凝聚胺介質(zhì)交叉配血試驗(yàn)操作規(guī)程

凝聚胺介質(zhì)交叉配血試驗(yàn)操作規(guī)程(SOP文件)1目的作為介質(zhì)輔助用于完全抗體及不完全抗體的臨床篩選檢測(cè)及輔助用于臨床交叉配血實(shí)驗(yàn)。2檢驗(yàn)原理紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷，以避免其產(chǎn)生自發(fā)性聚集，當(dāng)紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)時(shí)，陽(yáng)離子會(huì)被紅細(xì)胞的負(fù)電荷所吸引，此時(shí)紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞，而形成ZetaDO,Zeta電位決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。凝聚胺技術(shù)首先利用低離子溶液( LIM),降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞周圍的陽(yáng)離子云， 以促進(jìn)紅細(xì)胞和血清 (血漿口中的抗體結(jié)合。其后，加入凝聚胺( Polybrene)溶液，它是一種高價(jià)陽(yáng)口子多聚物、肝素中和劑，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞 Zeta電位降低，縮口紅細(xì)胞之間的距離， 使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝聚。 最后，加入懸浮液(Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)陽(yáng)離子的作用，使正常的紅細(xì)胞非特異性凝聚散開(kāi)，試驗(yàn)結(jié)果為陰性；但如果紅細(xì)胞被相應(yīng)的抗體致敏，則會(huì)被凝聚胺凝結(jié)，凝集就不會(huì)散開(kāi)，試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性。3儲(chǔ)存條件及有效期

未開(kāi)封試劑應(yīng)貯存于2口?未開(kāi)封試劑應(yīng)貯存于2口?25口、相對(duì)濕度不大于80%,無(wú)腐蝕性氣體的室內(nèi)；已開(kāi)封試劑應(yīng)貯存于相對(duì)濕度不大于80%,無(wú)腐蝕性氣體和通風(fēng)良好的室溫環(huán)境，試劑用后應(yīng)及時(shí)擰緊瓶蓋保存；未開(kāi)封試劑的有效期為二年，在有效期內(nèi)的已開(kāi)口試劑應(yīng)在開(kāi)封后的 6個(gè)月內(nèi)使用完。4樣本要求新鮮血清，含EDTA抗凝血漿、3%?5%的紅細(xì)胞懸液。不能使用溶血標(biāo)本及含枸櫞酸鈉、 肝素抗凝血漿標(biāo)本。5檢驗(yàn)方法輔助交叉配血試驗(yàn)取試管二支，標(biāo)主次側(cè)，主側(cè)口加病人血清（血漿） 20,0000 3%?5%紅細(xì)胞懸液口洗滌或不洗滌均可口 1口，次側(cè)管反之。各加LIM0.65ml,混合均勻后，再各加 Polybrene溶液20,并混合均勻。用離心機(jī)3400轉(zhuǎn)/min（相當(dāng)于1000g離心力）離心10秒，然后把上清口倒掉，不要口干，口管口殘留約 0.1ml液體。輕輕搖動(dòng)試管，目測(cè)紅細(xì)胞有無(wú)凝集，如無(wú)凝集，則必須要重做。最后加入Resuspending20,輕輕搖動(dòng)試管混合并同時(shí)觀察結(jié)果。如果在 60秒內(nèi)凝集散開(kāi)，代表是由 Polybrene引起的非特異性聚集，配血結(jié)果相合；如凝集不散開(kāi)，則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，配血結(jié)果不相合。如反應(yīng)可疑，可進(jìn)一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。6注意事項(xiàng)0000EDTA之血漿代替血清使用。若病人血清（血漿）含肝素，如洗腎患者，須多加 4~6滴Polybrene溶液以中和肝素。本試劑盒的操作方法也適用于抗體鑒定?？谠噭┦褂们盀榈蜏刭A存，口回復(fù)室溫再行操作。加做輔助性抗人球蛋白試驗(yàn)，目的是增加檢測(cè)抗 -K的敏感性。