第10章 遺傳重組和轉(zhuǎn)座子

10.遺傳重組和轉(zhuǎn)座10.1遺傳重組的類型10.2同源重組10.3位點(diǎn)專一性重組10.4異常重組——轉(zhuǎn)座10.遺傳重組和轉(zhuǎn)座概述：?只要有DNA，就會(huì)發(fā)生重組減數(shù)分裂高等真核體細(xì)胞核基因、葉綠體和線粒體溫和噬菌體轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座?生存→變異(突變+重組)→損傷修復(fù)→適應(yīng)環(huán)境→加速進(jìn)化?廣義遺傳重組：任何造成基因型變化的基因交流過(guò)程?狹義遺傳重組：涉及到DNA分子內(nèi)斷裂-復(fù)合的基因交流過(guò)程

重組類型

DNA序列

蛋白因子/酶同源重組

需長(zhǎng)同源

重組酶（Rec

ABCD）

普遍重組位點(diǎn)特異重組

需短同源

位點(diǎn)專一性蛋白

整合重組

整合酶，切離酶異常重組/轉(zhuǎn)座

不需

轉(zhuǎn)座酶

復(fù)制性重組狹義遺傳重組：涉及到DNA分子內(nèi)斷裂-復(fù)合的基因交流遺傳重組與重組DNA技術(shù)同源重組的特征：涉及同源序列間的聯(lián)會(huì)，且交換的片段較大；涉及DNA分子在特定的交換位點(diǎn)發(fā)生斷裂-錯(cuò)接的過(guò)程——異源雙鏈區(qū)的生成；存在重組熱點(diǎn)；需要重組酶；單鏈DNA分子或單鏈DNA末端是交換發(fā)生的重要信號(hào)10.2同源重組（homologousrecombination）細(xì)線期合線期粗線期雙線期終變期?e.g.

真核細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)染色單體間交換；

細(xì)菌的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合；病毒/噬菌體重組（單向重組）Mitchell：+pdxpxpdx+

孢子對(duì)子囊1234（1）+

pdxppdx++

+pdx

+（2）+

+pdx++

pdxp+

pdxp（3）+pdxp+

+pdx

++

+（4）pdx

++pdxppdx

+pdx

+脈孢霉pdxp：酸度敏感的VB6依賴型

pdx：酸度不敏感的VB6依賴型10.2.1

基因轉(zhuǎn)變

1930年,Ｈ.Winkler把不規(guī)則分離的現(xiàn)象解釋為減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體聯(lián)會(huì)時(shí)一個(gè)基因轉(zhuǎn)變?yōu)槠涞任换颉蜣D(zhuǎn)變（geneconversion)

。AAAAaaaa糞生糞殼菌(Olive):

G

A×g

a

GA非重組孢子對(duì)GagaGAgAga非重組孢子對(duì)重組孢子對(duì)，一個(gè)孢子基因轉(zhuǎn)變重組孢子對(duì)，一個(gè)孢子基因轉(zhuǎn)變6:2/2:6，5:3/3:5，3:1:1:3

的異常分離比，＜10E-3

Aa以后又發(fā)現(xiàn)一個(gè)基因發(fā)生轉(zhuǎn)變時(shí)它兩旁的基因（側(cè)翼標(biāo)記）常同時(shí)發(fā)生重組，所以認(rèn)為基因轉(zhuǎn)變是某種形式的染色體重組的結(jié)果。例如Ag+×ag-的雜交（Ａａ是一對(duì)關(guān)于接合型的基因）:g+和g-可以發(fā)生轉(zhuǎn)變，而且凡是g+或g-發(fā)生轉(zhuǎn)變都伴隨著Ａ和ｇ之間的重組。由于基因轉(zhuǎn)變常伴隨著重組的發(fā)生，所以基因轉(zhuǎn)變機(jī)制的研究，實(shí)質(zhì)上也是染色體交換機(jī)制的研究。（二）基因轉(zhuǎn)變的類型染色單體轉(zhuǎn)變：2:6或6:2分離比

減數(shù)分裂4個(gè)產(chǎn)物中，1個(gè)出現(xiàn)基因轉(zhuǎn)變

半染色單體轉(zhuǎn)變：5:3；3:1:1:3

減數(shù)分裂4個(gè)產(chǎn)物中，1個(gè)或2個(gè)的一半出現(xiàn)基因轉(zhuǎn)變

減數(shù)分裂后分離：等位基因的分離發(fā)生在減數(shù)分裂后的有絲分裂中（三）基因轉(zhuǎn)變的分子機(jī)制A都不校正B僅一鏈校正C兩鏈同向校正D各自校正

