中藥顯微鑒別技術(shù)講義3

部分顯微制片技術(shù)

在進(jìn)行顯微鑒別時(shí)，首先要將“檢樣”制成適于鏡檢的標(biāo)本。對(duì)于完整的藥材可制成各種切面的切片；對(duì)于粉末藥材(包括丸、散等成方)可直接裝片或作適當(dāng)處理后制片。永久片制作技術(shù)臨時(shí)制片技術(shù)2021/5/911、制片設(shè)備

滑走切片機(jī)——半自動(dòng)切片機(jī)脫水機(jī)

包埋機(jī)2021/5/922變倍體視顯微鏡

是一種具有立體感覺(jué)的顯微鏡。主要用途：

作為動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)、昆蟲(chóng)學(xué)、組織學(xué)、礦物學(xué)、考古學(xué)、地質(zhì)學(xué)和皮膚病學(xué)等的研究和解剖工具。2021/5/93電腦型連續(xù)變倍體視顯微鏡SZX-16研究用2021/5/94電腦（數(shù)碼相機(jī)）型連續(xù)變倍體視顯微鏡

它觀察物體時(shí)能產(chǎn)生正立的三維空間像，立體感強(qiáng)，成像清晰和寬闊，具有較長(zhǎng)的工作距離，，并可根據(jù)觀察物的特點(diǎn)選用不同的反射和透射光照明，是適用范圍非常廣泛的常規(guī)顯微鏡。對(duì)同一物體可實(shí)現(xiàn)連續(xù)放大倍率觀看,可能直接電視機(jī)或電腦上觀察實(shí)物圖像。2021/5/95目鏡鏡臂物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡玻片移動(dòng)裝置載物臺(tái)聚光鏡光源鏡座3、透射光生物學(xué)顯微鏡2021/5/96數(shù)碼型透射光生物學(xué)顯微鏡123456782021/5/974、偏光顯微鏡2021/5/98偏光顯微鏡2021/5/99偏光顯微鏡(polarizingmicroscope)

用于檢測(cè)具有雙折射性的物質(zhì)，如纖維絲、紡錘體、膠原、染色體等。和普通顯微鏡不同的是：其光源前有偏振片（起偏振器），使進(jìn)入顯微鏡的光線為偏振光，鏡筒中裝有另一偏振片（檢偏振器，一個(gè)偏振方向與起偏振器垂直的起偏器），這種顯微鏡的載物臺(tái)是可以旋轉(zhuǎn)的，當(dāng)載物臺(tái)上放入單折射的物質(zhì)時(shí)，無(wú)論如何旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)，由于兩個(gè)偏振片是垂直的，顯微鏡里看不到光線，而放入雙折射性物質(zhì)時(shí)，由于光線通過(guò)這類(lèi)物質(zhì)時(shí)發(fā)生偏轉(zhuǎn)，因此旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)便能檢測(cè)到這種物體。2021/5/910

在偏光顯微鏡下，藥材的鑒別要素在色彩上表現(xiàn)出一定的變化，可作為大多數(shù)植物、動(dòng)物、礦物類(lèi)藥材的顯微鑒別依據(jù)之一。如植物的淀粉在偏光顯微鏡下呈現(xiàn)黑十字現(xiàn)象，不同類(lèi)型的淀粉其黑十字形象不同（圖2）；草酸鈣結(jié)晶類(lèi)型多樣，在偏光顯微鏡下呈不同的多彩顏色（圖2）；石細(xì)胞在植物體內(nèi)廣泛分布，其細(xì)胞壁在偏光顯微鏡下呈亮黃色或亮橙黃色；纖維、導(dǎo)管在偏光顯微鏡下則呈強(qiáng)弱不同的色彩；動(dòng)物的骨碎片、肌纖維、結(jié)晶狀物、毛茸等也呈現(xiàn)出不同的偏光特性；礦物類(lèi)物質(zhì)多具有偏光特性。2021/5/911偏光下的草酸鈣晶體與淀粉粒2021/5/9125、倒置生物學(xué)顯微鏡2021/5/9136、掃描電子顯微鏡2021/5/914掃描電鏡工作原理2021/5/915掃描電子顯微鏡（簡(jiǎn)稱掃描電鏡）

