艾滋病實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理

HIV實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制及規(guī)范化管理吉林市疾病預(yù)防控制中心李玉瑩

艾滋病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理包括質(zhì)量保證、質(zhì)量控制和質(zhì)量評(píng)價(jià)。一、質(zhì)量保證(QA）質(zhì)量保證是指從接收樣本起，到實(shí)驗(yàn)室發(fā)出報(bào)告止，為確保實(shí)驗(yàn)室最終報(bào)告結(jié)果的正確性所進(jìn)行的全過(guò)程，包括采取各種行政和技術(shù)上的措施和方法。行政支持（行政部門關(guān)心實(shí)驗(yàn)室發(fā)展、建設(shè)，人員穩(wěn)定，足夠經(jīng)費(fèi)）人員培訓(xùn)（新人員上崗前培訓(xùn)獲得合格證書，接受復(fù)訓(xùn)，篩查實(shí)驗(yàn)室人員至少2年一次。檢測(cè)人員應(yīng)分為檢驗(yàn)人、復(fù)核人、簽發(fā)人。復(fù)核人和簽發(fā)人應(yīng)具備對(duì)檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析和解決問題的能力）環(huán)境條件（實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、建筑、設(shè)備符合要求）標(biāo)本采集、運(yùn)送和處理檢測(cè)方法和試劑的選擇設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)（酶標(biāo)儀、移液器、高壓滅菌器、溫度計(jì)等）文件和文件管理檢測(cè)方法和試劑的選擇使用經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)的試劑，選擇敏感性高，特異性好的，根據(jù)參比室組織的國(guó)家級(jí)艾滋病診斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)室更換試劑批號(hào)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行平行試驗(yàn)所有試劑盒要嚴(yán)格按照要求條件保存。設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)目前常用的艾滋病檢測(cè)設(shè)備類安全類：生物安全柜、洗眼器、普通冰箱、超低溫冰箱、高壓滅菌器。檢測(cè)類：微量加樣器、搖擺平臺(tái)、全自動(dòng)蛋白印跡儀、普通離心機(jī)、震蕩器、移液器、恒溫水浴、酶標(biāo)儀+洗板機(jī)、病毒載量?jī)x、流式細(xì)胞儀其它：計(jì)算機(jī)、空調(diào)規(guī)范化管理的意義遵照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》、《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法》。檢測(cè)質(zhì)量保證延長(zhǎng)設(shè)備的使用時(shí)間便于設(shè)備的管理節(jié)約資源HIV實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備維護(hù)日常維護(hù)定期檢定和校準(zhǔn)設(shè)備對(duì)環(huán)境的普通要求電源：電壓一定要匹配，插線板合適，專用的.經(jīng)常停電或電壓不穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)室，建議配備穩(wěn)壓器和不間斷電源環(huán)境：清潔，溫、濕度合適良好通風(fēng)長(zhǎng)時(shí)間不用的設(shè)備，注意特別容易壞酶標(biāo)儀移液器的檢定一年至少檢定一次需檢定的原因-經(jīng)常使用-要求高的準(zhǔn)確性超低溫冰箱定期清理灰塵過(guò)濾器（建議每月一次）

超低溫冰箱注意事項(xiàng)要求環(huán)境溫度控制在28度以下空間的清潔穩(wěn)定的電源供應(yīng)不宜放得太擠生物安全柜HEPA-過(guò)濾裝置容納有害生物氣體。需提供人員保護(hù)也為產(chǎn)品提供保護(hù)(按等級(jí)而定)二級(jí)生物安全柜生物安全柜的維護(hù)每年檢定一次安全柜保持所有操作在窗扇4英寸以內(nèi)清潔物質(zhì)和污染物隔離開，減少相互干擾使用后及時(shí)清理柜內(nèi)不宜放太多的物品，不能儲(chǔ)藏化學(xué)物質(zhì)離心機(jī)的維護(hù)轉(zhuǎn)頭、套桶使用離心機(jī)的注意事項(xiàng)離心力、離心速度平穩(wěn)的儀器臺(tái)不用時(shí)，松轉(zhuǎn)頭；使用時(shí)，擰緊轉(zhuǎn)子保持平衡使用安全：蓋子要嚴(yán)使用后要擦干或開蓋至晾干防止液體泄漏到腔內(nèi)高壓滅菌器滅菌器的維護(hù)壓力表需要定期檢驗(yàn)（一年兩次）等氣壓和溫度下降到正常后,再開閥高壓時(shí),放入指示紙,以便判定滅菌效果設(shè)備的檢定和校準(zhǔn)

對(duì)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性和有效性有影響的儀器設(shè)備必須進(jìn)行檢定和校準(zhǔn)。

有國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程的儀器設(shè)備，由法定計(jì)量檢定機(jī)構(gòu)或經(jīng)計(jì)量行政部門授權(quán)的技術(shù)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢定；

沒有國(guó)家檢定規(guī)程的，可以由廠家、自行檢定和校準(zhǔn)。制訂儀器設(shè)備檢定計(jì)劃。經(jīng)檢定的儀器設(shè)備校驗(yàn)結(jié)果貼上標(biāo)志：合格標(biāo)志為綠色、準(zhǔn)用標(biāo)志為黃色、停用標(biāo)志為紅色。凡檢定不合格或超過(guò)檢定有效期的儀器設(shè)備，一律不得用于檢驗(yàn)工作。對(duì)超過(guò)檢定期，但暫時(shí)不用的儀器設(shè)備，貼上停用標(biāo)志。