3113

53/35

62/26

44根據(jù)切除修復(fù)原理，基因轉(zhuǎn)變的幾種類型產(chǎn)生的分子機(jī)制可以歸納如下（圖10-6）。1．兩個(gè)雜種分子均未校正（圖10-6A）復(fù)制后出現(xiàn)異常的4＋∶4g（或3∶1∶1∶3）的分離；2．一個(gè)雜種分子校正為+，或校正為g時(shí)，則發(fā)生另一種類型的半染色單體轉(zhuǎn)變，前者修復(fù)后出現(xiàn)5∶3的分離，后者子囊孢子的異常分離比為3∶5（圖10-6B）；（三）基因轉(zhuǎn)變的分子機(jī)制3．兩個(gè)雜種分子都被校正到+（或g）時(shí)（圖10-6C），修復(fù)后出現(xiàn)6＋∶2g（或2＋∶6g）的異常分離，這便是出現(xiàn)染色單體轉(zhuǎn)變的起因；4．當(dāng)兩個(gè)雜種分子都按原來(lái)兩個(gè)親本的遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行修復(fù)時(shí)，則減數(shù)分裂4個(gè)產(chǎn)物恢復(fù)成G-C、G-C、A-T、A-T的正常配對(duì)狀態(tài)，子囊孢子分離正常，呈現(xiàn)4＋∶4g的結(jié)果，如圖10-6D所示。（三）基因轉(zhuǎn)變的分子機(jī)制（三）基因轉(zhuǎn)變的分子機(jī)制

基因轉(zhuǎn)變的實(shí)質(zhì)：重組過(guò)程中留下的局部異源雙鏈區(qū)，在細(xì)胞內(nèi)的修復(fù)系統(tǒng)識(shí)別下，不同的切除/修復(fù)方式產(chǎn)生不同的結(jié)果。10.2.2同源重組的分子機(jī)制一.交叉理論（chiasmatatypehypothesis） Janssens,1909二.斷裂和重接模型(Darlington,1937)三.模板選擇學(xué)說(shuō)（copychoice）

BellingJ.首提、1933撤回;Hershey,1948四.Holliday模型(R.Holliday1964)減數(shù)分裂中的同源配對(duì)-片段互換-基因重組同源染色體配對(duì)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)——聯(lián)會(huì)復(fù)合體；同源重組——非姐妹單體的片段交換。PrVgPrVgPrVgPrVgPrVg+PrVg+

Pr+Vg+

Pr+VgPr+VgPr+Vg+Pr+Vg+Pr+Vg+減數(shù)分裂中”染色體交叉/換=同源重組”

斷裂重接模型

不能解釋基因轉(zhuǎn)變和極化子現(xiàn)象.

極化子（polaron）:

指同一基因內(nèi)部的各個(gè)突變位點(diǎn)的轉(zhuǎn)變頻率常從基因的一端向另一端逐步遞減，具有這種現(xiàn)象的一段DNA稱為極化子。一個(gè)極化子相當(dāng)于一個(gè)基因.模板選擇復(fù)制模型

