第05章 臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)儀器

第五章

臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)儀器

臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器是臨床實(shí)驗(yàn)室最常用最基本的的分析儀器，包括：血細(xì)胞分析儀血液凝固分析儀第五章臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器第一節(jié)血細(xì)胞分析儀教學(xué)要求掌握血細(xì)胞分析儀的概念、庫(kù)爾特原理、儀器的基本結(jié)構(gòu)。熟悉聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀器的檢測(cè)原理，網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理，血紅蛋白檢測(cè)原理、儀器性能評(píng)價(jià)和維護(hù)。了解血細(xì)胞分析儀的分類(lèi)、性能指標(biāo)、常見(jiàn)故障和排除及進(jìn)展。第一節(jié)血細(xì)胞分析儀學(xué)習(xí)內(nèi)容一、血細(xì)胞分析儀的分型二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)及常見(jiàn)故障六、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展思考題一、血細(xì)胞分析儀的分型血細(xì)胞分析儀(Bloodcellanalyzer,BCA)是指對(duì)一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞異質(zhì)性進(jìn)行自動(dòng)分析的臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器。又稱(chēng)血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀(ABCC)、血液學(xué)自動(dòng)分析儀(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA，AHA外延過(guò)大。一、血細(xì)胞分析儀的分型

血細(xì)胞分析儀分型按自動(dòng)化程度按檢測(cè)原理按對(duì)白細(xì)胞的分類(lèi)水平二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理（一）血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理

請(qǐng)記住哦！庫(kù)爾特（電阻抗）血細(xì)胞檢測(cè)原理二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理（2）紅細(xì)胞和血小板檢測(cè)的直方圖二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理2.聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀檢測(cè)原理

二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理

二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理體積(volume，V)電阻抗原理測(cè)定細(xì)胞體積和數(shù)量電導(dǎo)性(conductivity，C)高頻電磁探針，測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例光散射(scatter，S)細(xì)胞內(nèi)粗顆粒的光散射強(qiáng)度要比細(xì)顆粒更強(qiáng)二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理（3）光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)原理

這類(lèi)儀器是應(yīng)用激光散射與細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)。二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理高角度前向散射光：細(xì)胞核及顆粒的信息低角度前向散射光：細(xì)胞大小的信息結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理（4）電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)原理

這類(lèi)儀器是利用電阻抗、射頻這一成熟細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)結(jié)合細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，通過(guò)4個(gè)不同的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)白細(xì)胞、幼稚細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)和計(jì)數(shù)。二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理

白細(xì)胞分類(lèi)散射圖

聯(lián)合使用多項(xiàng)技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細(xì)胞化學(xué)染色)同時(shí)分析一個(gè)細(xì)胞，綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從而得出較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞“五分類(lèi)”結(jié)果。二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理（5）網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理網(wǎng)織紅細(xì)胞中嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合熒光強(qiáng)度與RNA含量成正比用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞大小和

RNA含量及血紅蛋白的含量二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理網(wǎng)織紅細(xì)胞等與試劑反應(yīng)前后的變化反應(yīng)前反應(yīng)后二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理熒光(RNA)強(qiáng)度ReticulocytesPLTRBC高熒光強(qiáng)度低熒光強(qiáng)度中熒光強(qiáng)度WBC前向散射光(細(xì)胞大小)血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度分類(lèi)二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理3.干式離心分層型血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理將血液充入到含特殊試劑（抗凝劑、熒光染料）的毛細(xì)管內(nèi)專(zhuān)用離心機(jī)上離心，儀器根據(jù)血中各種血細(xì)胞成份的比重不同分層亦不同的原理，血細(xì)胞被吖啶橙染色后，各層細(xì)胞會(huì)有明顯的顏色差異，然后將毛細(xì)管放在特殊的判讀機(jī)上對(duì)不同細(xì)胞層進(jìn)行比對(duì)定量分析計(jì)算機(jī)綜合信息處理，得到紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板、血紅蛋白等參數(shù)。二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理（二）血細(xì)胞分析儀的血紅蛋白測(cè)定原理

