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魚油對兒童記憶功能的影響
魚油是由n-3系列的多飽和脂肪酸組成的混合成分,其中22、6和20碳六烯酸(da)和5-20碳5烯酸(epa)組成。已有大量動物實驗表明DHA可以提高動物學(xué)習(xí)記憶能力。在體外試驗中,DHA對神經(jīng)細(xì)胞的生長發(fā)育有明顯的促進(jìn)作用。但由于物種之間差異,魚油應(yīng)用于保健食品開發(fā),還應(yīng)進(jìn)行人體試食試驗。本文按《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》(2003年版)輔助改善記憶功能人體試食要求,觀察了魚油對兒童記憶功能影響。1材料和方法1.1產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)由某公司提供魚油膠囊1號、2號,二者在包裝、外觀、色澤上基本一致,其中一個內(nèi)含功效成分魚油,另一個為只含輔料成分的安慰劑。產(chǎn)品按照《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》(2003年版)的要求,進(jìn)行安全性評價,證明是安全無毒的;進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)檢驗,符合保健食品衛(wèi)生要求;經(jīng)動物功能實驗,證明對小鼠有輔助改善記憶功能。1.2受試者選擇1.2.1記憶商、嘴唇食品受試者選自某中學(xué)初一健康學(xué)生,身體健康,無智力障礙,知情同意,愿意合作,年齡在11~14歲之間,未接受過類似的測試(記憶商、智商測試),一年內(nèi)未服用過與改善記憶有關(guān)的藥品或保健食品。1.2.2短期服用與受試功能相關(guān)的物品有明顯身體缺陷者,有影響聽力,語言表達(dá)及智力缺陷,有明顯精神、睡眠和生活方式異常及合作不佳者;短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品,影響到對結(jié)果判斷者;不ˉ作者單位∶湖南省疾病預(yù)防控制中心作者單位∶湖南省疾病預(yù)防控制中心ˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉ(湖南長沙410005)符合納入標(biāo)準(zhǔn),未按規(guī)定食用受試樣品,無法判定功效或資料不全影響功效或安全性判定者。1.3第一次測試性別測試采用對照、雙盲、隨機(jī)的設(shè)計方法。通過隨機(jī)整群的方法從初等中學(xué)中抽取同年級的兩個班,生活環(huán)境相近的群體,服樣前進(jìn)行第一次測試,按記憶商高低排隊,按排序奇、偶數(shù)分兩組,再隨機(jī)抽取一組為試驗組,另一組為對照組。1.4受試組和對照組的劑量將符合納入標(biāo)準(zhǔn)并保證配合試驗的志愿受試者,隨機(jī)分為受試組和對照組。受試組與對照組按推薦劑量服用魚油或安慰劑,連續(xù)服用35d。試驗期間不改變原來的飲食習(xí)慣,正常飲食。1.5主要設(shè)備、測試和環(huán)境1.5.1圖形特征對比錄有指向記憶和聯(lián)想學(xué)習(xí)的指導(dǎo)語和刺激詞的磁帶;圖片材料,圖象自由回憶物象圖片兩組各15張,共30張(分甲、乙兩套);無意義圖形再認(rèn)圖片,備第一次呈現(xiàn)用目標(biāo)刺激圖片20張,備第二次再認(rèn)時呈現(xiàn)用目標(biāo)刺激和混入刺激圖片各20張,共40張,合計60張圖片(分甲、乙兩套);人像特點聯(lián)系回憶圖片,備第一次呈現(xiàn)用的黑白勾畫人面像6張,備回憶時呈現(xiàn)的人面像6張,兩者內(nèi)容相同,順序不同,共計12張;每張人像圖片背面標(biāo)有該人像的姓氏、職業(yè)、愛好、特點(分甲、乙兩套)。