①不符合半保留復(fù)制;②DNA復(fù)制應(yīng)在S期,重組應(yīng)在偶線期，不應(yīng)同時(shí)發(fā)生。③不能解釋3線和4線交換。任何基因重組的模型都必須解釋異源雙鏈的形成以及基因轉(zhuǎn)變往往伴隨著兩側(cè)基因重組這一現(xiàn)象。1964年美國(guó)學(xué)者RobinHolliday提出了著名的Holliday模型.在Holliday模型中,極化子是由于交換產(chǎn)生的錯(cuò)配只發(fā)生在異源雙鏈部分，而此部分只發(fā)生在Holliday結(jié)構(gòu)的斷裂和分枝點(diǎn)之間，離斷裂點(diǎn)越遠(yuǎn)的基因離分枝點(diǎn)可能也越遠(yuǎn)，因而不在異源雙鏈的部分。同源重組的Holliday模型RobinHolliday于1964年提出了重組的雜合DNA模型，又稱Holliday模型，對(duì)重組過(guò)程的解釋如下：A:同源的非姐妹染色單體聯(lián)會(huì)；B：同源非姐妹染色單體DNA中兩條方向相同的單鏈在DNA內(nèi)切酶的作用下，在相同位置同時(shí)切開；C：切開的單鏈交換重接;D：形成交聯(lián)橋結(jié)構(gòu)；同源區(qū)-配對(duì)/聯(lián)會(huì)-切-換-接-移-轉(zhuǎn)-切-接=重組E：交聯(lián)橋沿配對(duì)DNA分子“移動(dòng)”。兩個(gè)親本DNA分子間造成一大段異源雙鏈DNA（Holliday結(jié)構(gòu)）F：E和F相同；G：繞交聯(lián)橋旋轉(zhuǎn)1800；J：形成Holliday異構(gòu)體；I、通過(guò)兩種方式之一切斷DNA單鏈，若左右切，則形成非重組體，若上下切則形成重組體。由上可知：無(wú)論Holliday結(jié)構(gòu)斷裂是否導(dǎo)致旁側(cè)遺傳標(biāo)記的重組，他們都含有一個(gè)異源雙鏈DNA區(qū)。同源區(qū)-配對(duì)/聯(lián)會(huì)-切-換-接-移-轉(zhuǎn)-切-接=重組Holliday模型(RobinHolliday1964)：同源區(qū)-配對(duì)/聯(lián)會(huì)-切-換-接-移-轉(zhuǎn)-切-接=重組2、分枝遷移和Holliday結(jié)構(gòu)的拆分?分枝遷移（branchmigaration）－－雙螺旋形成的交叉連接以拉鏈?zhǔn)叫?yīng)擴(kuò)散Holliday結(jié)構(gòu)的異構(gòu)化產(chǎn)生重組體的拆分Holliday結(jié)構(gòu)一經(jīng)生成即可不斷地處于異構(gòu)化－－異源雙鏈

heteroduplexDNA重組結(jié)果取決于拆分時(shí)配對(duì)鏈上的切口位置Holliday模型中的雜合雙鏈部分必須得到校正。如果在減數(shù)分裂后的有絲分裂DNA合成前得到校正，那么將產(chǎn)生正常的４:４分離或６:２分離（染色單體轉(zhuǎn)變）；如果沒有及時(shí)得到校正而留到下一輪DNA復(fù)制而產(chǎn)生兩個(gè)非雜合的雙鏈，那么將產(chǎn)生５:３或不正常的3:1:1:3分離（半染色單體轉(zhuǎn)變），我們將這種沒有及時(shí)校正而下一輪ＤＮＡ復(fù)制時(shí)才被校正的現(xiàn)象稱為減數(shù)后分離。三、原核同源重組（E.coli）?發(fā)生在雙方DNA的同源區(qū)域

部分復(fù)制的染色體DNA之間或染色體DNA與外源DNA之間細(xì)菌的轉(zhuǎn)化、接合和轉(zhuǎn)導(dǎo)

1、RecBCD（外切核酸酶Ⅴ）和Chi位點(diǎn)?具有解旋酶（再旋）活性、ATPase活性、核酸外切酶活性、

序列特異性的單鏈內(nèi)切酶活性?單鏈內(nèi)切酶活性和解旋酶活性使DNA產(chǎn)生具有游離末端的單鏈－－－RecA的作用位點(diǎn)?RecBCD有固定切割位點(diǎn)3‘?RecBCD的識(shí)別和切割位點(diǎn)a、RecBCD結(jié)合在DNA的平頭末端（產(chǎn)生機(jī)制不清楚）b、外切、解鏈、移動(dòng)（ATP）c、兔耳狀loop結(jié)構(gòu)產(chǎn)生（再旋酶活性低于解旋酶活性）d、RecBCD在loop單鏈區(qū)的

chi位點(diǎn)3‘方4～6NT處切斷單鏈（單鏈內(nèi)切酶）?

chi位點(diǎn)：GCTGGTGG

目前發(fā)現(xiàn)的重組熱點(diǎn)

E.coli

含1000個(gè)、真核e、RecBCD切割產(chǎn)生3’單鏈末端

2、RecA蛋白

（1）

活性a、RecA有單、雙鏈DNA結(jié)合活性b、RecA有NTPase活性（底物差異活性）與單鏈DNA結(jié)合時(shí)活性最大---依賴于DNAc、RecA有啟動(dòng)一個(gè)分子的單鏈侵入到另一雙螺旋分子的能力，即聯(lián)會(huì)同源DNA

（但其靶DNA必須有缺口－－結(jié)合DNA）RecA入侵單鏈被置換連RecA引發(fā)鏈侵入模型RecApromotestheassimilationofinvadingsinglestrandsintoduplexDNAsolongasoneofthereactingstrandshasafreeend.

