食用菌的菌種生產(chǎn) 顆粒原種的制備與轉(zhuǎn)接

實(shí)驗(yàn)三、顆粒原種的制備與轉(zhuǎn)接1.了解原種常用培養(yǎng)基的種類2.掌握食用菌原種培養(yǎng)基的配制方法及消毒滅菌方法3.熟練原種的轉(zhuǎn)接技術(shù)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、材料：母種：平菇、杏鮑菇；糧食顆粒：小麥；碳酸鈣2.工具：超凈工作臺(tái)、酒精燈、75%酒精棉球、接種鏟、三角瓶、棉花、報(bào)紙、高壓滅菌鍋、托盤天平、培養(yǎng)箱二、實(shí)驗(yàn)材料

原種的生產(chǎn)是由母種移接入原種培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)而成，原種也稱二級(jí)種。生產(chǎn)程序是：培養(yǎng)基的配制→分裝→滅菌→接種→適溫培養(yǎng)。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法1、常用配方

（1）小麥99%、輕質(zhì)碳酸鈣1%

（2）高粱80%、小米19%、輕質(zhì)碳酸鈣1%（一）培養(yǎng)基的配制2、培養(yǎng)基的配制（1）糧食顆粒應(yīng)篩選干凈；（2）清水浸泡12小時(shí)，低溫季節(jié)浸泡時(shí)間長些，高溫季節(jié)浸泡時(shí)間短些，但要換水?dāng)?shù)次；（3）放入水中煮約20分鐘（理論值），一般以籽粒充分吸水，內(nèi)部沒有白芯而表皮又不破脹為度；（4）撈出，濾去多余水分，拌入輕質(zhì)碳酸鈣；（5）攪拌均勻、攤開、風(fēng)干顆粒表面水膜。

菌種瓶一般裝量上端距瓶口50毫米，可以有效減少培養(yǎng)期的污染和避免上部菌種的老化。

三角瓶一般裝量不超過半瓶，以便在菌絲萌發(fā)之后可以通過拉抖動(dòng)增快菌絲的生長速度。

（二）分裝將栽培料袋放高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋中進(jìn)行滅菌。若采用高壓蒸汽滅菌，則標(biāo)準(zhǔn)為1.5kg/cm2（0.15MPa），126～128℃,1.5h～2h。如果采用常壓蒸汽滅菌，則標(biāo)準(zhǔn)為100℃下8～10h。（三）滅菌一般滅過菌的培養(yǎng)基應(yīng)放在較潔凈的室內(nèi)（也可放無菌室或超凈工作臺(tái)中）冷卻至30℃左右方可接種。（四）冷卻1．將已滅菌的培養(yǎng)料瓶移入事先消毒過的超凈工作臺(tái)內(nèi)，紫外滅菌20～30min。2.母種管、用具及手要進(jìn)行酒精消毒。（五）接種3.等培養(yǎng)料溫降至30℃左右時(shí)，按無菌操作方法進(jìn)行接種，用接種鏟取菌種一塊放入種瓶內(nèi)培養(yǎng)料的孔隙邊，并使菌絲緊貼在培養(yǎng)料上，塞上硅膠塞，貼上標(biāo)簽，注明菌種名稱和接種日期。接種后，將種瓶置于20℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間進(jìn)行定期檢查，淘汰污染種瓶。一般兩周左右菌絲可長滿菌種瓶。培養(yǎng)成的原種菌絲濃白健壯，菌絲緊貼瓶壁不干縮，生命力強(qiáng)，具有一定清香味，無任何雜菌污染。（六）適溫培