除干式、無(wú)創(chuàng)型外，各型BCA對(duì)血紅蛋白測(cè)定都采用光電比色原理血細(xì)胞懸液中加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血?jiǎng)┲杏嘘P(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進(jìn)入血紅蛋白測(cè)試系統(tǒng)特定波長(zhǎng)(530～550nm)下進(jìn)行光電比色二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理

基本結(jié)構(gòu)機(jī)械系統(tǒng)電學(xué)系統(tǒng)血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)

1.機(jī)械系統(tǒng)包括機(jī)械裝置（如全自動(dòng)有進(jìn)樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等）和真空泵，以完成樣本的定量吸取、稀釋、傳送、混勻，以及將樣本移入各種參數(shù)的檢測(cè)區(qū)三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)2.電學(xué)系統(tǒng)包括主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動(dòng)真空泵電子控制系統(tǒng)，以及儀器的自動(dòng)監(jiān)控、故障報(bào)警和排除等

三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)3.血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)國(guó)內(nèi)常用的血細(xì)胞分析儀，使用的檢測(cè)技術(shù)可分為電阻抗檢測(cè)技術(shù)和光散射檢測(cè)技術(shù)兩大類(lèi)三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)電阻抗檢測(cè)技術(shù)：由檢測(cè)器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)和自動(dòng)補(bǔ)償裝置組成流式光散射檢測(cè)技術(shù)：由激光光源、檢測(cè)裝置和檢測(cè)器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)和自動(dòng)補(bǔ)償裝置組成三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)

4.血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)由光源、透鏡、濾光片、流動(dòng)比色池和光電傳感器等組成。

5.計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)

三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)（一）儀器的性能指標(biāo)

1.測(cè)試參數(shù)

2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析

3.測(cè)試速度

4.樣本量

5.工作條件與基本功能

6.技術(shù)要求

（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)ICSH公布了電子血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)方案：在細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定方面，要評(píng)價(jià)儀器測(cè)試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準(zhǔn)確性等四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)

1.精密度

2.攜帶污染率

3.總重復(fù)性

4.線性范圍

5.標(biāo)本老化

6.抗干擾性

7.白細(xì)胞分類(lèi)的鑒定（三）血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)

出廠前已經(jīng)過(guò)廠方技術(shù)鑒定合格，但由于運(yùn)輸振動(dòng)或因故障維修后或長(zhǎng)時(shí)間停用后再啟用等原因，以及正常使用半年以上或認(rèn)為有必要時(shí)，都必須對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)校及性能測(cè)試，這對(duì)了解儀器性能，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，確保檢驗(yàn)質(zhì)量有重要意義四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除

（一）儀器的維護(hù)血細(xì)胞分析儀屬高精密儀器，應(yīng)有專(zhuān)人負(fù)責(zé)，按儀器廠家的的要求進(jìn)行日保養(yǎng)、周保養(yǎng)、月保養(yǎng)及年終的大保養(yǎng)，并建立儀器保養(yǎng)和維修檔案。同時(shí)要做好：檢測(cè)器、液路和機(jī)械傳動(dòng)部分的維護(hù)（二）儀器的維護(hù)

1.檢測(cè)器的維護(hù)

①采血順利

②防止纖維絲堵孔

③關(guān)機(jī)前對(duì)檢測(cè)器的微孔進(jìn)行清理沖洗

④計(jì)數(shù)期間，及時(shí)按“反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)

⑤定期卸下檢測(cè)器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗

五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除檢測(cè)器

2.液路的維護(hù)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除3.機(jī)械傳動(dòng)部位的維護(hù)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除（三）常見(jiàn)故障排除有自我診斷功能，有故障發(fā)生時(shí)，內(nèi)置電腦的錯(cuò)誤檢查功能顯示出“錯(cuò)誤信息”，并伴有報(bào)警聲五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除1.開(kāi)機(jī)時(shí)的常見(jiàn)故障2.測(cè)試過(guò)程中常見(jiàn)的錯(cuò)誤信息其中檢測(cè)器的微孔堵塞是影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性最常見(jiàn)的原因。根據(jù)微孔堵塞的程度，將其分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除（三）常見(jiàn)故障排除六、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展儀器測(cè)試原理的不斷創(chuàng)新白細(xì)胞分類(lèi)的改進(jìn)紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)原理的改進(jìn)新血細(xì)胞分析參數(shù)的出現(xiàn)各種特殊技術(shù)的應(yīng)用儀器自動(dòng)化水平的提高無(wú)創(chuàng)血液分析儀的上市紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)原理的改進(jìn)二維激光散射法測(cè)定紅細(xì)胞和血小板