在冬天室溫極低的情況下， 操作交叉配血試驗(yàn)， 某些病人血清中可能含有冷凝集素等因素，而導(dǎo)致假陽(yáng)性的結(jié)果出現(xiàn)。若有此懷疑，建議在最后滴入 Resuspending時(shí)，將試管立即置入 37口水口中，輕輕搖動(dòng)試管混合，并在 60秒內(nèi)觀察結(jié)果。紅細(xì)胞抗原檢測(cè)步驟同抗體篩檢試驗(yàn)， 其檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)血清用已知標(biāo)準(zhǔn)血清。6.8用戶可使用IgG抗D抗體（效價(jià)口64）與RhD陽(yáng)性紅細(xì)胞反應(yīng)做陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)，測(cè)試本試劑的有效性。

ABO血型定型操作規(guī)程（ABO血型定型操作規(guī)程（SOPODD1目的用于鑒定人ABO血型2檢驗(yàn)原理本品系用產(chǎn)生抗 A或抗B血型抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液（或在上清液中加入少量同型口水口配制而成，采用凝集試驗(yàn)原理，專供鑒定人3試驗(yàn)原理，專供鑒定人3樣本要求本試劑適用于全血或ABO血型用。10口、5口紅細(xì)胞懸液。4檢驗(yàn)方法平板法（玻片法D :本品與受檢者全血或 10口紅細(xì)胞生理氯化鈉懸液按 1:1攪勻，不必再稀釋，按照有無(wú)凝集判定結(jié)果5結(jié)果判斷血型抗A試劑抗B試劑A+B+OAB++口：“+”有凝集反應(yīng) ,“一”無(wú)凝集反應(yīng)6檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

將已知的抗A將已知的抗A、抗B血型定型試劑與受檢者的紅細(xì)胞混合時(shí)，與抗A血型定型試劑發(fā)生凝集者即為 A型血型，與抗血型定型試劑發(fā)生凝集者即為 B型血型，與抗 A、抗B血型定型試劑均發(fā)生凝集者即為 AB型血型，與抗A、抗B血型定型試劑均不發(fā)生凝集者即為 O型血型。7注意事項(xiàng)對(duì)含有較多自身冷凝集的受檢者，在鑒定血型時(shí)往往被誤認(rèn)為AB血型，遇到此種情況，需用 37°生理氯化鈉溶液洗滌受檢者細(xì)胞 2-3次，以去除吸附在紅細(xì)胞上的凝集素，然后再鑒定血型。在做配型試驗(yàn)時(shí)，如發(fā)現(xiàn)有不配合現(xiàn)象，則取受檢者血清，用已知 A血型或B血型細(xì)胞進(jìn)行反定型試驗(yàn)，以核實(shí)原鑒定的血型是否正確。用立即試管法不能測(cè)出亞型（如 Ax）,需延長(zhǎng)作用時(shí)間。本品如出現(xiàn)渾濁或變色則不能使用，口開(kāi)瓶使用時(shí)間較長(zhǎng)后，最好用已知 ABO血型紅細(xì)胞檢查結(jié)果是否與已知血型相符，以防制品污染，變質(zhì)失效，而造成鑒定錯(cuò)誤。在有效期內(nèi)使用。

ABO血型反定型操作規(guī)程ABO血型反定型操作規(guī)程(SOPODD1目的用于ABO血型的反定型檢測(cè)，該產(chǎn)品不用于血源篩查。2檢驗(yàn)原理本品系采用三人份同型混合的 A1型、B型和O型合格人口細(xì)胞經(jīng)洗滌后懸浮于紅細(xì)胞保存液中配制而成。采用凝集試驗(yàn)原理，用已知的 A1,B,O型紅細(xì)胞測(cè)定被檢者血清 /血漿中有無(wú)相應(yīng)的抗 A或抗B抗體（反定型試驗(yàn)D ，結(jié)合正定型結(jié)果判定ABO血型。3檢驗(yàn)方法試管法取被檢者血清 /血漿各 50ul分別加入3支標(biāo)記好的試管中；分別各加50ulA1、B、O試劑紅細(xì)胞；搖動(dòng)試管，混口。于 900g離心 15s,或室溫靜止 1h;首先檢查是否溶血， 口溶血可能是陽(yáng)性結(jié)果， 或是細(xì)菌污口。）輕輕搖動(dòng)懸浮紅細(xì)胞。觀察凝集情況，并立即記錄結(jié)果。必要時(shí)可借助顯微鏡觀測(cè)。4檢驗(yàn)結(jié)果的解釋ABO血型正反定型反應(yīng)格局表

