī)藥的用途很大。釀酒造醬。生產(chǎn)有機酸及酶制劑，抗生素等。人體對曲霉有極強免疫力，只有在免疫功能降低時才能致病，如使用免疫抑制劑、腎上腺皮質(zhì)激素，放療化療，各種惡性腫瘤、糖尿病、AIDS等可誘發(fā)曲霉病。曲霉可侵犯許多部位，呼吸系統(tǒng)曲霉病主要有三種：過敏型、曲霉球和肺炎。全身性曲霉病多發(fā)生敗血癥，危及生命。曲霉產(chǎn)生黃曲霉毒素、雜色曲霉毒素與原發(fā)性肝癌有關(guān)。第49頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物特性由分生孢子頭和足細胞兩部分組成特征性結(jié)構(gòu)。分子孢子頭包括分生孢梗莖、頂囊、瓶梗、?；头稚咦渔?。足細胞為特化的厚壁膨大的菌絲細胞。向上形成孢梗莖。第50頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物檢驗

(1)直接顯微鏡檢查：取痰液等被檢材料涂于載玻片上，在鏡下可見分枝的菌絲、較粗的分生孢子頭，頂端膨大形成頂囊，頂囊上有小梗，小梗上有許多小分生孢子。第51頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)抗原檢測：用競爭性ELISA測定病人血清中曲霉抗原。(3)分離培養(yǎng)與鑒定標本接種沙氏瓊脂，室溫培養(yǎng)后菌落形成快，呈毛狀，一般為黃綠色。將菌落涂片鏡檢可見特征性的分子孢子頭和足細胞。第52頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(4)藥物敏感試驗對制霉菌素和兩性霉素B

敏感。(5)抗體檢測檢測病人血清中抗曲霉抗體。常用免疫擴散檢測，其敏感性和特異性較高，也可用對流免疫電泳、ELISA、生物素—親和素聯(lián)免疫吸附測定(BALISA)、放射免疫測定(R1A)及間接免疫熒光法等。菌絲和培養(yǎng)濾液可作ELISA抗原。第53頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(6)皮膚試驗對過敏性支氣管肺炎病人可用曲霉抗原提取液作皮試。

Ⅰ型超敏反應在15-20min發(fā)生陽性反應。

Ⅱ型超敏反應在4-10h出現(xiàn)陽性反應。

Ⅳ型超敏反應可出現(xiàn)于超敏反應型肺炎病人。第54頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月四、毛霉引起毛霉病的病原菌，以根霉屬最為常見，尤其是少根根霉和米根霉兩種最多見。第55頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月毛霉病是一種發(fā)病急，進展快、病死率極高的系統(tǒng)性條件致病性真菌感染。尤其是慢性消耗性疾病如糖尿病、白血病、長期應用化療、皮質(zhì)類固醇激素的患者。臨床上常見的是眼眶及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的毛霉病。起初多發(fā)于鼻粘膜或鼻竇，繼則眼眶軟組織及腦，也可全身性播散，預后較為嚴重。常在病死后尸檢才明確。第56頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物特性有無隔菌絲，在一些陳舊培養(yǎng)基中偶見有隔菌絲。有些霉菌有匍匐菌絲，在培養(yǎng)基表面橫向生長，其產(chǎn)生的假根伸入培養(yǎng)基內(nèi)，孢囊梗與假根對生，在孢囊梗頂端形成孢子囊，內(nèi)生孢子囊孢子。第57頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物檢驗

