藥物分離與純化試題庫

藥物分離與純化技術(shù)》試卷用題班級：題號-一-一^三四五六七八九十合計分數(shù)閱卷人得分一、名詞解釋（每小題2分，共50分）相似相容原理：萃取法：透析法：臨界溫度：梯度洗脫：濃差極化現(xiàn)象：鹽溶現(xiàn)象：生物技術(shù)：生物活性物質(zhì)：NDG:藥物分離與純化技術(shù)：鹽析：凝聚作用：梯度洗脫：臨界壓力：夾帶劑：超濾法:電泳法：離子交換層析：膜分離:凝膠極化：物理萃?。喝榛F(xiàn)象：超臨界流體：遷移率：閱卷人得分二、填空題（每空1分，共50分）根據(jù)分離里混合物內(nèi)是否有相界面存在，混合物可分為 和 兩大類。藥物分離與純化過程一般情況下主要分為 與 兩大類。3?按生產(chǎn)過程的性質(zhì)劃分，分離與純化工藝過程可劃分為四個階段，即分離純化前的預(yù)處理、TOC\o"1-5"\h\z4?沉淀常用的方法有： 、 、 、 及反應(yīng)沉淀法等。5?細胞破碎主要有兩類方法，機械法和非機械法，常用的機械法有： 、 高壓勻漿法等，常用的非機械法主要有： 、— 、 凍結(jié)法、化學滲透法等。6?層析技術(shù)中常用的吸附劑有： 、 、 硅酸鋁、硅藻土、聚酰胺等。7?常用的親脂性有機溶劑主要有： 、 、 苯、乙酸乙酯、二氯甲烷等。&常用的親水性有機溶劑主要有： 、 、 等。9?溶劑提取中常用的提取方法有： 、 、 、回流提取法及連續(xù)提取法等。蛋白質(zhì)鹽析常用的中性鹽，主要有硫酸鈉、 、 、 、磷酸鈉等。離子交換劑有 和 （如：羧甲基纖維素；CM-纖維素）。色譜法，又稱層析法。根據(jù)其分離原理， 、 、 與排阻色譜等方法。常用的膜分離過程有： 、 、 、反滲透及滲析等?？朔獠顦O化現(xiàn)象的措施主要有: 、 、錯流、切流、以及改變速度、 、和料液濃度等。以菌體或蛋白質(zhì)濃縮為目的的膜分離一般分三種操作方式，即 、 和連續(xù)濃縮操作。電泳分離主要有 、 、 等。這些電泳法又根據(jù)是否使用凝膠載體分為凝膠電泳和自由流電泳。結(jié)晶操作必須考慮 、 、 、單晶體生長4個問題。閱卷人得分三、判斷（每小題1分，共20分）TOC\o"1-5"\h\z1?在超臨界流體萃取時加入N、Ar等可使萃取物在流體中的溶解度顯著升高。（ ）22..以瓊脂糖作為凝膠介質(zhì)時,DNA分子構(gòu)型對其遷移率的影響為：共價閉環(huán)DNA＜直線DNA＜開環(huán)雙鏈DNA。（）生物產(chǎn)品的特點之一就是穩(wěn)定性差,極易被化學或微生物降解而失活。 （ ）凝膠電泳中相對遷移率是指蛋白質(zhì)移動的距離與指示劑移動距離的比值。 （ ）丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺的聚合反應(yīng)應(yīng)與空氣隔絕，主要是大氣中的CO能消滅自由基是反應(yīng)終止。2（）水蒸氣蒸餾法適用于能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，沸點多在100°C以下，與在水中溶解度大的成分的提取。（）7?對下列甲殼素及其衍生物間的相互轉(zhuǎn)換關(guān)系的連線圖進行判斷，對的用“丁”號表示，錯的用“X”號表示。（6分）

