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文檔簡介
一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)并掌握簡單染色和革蘭氏染色的原理及步驟。2、學(xué)習(xí)微生物涂片、染色技術(shù)和無菌操作。3、鞏固顯微鏡油鏡的使用技術(shù)。實驗二細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法二、實驗原理1、細菌的簡單染色原理①細菌菌體微小而透明,在普通光學(xué)顯微鏡下不易識別,必須通過染色來增加菌體的顯示力,從而更清楚地觀察到其形態(tài)和結(jié)構(gòu)。②在堿性、中性或弱酸性溶液中,細菌菌體通常帶負電荷,而堿性染料在電離時,其分子的染色部分帶正電荷(酸性染料的染色部分帶負電荷),因此,堿性染料很容易與菌體結(jié)合而是菌體著色。2、細菌革蘭氏染色的原理G+菌和G-菌的細胞壁結(jié)構(gòu)和組成有較大的區(qū)別。G+菌細胞壁中肽聚糖層厚且交聯(lián)度高,類脂質(zhì)含量少,經(jīng)脫色劑處理后反而使肽聚糖層的孔徑縮小,通透性降低,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被滯留在細胞內(nèi),因此細菌仍保留初染時的顏色,經(jīng)番紅復(fù)染后呈藍紫色。G-菌細胞壁的外膜層富含類脂,而且其肽聚糖層次薄、交聯(lián)度低;乙醇脫色時,細胞壁因類脂被溶解而出現(xiàn)較大縫隙,使得菌體內(nèi)的結(jié)晶紫-碘復(fù)合物較易滲出,而使
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