含氮類藥物分析（藥物分析技術(shù)課件）

芳胺類藥物分析全章概述

目錄01芳香胺的類型02芳胺類藥物的分類氨基直接與苯環(huán)相連。如：對氨基苯甲酸酯類、酰胺類等芳胺類藥物分析全章概述芳香胺的類型芳胺類藥物氨基在烴基側(cè)鏈上。如:苯乙胺類芳烴胺類藥物結(jié)構(gòu)芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類對氨基苯甲酸酯類代表藥物鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因化學(xué)性質(zhì)芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類對氨基苯甲酸酯類具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測定含量；可與芳醛發(fā)生縮合生成Schiff堿；易氧化變色。01酯鍵易水解02具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進行鑒別或非水堿量法測定含量。03游離堿易溶于有機溶劑，其鹽可溶于水。04結(jié)構(gòu)：苯胺的?；苌?，其共性是具有芳酰氨基酰胺基鄰位或?qū)ξ挥腥〈?。芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類酰胺類代表藥物醋氨苯砜對乙酰氨基酚（撲熱息痛）鹽酸利多卡因化學(xué)性質(zhì)芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類酰胺類水解后顯芳伯胺特性共性—具有芳酰胺結(jié)構(gòu)，水解成芳伯氨基，發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)。01水解產(chǎn)物易酯化對乙酰氨基酚和醋氨苯砜,水解后產(chǎn)生醋酸,可在硫酸介質(zhì)中與乙醇反應(yīng),發(fā)出醋酸乙酯的香味。02酚羥基的特性(與FeCl3反應(yīng))：具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基（對乙酰氨基酚），可與FeCl3作用呈色。03堿性：利多卡因、布比卡因側(cè)鏈中具有叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑反應(yīng)進行鑒別或非水堿量法測定含量。04化學(xué)性質(zhì)芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類酰胺類與重金屬離子反應(yīng)05與銅離子的反應(yīng)與鈷鹽反應(yīng)結(jié)構(gòu)：具有脂烴胺側(cè)鏈，屬于芳烴胺類藥物。多數(shù)在苯環(huán)上有1~2個羥基取代基。芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類苯乙胺類代表藥物化學(xué)性質(zhì)芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類苯乙胺類易被氧化：鄰苯二酚或苯酚結(jié)構(gòu)，易被氧化呈色，在堿性溶液中更易變色，可與重金屬離子絡(luò)合呈色。01顯堿性：具有烴胺側(cè)鏈，其氮為仲胺氮，顯弱堿性，能與酸成鹽。（3）酚羥基的特性(與FeCl3反應(yīng))：具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基（對乙酰氨基酚），可與FeCl3作用呈色。02具有旋光性：具有手性碳原子,具有光學(xué)活性，可利用此性質(zhì)進行質(zhì)量分析。03化學(xué)性質(zhì)芳胺類藥物分析全章概述芳胺類藥物的分類苯乙胺類溶解性：游離堿難溶于水，易溶于有機溶劑，其鹽可溶于水。04取代基：具芳伯氨基的鹽酸克侖特羅可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測定含量。05小結(jié)01芳香胺的分類0203芳香胺類藥物的分類芳香胺藥物的性質(zhì)撲熱息痛為什么可以和三氯化鐵發(fā)生顯色反應(yīng)？思考題芳香第一胺反映目錄01芳香第一胺的反應(yīng)02亞硝酸鈉滴定法影響因素01芳香第一胺反應(yīng)重氮化偶合反應(yīng)0101芳香第一胺反應(yīng)重氮化反應(yīng)在酸性條件下與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽。重氮鹽在堿性條件下，與β-萘酚發(fā)生偶合反應(yīng)，生成橙黃到猩紅色沉淀。偶合反應(yīng)01芳香第一胺反應(yīng)苯佐卡因、鹽酸普魯卡因ChP（2005）的鑒別案例取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，生成橙黃到猩紅色沉淀。02與芳醛的縮合反應(yīng)01芳香第一胺反應(yīng)反應(yīng)原理01芳香第一胺反應(yīng)原理亞硝酸鈉滴定法的原理及影響因素02具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應(yīng)生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計算出含量。亞硝酸鈉滴定法的原理及影響因素02具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定。01具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解；02芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測定。03第一步反應(yīng)速度比較慢，而后兩步反應(yīng)速度則比較快，所以整個反應(yīng)速度取決于第一步。亞硝酸鈉滴定法的原理及影響因素02影響因素加入適量KBr加速反應(yīng)：KBr為催化劑，在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機理如下02亞硝酸鈉滴定法的原理及影響因素加入過量的鹽酸（1:2.5～6）01重氮化反應(yīng)速度加快；02重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；03防止生成偶氮氨基化合物，而影響測定結(jié)果。02亞硝酸鈉滴定法的原理及影響因素滴定管尖端插入液面下2/3處，一次將大部分滴定液放下，近終點時方改為慢速滴定。03滴定速度：先快后慢02室溫條件下滴定（10～30℃）0103小結(jié)01芳香第一胺的反應(yīng)及鑒別0203亞硝酸鈉滴定法原理亞硝酸鈉滴定法影響因素磺胺甲惡唑?qū)儆诜枷愕谝话奉愃幬?，可以采用何種方法鑒別該藥物？04思考題異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)異煙肼：異煙肼基團的酰肼基具有還原性，可以將氧化性物質(zhì)還原，比如將Ag+還原為Ag單質(zhì)，可以作為異煙肼的鑒別實驗，同時，酰肼基也可以與含羰基（如芳醛）的試劑發(fā)生縮合反應(yīng)形成類似腙的化合物，而腙通常有固定的晶型和熔沸點，易于分離鑒別。異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)外消法異煙肼含量測定方法的依據(jù)是：異煙肼中酰肼基具有還原性，可采用氧化還原滴定法測定其含量，溴酸鉀法、碘量法、溴量法最為常用。中國藥典（1963年版）曾采用溴量法測定異煙肼的含量。我國藥典自1977年版改為在強酸性溶液中用溴酸鉀滴定液直接滴定法，用甲基橙指示劑（小于3.1紅色，3.1~4.4橙色，大于4.4黃色）指示終點；同時采用本法測定異煙肼片和注射劑的含量。異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)異煙肼的結(jié)構(gòu)還原反應(yīng)：酰肼基縮合反應(yīng)：酰肼基異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)溴酸鉀的測定原理異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)測定方法取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當(dāng)于異煙肼0.2g），置100mL量瓶中，加水適量，振搖使異煙肼溶解并稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過；01精密量取續(xù)濾液25mL，加水50mL，鹽酸20mL與甲基橙指示液1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）緩緩滴定（溫度保持在18~25℃）至粉紅色消失。01每1mL溴酸鉀試液相當(dāng)于3.429mg異煙肼。01異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)異煙肼標(biāo)示量的計算異煙肼的含量測定（溴酸鉀法)測定過程中的注意事項指示劑褪色是不可逆的，滴定過程中必須充分振搖，以免滴定劑局部過濃而引起指示劑提前褪色，可補加1滴指示劑以驗證終點是否真正達到。01過濾前必須充分振搖，使異煙肼完全溶解。01過濾用漏斗、燒杯必須干燥，棄去初濾液。01小結(jié)01氧化還原滴定法02溴酸鉀法測定異煙肼的含量異煙肼的主要結(jié)構(gòu)，及其適應(yīng)癥是什么？思考題異煙肼中特殊雜質(zhì)檢查（TLC法）異煙肼中特殊雜質(zhì)檢查（TLC法）而肼又是一種誘變劑和致癌物質(zhì)，因此國內(nèi)外藥典多數(shù)規(guī)定了異煙肼原料藥及其制劑中游離肼的限量檢查。常用的方法有薄層色譜法，比濁法和差示分光光度法。

