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類風(fēng)濕因子(RF)測(cè)試:原理,步驟,解釋和臨床意義類風(fēng)濕因子(RF)是與個(gè)體自身免疫球蛋白反應(yīng)的自身抗體。這些抗體通常針對(duì)人IgG的Fc片段。RA)RFRA)RF已與三種主要的免疫球蛋白類別相關(guān):IgM,IgG和IgA。在這些中,最常見(jiàn)的是IgM和IgG。關(guān)節(jié)間隙中免疫復(fù)合物的形成導(dǎo)致補(bǔ)體的活化和破壞性炎癥,從而引起類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎如其名稱所示,RF特別適用于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷和監(jiān)測(cè)。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種慢性炎癥性疾病,主要影響關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)周圍組織。在診斷出類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的病例中,有60-80%的人檢出了類風(fēng)濕因子。但是,有時(shí)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者的血清中和某些非風(fēng)濕性疾病中也可以檢測(cè)到。在正常的老年人□中也可以觀察到升高的值。測(cè)試原理 有許多方法可用于測(cè)試RFO最常用的血清學(xué)方法是基于乳膠凝集試驗(yàn)。由于RF是針對(duì)IgG分子Fc部分的IgM類抗體,因此可以通過(guò)其凝集涂有IgG分子的乳膠顆粒的能力來(lái)檢測(cè)。使用的試劑是聚苯乙烯膠乳顆粒在甘氨酸鹽水溶液中的懸浮液,pH值為8.6±.1,并涂有人丙種球蛋白。定性方法 程序1.將所有試劑和標(biāo)本置于室溫。2?將一滴陽(yáng)性對(duì)照和40ul患者血清分別放入幻燈片上的圓圈中。輕輕地在每個(gè)要測(cè)試和控制的樣品圓上添加一滴RF乳膠試劑。使用單獨(dú)的涂藥棒/攪拌棒將反應(yīng)混合物散布在特定區(qū)域的整個(gè)區(qū)域在旋轉(zhuǎn)搖床上將載玻片前后傾斜2分鐘,使混合物緩慢旋轉(zhuǎn)。2分鐘后在明亮的人造光下觀察凝集。解釋膠乳顆粒的凝集被認(rèn)為是陽(yáng)性反應(yīng),表明類風(fēng)濕因子的存在處于可檢測(cè)的顯著水平。陽(yáng)性結(jié)果:乳膠顆粒懸浮液會(huì)在兩分鐘內(nèi)發(fā)生凝集,表明RF水平超過(guò)18IU/ml陰性結(jié)果:乳膠顆粒懸浮液在兩分鐘內(nèi)沒(méi)有凝集。
半定量法 使用等滲鹽水以定.性方法.1.:::2、、i■:::4、、1::8、、1:::16、“”"1::”32、""”1:::64、、1:":128"等方式制備陽(yáng)性樣品的系列稀釋液,如下所示:對(duì)于每個(gè)要測(cè)試的樣品,將100L的0.9%鹽水加入1至5的試管中。將100L樣品加到試管1上?;旌匣旌衔?。避免形成氣泡。從管1到2轉(zhuǎn)移100L混合樣品。在試管3至4中重復(fù)此系列稀釋步驟,然后進(jìn)行5次?;旌虾螅瑥脑嚬?中棄置100L。試管1至5現(xiàn)在代表如下稀釋系列:管號(hào)1個(gè)2345稀釋1:21:41:81:161:32使用每種稀釋液作為測(cè)試樣品進(jìn)行定性測(cè)試程序。滴度報(bào)告為最高稀釋度的倒數(shù),顯示陽(yáng)性測(cè)試結(jié)果。在可見(jiàn)的凝集下,讀取最后一個(gè)稀釋步驟中的滴定度,類風(fēng)濕因子的大致濃度可以如下確定:RF單位為IU/mL乳膠Y球蛋白試劑的靈敏度,單位為IU/mL)滴定度。在所有診斷為RA…的患者中未檢測(cè)到祁”; 患有傳染性單核細(xì)胞增多癥,結(jié)節(jié)病,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,結(jié)核病或麻風(fēng)病以及其他急性或慢性免疫反應(yīng)的患者中,RF的含量可能增加。積極結(jié)果的重要
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