分辨率高，放大倍率5~100,000，能使物質(zhì)的圖像呈現(xiàn)顯著的表面立體結(jié)構(gòu)特征，樣品制備操作又較簡(jiǎn)易。在藥材鑒定，特別在同科屬種間的表面結(jié)構(gòu)的鑒別比較上，已成為一種新的手段。如：掃描電子顯微鏡用于研究花粉粒、種皮和果皮的表面紋飾，莖、葉表皮組織的結(jié)構(gòu)(毛茸、腺體、氣孔、角質(zhì)層、蠟層、分泌物等)的細(xì)微特征，木類(lèi)藥材的解剖以及動(dòng)物體壁、鱗片及毛等的鑒別。

2021/5/916小孢子囊及小孢子微形態(tài)差異2021/5/917十三種卷柏大孢子微形態(tài)差異2021/5/918使用顯微鏡的注意事項(xiàng)

合理制片，蓋玻片上不得有試液殘留，避免污染物鏡及載物臺(tái)，損傷鏡頭。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，由低到高逐級(jí)變換、選用合適放大倍數(shù)的物鏡觀察。使用40倍物鏡時(shí)，可用細(xì)螺旋調(diào)節(jié)焦距，禁止用粗螺旋調(diào)節(jié)；也不得移動(dòng)載玻片。根據(jù)觀察物象，選擇偏光條件確認(rèn)特征。用畢，應(yīng)將最小物鏡與通光孔相對(duì)，關(guān)閉光源，罩好，收置起來(lái)。顯微鏡的光學(xué)部分，只能用特殊的擦鏡頭紙擦拭。2021/5/9197、常用制片法

——永久片制作技術(shù)

藥材切片標(biāo)本的制作方法較多。在藥材鑒定的研究工作中往往將其制成石蠟切片(永久切片)，因制成的石蠟切片外形較完整，厚薄均勻，且可制得連續(xù)切片，觀察時(shí)方便，又能長(zhǎng)期保存。但由于制片技術(shù)較復(fù)雜，費(fèi)時(shí)太多，不適用于日常檢驗(yàn)。2021/5/920常用制片法

——臨時(shí)制片技術(shù)徒手切片或滑走切片法：表面裝片：為觀察葉類(lèi)、花類(lèi)及全草類(lèi)藥材的葉片、花冠、萼片、苞片等的表皮組織及其附屬物的特征。解離組織裝片：可清楚地觀察比較堅(jiān)硬的細(xì)胞組織，如導(dǎo)管、纖維、石細(xì)胞等的形態(tài)?；ǚ哿Ｅc孢子制片法：觀察花粉粒、孢子等的形態(tài)特征或構(gòu)造，需用花粉粒與孢子制片法制片。磨片法：觀察礦物藥或較堅(jiān)硬的動(dòng)物類(lèi)藥材如珍珠、石決明及動(dòng)物骨骼，可采用磨片法制片。2021/5/9217.1

儀器和用具

儀器

生物學(xué)顯微鏡（最好具有2.5×或4×物鏡頭及偏光裝置）、顯微攝影裝置或顯微描繪器、電腦聯(lián)機(jī)裝置及其圖像處理軟件、滑走切片機(jī)、小型粉碎機(jī)、臺(tái)式離心機(jī)、醫(yī)用超聲儀等。

用具

放大鏡、刀片、鑷子、剪刀、解剖針

載玻片、蓋玻片2021/5/9227.1儀器和用具

吸濕器（即玻璃干燥器改裝成底部放入蒸餾水加微量苯酚防霉，上部瓷板上置藥材樣品，利用潮氣潤(rùn)濕藥材樣品）培養(yǎng)皿或小燒杯、酒精燈、試管，試管架、滴管、玻璃棒、乳缽、綢布、濾紙、火柴等。2021/5/9237.2試液——封藏劑7.2.l

水合氯醛試液為常用封藏液，也是透化劑?？墒垢煽s的細(xì)胞膨脹而透明，并能溶解淀粉粒、樹(shù)脂、蛋白質(zhì)、葉綠素及揮發(fā)油等，加熱后更為明顯。

