食品微生物檢驗(yàn)基礎(chǔ)-微生物接種技術(shù)

食品微生物與檢驗(yàn)接種定義、工具及方法目錄Contents接種定義1接種工具2接種方法334

在無菌條件下，利用相應(yīng)的接種工具將微生物純種或含菌材料（如食品、水、土壤、空氣等）移接到已滅菌且適合其生長(zhǎng)繁殖的培養(yǎng)基中的過程。1、接種定義34

接種工具是微生物培養(yǎng)接種所用到的工具。常用的接種工具有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接種鏟或接種鋤、涂布棒等。2、接種工具1

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81-接種針；2-接種環(huán)；3-接種鉤；4,5-涂布棒；6-接種圈；7-接種鏟；8-解剖刀34

接種針的構(gòu)造包括手柄、接種桿、螺牙和針頭部分。各部分設(shè)計(jì)和用材由于生產(chǎn)廠家不同而不同。有金屬接種環(huán)（鋼，鉑金或者鎳鉻合金）和一次性的塑料接種環(huán)（塑料制成的）。2、接種工具（1）接種針、接種環(huán)、接種鉤結(jié)構(gòu)和材質(zhì)a34

鎳鉻合金制成的金屬針能經(jīng)受火焰反復(fù)灼燒、冷卻迅速，應(yīng)用比較廣泛。并且質(zhì)地軟硬適中，可根據(jù)實(shí)際需要折成針狀、環(huán)狀和鉤狀。2、接種工具（1）接種針、接種環(huán)、接種鉤鎳鉻合金接種針特點(diǎn)b34接種細(xì)菌和酵母菌用接種環(huán)和接種針，鎳鉻絲直徑以0.5mm為適當(dāng)，環(huán)的內(nèi)徑約2mm，環(huán)面應(yīng)平整。接種某些不易和培養(yǎng)基分離的放線菌和真菌，有時(shí)用接種鉤或接種鏟，其絲的直徑要求粗一些，約1mm。2、接種工具（1）接種針、接種環(huán)、接種鉤適用范圍c34

用涂布法在瓊脂平板上分離單個(gè)菌落時(shí)需用涂布棒。根據(jù)材質(zhì)可分為一次性涂布棒、玻璃涂布棒和不銹鋼涂布棒；根據(jù)形狀又分為T型涂布棒、L型涂布棒和三角形涂棒。2、接種工具（2）涂布棒34移液管根據(jù)不同的接種量有不同的規(guī)格，主要用于液體接種。移液槍是移液器的一種，常用于實(shí)驗(yàn)室少量或微量液體的移取，規(guī)格不同，不同規(guī)格的移液槍配套使用不同大小的槍頭。2、接種工具（3）移液管和移液槍0102030405劃線接種澆混接種穿刺接種三點(diǎn)接種涂布接種3、接種方法由于接種目的、接種要求、培養(yǎng)基種類及接種的微生物等的不同，接種方法也相應(yīng)有很多種。06液液接種34

將微生物的純種或含菌材料用接種環(huán)或接種針挑取，然后在固體培養(yǎng)基表面畫直線或曲線，達(dá)到接種的作用。斜面接種和平板劃線接種就常用此法。（1）劃線接種3、接種方法34

把少量的微生物接種在平板表面上，成等邊三角形的三點(diǎn)，讓它各自獨(dú)立形成菌落。除三點(diǎn)外，也有一點(diǎn)或多點(diǎn)進(jìn)行接種的。研究霉菌形態(tài)時(shí)常用此法。（2）三點(diǎn)接種（點(diǎn)植法）3、接種方法

將待接的微生物純種或含菌材料先放入培養(yǎng)皿中，然后再倒入冷卻至45℃左右的固體培養(yǎng)基，迅速輕輕搖勻，這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的。待平板凝固之后，倒置于合適溫度下培養(yǎng)，就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落。（3）澆混接種（傾注法）3、接種方法34

