細胞生物學(xué)實驗報告

細胞生物學(xué)實驗報告細胞生物學(xué)試驗報告（精選3篇）

細胞生物學(xué)試驗報告篇1

一、試驗?zāi)康模?/p>

1、把握顯示細胞中過氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。2.了解細胞凋亡的生物學(xué)意義

3、把握凋亡細胞的形態(tài)學(xué)檢測方法

二、試驗原理：

1、細胞內(nèi)的過氧化物酶能把很多胺類氧化為有色化合物，用聯(lián)苯胺處理標本，細胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍，進而變?yōu)樽厣a(chǎn)物，因而可以依據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產(chǎn)物藍色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的，無需酶的參與即可氧化為棕色化合物。

2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下，遵循自身的程序，自己結(jié)束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的，基因掌握的，一系列酶參加的過程。

3、凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)分散和聚集于核膜四周(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;依據(jù)細胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進行顯微觀看是檢測細胞凋亡的一種直觀、牢靠的方法。

三、試驗步驟：

細胞中過氧化物酶的顯示

1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；

2、取骨髓細胞：用斷頸法處死小鼠，馬上剪取后肢，去除肌肉，剝出后肢股骨，剪開股骨一端，用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中，摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上；

3、涂片：用另一玻片將骨髓細胞沿一個方向涂布推開，室溫晾干；

4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿涂片為宜，處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘（以蓋滿涂片為宜）6、清水沖洗，番紅復(fù)染2min。

7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀看，后換高倍鏡下觀看（油鏡100×）

細胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀看吉姆薩染色:

1、取細胞爬片置于小培育皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞3、95%乙醇固定5min

4、PBS緩沖液洗2次

5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

7、一般光學(xué)顯微鏡下觀看。吖啶橙染色:

1、取細胞爬片置于小培育皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞

3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min

5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

6、選用藍光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀看。

四、結(jié)果與分析：

1、依據(jù)隨機選擇的幾個視野的統(tǒng)計，該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9

Hela細胞凋亡過程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化（吖啶橙染色）

五、思索題：

1、細胞凋亡的調(diào)控機制

細胞凋亡是一個受基因調(diào)控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參加的細胞主動自殺過程，其觸發(fā)因素多種多樣，包括細胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對細胞凋亡的調(diào)控。

2、細胞凋亡的特征

凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)分散和聚集于核膜四周(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。

3、討論細胞凋亡的方法

定性的討論方法：常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀看（一般光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）

定量或半定量的討論方法：各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

細胞生物學(xué)試驗報告篇2

一、試驗?zāi)康?：

1、通過對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學(xué)顯微鏡觀看，了解細胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu)；

2、學(xué)習(xí)顯微測量的方法，對細胞的大小有始終觀熟悉。

二、試驗材料和儀器：

小白鼠肝細胞切片；雞血紅細胞；蠶豆葉片橫切片；

一般光學(xué)顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。

三、試驗步驟：

(一)細胞形態(tài)觀看

l、動物細胞的觀看

（1）人肝細胞切片：在顯微鏡下認真觀看肝細胞的形態(tài)構(gòu)造。

（2）雞血細胞涂片的觀看：觀看血細胞的組成；紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點。

2、植物細胞的觀看

取蠶豆葉片橫切片的觀看：留意表皮細胞和葉肉細胞的基本結(jié)構(gòu)。

（二）細胞的大小和測量

1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。

2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺測微尺的分度。

3、當(dāng)心移動鏡臺測微尺和轉(zhuǎn)動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉(zhuǎn)動目鏡上透鏡進行調(diào)焦)，使兩尺左邊的始終線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。

4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數(shù)。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：

鏡臺測微尺的格數(shù)

目鏡測微尺每格的微米數(shù)=—————————×10

目鏡測微尺的格數(shù)

四、試驗結(jié)果：

1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24

2、細胞大小的測量：

五、作業(yè)與思索：

1、血細胞按含量凹凸，主要含有：紅細胞，白細胞，血小板。

白細胞最大，紅細胞次之，血小板最小。紅細胞：主要的功能是運輸氧。白細胞：主要扮演了免疫的角色，當(dāng)病菌侵入人體時，白細胞能穿過毛細血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過程中起著重要作用。細胞形態(tài)見下圖。

2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態(tài)圖見下。

3、在不同放大倍數(shù)下，測定的細胞大小基本全都，但有一些偏差。放大倍數(shù)越大，在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大，而更簡單測量精確?????。

細胞生物學(xué)試驗報告篇3

試驗?zāi)康?/p>

⒈學(xué)習(xí)并把握動物細胞培育的無菌操作技術(shù)。

⒉了解原代細胞培育的基本方法及操作過程。

⒊學(xué)習(xí)細胞計數(shù)及養(yǎng)分液的配制。

試驗原理

⒈細胞原代培育

原代細胞培育是指直接從動物體內(nèi)獵取的細胞、組織和器官，經(jīng)體外培育后，直到第一次傳代為止。這種培育，首先用無菌操作的方法，從動物體內(nèi)取出所需的組織（或器官），經(jīng)消化，分解成單個游離細胞，在人工培育下，使其不斷的生長及繁殖。