克服了電阻抗法在病理情況下測(cè)定MCH、MCHC結(jié)果不準(zhǔn)及血小板計(jì)數(shù)精確性較差的缺點(diǎn)

六、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展思考題1.BCA的概念及功能是什么？2.簡(jiǎn)述電阻抗血細(xì)胞檢測(cè)原理。3.簡(jiǎn)述聯(lián)合檢測(cè)型BCA白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的實(shí)質(zhì)和共有特點(diǎn)4.簡(jiǎn)述BCA網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理。5.如何對(duì)BCA進(jìn)行分類(lèi)？半自動(dòng)與全自動(dòng)BCA的主要區(qū)別？6.如何對(duì)BCA進(jìn)行評(píng)價(jià)？7.電阻抗型BCA和聯(lián)合檢測(cè)型BCA的基本結(jié)構(gòu)？8.BCA的進(jìn)展表現(xiàn)在哪幾個(gè)方面？9.BCA常見(jiàn)的堵孔原因有哪些？如何處理？10.BCA保證血小板準(zhǔn)確計(jì)數(shù)的技術(shù)有哪些？

第二節(jié)血液凝固分析儀教學(xué)要求掌握血凝儀的檢測(cè)原理和基本結(jié)構(gòu)熟悉半自動(dòng)、全自動(dòng)血凝儀的特點(diǎn)，血凝儀的性能評(píng)價(jià)以及各種檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)了解血凝儀的分類(lèi)、臨床應(yīng)用、儀器的維護(hù)

請(qǐng)記住哦！學(xué)習(xí)內(nèi)容一、概述一、血凝儀的分型二、血凝儀的檢測(cè)原理三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)四、血凝儀的性能評(píng)價(jià)五、血凝儀的維護(hù)六、血凝儀的臨床應(yīng)用●思考題一、概述血液凝固分析儀（automatedcoayulationanalyzer,ACA）是采用一定分析技術(shù)，對(duì)血栓與出血有關(guān)成分自動(dòng)檢測(cè)的臨床常規(guī)檢驗(yàn)儀器在血栓/出血實(shí)驗(yàn)室中最基本的設(shè)備就是血液凝固分析儀（簡(jiǎn)稱(chēng)血凝儀）發(fā)展史1910年，Kottman發(fā)明了最早的血凝儀1950年，Schnitger和Gross發(fā)明了基于電流法的血凝儀20世紀(jì)70年代前為血凝儀的初級(jí)階段一、概述20世紀(jì)70年代，較精確的各種自動(dòng)血凝儀先后問(wèn)世。其特點(diǎn)是，單通道、終點(diǎn)法的半自動(dòng)血凝儀，也稱(chēng)第一代產(chǎn)品20世紀(jì)80年代末，多通道、多方法與原理的半自動(dòng)血凝儀相繼誕生，稱(chēng)之為第二代產(chǎn)品各代血凝儀的特點(diǎn)一、概述20世紀(jì)90年代以來(lái)，多通道、多方法、多功能全自動(dòng)（即第三代）血凝儀不斷涌現(xiàn)一、概述二、血凝儀的分型及特點(diǎn)（一）血凝儀分型按自動(dòng)化程度半自動(dòng)血凝儀全自動(dòng)血凝儀全自動(dòng)血凝工作站三者有何區(qū)別？三、血凝儀的檢測(cè)原理血凝儀檢測(cè)原理主要檢測(cè)方法：凝固法、底物顯色法、免疫學(xué)法、干化學(xué)法等。

彼此有何不同？三、血凝儀的檢測(cè)原理

血凝儀檢驗(yàn)技術(shù)原理（二）底物顯色法生物化學(xué)法以底物釋放產(chǎn)色基團(tuán)量