錄音機(jī)、秒表、記錄紙。1.5.2測試測試和環(huán)境1.5.2.測試時間及時點每一受試者前、后兩次測試由同一主試者施測,減少系統(tǒng)誤差。測試時點:每一受試者前、后兩次測試在同一時點進(jìn)行,避免生物節(jié)律的影響。第二次測試時,主試者不看分組名單,盲法測試。1.5.2.重視被測時的精神狀態(tài)由受過專門訓(xùn)練的人員進(jìn)行測試;測試地點選在一個安靜的房間內(nèi)進(jìn)行。除受試者和主試者外,盡量避免有其它人在場;本量表內(nèi)有三項和視覺有關(guān)的分測驗,室內(nèi)光線能保證看得清楚刺激圖片;盡量排除因聽力或視力不佳而影響記憶成績;測試時密切注意受試者受測時的精神狀態(tài),測驗需在受試者情緒正常、不反對接受測試、注意力比較集中的情況下進(jìn)行;受試者是否疲倦,注意力是否集中,是否配合、對測試是否緊張,是否有信心等均記錄在記錄紙的首頁上;同一受試者的測試一次做完;在用年齡量表分比較分測驗成績時,注意不同分測驗是否在相同的精神狀態(tài)下進(jìn)行的。各項分測驗成績的原始分復(fù)查無誤后填入原始分項內(nèi)。1.5.2.綜合運用能力對照與學(xué)習(xí)穩(wěn)定性將測得分(原始分)換算成量表分,比較兩組之間各項分測驗的量表分,計算總量表分,查得記憶商后比較兩組之間的差異,采用自身對照和組間對照兩種方式進(jìn)行統(tǒng)計分析,消除遷移學(xué)習(xí)的影響。1.6觀察指標(biāo)各項觀察指標(biāo)于試食試驗開始及結(jié)束時各測定一次。1.6.1營養(yǎng)檢查進(jìn)行定期檢查一般情況:試驗前詳細(xì)詢問受試者健康狀況,了解受試者的精神、睡眠、飲食、大小便等情況。進(jìn)行心肺聽診、肝脾觸診,并測定體重、心率等。血常規(guī):紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白含量測定等。尿常規(guī):pH值、白細(xì)胞等。糞便常規(guī):蟲卵檢查等。不良反應(yīng)觀察。1.6.2始分查量表使用臨床記憶量表測試,用測試后的各分測驗原始分查量表分:指向記憶、聯(lián)想學(xué)習(xí)、圖象自由回憶、無意義圖形再認(rèn)、人像特點聯(lián)系回憶。各分測驗量表分相加得總量表分,用總量表分查記憶商。1.7間平行比較的檢驗此試驗數(shù)據(jù)為計量資料,對兩組各分測驗量表分和記憶商可用t檢驗進(jìn)行分析。自身對照可以采用配對t檢驗,組間平行比較采用兩樣本均數(shù)的t檢驗,后者需進(jìn)行方差齊性檢驗,對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊后,用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗;若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求,改用t’檢驗或秩和檢驗;但變異系數(shù)太大(如CV>50%)的資料應(yīng)用秩和檢驗。用SPSS、INSTAT統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計。1.8記憶商的特征在試驗前兩組記憶商均衡的前提下,試食后試食組的記憶商高于對照組,且差異有顯著性,同時試食組試驗后的記憶商高于其試驗前的記憶商,且差異有顯著性,可以判定該受試樣品具有輔助改善記憶功能的作用。2結(jié)果2.1術(shù)后有效試驗人群雙盲法觀察結(jié)束揭曉:服食2號者為魚油,服食1號者為安慰劑。初始試驗人群試驗組52例,對照組52例,經(jīng)過35d試驗后,試驗組有0例受試者因間斷服用受試品或資料不全被篩除,對照組有1例受試者因資料不全被篩除。最后有效試驗人群試驗組52例,對照組51例。