中藥組分配置方案的配伍規(guī)律及作用機理研究

中藥組分配置方案的配伍規(guī)律及作用機理研究

處方是中醫(yī)學(xué)應(yīng)用的基本形式。該配方通過藥物的結(jié)合提高了臨床療效，并在幾千年來對人類健康發(fā)揮了積極作用。但傳統(tǒng)方劑的中藥配伍停留在飲片層次,成分復(fù)雜,質(zhì)量難以控制,療效機理難以說明。作為防治疾病的內(nèi)源性或外源性的藥物,不論其組成是簡單還是復(fù)雜都必須朝著質(zhì)量可控、安全有效、機理清楚的基本要求發(fā)展。因此,采用現(xiàn)代科學(xué)手段詮釋新的方劑配伍理論,在提高臨床療效的同時,提高中藥產(chǎn)品科技含量及內(nèi)在質(zhì)量,有重大理論意義及臨床價值。1分散分配理論的基礎(chǔ)和形式方法1.1劑配伍理論與原則組分配伍模式是以中醫(yī)學(xué)理論為基礎(chǔ),以系統(tǒng)科學(xué)思想為指導(dǎo)。從臨床出發(fā),遵循傳統(tǒng)方劑配伍理論與原則,保持新模式配伍方劑的中醫(yī)特色,通過嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)劃,針對有限適應(yīng)證,降低方劑研究的難度。其作用機理基于方劑的潛能及其整合,與西藥的對抗補充不同。方劑治病,融合了調(diào)節(jié)、對抗補充,啟動自組織、自平穩(wěn)的整體功能,求得和諧自然的整合效應(yīng)。1.2可能且具有較強的臨床適應(yīng)證明安全、有效并具有特定功能主治是組分配伍模式所追求的主要目標(biāo)。《方劑關(guān)鍵科學(xué)問題的基礎(chǔ)研究》的研究工作已經(jīng)初步證明這一目標(biāo)是可能達(dá)到的。包括:①能夠按中醫(yī)辨證用藥;②具有較高的安全性;③臨床適應(yīng)證明確且針對性好;④物質(zhì)基礎(chǔ)及作用原理相對清楚;⑤質(zhì)量穩(wěn)定可控,能夠產(chǎn)業(yè)化推廣。1.3標(biāo)準(zhǔn)組成和組成的原則和方法1.3.1藥物組成篩選方法在確定適應(yīng)證的條件下,針對特定的病證結(jié)合證候,以明確的關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)為藥效目標(biāo),以整體、器官、組織、細(xì)胞及分子模型為篩選模型,以現(xiàn)代病理學(xué)指標(biāo)為主要依據(jù),采用均勻設(shè)計、正交設(shè)計等試驗設(shè)計方法,根據(jù)設(shè)計方案,采用計算機輔助有效組分發(fā)現(xiàn)法、藥效功能篩選法等方法,發(fā)現(xiàn)或確定主要組分,剔除有毒組分,明確藥物君臣佐使配伍關(guān)系。1.3.2劑量比例不同時也要注意使用不同的藥物組成幾千年的中醫(yī)臨床及研究認(rèn)識到復(fù)方藥物組成相同但因劑量/或比例不同時療效迥異,這是由于復(fù)方具有非線性特征所致。因此,即使是相同的藥物組成,在治療目的不同時也要采取不同的劑量比例。由于用單一的病理指標(biāo)難以表達(dá)方劑的作用,因此研究中采用多指標(biāo),在文獻(xiàn)及理論的基礎(chǔ)上,提出合理實驗設(shè)計,通過非線性建模-多目標(biāo)優(yōu)化方法解決組分配比關(guān)系,通過實驗設(shè)計-非線性建模-多目標(biāo)優(yōu)化3個相關(guān)聯(lián)的環(huán)節(jié),共同實現(xiàn)復(fù)方劑量配比的非線性多目標(biāo)優(yōu)化。1.4組件配置模式的實現(xiàn)形式1.4.1中藥分組配伍規(guī)律臨床應(yīng)用的經(jīng)驗效方不少,可歸屬于對病效方、對癥效方、對證效方、病證結(jié)合特定證候效方幾類。