甲殼素>殼聚糖甲殼素寡糖D-氨基葡萄糖鹽酸鹽N-乙酰-D-葡胺糖>D-葡糖胺殼聚胺寡糖甲殼素>殼聚糖甲殼素寡糖D-氨基葡萄糖鹽酸鹽N-乙酰-D-葡胺糖>D-葡糖胺殼聚胺寡糖TOC\o"1-5"\h\z結(jié)晶制備時，結(jié)晶溶液的濃度越高越好，因為這樣結(jié)晶速度快且雜質(zhì)較少。（ ）分配層析法主要是根據(jù)組分在互不相溶的兩相溶液中分配系數(shù)之差來實現(xiàn)的。（ ）細菌的酸性水解產(chǎn)物不能以游離態(tài)存在，常締結(jié)成大分子物質(zhì)，最著名的大分子締結(jié)物是金黃色葡萄球菌胞壁質(zhì)。（）可以用陶器、砂鍋、銅器及搪瓷等容器煎煮中藥。 （ ）蛋白質(zhì)在靜電狀態(tài)時顆粒之間的靜電斥力最小，而溶解度最大 （ ）相似相溶原理中重要的相似是指在分子極性上的相似。 （ ）選擇與目標產(chǎn)物極性相反的有機溶劑為萃取劑，可以得到較大分配系數(shù)。（ ）超臨界流體的密度接近液體－－萃取能力強，粘度接近氣體－－傳質(zhì)性能好。（）結(jié)晶在達相平衡時候，固態(tài)晶體相的化學勢與周圍溶液相的化學勢相等。（）溶液中含有的溶質(zhì)量，比飽和的時候更多，這種溶液稱為過飽和溶液，它在熱力學上是非常穩(wěn)定的。（）重結(jié)晶是利用雜質(zhì)和結(jié)晶物質(zhì)在不同溶劑和不同溫度下的溶解度不同，將晶體用合適的溶劑再次結(jié)晶，以獲得高純度的晶體的操作。（）干燥是利用熱能除去目標產(chǎn)物的濃縮懸浮液或結(jié)晶產(chǎn)品中濕分的單元操作，通常是生物產(chǎn)物成品化前的最后一個工序。（）生物藥物是利用生物體、生物組織或其成分，綜合應(yīng)用生物學、生物化學、微生物學、免疫學、物理化學和藥學等原理與方法進行加工、制成的一類產(chǎn)品。（）閱卷人得分四、選擇題（每選對一項1分，共20分）），糖蛋白選用對電泳膠板進行染色時，應(yīng)根據(jù)不同的物質(zhì)選用不同的染色劑，一般蛋白質(zhì)選用（（），脂蛋白選用（）。），糖蛋白選用A氨基黑B甲苯胺藍C蘇丹黑D麗春紅E過碘酸瓊脂糖是由瓊脂分離制備的鏈狀多糖，其結(jié)構(gòu)單元為（ ）AD-半乳糖BL-葡萄糖 CD-蔗糖D3,6-脫水-L-半乳糖聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺和（ ）以一定的比例交聯(lián)而成。A甲基胺基丙腈B甲叉雙丙烯酰胺C過硫酸胺生物產(chǎn)品生產(chǎn)中，初步純化（除去差異性較大的雜質(zhì)）的主要方法有（）A沉淀法 B電泳法C結(jié)晶法 D層析法在《本草綱目》中記載的最早應(yīng)用升華法提取有效成分的是（ ）香豆素B.樟腦 C.咖啡堿 D.苯甲酸下列物質(zhì)親水性最強的為（ ）A.淀粉B.蛋白質(zhì)C.氨基酸D.葡萄糖溶劑提取主要應(yīng)用的方法有（）A.浸漬法B.滲漉法C.煎煮法D.回流提取法一般可以自制的透析膜有（）A.動物膀胱膜B.蛋白質(zhì)膜 C.玻璃紙膜 D.羊皮紙膜E.火棉膠膜9?甲殼素制備過程中，用（）脫除甲殼中的CaC03成分，而用（）脫除其中的蛋白類及脂類物質(zhì)。A.稀堿溶液B.強酸溶液C.稀酸溶液D.強堿溶液閱卷人得分五、簡答題（每題5分，共100分）提高超臨界流體的選擇性應(yīng)遵從那些原則？防止膜污染的具體方法有哪些？什么是電泳技術(shù)？為什么說甲殼素及其衍生物是生物活性物質(zhì)？評價細胞破碎程度的方法有哪兩種？并講明優(yōu)缺點。影響蛋白質(zhì)溶解行為的因素有哪些？藥物分離與純化過程有什么特點？預(yù)處理技術(shù)主要完成的工作有哪些？等電點沉淀法應(yīng)注意哪些事項？怎樣選擇層析中應(yīng)用的洗脫溶劑？影響電泳遷移率的因素有哪些？乙醇作為親水性有機溶劑有哪些優(yōu)點？溶劑提取中選擇溶劑應(yīng)遵從哪些原則？影響鹽析的因素有哪些？