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文檔簡介

第16 細胞計數(shù):取對數(shù)生長期的單層培養(yǎng)細胞,用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成單個細10%胎牛血清的培養(yǎng)液中。用細胞計數(shù)板人工計數(shù)或者以取細胞懸液0.3mL,加入0.9mL結(jié)晶紫(或臺盼至)染液,混勻后再計0.02%B0.05%的苯胺(根據(jù)增殖能力)接種于培養(yǎng)皿中。一般分每皿50、100、200個細胞的梯度密度分別接種含37℃預(yù)溫375CO22~3固定:棄去培養(yǎng)上清液,用PBS小心浸洗2次。加純甲醇或1:3醋酸/甲醇5mL,固定15分鐘。然后去固定液,加適量Giemsa染色液染10~30分鐘,然后使用帶網(wǎng)格的透明片疊在培養(yǎng)皿上,肉眼計數(shù),或在低倍鏡下計數(shù)大于50個細胞3次獨立重復(fù)的數(shù)據(jù)都分析完后進行統(tǒng)計分析并繪制柱狀圖。平使用帶網(wǎng)格的透明片疊在培養(yǎng)皿上,肉眼計數(shù),或在低倍鏡下計數(shù)大于50個細胞3次獨立重復(fù)的數(shù)據(jù)都分析完后進行統(tǒng)計分析并繪制柱狀圖。平

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