將其開發(fā)成符合現(xiàn)代用藥習(xí)慣、具有時代特征的中藥新藥是當(dāng)前學(xué)術(shù)及市場的迫切需求。針對臨床有效方劑,通過組分研究,以病證結(jié)合為基礎(chǔ),針對關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)與作用途徑,優(yōu)化方劑中不同組分配伍配比關(guān)系,強化主效應(yīng),減輕或避免副效應(yīng),形成針對特定病證結(jié)合證候的中藥組分配伍方劑,實現(xiàn)從飲片配伍向組分配伍的發(fā)展。而中醫(yī)方劑配伍理論與方法的深化也是名優(yōu)中成藥深度開發(fā)的重要方法。1.4.2標(biāo)準(zhǔn)組分配伍論以積累單味藥研究資料為基礎(chǔ),明確中藥不同化學(xué)類別組分的藥理作用及對證候的影響,針對特定的病證結(jié)合證候,依據(jù)方劑配伍理論與原則方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)組分配伍可以形成新藥,此類新藥能加強其針對病理環(huán)節(jié)/靶位的作用,相關(guān)靶位的療效也會因此而加強,但所針對的證候與傳統(tǒng)理論的關(guān)系相還需要進(jìn)一步研究。此類組分配伍方劑,可以從對病出發(fā),亦可從對癥或?qū)ψC出發(fā)。1.4.3分組成分配不清的情況中藥有“天然組合化學(xué)庫”之稱,從組分的角度來看,每味中藥就是一個復(fù)方,其中的組分比例是相對固定的,將其中的組分調(diào)整,藥物的作用即出現(xiàn)變化,提取單味藥的組分并通過對組分的配伍關(guān)系進(jìn)行調(diào)整,可能從中發(fā)現(xiàn)新藥。國外有許多植物不以標(biāo)準(zhǔn)提取物為基礎(chǔ)進(jìn)行的研究開發(fā),因而其產(chǎn)品不能體現(xiàn)辨證論治。1.5臨床研究對方證對應(yīng)的作用組分配伍的方劑仍然是以多組分,多靶點、整體綜合調(diào)節(jié)作為其作用方式。其整體綜合調(diào)節(jié)體現(xiàn)在:①方劑的作用不僅與藥物組成有關(guān)。而且與機體的狀況有關(guān),以血府逐瘀湯及生脈飲分別干預(yù)氣滯血瘀及氣陰兩虛型冠心病心絞痛63例,通過隨機雙盲研究證實,中醫(yī)方劑的療效與證候有關(guān),方證對應(yīng)時療效明顯優(yōu)于方證不對應(yīng);以隨機雙盲的方法進(jìn)行的血府逐瘀湯干預(yù)冠心病心絞痛的拆方臨床研究,共納入126冠心病心絞痛患者,結(jié)果提示方劑的療效不僅取決治療,還要求方藥與理法一致。2項隨機雙盲的臨床研究提示方劑的療效不僅取決于方藥,更取決于理法方藥一致。左金丸干預(yù)熱證胃炎模型及反左金丸干預(yù)寒證胃炎模型的實驗研究,也證明方證對應(yīng)是中藥治療取效的關(guān)鍵。②組分配伍方劑作用是多環(huán)節(jié)作用的整合。無論飲片層次及組分配伍,其作用皆表現(xiàn)為多環(huán)節(jié)、多靶點作用的整合。此時可以呈級聯(lián)效應(yīng)或為瀑布式作用方式,也可以是強效應(yīng)與弱效應(yīng)、正效應(yīng)與負(fù)效應(yīng)等多種形式效應(yīng)整合。其最終效應(yīng)受到若干個重要環(huán)節(jié)的影響,其中任何單一環(huán)節(jié)皆不能形成唯一貢獻(xiàn),即方劑的最終效應(yīng)是多個環(huán)節(jié)作用的整合,其中存在多種互相影響的反饋機制。