硫酸銨作為鹽析用鹽的優(yōu)點有哪些？影響有機溶劑沉淀效果的因素有哪些？膜分離技術(shù)具有怎樣的優(yōu)點？影響膜分離截留率（表觀截留率）的因素，除相對分子質(zhì)量外，主要還有哪幾個方面？有機溶劑作為萃取劑應(yīng)滿足怎樣的條件？防止乳化現(xiàn)象的方法有哪些？閱卷人得分五、論述題（每題10分，共100分）1?用高濃度的NaOH溶液與甲殼素長時間反應(yīng)雖能徹底脫除其乙?；?，但會造成甲殼素分子主鏈的嚴重斷裂,影響殼聚糖的黏度，要想得到高脫乙酰基、高粘度的殼聚糖，應(yīng)采取什么措施？為什么？（10分）實驗室用冷凍離心機在使用時有哪些注意事項？（10分）聚丙烯酰胺凝膠作為電泳支持物有哪些優(yōu)點？（10分）論述蛋白質(zhì)制品的保存方法及注意事項。（10分）蛋白質(zhì)提取時常用的濃縮方法有哪些？分別說明優(yōu)缺點。（10分）寫出三種分離純化酶蛋白的方法，并簡述其原理。（10分）無機膜是由無機材料加工而成，是一種固態(tài)膜，論述無機膜較聚合物分離膜具有哪些優(yōu)點。（10分）膜分離技術(shù)在分離工程中的重要作用及存在問題。（10分）論述超臨界流體萃取法具有哪些優(yōu)點以及在實際生產(chǎn)中的應(yīng)用，并舉例說明具體操作過程。（10分）論述等點聚焦電泳的優(yōu)缺點。（10分）藥物分離與純化技術(shù)》試卷答案一、名詞解釋（每小題2分，共20分）相似相容原理：結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相似的物質(zhì)之間相互助溶的現(xiàn)象。萃取法：是利用混合物中的各種成分在兩種互不相容的溶劑中分配系數(shù)的不同而達到分離的方法。透析法：利用小分子物質(zhì)在溶液中可透過半透膜，而大分子物質(zhì)不能透過的性質(zhì)達到分離的方法。臨界溫度：是指高于此溫度時，無論加多大的壓力也不能使氣體液化，此溫度稱為這種氣體的臨界溫度。梯度洗脫：在對層析柱洗脫時逐漸增大溶劑的極性，是吸附在柱上的成分逐個被洗脫的一種方法。濃差極化現(xiàn)象：超濾過程中，水透過膜后使膜表面形成溶質(zhì)的濃度梯度，當達到一定平衡時，這層溶質(zhì)濃度分布邊界阻礙水透過膜作用的現(xiàn)象。鹽溶現(xiàn)象：中性鹽對蛋白質(zhì)的溶解度有顯著的影響，一般在低濃度下隨鹽濃度的升高，蛋白質(zhì)的溶解度在增大的現(xiàn)象。生物技術(shù)：是以生命科學為基礎(chǔ)，利用生物體系（組織、細胞、組分）和工程技術(shù)原理來提供商品和社會性技術(shù)服務(wù)的綜合性科學技術(shù)。生物活性物質(zhì)：是指對生命現(xiàn)象具有影響的微量或少量物質(zhì)。NDG:殼聚糖，是甲殼素在堿性條件下脫乙?；玫降漠a(chǎn)物。藥物分離與純化技術(shù)：從含有目的藥物成分的混合物中，經(jīng)提取、精制并加工制成高純度、符合藥典規(guī)定的各種藥品的生產(chǎn)技術(shù)。鹽析：高濃度鹽溶液中，隨著鹽濃度的升高蛋白質(zhì)的溶解度不同程度下降并先后析出的現(xiàn)象。凝聚作用：在某些電解質(zhì)的作用下，膠粒之間雙點層的排斥作用降低，電位下降，吸引作用加強，破壞膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，致使膠體粒子凝聚的過程。梯度洗脫：洗脫時逐漸增大溶劑的極性，使吸附在層析柱上的成分逐個被洗脫下來的一種方法。臨界壓力：指在臨界溫度下，使液體氣化所用的壓力值。夾帶劑：超濾法:利用高壓力或離心力，強使水和其他小的溶質(zhì)分子通過半透膜，而蛋白質(zhì)留在膜上的一種分離方法。