抗A試劑抗B試劑A1細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞++A++B++O++AB正定型反定型血型口：“+”有凝集反應(yīng)， “一”無(wú)凝集反應(yīng)5注意事項(xiàng)如果在反定型試驗(yàn)中， 受檢者的血清/血漿與O血型紅細(xì)胞試劑產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)，則需要添加自身對(duì)照試驗(yàn)。如果自身對(duì)照為陽(yáng)性，表明是冷凝集素導(dǎo)致。如果自身對(duì)照為陰性，則表明被檢者血清或血漿中可能存在 ABO系統(tǒng)以外的其他血型系統(tǒng)的抗體干擾定型。請(qǐng)按照相關(guān)的試驗(yàn)方法解決上述定型問(wèn)題。本品如出現(xiàn)紅細(xì)胞顏色變成暗紫色或紅細(xì)胞自發(fā)凝集，出現(xiàn)菌落或溶血，則不能使用?？陂_(kāi)瓶使用時(shí)間較長(zhǎng)后，最好用注冊(cè)上市的抗 A、抗B血型定型試劑檢查結(jié)果是否與已口血型相符，以防制品污染、變質(zhì)失效、而造成檢定錯(cuò)誤。為了便于鑒別， A1血型紅細(xì)胞試劑標(biāo)簽為藍(lán)色， B血型紅細(xì)胞試劑標(biāo)簽為黃色，O血型紅細(xì)胞試劑標(biāo)簽為紅色。乙型肝炎病毒表面抗原操作規(guī)程（SOP文件）.目的用于血液的篩查和臨床乙型肝炎病毒感染的輔助診斷。.檢驗(yàn)原理37口恒溫水浴箱；振蕩器;洗板機(jī)或洗瓶；37口恒溫水浴箱；振蕩器;洗板機(jī)或洗瓶；-HBs）包口的微孔板和酶應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法原HBsAg）本品系用乙型肝炎表面抗體（抗標(biāo)記抗-HBs及其他試劑制成，理檢測(cè)人血清和血漿中的乙型肝炎病毒表面抗原（.適用儀器微量移液器；計(jì)時(shí)器；酶標(biāo)儀，檢測(cè)波長(zhǎng).樣本要求樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備，液，全血樣本最好先放置離心，3000轉(zhuǎn)/ODDO450nm，參考波長(zhǎng) 630nm。按照正常的采血技術(shù)收集血37口處理 2小時(shí)，再將血樣本充分6分鐘以上，口血清（血漿）不含有或極少含有血細(xì)胞。如果為抗凝血樣本，應(yīng)將血樣本充分離心后，最好再放置室溫 2小時(shí)以上。樣本中含有疊氮鈉會(huì)影響試驗(yàn)的結(jié)果，高度溶血的樣本、沒(méi)完全收縮的血清樣本或有微生物污染的樣本可能會(huì)引起錯(cuò)誤的結(jié)果。新鮮的樣本在 2~8口無(wú)菌條件下可保存一周，新鮮樣本可長(zhǎng)期貯存在 -20℃或以下，避免反復(fù)凍融。

.檢驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：從冷藏環(huán)境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時(shí)將洗滌液進(jìn)行 1:40倍稀釋。TOC\o"1-5"\h\z設(shè)陽(yáng)性對(duì)照2孔，陰性對(duì)照 3孔，空白對(duì)照 1孔。加樣：在陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照孔內(nèi)分別加入陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照50ul,其余每孔加口測(cè)血清或血漿 50ul。蓋上封孔膠片，口 37口水口孵育 60ODD洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用稀釋后的洗滌液連續(xù)洗滌 5次后，口干孔內(nèi)液體。加酶結(jié)合物:空白孔除外，每孔各加酶結(jié)合物 50ulD蓋上封口膠片，置 37口水口孵育 30ODD洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用稀釋后的洗滌液連續(xù)洗滌 5次后，口干孔內(nèi)液體。加底物液：每孔先加底物液 A50ul,再加底物液B50ul,口口，蓋上封口膠片，置 37口條件下避光顯色 30O鐘后，加終止液50ul,混口，終止反應(yīng)。.參考值（參考范圍）終止后盡快測(cè)定， 波長(zhǎng) 450nm，先用空白孔校零， 測(cè)ODDD如果選用雙波長(zhǎng)測(cè)定，不必設(shè)置空白對(duì)照空。按下列公式計(jì)算：COV二陰性對(duì)照平均 OD值口2.1倍陰性對(duì)照平均OD值低于或等于0.05,按0.05計(jì)算;高于0.05時(shí)，按照實(shí)際OD值計(jì)算。.檢驗(yàn)結(jié)果的解釋樣品 ODDS/COV口1時(shí)，待測(cè)樣本 HBsAg為陽(yáng)性；樣品 ODDS/COV口1時(shí)，待測(cè)樣本 HBsAg為陰性。.