無論是何種作用方式,組分配伍方劑的共性特點是多個成分(群)針對多個病理環(huán)節(jié)的作用,表現(xiàn)為復(fù)雜體系的效應(yīng)特征;如以組分配伍為基礎(chǔ)的清開靈小方表現(xiàn)出對抗缺血級聯(lián)反應(yīng)的藥理效應(yīng),起到提高抗損傷能力,降低缺血損傷因子作用的效應(yīng)。此外,組分配伍方劑間整合作用還可以發(fā)生在多個環(huán)節(jié)。2有效組成組分配序列的重要性2.1中藥的用量的確定標(biāo)準(zhǔn)中藥的用藥劑量,一般是指每一味飲片的成人日用量。由于中藥飲片中既含有發(fā)揮治療作用的有效成分,又含有產(chǎn)生不良反應(yīng)的相關(guān)成分,因此劑量是否得當(dāng),是確保用藥有效、安全的重要因素之一。由于影響中藥有效成分和有毒成分含量的因素很多,如產(chǎn)地的土壤、日照、溫度及化肥、農(nóng)藥的使用狀況等,在中藥飲片層次組方上,劑量成為衡量一個中醫(yī)師水準(zhǔn)高低的標(biāo)準(zhǔn)之一,“中醫(yī)不傳之秘在量上”的說法即源于此。盡管在長期的用藥經(jīng)驗中,形成了“道地藥材”的概念并對采收時間和用藥部位進(jìn)行了限制,而且為了最大限度地發(fā)揮中藥的效力,克服其不良反應(yīng),傳統(tǒng)上還建立了多種炮制方法,若缺乏現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的滲入,不能進(jìn)化到分析化學(xué)成分這一步,也就不可能按有效成分的多少來準(zhǔn)確確定臨床劑量,方劑中中藥的用量很大程度上還要根據(jù)用藥經(jīng)驗來確定,存在很大的盲目性。采用有效成(組)分組方可確保用量準(zhǔn)確,療效穩(wěn)定。2.2青蒿素的分離和利用如上所述一味中藥含有多種成分,而在方劑中發(fā)揮作用的僅僅是某一類或幾類成分,其他成分則成為無效成分,起干擾或拮抗作用。有效成(組)分組方可克服上述缺點。如青蒿治療瘧疾雖然已有1000多年的歷史,然而由于傳統(tǒng)的煎煮法,其活性成分受到很大影響,丸、散劑中的青蒿,有效成分很低,治瘧效果不佳,絞汁服用也只有1/5的有效成分被利用,其余有效成分仍留在生藥殘渣中,有效劑量很低,近些年利用現(xiàn)代技術(shù),分離出青蒿素,使青蒿治瘧的機理得到證實,同時使其整個研制過程完全符合國際慣例,治療瘧疾不必麻煩地絞汁或是煎煮,只需按要求口服幾片藥物即可,方便易行,療效明顯,使有效成分得到了最大限度利用,節(jié)約了大量藥材。又如大黃含有多種鞣質(zhì),口服總鞣質(zhì)有改善腎功能的作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),其中5種低分子鞣質(zhì)口服能被吸收,而其中3種鞣質(zhì)有改善腎功能的作用,1種有加重腎功能損害作用。由此可以想到去掉有害作用部分只保留改善腎功能的部分效果可能會更好。2.3對心臟的作用中藥現(xiàn)代化的目的之一是減少中藥復(fù)方制劑中的非藥效因素,提高制劑水平和療效。以單味黃芪為例,黃芪含有多種成分,主要為多糖、黃芪皂苷和黃酮,不同成分主要作用不同,黃芪皂苷主要作用于心腦血管,通過擴張血管達(dá)到降壓目的;對心臟的作用則是通過改善心肌收縮舒張功能,增加冠脈流量,對心功能起到保護(hù)作用。黃芪多糖主要對免疫系統(tǒng)有影響,不僅能作用于多種免疫活性細(xì)胞,促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌和正常機體的抗體生成,還可以從不同角度發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。黃芪多糖和皂苷均可誘生干擾素,在抗病毒中發(fā)揮作用。