電泳法：各種蛋白質(zhì)在同一pH條件下，因分子量和電荷數(shù)量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開的方法。離子交換層析：利用離子交換劑作為載體這些載體在一定條件下帶有一定的電荷，當帶相反電荷的分子通過時，由于靜電引力就會被載體吸附，這種分離方法叫離子交換層析。膜分離：利用具有一定選擇性透過特性的過濾介質(zhì)進行物質(zhì)的分離純化。凝膠極化：當膜表面附近的濃度超過溶質(zhì)的溶解度時，溶質(zhì)會析出，形成凝膠層的現(xiàn)象。物理萃?。喝苜|(zhì)根據(jù)相似相容的原理在兩相間達到分配平衡，萃取劑與溶質(zhì)間不發(fā)生化學反應(yīng)。乳化現(xiàn)象：水或有機溶劑以微小液滴形式分散于有機相或水相中的現(xiàn)象。超臨界流體：當一種流體處于其臨界點的溫度和壓力之下，則稱之為超臨界流體。遷移率：帶電粒子在單位電場強度下的泳動速度。二、填空（每小題1分，共50分）均相混合物、非均相混合物；機械分離、傳質(zhì)分離； 3.提取、精制、成品加工；等電點沉淀法、變性沉淀法、鹽析法、有機溶劑沉淀法；珠磨法、超聲破碎法、酶解法、滲透壓法、干燥法；硅膠、氧化鋁、活性炭； 7.石油醚、氯仿、乙醚；8.乙醇、甲醇、丙酮； 9.浸漬法、滲漉法、煎煮法；10.硫酸銨、硫酸鎂、氯化鈉；10.硫酸銨、硫酸鎂、氯化鈉；12.吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜;14.震動、攪拌、壓力、溫度;16.區(qū)帶電泳、等電點電泳、等速電泳;陰離子交換劑、陽離子交換劑；13.微濾、超濾、納濾;15.開路循環(huán)、閉路循環(huán);17.飽和度、結(jié)晶提純度、晶核形成三、判斷（每小題1分，共15分）1.X1.X2.X3.V4.V5.X6.X用 > 連接的為錯誤方向。甲殼素甲殼素寡糖D-氨基葡萄糖鹽酸鹽殼聚胺寡糖甲殼素甲殼素寡糖D-氨基葡萄糖鹽酸鹽殼聚胺寡糖N_乙酰-DN_乙酰-D-葡胺糖 kX9.V10.V11.V12.X13.V20.VD-葡糖胺V14.X15.V16.V17.X18.V19.四、選擇題（每選對一項1分，共20分）ADBEC2.AD3.B4.A5.B6.D7.ABCD8.ADE9.CA五、簡答題（每題5分，共30分）答A、操作溫度T與臨界溫度Tc相接近。B、超臨界流體的化學性質(zhì)與待分離的溶質(zhì)化學性質(zhì)相接近。答）預(yù)處理：調(diào)節(jié)pH值，加入阻止氧化反應(yīng)的試劑等。）開發(fā)抗污染膜。）加大供給液的流速。）清洗已被污染的膜：化學洗——根據(jù)吸附物的不同選擇清洗試劑；物理洗——超聲波處理、振動處理等。答電泳技術(shù)是指帶電荷的供試品在惰性支持介質(zhì)中，于電場的作用下，向其對應(yīng)的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區(qū)帶，用適宜的監(jiān)測方法記錄其電泳區(qū)帶圖譜或計算其百分含量的技術(shù)。答因為甲殼素及其衍生物的分子中含有活性基團：-0H和一NH2答A、直接計數(shù)法：缺點：難以根據(jù)不同的細胞應(yīng)用一種合適的染色劑。死亡的細胞不被染色和計數(shù)細胞有團聚現(xiàn)象時無法計數(shù)B、間接計數(shù)法：破碎率=包內(nèi)物質(zhì)釋放量X100%/此物質(zhì)的理論最大釋放量最常用酶活性分析法答）蛋白質(zhì)的組成：不同氨基酸的親水性有較大差異，組成不同蛋白質(zhì)的氨基酸種類及含量的不同對其溶解性有較大影響。）