蔬菜和水果中的氨基甲酸酯類農(nóng)殘檢測(cè)

蔬菜和水果中的氨基甲酸酯類農(nóng)殘檢測(cè)――帶柱后衍生的高效液相色譜法氨基甲酸酯類農(nóng)藥由于高效、經(jīng)濟(jì)而被廣泛應(yīng)用于蔬菜水果種植過(guò)程，但會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重污染，并引發(fā)中毒。該類農(nóng)殘檢測(cè)方法主要有液相色譜法、光譜法、氣質(zhì)聯(lián)用等,其中柱后衍生的高效液相法方法簡(jiǎn)單，檢測(cè)限低，已被農(nóng)業(yè)部列為該類農(nóng)殘的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法,但是由于進(jìn)口儀器價(jià)格昂貴，因此一直沒(méi)有得到大力推廣，本文利用國(guó)產(chǎn)創(chuàng)新通恒的設(shè)備得到的結(jié)果，完全可以滿足農(nóng)業(yè)部相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求?！菊恐笱苌ㄊ菣z測(cè)氨基甲酸酯類農(nóng)藥在蔬菜水果中殘留量的重要方法。本文應(yīng)用創(chuàng)新通恒高效液相色譜-柱后衍生系統(tǒng)對(duì)氨基甲酸酯類農(nóng)殘的檢測(cè)進(jìn)行了系統(tǒng)研究。通過(guò)微調(diào)NY/T761-2008中的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，建立了重現(xiàn)性良好、快速便捷、結(jié)果可靠的氨基甲酸酯類農(nóng)殘柱后衍生檢測(cè)方法?！娟P(guān)鍵詞】氨基甲酸酯；農(nóng)藥殘留；柱后衍生；高效液相色譜1原理樣品中的氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝產(chǎn)物用乙腈提取，提取液經(jīng)過(guò)濾、濃縮后，采用固相萃取技術(shù)進(jìn)行分離、凈化，淋洗液經(jīng)濃縮后，使用帶有熒光檢測(cè)器和柱后衍生系統(tǒng)的液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。試劑與材料試劑：乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純）、氯化鈉（分析純）、鄰苯二甲醛（OPA,Pickering）、0.05mol/LNaOH溶液（Pickering）、OPA稀釋液（Pickering）、巰基乙醇（Thiofluor,Pickering）、農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（見(jiàn)表1）表110種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)品序號(hào)中文名英文名濃度“g/ml溶劑1涕滅威亞砜Aldicarbsulfoxide1000甲醇2涕滅威砜Aldicadbsulfone1000甲醇3滅多威Methomyl1000甲醇43-羥基克百威3—hydroxycabofuran1000甲醇5涕滅威Adicarb1000甲醇6速滅威Metolcarb1000甲醇7克百威Carbofuran1000甲醇8甲萘威Carbaryl1000甲醇9異丙威Isoprocarb1000甲醇10仲丁威fenobucarb1000甲醇材料：新鮮黃瓜固相萃取柱（氨基柱，Aminopropyl,容積6mL，填充物500mg）濾膜：0.45pm有機(jī)濾膜儀器設(shè)備液相色譜儀：LC3000分析兩元高壓系統(tǒng)——TP3000二級(jí)柱后衍生系統(tǒng)——熒光檢測(cè)器榨汁機(jī)、勻漿機(jī)、氮吹儀、固相萃取儀樣品配制與檢測(cè)4.1農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制將表1中的10種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)品取各1mL混合置入容量瓶中，混勻后，取出一定量混合液，稀釋200倍，待測(cè)。4.2樣品的制備與凈化4.2.1試樣制備按GB/T8855抽取蔬菜樣品，取可食部分，將其切碎，充分混勻，放入榨汁機(jī)中，制成待試樣品，裝于容器中待用。4.2.2提取稱取25g試樣，放入勻漿機(jī)中，加入50.0mL乙腈，在勻漿機(jī)上高速勻漿2min后，用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有7g氯化鈉的100mL具塞量筒中，收集40ml，蓋上塞子，劇烈震蕩1min,在室溫下靜置30min,使乙腈相和水相分層。