7.2.2

甘油醋酸試液（斯氏液）為常用封藏液，專(zhuān)用于觀察淀粉形態(tài)，可使淀粉粒保持原形，便于測(cè)量其大小。

7.2.3

甘油-乙醇溶液封藏液，也是軟化劑。常用于保存植物性材料及臨時(shí)切片，有軟化組織的作用。2021/5/9243試液——染色劑7.2.4

蘇丹Ⅲ試液此液可使木栓化、角質(zhì)化細(xì)胞壁及脂肪油、揮發(fā)油、樹(shù)脂等染成紅色或淡紅色。

7.2.5

釕紅試液（臨用新制）此液可使粘液染成紅色。

7.2.6

間苯三酚試液此液與濃鹽酸合用，可使木化細(xì)胞壁染成紅色或紫紅色。

7.2.7

碘試液（臨用現(xiàn)配。應(yīng)置棕色瓶?jī)?nèi)保存）此液可使淀粉染成藍(lán)色或紫色；蛋白質(zhì)或糊粉粒染成棕色或黃棕色。2021/5/925

7.2.8硝鉻酸試液此液為常用的“植物組織解離液”。各檢品的解離浸泡時(shí)間，按材料的質(zhì)地不同而異。7.2.9α-萘酚試液此液可使菊糖染成紫紅色，并很快溶解。

3.1l氯化鋅碘試液此液用于檢查木質(zhì)化與纖維素細(xì)胞壁，前者顯黃棕色，后者顯藍(lán)色或紫色。2021/5/9267.3

顯微標(biāo)本的制作7.3.1

橫切制片或縱切制片

7.3.1.1

藥材的預(yù)處理將應(yīng)觀察的部位、切成適當(dāng)大小的塊或段，一般以寬lcm、長(zhǎng)3cm為宜，切面削平整。質(zhì)地軟硬適中的樣品可直接進(jìn)行切片；質(zhì)地堅(jiān)硬的則需先使其軟化后再切片。2021/5/927制片的預(yù)處理——軟化

軟化方法可采用放在吸濕器中悶潤(rùn)，或在水中浸軟或煮軟。經(jīng)軟化處理的材料，檢查軟化是否合適，可用刀片切割材料，若較容易切下薄片，則表示軟化適宜。有些根、根莖、莖及木類(lèi)藥材，質(zhì)地較堅(jiān)實(shí)，可將削平的切面浸水中片刻，待表面潤(rùn)濕時(shí)取出，直接切片也能切成較完整的薄片。過(guò)于柔軟的樣品，可將其浸入70%~95%乙醇中，約20分鐘后可變硬些，再切片。2021/5/928制片的預(yù)處理——禁忌

藥材預(yù)處理時(shí)，應(yīng)注意不能影響要觀察的顯微鑒別特征。如要觀察菊糖、粘液等在軟化、切片、裝片等過(guò)程中，均不可與水接觸，以免溶解消失；要觀察揮發(fā)油、樹(shù)脂等，則不可與高濃度乙醇或其它有機(jī)溶媒接觸。如：茯苓淀粉粒菊糖2021/5/9297.3.1.2切片在檢驗(yàn)工作中，此法最常用，操作簡(jiǎn)便，迅速，制成的切片保持其細(xì)胞內(nèi)含物的固有形態(tài)，便于進(jìn)行各種顯微化學(xué)反應(yīng)觀察2021/5/9301)

徒手切片法切片

一手持刀片，另一手拇指和食指夾持樣品，中指托著樣品的底部，使樣品略高出食、拇二指；肘關(guān)節(jié)應(yīng)固定，使樣品的切面保持水平，刀口向內(nèi)并使刀刃自前向后切削，即可得薄切片。操作時(shí)，材料的切面和刀刃須經(jīng)常加水或50%乙醇保持濕潤(rùn)，防止切片粘在刀片上。切好的切片用毛筆蘸水輕輕從刀片上推入盛有水或50％乙醇的培養(yǎng)皿中。2021/5/9312)滑走切片機(jī)切片此法不需要較高的技巧，只要了解掌握操作方法，短時(shí)間內(nèi)即可學(xué)會(huì)并切出較薄的切片，適用于切質(zhì)地堅(jiān)實(shí)、形狀較大的藥材樣品，柔軟的樣品經(jīng)冷凍處理亦可切得較薄的切片。