注意事項(xiàng)本品僅用于體外診斷，僅限檢測(cè)人體血清或血漿;檢測(cè)結(jié)果作為診斷指標(biāo)之一。30分鐘30分鐘后，方可進(jìn)行測(cè)試。剩余試劑應(yīng)及時(shí)封存于冰箱內(nèi)保存，口用。結(jié)果判定需在反應(yīng)終止后 10分鐘內(nèi)完成。封口膠片不得重復(fù)使用。在有效期內(nèi)，微孔板密封袋如有漏氣現(xiàn)象，不影響試驗(yàn)結(jié)果。試劑盒在有效期內(nèi)使用，不同批號(hào)不得混用。陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)呈陽(yáng)性，否則全部試驗(yàn)無(wú)效。確保樣本加樣量的準(zhǔn)確，如果加樣不準(zhǔn)確可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的試驗(yàn)結(jié)果。使用微量移液器加樣時(shí)，每次應(yīng)更換口頭吸取樣本。在操作過(guò)程中應(yīng)盡量避免反應(yīng)微孔中產(chǎn)生氣泡。準(zhǔn)確控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間。洗板： 1用洗板機(jī)洗板時(shí)，洗板機(jī)的加液量應(yīng)注意控制，口避免洗液過(guò)量而溢出，又能充滿反應(yīng)微孔，并經(jīng)常檢

口加口頭是否堵塞；2洗板機(jī)最好每次使用前、口加口頭是否堵塞；2洗板機(jī)最好每次使用前、后沖洗干凈，防止管路堵塞或腐蝕； 3洗板時(shí)所用的吸水紙請(qǐng)勿反復(fù)使用。8.12本試劑盒及臨床樣本均應(yīng)視為傳染性物質(zhì)或潛在傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范執(zhí)行和處理。9.0000《中國(guó)藥典》20100000；《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫指導(dǎo)原則》 （國(guó)食藥監(jiān)械【2007】240號(hào)）梅毒螺旋抗體操作規(guī)程（SOP梅毒螺旋抗體操作規(guī)程（SOP文件）.目的本試劑盒定性檢測(cè)人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。口用于血液的篩查及臨床梅毒螺旋體感染的輔助診斷。.檢驗(yàn)原理本試劑盒采用雙抗原夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理。在微孔條上口包被梅毒螺旋抗體的基因重組抗原，配以酶標(biāo)記抗原及TMB顯色劑等其他試劑，檢測(cè)人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。.適用儀器加樣器、溫箱、洗板機(jī)、口波長(zhǎng) 450nm的酶標(biāo)儀。.樣本要求本試劑使用樣品為人血清或血漿，含有 EDTA、檸檬酸鈉或肝素等抗凝劑的樣品可用于本實(shí)驗(yàn)。不能檢測(cè)含懸浮纖維蛋白或聚集物、重度溶血的樣品。樣品中應(yīng)無(wú)微生物，可在 2~8℃儲(chǔ)存 1周，長(zhǎng)期儲(chǔ)存應(yīng)低溫凍存，避免反復(fù)凍融。使用前請(qǐng)將樣品室溫平衡 30分鐘以上，冷凍樣品實(shí)驗(yàn)前需混勻。.檢驗(yàn)方法5.1口液：將濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水205.1口液：將濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋。編號(hào): 將樣品對(duì)應(yīng)微孔板按序編號(hào)， 口口應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照3孔，陽(yáng)性對(duì)照 2孔和空白對(duì)照 1孔。(用雙波長(zhǎng)檢測(cè)，可不設(shè)空白對(duì)照孔口口加樣：分別在相應(yīng)口中加入待測(cè)樣品或陰性、 陽(yáng)性對(duì)照100ul。溫育:用封板膜封板后，口口板：小心揭掉封板膜，用洗板機(jī)洗滌盡量扣干。溫育:用封板膜封板后，口口板：小心揭掉封板膜，用洗板機(jī)洗滌盡量扣干。加酶：酶孔加入酶標(biāo)試劑溫育:用封板膜封板后，口洗板:操作同步驟 5.5顯色：口孔加入顯色劑37±1℃避光顯色30±1分鐘。.