先倒好平板，讓其凝固，然后再將菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布，讓菌液均勻分布，就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落。（4）涂布接種3、接種方法34用接種針蘸取少量待接菌種，垂直刺入固體或半固體培養(yǎng)基的底部，再按原路抽出接種針的方法。有水平穿刺和垂直穿刺兩種。常用于保藏厭氧菌種或微生物的動(dòng)力觀察。（5）穿刺接種3、接種方法食品微生物與檢驗(yàn)微生物接種技術(shù)任務(wù)描述任務(wù)完成條件任務(wù)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求師生互動(dòng)12345目錄每位同學(xué)獨(dú)立完成斜面接種、液體接種和穿刺接種的實(shí)驗(yàn)操作。在接種過程中學(xué)習(xí)和掌握無菌技術(shù)。檢查培養(yǎng)物是否為純培養(yǎng)，若出現(xiàn)污染，分析原因，反復(fù)練習(xí)無菌操作技術(shù)。一、任務(wù)描述1.枯草芽孢桿菌；2.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的固體斜面、液體培養(yǎng)基試管及半固體培養(yǎng)基試管；3.試管、接種環(huán)、接種針、酒精燈、鑷子、記號(hào)筆等。二、任務(wù)完成條件LOREMIPSUMDOLORSITAMET掌握無菌操作的程序和操作要點(diǎn)；0102能夠進(jìn)行斜面接種、液體接種和穿刺接種。三、任務(wù)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程叫做接種。

接種無菌接種操作LOREMIPSUMDOLORSITAMET培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后，用經(jīng)過滅菌的工具（如接種針和吸管等）在無菌條件下接種含菌材料（如樣品、菌或菌懸液等）于培養(yǎng)基上，這個(gè)過程叫做無菌接種操作。四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求Part1一斜面接種技術(shù)四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求斜面接種是從已生長(zhǎng)好的菌種斜面上挑取少量菌種移植至另一新鮮斜面培養(yǎng)基上的一種接種方法。01

貼標(biāo)簽：接種前在試管上貼上標(biāo)簽，注明菌名、接種日期、接種人姓名等，貼在距試管口2-3cm的位置。0203點(diǎn)燃酒精燈：酒精燈火焰周圍是無菌區(qū)，無菌操作需要在此范圍內(nèi)進(jìn)行，離火焰越遠(yuǎn)，污染的可能性越大。接種：用接種環(huán)將少許菌種移接到貼好標(biāo)簽的試管斜面上。四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求Part1一斜面接種技術(shù)1取一菌種管和培養(yǎng)基管，置左手食指、中指、無名指間，拇指壓住兩管底部上側(cè)面，使菌種管位于外側(cè)，培養(yǎng)基管位于內(nèi)側(cè)。23右手拇指和食指分別旋松兩管棉塞?；鹧鏈缇臃N環(huán)。以右手小指與手掌，小指與無名指分別夾取棉塞（先外管后內(nèi)管），將兩管口迅速通過火焰1~2次。斜面接種操作四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求45將已滅菌的接種環(huán)伸入菌種管中，從斜面上取菌少許，迅速伸入待接種的培養(yǎng)基管中，然后從底部起向上作曲折連續(xù)劃線，直至斜面上方頂端。或在斜面底部向上劃一條直線。取出接種環(huán)，火焰滅菌管口，塞上棉塞（先塞內(nèi)管）；最后將接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌放好。四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求LOREMIPSUMDOLORSITAMET(1)接種環(huán)滅菌(2)開啟棉塞(3)管口滅菌(4)挑起菌苔(5)接種(6)塞好棉塞

接種量小用接種環(huán)取少量菌體移入培養(yǎng)基容器中，將接種環(huán)在液體表面震蕩或在容器壁上輕輕摩擦把菌苔散開，然后塞上棉塞，再將液體搖動(dòng)。接種量大先在斜面菌種管中注入定量無菌水，用接種環(huán)把菌苔刮下研開，再將菌懸液倒入液體培養(yǎng)基中，倒前需將試管口在火焰上滅菌。第一節(jié)緒論P(yáng)art1二液體接種技術(shù)1如斜面接種法持好菌種管及培養(yǎng)基管。2以滅菌接種針從菌種管取菌，垂直刺入培養(yǎng)基的中心（半固體或一般瓊脂高層）直達(dá)近管底部（但不能完全刺到管底），接種針應(yīng)沿原路退出。3經(jīng)培養(yǎng)后半固體培養(yǎng)基可觀察到：沿穿刺線生長(zhǎng)，線外的培養(yǎng)基清亮表示細(xì)菌無動(dòng)力；穿刺線模