2021/5/932切片前：

應(yīng)檢查切片機(jī)是否穩(wěn)固，并調(diào)試刀具。將切片刀夾持在夾刀器上夾緊，調(diào)整刀的角度(約0。~15。)；調(diào)整厚度調(diào)節(jié)器至所需厚度。把制備好的樣品用兩塊軟木夾住或直接放在切片機(jī)的材料固定器上夾緊夾正，使樣品露出軟木塊或固定器上端0.5cm，調(diào)整好樣品高度，使刀刃靠近樣品的切面且平行并略高于刀刃約0.5~1mm。2021/5/933切片時(shí)

用右手握夾刀器柄，往操作者方向迅速拉動(dòng)，切下的切片附著于刀的表面上，用毛筆蘸水把切片取下放于盛水的培養(yǎng)皿中。將刀推回原處，轉(zhuǎn)動(dòng)厚度推進(jìn)器，用毛筆蘸水潤(rùn)濕材料切面及刀刃，再拉刀柄，往返推拉，可得到許多厚度均勻完整的切片。若切片不成功，應(yīng)檢查切片刀是否太鈍，則應(yīng)磨刀或換鋒銳的切片刀，若切得太薄而破碎，則逐漸增加厚度至能切得完整的薄片為度。注意：夾持在材料固定器上的樣品切面接近于固定器上端時(shí)，必須注意防止切片刀刃碰撞固定器而損毀切片刀。2021/5/9347.3.1.3

裝片

選取薄而平整的切片置載玻片上，根據(jù)所要觀察的內(nèi)容要求，滴加適宜的試液1~2滴，蓋好蓋玻片，即可在顯微鏡下觀察。為防止較大的切片彎卷，可選取理想的切片，用兩張載玻片夾住，浸于水中放置4小時(shí)使材料壓平，放入95%乙醇中固定，甘油裝片觀察。2021/5/935透化

在載玻片上放有切片處滴加1~2滴水合氯醛試液，置載玻片于酒精燈上方微微加熱，至邊緣起小泡即停止加熱，可繼續(xù)補(bǔ)充試液再加熱，以不燒干為度，直至切片透化完全為止。2021/5/936注意：

加熱溫度不能過(guò)高，以防水合氯醛試液沸騰，使組織內(nèi)帶入氣泡；加熱時(shí)應(yīng)將載玻片不斷移動(dòng)，以免受熱不勻而炸裂。透化后放冷，加甘油乙醇試液l~2滴后加封蓋片，貼上標(biāo)簽。冬日室溫較低時(shí)，透化后不待放冷即滴加甘油乙醇液，以防水合氯醛結(jié)晶析出而妨礙觀察。水合氯醛試液能使已收縮的細(xì)胞膨脹，便于清楚地觀察組織構(gòu)造；可溶解淀粉粒、蛋白質(zhì)、葉綠體、樹(shù)脂、揮發(fā)油等，對(duì)草酸鈣結(jié)晶無(wú)作用，為觀察草酸鈣結(jié)晶的良好試劑。如需觀察菊糖等一些多糖物質(zhì)則加水合氯醛試液不加熱。2021/5/9377.3.2

粉末制片

主要用于粉末狀的藥材及藥材粉末制成的成方制劑的觀察。

4.2.l

藥材粉末制備取干燥藥材，磨或銼成細(xì)粉（通常應(yīng)過(guò)80目以上藥篩），裝瓶，貼上標(biāo)簽。制備粉末時(shí)，注意取樣的代表性。例如：根類(lèi)藥材要切取根頭、根中段及根尾等部位，并全部磨粉，過(guò)4號(hào)篩，混合均勻，不得丟棄渣頭。干燥時(shí)，一般溫度不能超過(guò)60℃，避免淀粉粒糊化，有礙觀察。2021/5/9387.2.2