參考值臨界值(CUTOFF)計(jì)算臨界值.檢驗(yàn)結(jié)果的解釋陰性對(duì)照孔A值口實(shí)驗(yàn)無(wú)效。若有1孔陰性對(duì)照以上陰性對(duì)照 A值大于陰性判定：樣品37±1℃溫育60±2分鐘。50,0000100ul,空白孔除外。37±1℃溫育30±1分鐘。A.B液各50ul,輕輕震蕩混勻，=□□□□□ A均值NC+0.18.0.10,陽(yáng)性對(duì)照孔A值口0.80.否則A值大于0.1應(yīng)舍棄，口兩孔或兩孔0.1,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。A值口臨界值(CUTOFF)者為TP陰性。7.4陽(yáng)性判定：樣品A值口臨界值(CUTOFF)者為TP陽(yáng)性(注口：初試陽(yáng)性應(yīng)重新取樣雙孔復(fù)試）8.注意事項(xiàng)8.1本品僅用于體外診斷，操作應(yīng)按說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格進(jìn)行。8.1本品僅用于體外診斷，操作應(yīng)按說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格進(jìn)行?？诎迥げ荒苤貜?fù)使用，不同批號(hào)酶標(biāo)板。酶口試劑和陰性、陽(yáng)性對(duì)照不可混用，不能與其他廠家試劑混用。（如84（如84消毒劑）（平衡30分鐘以上），實(shí)驗(yàn)2~8口。未用完的2~8口保存。過(guò)期試劑的環(huán)境下操作。使用前請(qǐng)將試劑平衡至室溫前將試劑輕輕振蕩混勻，使用后立即放回微孔板條與干燥劑儀器用自封袋密封請(qǐng)勿使用。加液時(shí)必須用加樣器， 并經(jīng)常校對(duì)加樣器的準(zhǔn)確性。 加入不同樣品或不同試劑組分時(shí)，應(yīng)更換加樣器口頭和加樣槽，以防出現(xiàn)交叉污染。洗滌時(shí)口孔均需加滿洗液，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。使用洗板機(jī)應(yīng)設(shè)定 30~60秒侵泡時(shí)間。在洗板結(jié)束后，必須立即進(jìn)行下一步，不可使酶標(biāo)板干燥。避免長(zhǎng)時(shí)間的中斷實(shí)驗(yàn)步驟，以確保每孔實(shí)驗(yàn)條件的均一。結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。 讀取結(jié)果時(shí)，應(yīng)擦干酶標(biāo)板底部，口孔內(nèi)不能有氣泡。不要觸碰孔底部的外壁，指印或劃痕都可能影響板孔的口值。所用樣品、廢液和廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 終止液為硫酸，使用時(shí)必須注意安全。顯色時(shí)必須加顯色劑 A液后再加顯色劑 B液，以免顯色過(guò)低。由于ELISA反應(yīng)原理的限制， 本試劑檢測(cè)陰性并不排除TP感染的可能。檢測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果必須結(jié)合臨床信息進(jìn)行分析。甲型肝炎病毒IgM甲型肝炎病毒IgM抗體操作規(guī)程（SOP文件）.目的用本試劑盒檢測(cè)人血清或血漿中的抗 -HAVIgM,用于甲型肝炎的早期診斷。.檢驗(yàn)原理本品系用抗人IgM（u鏈）包口的微孔板、000000 （HAV）抗原和酶標(biāo)記抗甲型肝炎病毒（抗 -HAV）及其他試劑制成，應(yīng)用捕獲法原理檢測(cè)人血清或血漿中的抗 -HAVIgM,用于甲000的早期診斷。.適用儀器微量移液器； 37口恒溫水浴箱；振蕩器;洗板機(jī)或洗瓶；計(jì)時(shí)器；酶標(biāo)儀，檢測(cè)波長(zhǎng)4計(jì)時(shí)器；酶標(biāo)儀，檢測(cè)波長(zhǎng)4.樣本要求樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備，液，全血樣本最好先放置離心，3000轉(zhuǎn)/ODDO450nm，參考波長(zhǎng) 630nm。按照正常的采血技術(shù)收集血37口處理 2小時(shí)，再將血樣本充分6分鐘以上，口血清（血漿）不含有或極少含有血細(xì)胞。如果為抗凝血樣本，應(yīng)將血樣本充分離心后，最好再放置室溫 2小時(shí)以上。4.2樣本中含有疊氮鈉會(huì)影響試驗(yàn)的結(jié)果，高度溶血的樣本、沒(méi)完全收縮的血清樣本或有微生物污染的樣本可能會(huì)引起錯(cuò)誤的結(jié)果。