細胞培育是一種操作繁瑣而又要求非常嚴謹?shù)脑囼灱夹g(shù)。要使細胞能在體外長期生長，必需滿意兩個基本要求：一是供應(yīng)細胞存活所必需的條件，如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長因子、氧氣、相宜的溫度，留意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調(diào)整。二是嚴格掌握無菌條件。

⒉細胞死活鑒定死活細胞的鑒定方法有許多種，常用的.有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法，簡便，易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同詳細的反應(yīng)機理，但無論采納何種方法，都是利用了死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異。

染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法，依據(jù)染色機理的不同，染料或使死細胞著色，或使活細胞著色。

死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異主要包括：

☆死活細胞細胞膜通透性的差異：活細胞的細胞膜是一種選擇性膜，對細胞起愛護和屏障作用，只允許物質(zhì)選擇性的通過；而細胞死亡之后，細胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。臺盼藍，又稱錐藍，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細胞膜。所以經(jīng)臺盼藍染色后只能使死細胞著色，而活細胞不被著色。甲基藍有類似的染色機理。植物細胞的質(zhì)壁分別也可鑒定死活。

☆死活細胞在代謝上的差異：是采納美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據(jù)。美藍是一種無毒染料，氧化型為藍色，還原型為無色。由于活細胞中新陳代謝的作用，使細胞內(nèi)具有較強的還原力量，能使美藍從藍色的氧化性變?yōu)闊o色的還原型，因此美藍染色后活的酵母細胞無色；而死細胞或代謝緩慢的老細胞，則因它們的無還原力量或還原力量極弱，使美藍處于氧化態(tài)，從而被染成藍色或淡藍色。

除此之外，還有一些細胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料，可以使活細胞液泡著紅色，而細胞質(zhì)和細胞核不被著色；死細胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散于整個細胞中，細胞核和細胞質(zhì)被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結(jié)合使用，如甲基藍-中性紅混合染色法。

試驗用品

⒈材料小白鼠

⒉試劑

臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培育液（含生長因子）

⒊器材

剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺、正置光學(xué)顯微鏡、倒置光學(xué)顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培育皿、酒精燈、塑料培育皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數(shù)板

試驗步驟

⒈取材

取小鼠一只，采納斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min，取出轉(zhuǎn)入超凈工作臺內(nèi)的解剖盤中，無菌操作打開腹腔，取出其脾臟，除去其四周的脂肪組織，并用PBS液自上而下淋洗1-2次，轉(zhuǎn)入無菌培育皿中待用。

⒉分別脾細胞

用滴管向培育皿中注入30滴PBS緩沖液，再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟，注射時沿長軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼，并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在勻稱吹勻脾臟細胞。

吸取上述分別的單個脾細胞懸液，放入Eppendorf管中，使量至1mL，以1000r/min離心5min。⒊培育脾細胞

取塑料培育皿一套，用移液槍吸取培育液2mL加入塑料皿中，并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管，棄去上清液，用移液槍（200ul）吸取塑料皿中的培育液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中，用槍頭吹勻管底的脾細胞，吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中，混勻后放入37°C，5%CO2的培育箱中培育。

⒋配制染液

用生理鹽水配成5%臺盼藍染液，備用。⒌染色

取0.5mL細胞懸濁液放入試管中，加入1-2滴染液?；旌?。2-5min后將細胞放在血細胞計數(shù)板上觀看死活狀況，留意不要有

氣泡產(chǎn)生，放大倍數(shù)為10x10。染色后活細胞不著色，死細胞顯示藍色。留意染色時間不能超過15min，否則染液將細胞毒殺。

⒍計數(shù)

在10x10倍的顯微鏡下觀看，計算血細胞計數(shù)板的4個4小方格的細胞數(shù)量。包括細胞總數(shù)與死細胞數(shù)量。壓線者計上不計下，計左不計右。

⒎計算細胞活力

依據(jù)公式：細胞活力=(總細胞數(shù)-死細胞數(shù))/總細胞數(shù)×100%

試驗結(jié)果

臺盼藍染色后的細胞（10x10）伊紅染色后的細胞（10x10）

總細胞數(shù)和活細胞數(shù)統(tǒng)計表（10×10）

項目自己培育細胞老師培育細胞總細胞數(shù)個/ml活細胞數(shù)個/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與爭論

⒈結(jié)果分析

本次試驗中我們小組自己培育細胞所測細胞活力為21.4%，并不算高，分析得應(yīng)有以下緣由可能影響試驗結(jié)果（包括誤差）：

⑴若在無菌操作的過程中操作不規(guī)范，導(dǎo)致染菌，會極大的影響觀看，導(dǎo)致試驗失敗。

⑵若在離心分別呈單細胞的過程中離心機轉(zhuǎn)速過快或時間過長很可能會導(dǎo)致細胞裂開，導(dǎo)致小鼠脾細胞大量死亡。

⑶染色時間過長，或觀看時間過長都會導(dǎo)致染色試劑將細胞殺死，使細胞活力驟降，這是