紫外吸收光譜定量分析（光學(xué)分析課件）

《光譜分析及操作》紫外吸收光譜定量分析01紫外吸收光譜定量分析的基本知識(shí)一、紫外吸收光譜定量分析概述紫外吸收光譜定量分析的依據(jù)是朗伯-比爾定律（Lambert-Beer定律），即物質(zhì)在一定波長(zhǎng)處的吸光度與其濃度成正比。因此，只要選擇一定適宜波長(zhǎng)，測(cè)定溶液的吸光度就可以求出溶液的濃度和物質(zhì)的含量。A=kbc二、紫外吸收光譜定量分析的基本原理如果在一個(gè)試樣中只測(cè)定一種組分，且在選定的測(cè)量波長(zhǎng)下，試樣中其它組分對(duì)該組分不干擾，這種單組分的定量分析較簡(jiǎn)單。一般有標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法兩種。二、紫外吸收光譜定量分析的基本原理在相同條件下，平行測(cè)定試樣溶液和某一濃度Cs（應(yīng)與試液濃度接近）的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度Ax和As，則由Cs可計(jì)算試樣溶液中被測(cè)物質(zhì)的濃度Cx。1.標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法因只使用單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，引起誤差的偶然因素較多，故往往較不可靠。

二、紫外吸收光譜定量分析的基本原理這是實(shí)際分析工作中最常用的一種方法。配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以不含被測(cè)組分的空白溶液作參比，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度，繪制吸光度－濃度曲線，稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線（或工作曲線）。在相同條件下測(cè)定試樣溶液的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出與之對(duì)應(yīng)的未知組分的濃度。2.標(biāo)準(zhǔn)曲線法作業(yè)一、填空題1.紫外吸收光譜定量分析的依據(jù)是

。因此，只要選擇一定適宜的

，測(cè)定溶液的

就可以求出溶液的濃度和物質(zhì)的含量。2.在紫外分光光度法中，工作曲線是_______和_______之間的關(guān)系曲線。當(dāng)溶液符合比耳定律時(shí)，此關(guān)系曲線應(yīng)為_______。3.紫外分光光度法單組分定量分析的方法有