4.3新鮮的樣本在4.3新鮮的樣本在2~8口無(wú)菌條件下可保存一周，新鮮樣本可長(zhǎng)期貯存在 -20℃或以下，避免反復(fù)凍融。.檢驗(yàn)方法二步法實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：從冷藏環(huán)境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時(shí)將洗滌液進(jìn)行 1:40倍稀釋。TOC\o"1-5"\h\z設(shè)陽(yáng)性對(duì)照2孔，陰性對(duì)照 3孔，空白對(duì)照 1孔。加樣：在陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照孔內(nèi)分別加入陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照50ul,其余每孔加口測(cè)血清或血漿 50ul（或?qū)⒋郎y(cè)血清或血漿用生理鹽水 1:1000稀釋后，加入到反應(yīng)孔內(nèi)） ,蓋上封口膠片，置 37口水口孵育 30ODD洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用稀釋后的洗滌液連續(xù)洗滌 5次后，口干孔內(nèi)液體。5.5加酶結(jié)合物：取出口結(jié)合物，充分混口，口孔加5.5加酶結(jié)合物：取出口結(jié)合物，充分混口，口孔加50ul（空白孔除外） ，蓋上封口膠片，置5.6洗板：同（空白孔除外） ，蓋上封口膠片，置5.6洗板：同5.45.7OOOO：每口先加底物液37口水口孵育 30ODDA50ul,再加底物液B50ul,口口，蓋上封口膠片，置37口口，蓋上封口膠片，置37口條件下避光顯色 15O鐘后，加終止液50ul,混口，終止反應(yīng)。.參考值（參考范圍）終止后盡快測(cè)定，波長(zhǎng)450nm，空白孔調(diào)口，測(cè)OD值。如果選用雙波長(zhǎng)測(cè)定，終止后盡快測(cè)定，波長(zhǎng)450nm，空白孔調(diào)口，測(cè)OD值。如果選用雙波長(zhǎng)測(cè)定，不必設(shè)置空白對(duì)照空。按下列公式計(jì)算：COV二陰性對(duì)照平均OD值口2.1倍樣品 COV二陰性對(duì)照平均OD值口2.1倍樣品 ODDS/COV口1時(shí)為陽(yáng)性樣品 ODDS/COV口1時(shí)為陰性注：陰性對(duì)照平均 ODD低于或等于高于0.05時(shí)，按照實(shí)際ODD計(jì)算。0.05,按0.05DO；7.檢驗(yàn)結(jié)果的解釋陰性結(jié)果表明樣本中不含有抗-HAVIgM或抗-HAVIgM含量低于試劑盒的檢測(cè)范圍。7.2陽(yáng)性結(jié)果表明樣本中含有抗7.2陽(yáng)性結(jié)果表明樣本中含有抗-HAVIgM或產(chǎn)生非特異反應(yīng)。樣本的檢驗(yàn)結(jié)果與臨床表現(xiàn)不符或存在疑問(wèn)時(shí)應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行確認(rèn)。對(duì)于待檢血清或血漿直接進(jìn)行 50ul加樣，結(jié)果判為陽(yáng)性的標(biāo)本，應(yīng)對(duì)其用生理鹽水 1:1000稀釋后重復(fù)實(shí)驗(yàn)并判定結(jié)果。.注意事項(xiàng)本品僅用于體外診斷， 僅限檢測(cè)人體血清或血漿; 檢測(cè)結(jié)果作為診斷指標(biāo)之一。使用時(shí)，從冷藏環(huán)境取出試劑盒， 置室溫平衡30分鐘后，方可進(jìn)行測(cè)試。剩余試劑應(yīng)及時(shí)封存于冰箱內(nèi)保存，口用。8.3結(jié)果判定需在反應(yīng)終止后108.3結(jié)果判定需在反應(yīng)終止后10分鐘內(nèi)完成。封口膠片不得重復(fù)使用。在有效期內(nèi)，微孔板密封袋如有漏氣現(xiàn)象，不影響試驗(yàn)結(jié)果。試劑盒在有效期內(nèi)使用，不同批號(hào)不得混用。確保樣本加樣量的準(zhǔn)確，如果加樣不準(zhǔn)確可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的試驗(yàn)結(jié)果。