4.2.3凈化參見(jiàn)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)NY/T761-2008[1]4.3色譜條件色譜柱：CXTHC18-5pm-1004.6x250mm柱溫：42°C4.3.3檢測(cè)波長(zhǎng)：激發(fā)波長(zhǎng)330nm,發(fā)射波長(zhǎng)465nm4.3.4梯度程序：梯度程序如表2所示：表2梯度程序時(shí)間/min流速/mL/min甲醇％水％0.000.815852.000.825758.000.825759.000.8406010.000.8455519.000.8802025.000.8802026.000.815854.3.5柱后衍生：0.05mol/L氫氧化鈉溶液，流速0.3mL/min,水解溫度100COPA試劑，流速0.3mL/min,水解溫度40C4.4樣品的色譜分析分別吸取5.00pL標(biāo)準(zhǔn)混合溶液和凈化后的樣品溶液注入液相色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以樣品溶液峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比例定量。5.結(jié)果5.1結(jié)果計(jì)算試樣中被測(cè)農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w計(jì)，單位以mg/kg表示，按以下公式進(jìn)行計(jì)算：式中：p 標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，單位為mg/LA——樣品溶液中被測(cè)農(nóng)藥的峰面積As——農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液中被測(cè)農(nóng)藥的峰面積V—提取溶劑總體積V2——吸取出用于檢測(cè)的提取液的體積，單位為mLV3 樣品溶液定容體積，單位為mLm——試樣的質(zhì)量，單位為g計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字，當(dāng)結(jié)果大于1mg/kg時(shí)保留三位有效數(shù)字。5.2結(jié)果與譜圖5.2.1氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣結(jié)果圖1氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液1-涕滅威亞砜；2-涕滅威砜；3-滅多威；4-三羥基克百威；5-涕滅威；6-速滅威;7-克百威；8-甲萘威；9-異丁威；10-仲丁威圖1為氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣結(jié)果，從圖中可以看出十種標(biāo)準(zhǔn)品峰型完好,且都能夠達(dá)到基線分離。其各樣品峰的保留時(shí)間如表3所示。表3標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣結(jié)果保留時(shí)間名稱保留時(shí)間名稱9.810涕滅威亞砜21.580速滅威

11.290涕滅威砜22.373克百威14.203滅多威23.063甲萘威18.2183-羥基克百威24.348異丁威20.813涕滅威25.868仲丁威圖2氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)性實(shí)驗(yàn)譜圖圖2是進(jìn)樣三針后的譜圖重疊結(jié)果，從圖中可以看出譜圖重疊良好,說(shuō)明此儀器和方法的重復(fù)性良好。5.2.3最低檢測(cè)限實(shí)驗(yàn)取氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，將其稀釋至O.OIppm，進(jìn)樣后的結(jié)果如圖3所示。從圖中可以看出O.OIppm的樣品具有很好的響應(yīng)，此儀器和方法完全適用于低濃度樣品的檢測(cè)。圖3氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液檢測(cè)限實(shí)驗(yàn)譜圖5.2.4黃瓜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留實(shí)驗(yàn)將黃瓜樣品處理、凈化完畢并定容的樣品進(jìn)樣5ML結(jié)果如圖4所示。經(jīng)分析可知其黃瓜中含有滅多威，經(jīng)計(jì)算可知黃瓜樣品中滅多威的含量為0.33mg/kg，低于國(guó)標(biāo)規(guī)定的蔬菜圖4黃瓜中氨基甲酸酯類農(nóng)殘檢測(cè)譜圖6結(jié)論本文采用創(chuàng)新通恒柱后衍生系統(tǒng)對(duì)氨基甲酸酯類農(nóng)殘的檢測(cè)進(jìn)行了研究，將原標(biāo)準(zhǔn)中的進(jìn)樣量20uL調(diào)整為5uL,避免了溶劑效應(yīng)的產(chǎn)生，使得前三個(gè)峰的峰形更加對(duì)稱，重現(xiàn)性更好。同時(shí)將梯度中的流動(dòng)相流速變化取消，統(tǒng)一采用0