粉末制片

用解剖針挑取樣品粉末少許，置載玻片的中央，加適宜的試液1滴，用針攪勻(如為酸或堿時(shí)應(yīng)用細(xì)玻棒代替針)，待液體滲入粉末后，用左手食指與拇指夾持蓋玻片的邊緣，使其左側(cè)與藥液層左側(cè)接觸，再用右手持小鑷子或解剖針托住蓋玻片的右側(cè)，輕輕下放，則液體逐漸擴(kuò)延充滿蓋玻片下方。如液體未充滿蓋玻片，應(yīng)從空隙相對(duì)邊緣滴加液體，以防產(chǎn)生氣泡；若液體過(guò)多，用濾紙片吸去溢出的液體，最后在載玻片的左端貼上標(biāo)簽或書(shū)寫(xiě)上標(biāo)記。2021/5/9397.3.3顯微化學(xué)分析

丁香切片滴加3%氫氧化鈉的氯化鈉飽和液，油室內(nèi)有針狀丁香酚鈉結(jié)晶析出；北柴胡橫切片加無(wú)水乙醇-濃硫酸1：1液，木栓層、栓內(nèi)層和皮層顯黃綠色至藍(lán)綠色。2021/5/9407.3.4微量升華法

利用藥材所含成分有升華現(xiàn)象，置顯微鏡下觀察結(jié)晶形狀、色澤。如大黃，可見(jiàn)菱狀針狀或羽狀結(jié)晶。2021/5/9417.3.5

成方制劑粉末裝片

按劑型不同，分別處理樣品，按粉末制片法裝片觀察。1)散劑、膠囊劑可直接取出粉末（內(nèi)容物為顆粒狀的應(yīng)研細(xì)）裝片，或透化裝片。2021/5/9422)

片劑

可取2~3片，水丸、糊丸、水蜜丸、錠劑等（有包衣者除去包衣）取數(shù)丸或1~2錠，置于乳缽中研細(xì)，取出適量粉末裝片，或透化裝片。

2021/5/9433)

蜜丸劑

樣品可用兩種方法處理：(1)用解剖刀沿蜜丸正中切開(kāi)，從切面由外至內(nèi)刮取少許樣品，置載玻片中央，滴加適宜的試液，用玻璃棒攪勻。按上述粉末制片法裝片，或透化裝片。(2)將樣品切碎放入容器，加水?dāng)嚢柘礈?，然后置離心管中離心、沉淀。也可置超聲儀中處理少時(shí)，以助樣品分散。如此反復(fù)以除盡蜂蜜后，取沉淀或透化后裝片。**

含揮發(fā)性成分的制劑取其粉末進(jìn)行微量升華裝片。2021/5/9447.3.4

粉末制片的注意事項(xiàng)

1)

粉末藥材制片時(shí)，每片取用量宜少不宜多，為使觀察全面，可多做些制片。如取量多，顯微特征單一輪廓不清，反而費(fèi)時(shí)，不易得出準(zhǔn)確結(jié)論。成方制劑的粉末檢查，是在多味藥材粉末中尋找某一味藥的某一顯微特征，有時(shí)較難查見(jiàn)，可以取粉末適量，置試管或小燒杯中，加水合氯醛液透化(加適量甘油以防水合氯醛結(jié)晶析出)，攪勻，用吸管吸取混懸液裝片，觀察。

2021/5/9452)

粉末樣品如用水或稀甘油裝片時(shí)，可先加少量乙醇使其潤(rùn)濕，以避免或減少氣泡的形成，或反復(fù)將蓋玻片沿一側(cè)輕抬，亦可使多數(shù)氣泡逸出。攪拌時(shí)產(chǎn)生的氣泡可隨時(shí)用針將其移出。

3)

裝片用的液體易揮發(fā)，裝片后應(yīng)立即觀察。用水裝片也較易蒸發(fā)而干涸，通常滴加少許甘油可延長(zhǎng)保存時(shí)間。2021/5/9467.3.5

表面制片

主要用于葉類(lèi)、花類(lèi)(萼片、花瓣)、果實(shí)類(lèi)、草質(zhì)莖及鱗莖類(lèi)等藥材的表面特征如毛茸、氣孔、表皮細(xì)胞等的觀察。質(zhì)地菲薄的藥材可以整體裝片；較厚的藥材則需撕下表皮裝片。