強(qiáng)制檢定的工作計(jì)量器具目錄

HIV檢測(cè)強(qiáng)制檢定儀器：加樣器、酶標(biāo)儀、溫度計(jì)、高壓滅菌器

強(qiáng)制檢定的周期，由執(zhí)行強(qiáng)制檢定的計(jì)量檢定機(jī)構(gòu)根據(jù)計(jì)量檢定規(guī)程確定。

屬于強(qiáng)制檢定的工作計(jì)量器具，未按照本辦法規(guī)定申請(qǐng)檢定或者經(jīng)檢定下合格的，任何單位或者個(gè)人不得使用。

文件及文件管理

1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序

(SOP)

2.實(shí)驗(yàn)原始記錄表

3.結(jié)果報(bào)告

4.樣品登記和保存

5.文件存檔

1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序

(SOP)

艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件。

SOP由各崗位工作人員起草，實(shí)驗(yàn)室主任審定，并應(yīng)定期修訂。修訂應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)室主管人員的領(lǐng)導(dǎo)下進(jìn)行，每年至少一次。所有工作人員要在所從事工作的SOP文件上簽名表示已經(jīng)閱讀并掌握了有關(guān)內(nèi)容。.艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立以下SOP1、樣品的接收、登記、處理、保存和運(yùn)輸2、檢測(cè)方法和步驟3、試劑使用方法和保存4、儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)5、實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量控制要求及程序6、結(jié)果解釋與報(bào)告7、保密程序8、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存9、不確定樣本的追蹤和處理10、實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)及實(shí)驗(yàn)室的的清理和消毒11、職業(yè)暴漏SOP通常包括以下內(nèi)容（1）標(biāo)題和編號(hào)（2）編寫和修改日期（3）編寫和修訂人員姓名（4）方法、目的和應(yīng)用范圍（5）相應(yīng)的職業(yè)規(guī)范（6）檢測(cè)設(shè)備和試劑（7）安全防護(hù)相關(guān)步驟（8）結(jié)果的解釋和報(bào)告（9）附錄（包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說(shuō)明書等。）

寫你所做的做你所寫的2、實(shí)驗(yàn)原始記錄表

應(yīng)按實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)計(jì)操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、外部對(duì)照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員加樣。要注明試劑廠家、測(cè)定方法、批號(hào)、有效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測(cè)日期。

ELISA原始記錄快速原始記錄表實(shí)驗(yàn)室樣本交接記錄08高壓滅菌器.實(shí)驗(yàn)室所有設(shè)備的使用記錄和維護(hù)記錄

3、結(jié)果報(bào)告分析結(jié)果及發(fā)出檢測(cè)報(bào)告前，應(yīng)注意須在試劑盒及外部質(zhì)控結(jié)果滿足要求的前提下，對(duì)樣品進(jìn)行分析。試劑盒及外部質(zhì)控不合格，樣品需要重新檢測(cè)復(fù)核人對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)復(fù)核并對(duì)結(jié)果提出結(jié)論簽發(fā)人對(duì)試驗(yàn)結(jié)論進(jìn)行審核、分析、總結(jié)、簽字4、樣品登記和保存

收到樣品后，建立唯一編碼，及時(shí)登記有關(guān)信息，包括受檢者姓名或代號(hào)、試管編號(hào)、性別、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢測(cè)結(jié)果、送檢日期、報(bào)告日期、通訊地址5、文件存檔

實(shí)驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、膜反應(yīng)條帶或其照片、檢測(cè)記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存10年以上。最好同時(shí)使用計(jì)算機(jī)保存各種文件和記錄。

二、質(zhì)量控制(QC)p15

質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一步實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的即時(shí)性評(píng)價(jià)，通過(guò)對(duì)質(zhì)控結(jié)果的連續(xù)觀察，監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的精密性。

（一）抗體檢測(cè)的統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制

在所有實(shí)驗(yàn)中必須包含有試劑盒內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清和室內(nèi)質(zhì)控品（外部對(duì)照質(zhì)控血清）。1、試劑盒內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控品即為試劑盒內(nèi)提供的陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清。試劑盒內(nèi)部對(duì)照用于判斷每次實(shí)驗(yàn)的有效性，但不能做為室內(nèi)質(zhì)控品使用。內(nèi)部對(duì)照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。每一次檢測(cè)必須使用內(nèi)部對(duì)照，而且只能在同批號(hào)的試劑盒中使用。內(nèi)部對(duì)照結(jié)果無(wú)效必須重新實(shí)驗(yàn)。

2、室內(nèi)質(zhì)控品（外部對(duì)照）為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品，是為了監(jiān)控檢測(cè)的重復(fù)性而設(shè)置的，包括強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性質(zhì)控血清。也可以只設(shè)置一個(gè)弱陽(yáng)性質(zhì)控，以該試劑盒臨界值（cutoff）的2-3倍為宜。外部質(zhì)控品的作用是，判斷該批臨床樣本檢測(cè)的有效性，因此，每次實(shí)驗(yàn)必須包含室內(nèi)質(zhì)控品，其結(jié)果無(wú)效，必須重新實(shí)驗(yàn)。室內(nèi)質(zhì)控品可以是商品或?qū)嶒?yàn)室自行制備室內(nèi)質(zhì)控品的保存

（1）按一周實(shí)驗(yàn)用量分裝、分類、標(biāo)記、封口、-20℃凍存。

（2）外部對(duì)照血清不可反復(fù)凍融，一旦融化后應(yīng)該存放2-8℃，一周內(nèi)使用。3、室內(nèi)質(zhì)控品的使用每一次實(shí)驗(yàn)必須使用室內(nèi)質(zhì)控品，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。同時(shí)可以了解各批試劑盒的批間差異或孔間差異，繪制質(zhì)量控制圖。

統(tǒng)計(jì)室內(nèi)質(zhì)控的主要方法----