異煙肼不穩(wěn)定，受光、重金屬、溫度、pH等因素的影響，其中的游離肼是由制備時原料引入，或在貯存過程中降解而產(chǎn)生。異煙肼中特殊雜質(zhì)檢查（TLC法）由于樣品中各個組分對吸附劑的吸附能力和在展開劑中的溶解度不同，當(dāng)展開劑流經(jīng)吸附劑時，發(fā)生無數(shù)次吸附和解吸過程，吸附力弱的組分隨流動相向前移動快，吸附力強的組分滯留在后。經(jīng)過一段時間展開后，吸附能力不同的組分會彼此分離。如組分為無色物質(zhì)，可用物理或化學(xué)方法顯色定位。各組分斑點移動的速率可用比移值Rf表示。薄層色譜,也叫薄層層析法，它是一種快速、簡便和應(yīng)用廣泛的層析方法。薄層色譜法是把吸附劑(固定相)均勻的涂鋪在表面光潔的玻璃板(稱薄層板)上，把待分析樣品滴加在薄層板的一端，放在密閉的容器中用合適的展開劑（流動相展開）。薄層色譜法Rf=原點中心至斑點中心的距離/原點中心至溶劑前沿的距離異煙肼中特殊雜質(zhì)檢查（TLC法）Rf的計算薄層色譜法

《中國藥典》對異煙肼及異煙肼片中游離肼的檢查方法采用薄層色譜法，利用薄層色譜法分離肼后，以對-二甲氨基苯甲醛與肼反應(yīng)生成腙顯色，進行比較。異煙肼中特殊雜質(zhì)檢查（TLC法）異煙肼雜質(zhì)測定的原理異煙肼中特殊雜質(zhì)檢查（TLC法）試液的制備

供試品溶液（異煙肼）：取本品細粉適量，加丙酮-水（1:1）使異煙肼溶解并稀釋制成每1mL中含異煙肼100mg的溶液，濾過，作為供試品溶液（100mg/mL）01

對照品溶液（硫酸肼）：另取硫酸肼對照品，加丙酮-水（1:1）制成每1mL中含0.08mg（相當(dāng)于游離肼20μg）的溶液，作為對照品溶液（0.08mg/mL=游離肼20ug）02

系統(tǒng)適用性試液溶液（供試品+對照品）：取異煙肼與硫酸肼各適量，加丙酮-水（1:1）溶解并稀釋制成每1mL中含異煙肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合溶液，濾過，作為系統(tǒng)適用性試驗溶液。03異煙肼中特殊雜質(zhì)檢查（TLC法）測定方法

吸取上述三種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇-丙酮（3:2）為展開劑，展開，晾干，噴以乙