（1）直接鏡檢取皮屑、膿液、血液、痰、鼻竇抽取物等標本，用20%KOH制成濕片，直接鏡檢可見折光性強的粗大菌絲，直徑6～15μm，無隔或少數(shù)分隔、壁薄、偶見孢子囊及孢子囊梗。第58頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(２)分離培養(yǎng)將臨床標本接種于不含放線菌酮的麥芽糖培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基及沙氏瓊脂培養(yǎng)基，25℃或37℃培養(yǎng)，毛霉生長較快，初起菌落表面呈棉花樣、白色，漸變?yōu)榛液稚?，頂端有黑色小點。鏡檢菌絲無隔或極少分隔，孢囊梗直接由菌絲長出，常單生，分枝或極少不分枝。因毛霉常污染環(huán)境，故直接鏡檢較培養(yǎng)更有意義。第59頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月鑒定依據(jù)是菌落形態(tài)、色澤。分枝狀態(tài)：有無結(jié)合孢子及結(jié)合孢子的特點。孢子囊的形態(tài)，有無囊軸、囊領和囊托。生長溫度，有無厚壁孢子等。第60頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1)少根根霉：生長快，在37℃～40℃能生長。菌落初為白色，后變?yōu)榛液稚?。鏡檢見匍匐菌絲和假根。孢囊梗單生或分枝，淡褐色或黃褐色，常從菌絲膨脹處生出。囊軸卵圓形或球形，無色或淡黃色。孢囊孢子圓形，表面有棘刺。偶有厚壁孢子。第61頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2)米根霉：菌落同少根根霉。鏡檢見孢囊梗單生或分枝，孢子囊孢子淡褐色有條紋，形態(tài)不規(guī)則。假根發(fā)達。厚壁孢子極多。在室溫及40℃均可生長。

第62頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3)總狀毛霉：生長迅速，菌落呈毛狀，高可達1cm，灰色疏松。鏡檢見孢囊梗最初不分枝，以后不規(guī)則分枝。孢子囊球形，淡黃色。成熟時孢囊壁消解，囊軸球形。孢囊孢子卵形。第63頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月4)傘梨頭霉：異名為傘狀毛霉。菌落呈毛狀、生長快，數(shù)日可長滿斜面和瓊脂平板。菌落粗糙，初為白色，后變?yōu)榈{灰色，背面深灰至黃綠色。孢囊梗長并呈傘形分枝，孢子囊灰色，囊軸圓形光滑，有囊托。孢囊孢子近球形，表面光滑。無厚壁孢子。第64頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3．藥物敏感試驗對兩性霉素B敏感，靜脈滴注療效較好。4．抗體檢測用瓊脂雙擴散、ELISA法檢測病人體內(nèi)特異性抗體。即用勻漿抗原檢測毛霉抗體的敏感性和特異性都較高。也可用免疫熒光技術(shù)在組織切片中檢測和鑒定毛霉。第65頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月五、組織胞漿菌

有莢膜組織胞漿菌和杜波組織胞漿菌兩個種。主要侵犯網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，莢膜組織胞漿菌引起：①原發(fā)急性型組織胞漿菌病，僅皮膚試驗陽性。②慢性空洞型，引起肺損害，常被誤診為肺結(jié)核。③嚴重播散型，全身器官均可損傷，預后嚴重。淋巴瘤、白血病、霍奇金病、AIDS或用腎上腺皮質(zhì)激素治療者常可感染本菌。第66頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物特性

組織胞漿菌是一種雙相型真菌，在25℃培養(yǎng)時呈典型菌絲體，在37℃培養(yǎng)時為酵母型，位于細胞內(nèi)或外。卵圓形，直徑為2～4μm、芽生孢子，一端較尖，一端較圓，自細，有莢膜。杜波組織胞漿菌圓形，直徑為12～15μm、薄壁的芽生孢子。第67頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物檢驗

(1)標本直接顯微鏡檢查痰液標本涂片后先用甲醇固定10min，再用姬姆薩染色鏡檢，如巨噬細胞發(fā)現(xiàn)卵圓形，直徑2～4μm的較小，一端有出芽，可疑為莢膜組織胞漿菌。皮損、膿液標本，用20％KOH涂片后鏡檢，可見12-15μm直徑的厚壁酵母細胞，細胞內(nèi)可見脂肪小滴，可疑為杜波組織胞漿菌。第68頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)抗原檢測取患者痰液作免疫熒光法染色后鏡檢，可快速檢測其抗原，但特異性差，僅作組織胞漿菌初篩試驗。第69頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(3)分離培養(yǎng)將臨床標本接種于含抗生素的沙氏培養(yǎng)基上，25℃培養(yǎng)，生長緩慢，4～6周才開始生長，逐漸形成白色至棕色絨毛狀菌落。當轉(zhuǎn)種于血瓊脂培養(yǎng)基上，37℃很快形成酵母型菌落。第70頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(4)鑒定取可疑菌落涂片染色鏡檢，并作脲酶試驗和明膠液化試驗。莢膜組織胞漿菌分解尿素；而杜波組織胞漿菌不分解尿素，在24～96h內(nèi)可液化明膠，而莢膜組織胞漿菌則否。第71頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(5)