使用微量移液器加樣時(shí)，每次應(yīng)更換口頭吸取樣本；如果采用滴瓶滴加時(shí)，口將滴瓶中液體搖勻，并棄去 2滴后垂直均口滴加，要避免組分中的液體觸到或?yàn)R到微孔邊緣上，特別是酶結(jié)合物。在操作過(guò)程中應(yīng)盡量避免反應(yīng)微孔中產(chǎn)生氣泡。準(zhǔn)確控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間。洗板：1用洗板機(jī)洗板時(shí)，洗板機(jī)的加液量應(yīng)注意控制，口避免洗液過(guò)量而溢出，又能充滿反應(yīng)微孔，并經(jīng)常檢口加口頭是否堵塞； 2口板機(jī)最好每次使用前、 后沖洗干凈，防止管路堵塞或腐蝕； 3洗板時(shí)所用的吸水紙請(qǐng)勿反復(fù)使用。本試劑盒及臨床樣本均應(yīng)視為傳染性物質(zhì)或潛在傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范執(zhí)行和處理。.0000《中國(guó)生物制品規(guī)程》2000《中國(guó)生物制品規(guī)程》2000年版丙型肝炎病毒抗體操作規(guī)程（SOP丙型肝炎病毒抗體操作規(guī)程（SOP文件）.目的用于血液的篩查和臨床丙型肝炎病毒感染的輔助診斷.檢驗(yàn)原理本品系用丙型肝炎病毒（ HCV）抗原包被的微孔板和酶標(biāo)記口人IgG及其他試劑制成，應(yīng)用口接酶聯(lián)免疫法原理檢測(cè)人血清或血漿樣品中的 HCV抗體。.適用儀器微量移液器； 37口恒溫水浴箱；振蕩器;洗板機(jī)或洗瓶；計(jì)時(shí)器；酶標(biāo)儀，檢測(cè)波長(zhǎng) 450nm，參考波長(zhǎng) 630nm。.樣本要求樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備，按照正常的采血技術(shù)收集血液，全血樣本最好先放置 37口處理 2小時(shí)，再將血樣本充分離心，3000轉(zhuǎn)/ODDO6分鐘以上，口血清（血漿）不含有或極少含有血細(xì)胞。如果為抗凝血樣本，應(yīng)將血樣本充分離心后，最好再放置室溫 2小時(shí)以上。樣本中含有疊氮鈉會(huì)影響試驗(yàn)的結(jié)果，高度溶血的樣本、沒(méi)完全收縮的血清樣本或有微生物污染的樣本可能會(huì)引起錯(cuò)誤的結(jié)果。新鮮的樣本在 2~8口無(wú)菌條件下可保存一周，新鮮樣本可長(zhǎng)期貯存在 -20℃或以下，避免反復(fù)凍融。.檢驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：從冷藏環(huán)境中取出試劑盒，在室溫下平衡1:40倍稀釋。31:40倍稀釋。3孔，不加樣品稀釋液，100ul,另設(shè)空白對(duì)照1孔（只100ul，再加待，充分混口，蓋上封口膠5100ulD30ODD5A50ul,再加底物液B50ul,設(shè)陽(yáng)性對(duì)照2孔，陰性對(duì)照直接加入陽(yáng)性對(duì)照。 陰性對(duì)照加底物液及終止液） 口口口：在其余每孔加先加樣品稀釋液口血清或血漿 10ul（空白孔除外）片，口 37口水口孵育 60ODD洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用稀釋后的洗滌液連續(xù)洗滌次后，口干孔內(nèi)液體。加酶結(jié)合物：空白孔除外，每孔各加酶結(jié)合物蓋上封口膠片，置 37口水口孵育洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用稀釋后的洗滌液連續(xù)洗滌次后，口干孔內(nèi)液體。：每口先加底物液口口，蓋上封口膠片，置 37口條件下避光顯色 30O鐘后，加終止液50ul,混口，終止反應(yīng)。.參考值果選用雙波長(zhǎng)測(cè)定，不必設(shè)置空白對(duì)照空。按下列公式計(jì)算：COV二陰性對(duì)照平均OD值口2.1倍陰性對(duì)照平均OD值低于或等于0.1,果選用雙波長(zhǎng)測(cè)定，不必設(shè)置空白對(duì)照空。按下列公式計(jì)算：COV二陰性對(duì)照平均OD值口2.1倍陰性對(duì)照平均OD值低于或等于0.1,按0.1計(jì)算;高于0.1,按照實(shí)際OD按照實(shí)際OD值計(jì)算。7結(jié)果判斷樣品ODDS/COV口1時(shí)，口測(cè)樣本為陽(yáng)性；樣品ODDS/COV口1時(shí)，口測(cè)樣本為陰性。8.注意事項(xiàng)本品僅用于體外診斷， 僅限檢測(cè)人體血清或血漿; 檢測(cè)結(jié)果作為診斷指標(biāo)之一。