RecA啟動(dòng)的單鏈入侵RecA引起的鏈交換和Holliday結(jié)構(gòu)的生成

（2）RecA蛋白催化雙鏈和單鏈DNA

的反應(yīng)階段a、聯(lián)會(huì)前階段（緩慢）

RecA與單鏈結(jié)合b、單鏈與雙螺旋的互補(bǔ)鏈迅速配對(duì)，形成雙鏈連接分子

Holliday（5‘侵入）c、從雙螺旋結(jié)構(gòu)中緩慢置換一條鏈產(chǎn)生一段長(zhǎng)的異源雙鏈DNA

反應(yīng)結(jié)束時(shí)，RecA結(jié)合到雙鏈上?其中—單鏈同化有固定的方向入侵單鏈為5’－3‘

雙鏈DNA的互補(bǔ)鏈?zhǔn)?’－5‘?RecBCD和

RecA的共同作用

3、原核同源重組的其它蛋白

需要E.coli中三個(gè)基因ruvA,ruvB和ruvC的產(chǎn)物a、RuvA識(shí)別Holliday結(jié)構(gòu)的連接點(diǎn)b、RuvB為分枝遷移提供動(dòng)力（ATPase10～20bp/s）c、RuvC核酸內(nèi)切酶---專一性識(shí)別Holliday結(jié)構(gòu)的連接點(diǎn)體外切段連接點(diǎn)以拆分重組體?E.coli重組的各階段（損傷修復(fù)）損傷DNA復(fù)制產(chǎn)生缺口RecA鏈交換第二次鏈交換DNApol通過(guò)DNA合成填滿缺口RuvA,B分枝遷移RuvC切割Holliday連接點(diǎn)細(xì)菌的同源重組一、細(xì)菌同源重組的特點(diǎn)細(xì)菌的接合、轉(zhuǎn)化以及轉(zhuǎn)導(dǎo)重組都是同源重組，而且這種重組是發(fā)生在一個(gè)完整的環(huán)狀雙螺旋DNA分子與一個(gè)雙鏈或單鏈DNA分子片段之間的。且重組需要RecA和RecBCD蛋白質(zhì)的參與。

細(xì)菌的轉(zhuǎn)化重組細(xì)菌的接合與轉(zhuǎn)導(dǎo)中的重組機(jī)制接合重組（Hfr與F-之間進(jìn)行）部分DNA進(jìn)入細(xì)胞，且只有其中的部分參與重組，需要RecA和RecBC參與，機(jī)制與轉(zhuǎn)化重組相似;轉(zhuǎn)導(dǎo)重組（phage-DNA與細(xì)菌之間）雙鏈DNA與完整雙鏈DNA之間的重組，供體DNA以雙鏈進(jìn)入受體細(xì)胞，并且以雙鏈形式整合進(jìn)入染色體，需要RecA和RceBC參與。10.3位點(diǎn)專一性重組（

site-specificrecombination）一、位點(diǎn)特異重組（

site-specificrecombination）1、概念：發(fā)生在專一序列的DNA分子間的重組（整合重組）噬菌體基因組整合到細(xì)菌染色體基因組中屬此種重組2、特征：在特定的結(jié)合序列部位，有專一的酶催化斷裂重接

----產(chǎn)生精確的DNA重排都具有整合作用的兩個(gè)基本特征a、典型的保守性重組---交換是相互的且保存原先的DNAb、發(fā)生在噬菌體和細(xì)菌DNA的短而同源的專一序列上真核

中專一性抗體基因的構(gòu)建二、λphage的整合與切除1、實(shí)現(xiàn)機(jī)制：均是通過(guò)

細(xì)菌DNA和λDNA上特定位點(diǎn)之間的重組2、特定位點(diǎn)-----附著位點(diǎn)（attachmentsiteatt）E.coliattB