構(gòu)象的差異：通過共價交聯(lián)、疏水效應(yīng)及各種作用力而形成的蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)，其親水區(qū)和疏水區(qū)的大小及分布情況影響其溶解性。3）環(huán)境因素：主要取決于溶液的性質(zhì)，如：pH值、溫度、溶液濃度、離子強度等。答1） 藥品種類繁多，性質(zhì)差異較大，致使混合物復(fù)雜多樣。2） 混合物中與分離的目的藥物成分含量低，常需多步分離，致使回收率較低。3） 藥物成分的穩(wěn)定性通常較差，使分離與純化方法的選擇受到較大限制，必須嚴格控制操作條件。4） 某些藥物在分離與純化過程中，要求無菌操作。對于基因產(chǎn)品，還應(yīng)注意安全問題。5） 藥品質(zhì)量要求較高，要確保藥品安全有效、穩(wěn)定均一，才能達到防病治病及保護健康的目的。答1） 沉淀可溶性雜質(zhì)。2） 采用凝聚或絮凝技術(shù)，將膠體狀態(tài)的雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為易于分離的較大顆粒。3） 改善料液的流動性，便于4） 固液分離。）將胞內(nèi)產(chǎn)物從胞內(nèi)釋放出來。答1） 不同的蛋白質(zhì)具有不同的等電點，在生產(chǎn)過程中，應(yīng)根據(jù)分離要求出去目的產(chǎn)物之外的雜蛋白。2） 同一蛋白質(zhì)在不同條件下等電點不同，在鹽溶液中，一般蛋白質(zhì)結(jié)合較多的陽離子，等電點的pH升高。3） 目的藥物成分對pH值的要求，生產(chǎn)中應(yīng)盡可能避免直接應(yīng)用強酸或強堿調(diào)節(jié)pH值，以免局部過酸或過堿引起目的藥物成分的變性。4） 各種蛋白在等電點處仍具有一定的溶解度，致使沉淀不完全，因此等電點沉淀法多與其他方法配合使用效果更為理想。答1） 被分離物質(zhì)是弱極性的，應(yīng)選擇弱極性的容積洗脫。2） 被分離物質(zhì)是強極性的，應(yīng)選擇強極性的容積洗脫。3） 吸附劑是弱極性的，而被分離物質(zhì)是強極性的，應(yīng)選擇極性較低的容積洗脫。答1） 電場強度：電場強度增大，遷移率加快，省時；但產(chǎn)生大量的熱量，必須配備冷卻裝置以保證產(chǎn)品的生物活性。2） 溶液的pH值：pH值決定被分離物質(zhì)的解離程度、質(zhì)點的帶電性質(zhì)及所帶凈電荷量。pH值離pI越遠所帶電荷越多，遷移率越大。3） 溶液的離子強度：電泳液中離子濃度增加會引起質(zhì)點遷移率的降低。4） 電滲：固體支持物吸附溶液中的“+”“-”離子，使溶液帶電，從而改變了質(zhì)點在電場中固有的移動速率。答1） 溶解性好，對細胞的穿透力強。2） 除蛋白質(zhì)、果膠、粘液質(zhì)、淀粉和多糖外，多數(shù)物質(zhì)能溶于乙醇。3） 難溶于水的親脂類物質(zhì)在乙醇中的溶解度較大。4） 可以設(shè)置不同的濃度梯度進行溶解。5） 比水用量少，提取時間短，水溶性雜質(zhì)較少。6） 便宜且來源方便，毒性小。答）對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小。）溶劑不能與中藥內(nèi)的成分起化學反應(yīng)。）經(jīng)濟實惠，容易得到，使用安全性高。答1）溫度：除對溫度敏感的蛋白質(zhì)在低溫操作外，一般可在室溫中進行。一般溫度低蛋白質(zhì)溶介度降低。