和

。作業(yè)二、不定項(xiàng)選擇題（將正確答案的序號(hào)填入括號(hào)內(nèi)）1.符合朗伯-比耳定律的有色溶液稀釋時(shí)，其最大吸收峰的波長(zhǎng)位置（）。A、向短波方向移動(dòng)B、向長(zhǎng)波方向移動(dòng)C、不移動(dòng)，且吸光度值降低D、不移動(dòng)，且吸光度值升高2.在用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定某物質(zhì)含量時(shí)，用參比溶液調(diào)節(jié)A=0或T=100%，其目的是（）。A、使測(cè)量中c-T成線性關(guān)系B、使標(biāo)準(zhǔn)曲線通過坐標(biāo)原點(diǎn)C、使測(cè)量符合比耳定律，不發(fā)生偏離D、使所測(cè)吸光度A值真正反映的是待測(cè)物的A值《光譜分析及操作》紫外吸收光譜定量分析02紫外分光光度計(jì)的維護(hù)和保養(yǎng)一、儀器的日常維護(hù)和保養(yǎng)在處理液體試樣較多的時(shí)候，請(qǐng)?jiān)谑褂们昂褪褂煤髾z查試樣室中是否有遺漏的溶液，如果有應(yīng)立即擦拭干凈，以防止溶液蒸發(fā)后腐蝕光學(xué)系統(tǒng)，造成儀器測(cè)量結(jié)果誤差。1.試樣室檢查在儀器的底部有4塊防塵濾網(wǎng)，一般情況下需要3個(gè)月清洗1次，但在環(huán)境比較惡劣，沙塵比較大的地區(qū)需要1個(gè)月清洗1次，濾網(wǎng)取下后，可以用清水直接沖洗干凈，晾干后方可使用。2.防塵濾網(wǎng)的清洗儀器的外殼表面經(jīng)過了噴漆工藝的處理，在使用過程中請(qǐng)不要將溶液遺灑在外殼上，否則會(huì)在外殼上留下斑痕，如果不小心將溶液遺灑在外殼上請(qǐng)立即用濕毛巾擦拭干凈，杜絕使用有機(jī)溶液擦拭。3.儀器的表面清潔二、儀器常見故障排除請(qǐng)檢查對(duì)比度調(diào)節(jié)旋鈕——用平口螺絲刀調(diào)節(jié)儀器后面“CONTRAST”旋鈕。1.打開電源屏幕不顯示，或顯示不清楚檢查電源是否正常，是否出現(xiàn)電壓不穩(wěn)定的現(xiàn)象；檢查電源線，看是否出現(xiàn)電源線插頭接觸不良的情況；檢查儀器主機(jī)保險(xiǎn)管是否熔斷；如果是，請(qǐng)更換保險(xiǎn)管。2.打開電源開關(guān)儀器不動(dòng)作，屏幕不顯示檢查打印機(jī)型號(hào)是否正確，T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)只支持惠普噴墨或激光并口打印機(jī)，以及熱敏微型并口打印機(jī)；檢查儀器與打印機(jī)連線是否松動(dòng)；檢查系統(tǒng)應(yīng)用中UP和HP模式選擇是否正確，UP選擇要對(duì)應(yīng)熱敏微型并口打印機(jī)；HP選擇要對(duì)應(yīng)惠普噴墨或激光并口打印機(jī)。3.打印機(jī)不工作，打印出錯(cuò)二、儀器常見故障排除檢查樣品室內(nèi)是否有阻擋物，阻礙樣品池電機(jī)移動(dòng)。4.儀器開機(jī)自檢的過程中，屏幕顯示“樣品池電機(jī)ERR”出錯(cuò)主要檢查樣品池是否有擋光物或者比色皿。取出擋光物。每次使用完儀器后一定要取出比色皿，以免造成不必要的干擾，以及溶液對(duì)儀器內(nèi)部精密光學(xué)部件的腐蝕；請(qǐng)檢查電源電壓是否過低，在200V以下，電源過低會(huì)導(dǎo)致燈光源啟動(dòng)不正常；確認(rèn)鎢燈、氘燈是否不亮，如果不亮請(qǐng)更換鎢燈或者氘燈。5.儀器開機(jī)自檢中，“光源電機(jī)”、“鎢燈”、“氘燈”以及“波長(zhǎng)檢查”出錯(cuò)二、儀器常見故障排除確認(rèn)儀器是否正常自檢。打開儀器電源時(shí)如果立即按住“RETURN”鍵儀器就不進(jìn)行初始化，不能正常使用，該功能只是儀器調(diào)試使用。在當(dāng)前測(cè)量狀態(tài)下，取出比色皿，樣品池為空狀態(tài)，按“ZERO”鍵，查看吸光度0.000Abs是否跳動(dòng)，如果在±0.001之間跳動(dòng)為正常，如果跳動(dòng)太大請(qǐng)確認(rèn)外部電源是否符合儀器要求電源條件，確認(rèn)完成后關(guān)閉儀器電源重新自檢，確認(rèn)自檢正常。