黃芪中的總黃酮和總皂苷等成分具有顯著的抗氧化活性,能抑制自由基的產(chǎn)生和清除體內(nèi)過剩的自由基,保護(hù)細(xì)胞免受自由基產(chǎn)生的過度氧化作用的影響,進(jìn)而延長細(xì)胞壽命。因此在用于治療心腦血管病組方選用黃芪皂苷,用于增強免疫功能時選用黃芪多糖,用于和氧化有關(guān)的疾病治療時用黃芪總黃酮和總皂苷,使組方得到精簡,藥效更為明確,這是目前從中藥復(fù)方創(chuàng)制新藥的常用方法。3形成了現(xiàn)代對中藥有效成組分配的研究成果—有效成(組)分配伍的可行性3.1對方劑配伍傳統(tǒng)理論的正確理解是實現(xiàn)有效成(組)分配伍的前提和基礎(chǔ)中醫(yī)藥學(xué)經(jīng)過數(shù)千年的應(yīng)用,已被實踐證明是安全和有效的。但中醫(yī)藥理論帶有我國傳統(tǒng)文化歸納與綜合的特性,其系統(tǒng)觀以古代哲學(xué)及古代科學(xué)為基礎(chǔ)。古代科學(xué)的特性是對現(xiàn)象進(jìn)行描述、對經(jīng)驗進(jìn)行總結(jié)和對事物進(jìn)行猜測性思辯。因而,中醫(yī)的術(shù)語及觀測指標(biāo)有模糊性及不易掌握。加之中醫(yī)藥術(shù)語古樸而深奧,因此如何正確理解和繼承前人成功經(jīng)驗,用正確的理論指導(dǎo)中醫(yī)藥的發(fā)展方向,使祖國醫(yī)學(xué)更加發(fā)揚光大,造福于后代成為首先應(yīng)該解決的關(guān)鍵問題。國家973項目“方劑關(guān)鍵科學(xué)問題的基礎(chǔ)研究”成果為科學(xué)認(rèn)識傳統(tǒng)中醫(yī)配伍理論、并用其指導(dǎo)中藥有效成(組)分配伍提供了科學(xué)的理論。3.2現(xiàn)代對中藥化學(xué)成分及其藥理作用的研究結(jié)果為有效成(組)分配伍提供了科學(xué)依據(jù)近年來隨著分離技術(shù)的發(fā)展,對中藥有效性成分的研究取得了豐碩成果,已從數(shù)百種中草藥中分離出多種活性單體和組分,這些單體和組分成分的藥理作用得到公認(rèn),并在臨床上發(fā)揮了重要的作用。中藥的現(xiàn)代研究提供了許多微觀上的資料。目前中藥藥理藥效的研究成果驗證了一些配伍組方規(guī)律,顯示出良好的發(fā)展前景。如川芎與當(dāng)歸相使配伍組方在臨床常用,川芎的主要有效成分川芎嗪與當(dāng)歸的主要成分阿魏酸合用時,在解除血管平滑肌痙攣、增加心臟灌流量和降低血糖方面有協(xié)同作用,對小鼠的急性毒性表現(xiàn)為拮抗。這就揭示了川芎與當(dāng)歸在中藥配伍組方應(yīng)用中的物質(zhì)基礎(chǔ),同時初步表明其有效成分川芎嗪、阿魏酸也符合相使配伍的組方原則。3.3現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)面臨的問題為中藥有效成(組)分配伍提供了機遇西醫(yī)治病重在靶器官病理改變的糾正、逆轉(zhuǎn)。故西藥常為單一化學(xué)成分,具有高度專一性,作用靶點單一明確,因此在病因明確、發(fā)病機理清楚的疾病治療中占絕對的優(yōu)勢。中醫(yī)強調(diào)辨證施治,即將疾病的某一階段的病理、生理改變歸納為“證”。根據(jù)“證”這一整體水平的疾病認(rèn)識,從臟腑的聯(lián)系、人和自然的關(guān)系等方面綜合考慮,采用中藥配伍復(fù)方用藥的多種化學(xué)成分、多靶點、多環(huán)節(jié)、多途徑調(diào)節(jié)機體的動態(tài)平衡。因此中藥復(fù)方具有高度復(fù)雜性、整體性,是一動態(tài)調(diào)節(jié)過程,在治療復(fù)雜疾病顯示其特有的優(yōu)勢。