但有的蛋白質(zhì)（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低，更容易鹽析。2）pH值：大多數(shù)蛋白質(zhì)在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度最低。）蛋白質(zhì)濃度：蛋白質(zhì)濃度高時，欲分離的蛋白質(zhì)常常夾雜著其他蛋白質(zhì)地一起沉淀出來。答1） 溫度系數(shù)小而溶解度大Q5度時飽和溶液為4.1M,即767克/升；0度時飽和溶解度為3.9M，即676克/升），在這一溶解度范圍內(nèi)，許多蛋白質(zhì)和酶都可以鹽析出來；2） 分段鹽析效果也比其他鹽好，不易引起蛋白質(zhì)變性。3）硫酸銨溶液的pH常在4.5-5.5之間，當用其他pH值進行鹽析時，需用硫酸或氨水調(diào)節(jié)。答1） 溫度低溫可保持生物大分子活性，同時降低其溶解度，提高提取效率；2） 樣品濃度和PH與鹽析法中的作用基本相同；3） 金屬離子一些多價陽離子如Zn2+和Ca2+在一定PH下能與呈陰離子狀態(tài)的蛋白質(zhì)形成復(fù)合物，這種復(fù)合物在水中或有機溶劑中的溶解度都大大下降，而且不影響蛋白質(zhì)的生物活性。4） 離子強度鹽濃度太大或太低都對分離有不利影響，對蛋白質(zhì)和多糖而言鹽濃度不超過5%比較合適，使用的乙醇量不超過二倍體積為宜。答1） 高效的分離過程2） 接近室溫的工作溫度，低能耗3） 品質(zhì)穩(wěn)定性好，回收率高）連續(xù)化操作，靈活性強5） 純物理過程，環(huán)保答（1）分子特性：相對分子質(zhì)量相同時，呈線狀的分子截留率較低，有支鏈的分子截留率較高，球形分子的截留率最大。對于荷電膜，具有與膜相反電荷的分子截留率較低，反之則較高。若膜對溶質(zhì)具有吸附作用時，溶質(zhì)的截留率增大。（2）其他高分子溶質(zhì)的影響：由于①競爭性抑制②濃度極化現(xiàn)象使膜表面的濃度高于主體濃度。（3）操作條件：溫度升高，粘度下降，則截留率降低。膜面流速增大，則濃度極化現(xiàn)象減輕，截留率減小。答（1）價廉易得；（2） 與水相不互溶；（3） 容易回收和再利用；（4） 與水相有較大的密度差，且粘度小，表面張力適中，相分散和相分離較容易；（5） 毒性低，腐蝕性小，閃電低，使用安全（6） 不與目標產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)。答（1） 操作前對發(fā)酵液進行過濾或絮凝沉淀處理,除去大部分蛋白質(zhì)及固體微粒，防止乳化現(xiàn)象發(fā)生。（2） 產(chǎn)生乳化后，根據(jù)乳化的程度和乳濁液的形式采取適當?shù)钠迫槭侄巍Ｈ榛F(xiàn)象不嚴重：采用過濾或離心沉降的方法；0/W型乳濁液：加入親油性表面活性劑；W/0型乳濁液：加入親水性表面活性劑；六、論述題（每題10分，共100分）1.答應(yīng)采取間歇時反應(yīng)。即在甲殼素與NaOH溶液反應(yīng)過程中，隔一段時間用清水沖洗一次，以便洗除吸附在殼聚糖表面的CHfOONa，利于NaOH溶液的滲入，縮短脫乙?；姆磻?yīng)時間，從而減少或降低殼聚糖分子主鏈的斷裂，抑制殼聚糖產(chǎn)品粘度的下降。答1） 使用前先檢查離心機的狀態(tài)，首次使用前先認真閱讀使用說明書。2） 根據(jù)所提取物質(zhì)的量選擇離心用的轉(zhuǎn)子及離心管。3） 對離心的各參數(shù)進行設(shè)置：轉(zhuǎn)子型號、轉(zhuǎn)速、溫度等。4） 冷凍離心時，使用前先開機預(yù)冷到設(shè)定的溫度。