如果樣品池為空，在空氣狀態(tài)下按“ZERO”鍵，查看吸光度0.000Abs跳動(dòng)正常。請(qǐng)檢查是否存在以下問題：測(cè)量的樣品是否揮發(fā)性太大，請(qǐng)使用比色皿蓋子。如果是強(qiáng)揮發(fā)性氣體，請(qǐng)敞開樣品池去除干擾氣體后再測(cè)量；確認(rèn)是否正確使用空白溶液校零。應(yīng)注意的是，用來校零的空白溶液的吸光度值不應(yīng)該超過0.4Abs，如果超過請(qǐng)檢查或更換空白溶液或參比溶液。6.樣品測(cè)量不穩(wěn)定二、儀器常見故障排除確認(rèn)樣品是否穩(wěn)定，樣品是否有光解等現(xiàn)象；請(qǐng)檢查比色皿擦拭方法是否正確，應(yīng)仔細(xì)擦拭、清洗比色皿。7.測(cè)量樣品重復(fù)性差在系統(tǒng)應(yīng)用中進(jìn)行“暗電流校正”，校正完成后重新校正空白溶液，再測(cè)量。比色皿的配套性不好，請(qǐng)檢查比色皿的配套性。8.測(cè)量樣品吸光度不準(zhǔn)確三、儀器常見問題處理T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)是自動(dòng)化儀器，不需要每次測(cè)量校正0%T，在自動(dòng)化儀器中0%T校正叫做暗電流校正，一般情況下不需要校正。如果當(dāng)儀器的使用環(huán)境發(fā)生改變（如：溫度、工作電壓、環(huán)境光線），才需要進(jìn)行暗電流校正；在系統(tǒng)應(yīng)用中選擇“暗電流校正”，確認(rèn)即可。1.如何校正0%T在使用T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)的時(shí)候不需要手動(dòng)轉(zhuǎn)換鎢燈和氘燈。使用中只需要設(shè)置換燈波長(zhǎng)就可以了，儀器自動(dòng)轉(zhuǎn)換鎢燈氘燈。2.如何轉(zhuǎn)換鎢燈氘燈三、儀器常見問題處理出現(xiàn)這個(gè)情況主要由于電源情況不好，導(dǎo)致儀器暗電流升高，在系統(tǒng)應(yīng)用中進(jìn)行暗電流校正即可消除此現(xiàn)象；另外，儀器長(zhǎng)時(shí)間在潮濕環(huán)境存放或使用導(dǎo)致光學(xué)鏡面受潮也會(huì)引起雜散光偏高。因此，儀器最好每周開機(jī)一次，避免長(zhǎng)時(shí)間存放而造成的某些故障。3.為什么測(cè)量雜散光不合格T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)為了測(cè)試結(jié)果的嚴(yán)謹(jǐn)性沒有設(shè)置刪除個(gè)別數(shù)據(jù)的功能，只有在打印結(jié)果后清除所有數(shù)據(jù)。在改變測(cè)量參數(shù)后儀器會(huì)提示打印，如果取消打印也會(huì)清除所有數(shù)據(jù)。4.怎樣清除儀器當(dāng)中存儲(chǔ)的數(shù)據(jù)四、儀器安全使用的注意事項(xiàng)更換光源時(shí)，請(qǐng)務(wù)必在關(guān)閉儀器電源的狀況下進(jìn)行，否則會(huì)有危險(xiǎn)。儀器在剛剛工作后，光源蓋板的溫度將很高，請(qǐng)不要立即更換光源和觸摸蓋板，避免燙傷。氘燈發(fā)出的紫外線和鎢燈的強(qiáng)光會(huì)對(duì)眼睛造成傷害。因?yàn)楸緝x器為免調(diào)儀器，請(qǐng)?jiān)谡麄€(gè)換燈過程當(dāng)中不要點(diǎn)亮任何燈。儀器在剛剛工作后，防塵濾網(wǎng)的溫度會(huì)很高，請(qǐng)等待儀器冷卻至室溫后再對(duì)防塵濾網(wǎng)進(jìn)行清洗工作，以免燙傷。作業(yè)一、填空題在處理液體試樣較多的時(shí)候，請(qǐng)?jiān)谑褂们昂褪褂眠^后檢查

，以防止溶液蒸發(fā)后腐蝕

，造成儀器測(cè)量結(jié)果誤差。在儀器的底部有

塊防塵濾網(wǎng)，一般情況下需要

個(gè)月清洗1次，濾網(wǎng)取下后，可以用直接沖洗干凈，