含BOB’三序列23bp，位于bio和gal基因之間B,B’,P,P’---臂核心序列“O”完全一致

（同源部分）

---位點(diǎn)特異性重組發(fā)生的地方λphage

attP

含POP’三序列

240bp

通過(guò)attP和attB間的相互重組，環(huán)狀的噬菌體DNA轉(zhuǎn)換為整合的原噬菌體，原噬菌體通過(guò)attL和attR間的相互重組而切離3、整合過(guò)程

λ噬菌體：attP

POP’

大腸桿菌：attB/attλBOB’

1.整合：BOB’+POP’

BOP’+POB’

2.切離：BOP’+POB’

BOB+POPIntIHFInt,XisIHF3、整合過(guò)程4、整合分子機(jī)制?核心序列O全長(zhǎng)15bp，富含A-T?發(fā)生在O內(nèi)的重組交換位點(diǎn)相距

7bp?整合酶的結(jié)合位點(diǎn)：attP240bp、attB23bp(兩者的作用不同)?attP位點(diǎn)的負(fù)超螺旋為重組所必須---加強(qiáng)了Int和IHF的親和力

-----高劑量的蛋白維持單鏈重組所必需的結(jié)構(gòu)?Int結(jié)合

----核心序列的反向位點(diǎn)（切割位置）

----結(jié)合在att臂上（臂與核心區(qū)靠近）intIHFXis整合體及其作用整合體（intasome）---Int和IHF結(jié)合到attP時(shí)的復(fù)合物整合體捕獲attB

說(shuō)明-----

a、attB和attP的最初識(shí)別靠Int

識(shí)別兩序列的能力

b、兩序列的同源性在鏈交換時(shí)為重要因素Int蛋白能切斷DNA，并使它重新連接，進(jìn)而使holliday結(jié)構(gòu)拆分重組時(shí)attP和attB部位交叉斷裂，互補(bǔ)單鏈末端進(jìn)行交叉雜交5、整合與切除的控制（1）整合CⅡ---促使阻遏蛋白CⅠ的產(chǎn)生

---與intgene

的PI結(jié)合，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生Int蛋白

---且PI位于xis基因內(nèi)，CⅡ與PI結(jié)合導(dǎo)致xisgene失活（2）切除寄主SOS反應(yīng)時(shí)---RecA大量產(chǎn)生，促使阻遏蛋白CⅠ的水解

---把OL和OR從阻遏狀態(tài)釋放出來(lái)

---從PL轉(zhuǎn)錄使int和xis表達(dá)10.4異常重組—轉(zhuǎn)座轉(zhuǎn)座成分概述1、轉(zhuǎn)座子(元)或轉(zhuǎn)座元件(transposonortransposableelement):基因組中不必借助于同源序列就可自主復(fù)制和移位的基本單位轉(zhuǎn)座（transposition）：由可轉(zhuǎn)座/移位因子介導(dǎo)的DNA重排現(xiàn)象，分復(fù)制轉(zhuǎn)座與非復(fù)制轉(zhuǎn)座兩類。2、發(fā)現(xiàn)和發(fā)展1914A.Emerson1936Marcus.M.Rhoabes

玉米果皮、糊粉層花斑突變

玉米籽粒糊粉層色素不穩(wěn)定遺傳機(jī)理

跳躍基因（jumpinggene）1947冷泉港實(shí)驗(yàn)室（美）BarbaraMcClintockDNAtransposableelement10.4.1

Ac-Ds系統(tǒng)（玉米的轉(zhuǎn)座子）玉米中的控制因子

1938年MarcusRhoades首次發(fā)現(xiàn)不穩(wěn)定突變等位基因（unstablemutantallele），即一種回復(fù)突變率很高的等位基因。不穩(wěn)定是取決于不連鎖的Dt基因的存在。McClintock。1940～1950描述了大量的控制因子A1:控制色素形成Dt:控制產(chǎn)生斑點(diǎn)

MarcusRhoades分析了一種墨西哥玉米的穗，此穗來(lái)自于一種籽粒有顏色的純種自花受粉的玉米，但它在后代中表現(xiàn)出一種意外的雙因子雜種修飾性孟德爾分離比原來(lái)的品系可能為A1A1dtdt，突變后產(chǎn)生A1a1Dtdt的植物，自交產(chǎn)生了上述比例。產(chǎn)生斑點(diǎn)的一種可能是在體細(xì)胞中產(chǎn)生了回復(fù)突變a1→A1,但大量的斑點(diǎn)需要很高頻率的回復(fù)突變。Rhoades能在a1a1Dt_（花斑）特殊無(wú)性種植物的花中找到相應(yīng)的花藥，其花粉應(yīng)攜帶回復(fù)突變產(chǎn)生色素的基因型，而他用這些花粉與a1a1的植株測(cè)交，結(jié)果有的后代完全是有顏色的。表明在親本中每個(gè)斑點(diǎn)實(shí)際上是回復(fù)突變的。