5） 提取物以達到離心管的2/3為宜，太多容易溢出而腐蝕轉(zhuǎn)子。6） 離心機中對角放置的兩個離心管應(yīng)在精確配平的天平上配平。7） 離心后應(yīng)注意腔室內(nèi)除霜，在未完全干燥的情況下應(yīng)開蓋放置一段時間。等充分干燥后合上蓋子。8） 離心機應(yīng)與其他電器設(shè)備隔開一定的距離，且放于干燥、陽光不宜直射的穩(wěn)固臺上。答1） 電滲作用小，不易與樣品相互作用。2） 是一種人工合成的物質(zhì)，聚合前可調(diào)節(jié)單體的濃度以形成不同程度的膠鏈結(jié)構(gòu)，使其空隙度在一個較大的范圍變化，因此可根據(jù)要分離物質(zhì)的分子大小選擇合適的凝膠成分。3） 在一定的濃度范圍內(nèi)對熱穩(wěn)定，且凝膠無色透明，易于觀察。4） 丙烯酰胺是比較純的化合物，可以精制，減少污染。答1） 干燥的制品一般比較穩(wěn)定，在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無明顯變化，貯藏要求簡單，只要將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)（內(nèi)裝有干燥劑）密封，保持0－4度冰箱即可。2） 液態(tài)貯藏時應(yīng)注意以下幾點。A、 樣品不能太稀，必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏，樣品太稀易使生物大分子變性。B、 一般需加入防腐劑和穩(wěn)定劑，常用的防腐劑有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等。蛋白質(zhì)和酶常用的穩(wěn)定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等，如酶也可加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性。此外，鈣、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護作用。核酸大分子一般保存在氯化鈉或檸檬酸鈉的標準緩沖液中。C、 貯藏溫度要求低，大多數(shù)在0度左右冰箱保存，有的則要求更低，應(yīng)視不同物質(zhì)而定。5.答1） 減壓加溫蒸發(fā)濃縮：通過降低液面壓力使液體沸點降低，減壓的真空度愈高，液體沸點降得愈低，蒸發(fā)愈快，此法適用于一些不耐熱的生物大分子的濃縮。2） 空氣流動蒸發(fā)濃縮：空氣的流動可使液體加速蒸發(fā),鋪成薄層的溶液，表面不斷通過空氣流；或?qū)⑸锎蠓肿尤芤貉b入透析袋內(nèi)置于冷室，用電扇對準吹風，使透過膜外的溶劑不沁蒸發(fā)，而達到濃縮目的，此法濃縮速度慢，不適于大量溶液的濃縮。3） 、冰凍法：生物大分子在低溫結(jié)成冰，鹽類及生物大分子不進入冰內(nèi)而留在液相中，操作時先將待濃縮的溶液冷卻使之變成固體，然后緩慢地融解，利用溶劑與溶質(zhì)融點介點的差別而達到除去大部分溶劑的目的。4） 吸收法：通過吸收劑直接收除去溶液中溶液分子使之濃縮。所用的吸收劑必需與溶液不起化學反應(yīng)，對生物大分子不吸附，易與溶液分開。5） 超濾法：超濾法是使用一種特別的薄膜對溶液中各種溶質(zhì)分子進行選擇性過濾的方法，不液體在一定壓力下（氮氣壓或真空泵壓）通過膜時，溶劑和小分子透過，大分子受阻保留，這是近年來發(fā)展起來的新方法，最適于生物大分子尤其是蛋白質(zhì)和酶的濃縮或脫鹽，并具有成本低，操作方便，條件溫和，能較好地保持生物大分