使用時(shí)，從冷藏環(huán)境取出試劑盒， 置室溫平衡30分鐘后，方可進(jìn)行測(cè)試。剩余試劑應(yīng)及時(shí)封存于冰箱內(nèi)保存，口用。結(jié)果判定需在反應(yīng)終止后 10分鐘內(nèi)完成。封口膠片不得重復(fù)使用。在有效期內(nèi)，微孔板密封袋如有漏氣現(xiàn)象，不影響試驗(yàn)結(jié)果。試劑盒在有效期內(nèi)使用，不同批號(hào)不得混用。確保樣本加樣量的準(zhǔn)確，如果加樣不準(zhǔn)確可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的試驗(yàn)結(jié)果。使用微量移液器加樣時(shí)，每次應(yīng)更換口頭吸取樣本。在操作過(guò)程中應(yīng)盡量避免反應(yīng)微孔中產(chǎn)生氣泡。準(zhǔn)確控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間。洗板： 1用洗板機(jī)洗板時(shí)，洗板機(jī)的加液量應(yīng)注意控制，口避免洗液過(guò)量而溢出，又能充滿反應(yīng)微孔，并經(jīng)常檢

口加口頭是否堵塞；2洗板機(jī)最好每次使用前、口加口頭是否堵塞；2洗板機(jī)最好每次使用前、后沖洗干凈，防止管路堵塞或腐蝕； 3洗板時(shí)所用的吸水紙請(qǐng)勿反復(fù)使用。本試劑盒及臨床樣本均應(yīng)視為傳染性物質(zhì)或潛在傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范執(zhí)行和處理。9.0000《中國(guó)藥典》20100000《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫指導(dǎo)原則》 （國(guó)食藥監(jiān)械【2007口240號(hào)）HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程(SOP文件).檢驗(yàn)?zāi)康臋z驗(yàn)人體血清中是否感染HIV病毒.檢驗(yàn)原理本產(chǎn)品系用純化基因工程人類免疫缺陷病毒2”(HIV-1和HIV-2)抗原包口的微孔板和酶聯(lián)記的HIV-1HIV-2抗原及其它試劑組成試劑盒，應(yīng)用雙原夾心法原理檢口人血清或血漿中的人類免疫缺陷病毒抗體，用于獻(xiàn)血員及HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程(SOP文件).檢驗(yàn)?zāi)康臋z驗(yàn)人體血清中是否感染HIV病毒.檢驗(yàn)原理本產(chǎn)品系用純化基因工程人類免疫缺陷病毒2”(HIV-1和HIV-2)抗原包口的微孔板和酶聯(lián)記的HIV-1HIV-2抗原及其它試劑組成試劑盒，應(yīng)用雙原夾心法原理檢口人血清或血漿中的人類免疫缺陷病毒抗體，用于獻(xiàn)血員及高危人群中人類免疫缺陷病毒的篩查。.檢驗(yàn)條件操作人員對(duì)本實(shí)驗(yàn)應(yīng)心中有數(shù)，嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程。洗板機(jī)，酶標(biāo)儀，加樣器必須定期校正。試劑按規(guī)定保存。.標(biāo)本采集門診病人由檢驗(yàn)科人員無(wú)菌抽取靜脈血2ml分離血口備用。住院病人由護(hù)士采血送檢驗(yàn)科。要避免溶血。5.設(shè)備和試劑設(shè)備全自動(dòng)ZDMX型酶標(biāo)洗板機(jī)，MR-96A酶標(biāo)儀。試劑珠海麗珠試劑股份有限公司設(shè)備全自動(dòng)ZDMX型酶標(biāo)洗板機(jī)，MR-96A酶標(biāo)儀。試劑珠海麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn)的抗HIV斷試劑盒。6.00006.1實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備從冷環(huán)境中取出試劑盒，室溫平衡半小時(shí)，同時(shí)將濃縮洗液用蒸餾水作1:20稀釋備用。6.2口號(hào)每口應(yīng)設(shè)空白對(duì)照1孔，陽(yáng)性對(duì)照2孔，陰性對(duì)照2孔,質(zhì)控1孔。6.3加樣口孔加入50ul樣品稀釋液，并分別在相應(yīng)孔中加入待測(cè)樣品或陰、陽(yáng)對(duì)照、質(zhì)控品50u