這樣a1成為首次發(fā)現(xiàn)的不穩(wěn)定突變等位基因（unstablemutantallele）的例子。即一種回復(fù)突變率很高的等位基因。然而這種等位基因的不穩(wěn)定是取決于不連鎖的Dt基因的存在。一旦回復(fù)突變發(fā)生，它們就變得穩(wěn)定了；即Dt基因能離開A1基因，這時(shí)A1表型不再改變。這樣a1表型是由一個(gè)缺陷型的轉(zhuǎn)座因子的插入而產(chǎn)生也就順理成章了（缺陷的轉(zhuǎn)座因子自己并不能移動(dòng)）。Dt的缺乏使得表型保持穩(wěn)定。葉片的花斑表型Phoades將基因型a1/a1;Dt/-的玉米發(fā)芽，檢測(cè)它們是否帶有在各組織中產(chǎn)生色素斑的基因玉米籽粒的花斑Ac-Ds系統(tǒng)10.4.2.1基因轉(zhuǎn)座現(xiàn)象的再次發(fā)現(xiàn)與證實(shí)

在一個(gè)操縱子/元中，與操作子毗鄰的結(jié)構(gòu)基因發(fā)生終止突變后，它除了影響該基因本身產(chǎn)物的翻譯外，還影響其后結(jié)構(gòu)基因多肽的翻譯，并且具有極性梯度的特征。

插入型極性突變的發(fā)現(xiàn)與機(jī)理（1967

Shapiro）Operon&PolarityMutation

極性突變的基本概念10.4.2原核生物中的轉(zhuǎn)座子A酶活性

OZ基因終止突變位

點(diǎn)離O的距離

IpoZYA證實(shí)轉(zhuǎn)座因子的實(shí)驗(yàn)(1)密度梯度離心實(shí)驗(yàn):

dgl

m突變體密度大— 可能存在小的插入片段

dgl+/dgl

m

雜合雙鏈DNA的電鏡照片。出現(xiàn)了棒糖狀結(jié)構(gòu)—證實(shí)存在插入序列/轉(zhuǎn)座子(2)分子雜

交實(shí)驗(yàn)

dgal+/dgal

m雜合雙鏈DNA中的

莖環(huán)結(jié)構(gòu)原核生物的轉(zhuǎn)座子種類兩種類型：簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)座子（simpletransposon）（插入序列insertionsequenceIS）復(fù)合轉(zhuǎn)座子（compositetransposon

Tn）共同特征：a）兩端有20～40bp的IRb）具有編碼轉(zhuǎn)座酶（transposase）的基因10.4.2.2

插入序列最簡(jiǎn)單，是細(xì)菌染色體、質(zhì)粒和某些噬菌體的正常組分命名：IS＋編號(hào)（鑒定類型）長(zhǎng)度700～2000bp1）插入序列(IS)IS是最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子，不含有任何宿主基因，它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。λ：：IS1

特點(diǎn)：a）兩端IR為轉(zhuǎn)座酶的識(shí)別位點(diǎn)（突變）

b）插入靶位點(diǎn)后會(huì)出現(xiàn)靶位點(diǎn)的正向重復(fù)（3～9bp）含有Is的質(zhì)粒經(jīng)變性后形成柄環(huán)結(jié)構(gòu)IS可以正反方向插入到DNA（宿主、質(zhì)?；蚰承┦删w），常對(duì)插入位點(diǎn)后面的基因表達(dá)功能產(chǎn)生極性效應(yīng)2)復(fù)合轉(zhuǎn)座子,Tn復(fù)合轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因（或其他宿主基因）的轉(zhuǎn)座子，其兩翼往往是兩個(gè)相同或高度同源的IS序列。復(fù)合轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力由IS決定a)Tn/TnAfamily

l具有IR、轉(zhuǎn)座酶基因、調(diào)節(jié)基因（解離酶）、抗抗生素基因

l

Tn1(AmpR)