隨著社會的變遷,人類疾病譜發(fā)生了變化,如今癌癥、艾滋病、代謝綜合征、老年性癡呆等多種發(fā)病機理不明、治療靶點不清的復(fù)雜疾病成為困擾西方醫(yī)藥學(xué)界的難題,而中醫(yī)藥在這些疾病的治療方面顯示了其獨特的療效,這為中藥有效成(組)分配伍提供了極好的用武之地。4有效組成組分配序列的實現(xiàn)方法4.1復(fù)方有效組分的組成及其應(yīng)用所謂方劑有效組分是指中藥復(fù)方中具有相近化學(xué)性質(zhì)的一大類化合物(成分群),即將中藥配伍組成的復(fù)方看作一個整體,采用現(xiàn)代提取分離方法,將其分離成為各個部位(如揮發(fā)油、生物堿類、黃酮類、香豆精類、蒽醌類、強心苷類、皂苷類、萜類、多糖類等)。復(fù)方有效組分不是1味中藥飲片的有效組分,而是組成復(fù)方的各味藥相互作用后生成的成分。復(fù)方成分分離可根據(jù)復(fù)方的用藥經(jīng)驗和臨床作用特點采用多種方法進(jìn)行分離(如按化學(xué)成分的分子質(zhì)量、極性大小或酸堿性不同進(jìn)行分離)。有研究采用復(fù)方有效組分分離和藥理實驗相結(jié)合的方法,從補陽還五湯中分離提取了7類有效組分,即總生物堿、總多糖、總苷元、總苷、蛋白質(zhì)、氨基酸和揮發(fā)油,然后進(jìn)行配伍使用,研究各組分對小鼠腦缺血的影響及各人有效組分間的相互作用。結(jié)果表明,總生物堿、總多糖、總苷、總苷元和揮發(fā)油單獨應(yīng)用均可使小鼠對結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈及迷走神經(jīng)所致腦缺血的耐受時間明顯延長,而蛋白質(zhì)和氨基酸單獨應(yīng)用則無明顯作用。正交試驗結(jié)果表明,蛋白質(zhì)和氨基酸與其他有效組分之間及兩者之間均無交互作用,從而得出補陽還五湯中具有抗腦缺血作用的有效組分主要為生物堿、總多糖、總苷、苷元和揮發(fā)油,它們按一定比例配伍可發(fā)揮較好作用,從而形成了優(yōu)于原復(fù)方的有效成分組方。4.2最佳配伍研究這種組方方式雖然也是以臨床有效復(fù)方為基礎(chǔ),但與上述方法不同。不是把復(fù)方看成一個整體,而是將復(fù)方中的每味藥當(dāng)成一個個體,根據(jù)復(fù)方的組方原則和主要功效、主治病癥,選取每味藥在方中的有效成分或部位,采用現(xiàn)代藥理學(xué)方法進(jìn)行有效成分劑量的最佳配伍研究,最后確定組成和劑量,成為組分清楚的現(xiàn)代復(fù)方。如黃芩湯出自《傷寒論》,用來治療太陽與少陽合病所致之下利,有清熱止利、緩急止痛之功效。本方藥味精簡、力專效宏,后世醫(yī)家在此方基礎(chǔ)上加減化裁,用于治療下痢、泄瀉等病證,故清·汪昂《醫(yī)方集解》中稱:“仲景此方遂為萬世治痢之祖矣?！倍鴱募膊“Y狀表現(xiàn)來看,潰瘍性結(jié)腸炎應(yīng)屬于下痢、泄瀉等病證的范疇。在臨床上,應(yīng)用黃芩湯治療潰瘍性結(jié)腸炎也確實具有較好的療效。但傳統(tǒng)劑型存在作用機理不明確、質(zhì)量控制不穩(wěn)定、煎服不方便等缺點。有研究通過對黃芩湯組成藥味的分析,采用組方中有效組分按黃芩苷∶白芍總苷∶甘草酸=6∶2∶1配成懸濁液,結(jié)果顯示黃芩湯有效組分配伍組對潰瘍的修復(fù)有明顯的促進(jìn)作用。有效組分配伍組方克服了傳統(tǒng)劑型的缺點,并且具有較好的療效。4.3對組方的科學(xué)設(shè)計和優(yōu)化中醫(yī)理論給予對疾病從整體上把握的整體觀思想,在宏觀上優(yōu)于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中還原論的觀點及方法。從中藥中提取有效成分,即可以提高療效、易控質(zhì)量,也大大減少了服藥量,這是我們研究的