對照組年齡12.57±0.64歲,試驗組年齡12.56±0.57歲;對照組男/女為32/19,試驗組男/女為32/20。試驗前后受試者精神狀況、飲食情況、睡眠情況及腦力活動等均無明顯異常。2.2蝦油調(diào)味劑對機(jī)體健康指標(biāo)的影響心肺聽診、肝脾觸診、體重、心率、血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)見表1。食用受試物前后,試食組和對照組體重、心率、血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi),心肺聽診、肝脾觸診未見異常,提示魚油對機(jī)體健康無明顯損害。試食期間未見明顯不良反應(yīng)。2.3聯(lián)想學(xué)習(xí)量表分的統(tǒng)計與分析由表2可見,服樣前試驗組的指向記憶量表分與對照組比較,差異無顯著性(P>0.05);服樣后試驗組的指向記憶量表分與自身服樣前比較,差異有顯著性(P<0.05),與服樣后對照組比較,差異無顯著性(P>0.05)。由表3可見,服樣前試驗組的聯(lián)想學(xué)習(xí)量表分與對照組比較,差異無顯著性(P>0.05);服樣后試驗組的聯(lián)想學(xué)習(xí)量表分與自身服樣前比較,差異有顯著性(P<0.05),與服樣后對照組比較,差異無顯著性(P>0.05)。由表4可見,服樣前試驗組的圖像自由回憶量表分與對照組比較,差異無顯著性(P>0.05);服樣后試驗組的圖像自由回憶量表分與服樣后對照組及自身服樣前比較,差異均有顯著性(P<0.05)。由表5可見,服樣前試驗組的無意義圖形再認(rèn)量表分與對照組比較,差異無顯著性(P>0.05);服樣后試驗組的無意義圖形再認(rèn)量表分與自身服樣前比較,差異有顯著性(P<0.05),與服樣后對照組比較,差異無顯著性(P>0.05)。由表6可見,服樣前試驗組的人像特點聯(lián)系回憶量表分與對照組比較,差異無顯著性(P>0.05);服樣后試驗組的人像特點聯(lián)系回憶量表分與服樣后對照組及自身服樣前比較,差異均有顯著性(P<0.05)。由表7可見,服樣前試驗組的記憶商與對照組比較,差異無顯著性(P>0.05);服樣后試驗組的記憶商顯著高于對照組(P<0.05);試驗組服樣后的記憶商顯著高于服樣前(P<0.05)。3魚油對人體安全作用中國科學(xué)院心理研究所編制的《臨床記憶量表》將抽象的記憶過程量化為具體的數(shù)字,測試方法采用回憶和再認(rèn)相結(jié)合,語文和非語文相結(jié)合,較好地排除了干擾因素的影響,能夠客觀地反映被測試者的記憶水平。本試驗中,受試者連續(xù)服用魚油35d后,試驗組各分測驗量表分和記憶商與服樣前比較,均高于試驗前,且差異有顯著性(P<0.05);試驗組圖像自由回憶量表分、人像特點聯(lián)系回憶量表分和記憶商均高于對照組,差異有顯著性(P<0.05)。試食前后各項安全性指標(biāo)皆在正常范圍內(nèi),且未見明顯不良反應(yīng),表明魚油對人體安全且可提高兒童的學(xué)習(xí)記憶能力。本試驗所用魚油提煉自金槍魚,經(jīng)檢測DHA、EPA含量分別達(dá)16.7%、4.0%。DHA、EPA與人體學(xué)習(xí)記憶能力有著深刻的聯(lián)系,首先,DHA在神經(jīng)原表層高度富集,約占腦細(xì)胞脂肪酸的10%,對腦神經(jīng)傳導(dǎo)和突觸的生長發(fā)育有極重要的作用,對維持細(xì)胞形態(tài)和生理功能的作用不容忽視,EPA能迅速在腦中合成DHA而發(fā)揮作用。其次,DHA為長碳鏈高度不飽和脂肪酸,它在生物膜中含量的增加,對膜的流動性,物質(zhì)透過性,受體的活性都會產(chǎn)生影響,從而提高膜的生理機(jī)能,有利于增強(qiáng)神經(jīng)信息的傳遞,增
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