4.3.1

整體裝片適用于較薄的葉片、萼片和花瓣。剪取欲觀察部位約4mm2的兩小片，一反一正放在載玻片上，加水合氯醛試液加熱透化，補(bǔ)充封藏液，蓋好玻片即得。

2021/5/9477.3.6

表皮撕離裝片

適用于較厚的或新鮮藥材不便于整體裝片的樣品。將軟化了的或新鮮材料固定住，然后用鑷子夾住要?jiǎng)內(nèi)∷弘x的部分，小心的撕離，或用解剖刀輕輕割(刮)去不需要的各層組織，只保留表皮層(上層或下層)，將欲觀察的表皮表面觀朝上，置載玻片上，加水合氯醛試液加熱透化，補(bǔ)充封藏液，蓋好玻片即得。2021/5/9487.3.7

解離組織片

適用于厚壁組織或輸導(dǎo)組織等的單個(gè)細(xì)胞的顯微觀察。將樣品切成段(長(zhǎng)約5mm，粗約2mm)或片(厚約lmm)，觀察纖維或?qū)Ч艿茸詈们谐煽v長(zhǎng)的小段。然后根據(jù)細(xì)胞壁的性質(zhì)，按照下列方法之一進(jìn)行處理：對(duì)于薄壁組織占大部分，木化組織少或分散存在的樣品，可用氫氧化鉀法；如樣品堅(jiān)硬，木化組織較多或集成較大群束的樣品，可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。2021/5/9491)

氫氧化鉀法

置樣品于試管中，加5％氫氧化鉀溶液適量，加熱至用玻璃棒擠壓，能離散為止，傾去堿液，加水洗滌后，取出少量置載玻片上，用解剖針?biāo)洪_(kāi)，以稀甘油裝片觀察。

2021/5/9502)

硝鉻酸法

置樣品于小燒杯中，加硝鉻酸試液（20%硝酸與20%鉻酸的等量混合液）適量，使之浸沒(méi)樣品，放置約30~60分鐘。堅(jiān)硬的樣品需時(shí)要長(zhǎng)些，也可在水浴上微溫，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，用水洗滌后，照氫氧化鉀法操作裝片。2021/5/9513)

氯酸鉀法

置樣品于試管中，加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量，緩緩加熱，待產(chǎn)生的氣泡漸少時(shí)，再及時(shí)加入氯酸鉀少量以維持氣泡持續(xù)地發(fā)生，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，用水洗滌后，照氫氧化鉀法操作裝片。

2021/5/9524)

注意事項(xiàng)

用氯酸鉀法制片時(shí)，每次加入的氯酸鉀不可過(guò)多，加熱溫度不宜過(guò)高，否則突沸容易使液體逸出管外。加熱時(shí)間長(zhǎng)短因樣品的硬度和木化程度而異，通常約需5~15分鐘。操作過(guò)程中產(chǎn)生的氯氣有毒，應(yīng)注意通風(fēng)。

用硝鉻酸法解離也可在載玻片上進(jìn)行。即取一塊厚度適當(dāng)?shù)臉悠?，置載玻片上，滴加硝鉻酸試液使之浸沒(méi)，放置約20分鐘后，輕輕壓下或移動(dòng)蓋玻片使之分離。其余操作同前，此法解離的細(xì)胞，可以看清其分離的組織部位。2021/5/9537.3.8

花粉粒與孢子制片

取花粉、花藥(或小的花)或孢子囊群（干燥樣品浸于冰醋酸中軟化），用玻璃棒搗碎，紗布過(guò)濾，濾液置離心管中，離心，取沉淀加新鮮配制的醋酐與硫酸(9：1)的混合液l~3mL，置水浴上加熱2~3分鐘，離心，取沉淀，用水洗滌2次，可直接用水合氯醛試液裝片，具體操作同粉末標(biāo)本片。也可加50％甘油與1％苯酚3～4滴，用品紅甘油膠封藏觀察。2021/5/9547.3.9

磨片

凡需觀察斷面，以一般切片法又無(wú)法制作的標(biāo)本，如堅(jiān)硬的動(dòng)物類(lèi)藥材珍珠、石決明、動(dòng)物骨骼、礦物藥等可采用磨片法制片。片的厚度一般為20~50μm。磨片方法有手工磨制與機(jī)器磨制。

手工磨制

機(jī)器磨制2021/5/9557.4

顯微測(cè)量

顯微鑒定時(shí)用于測(cè)量細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等大小的方法最多的是長(zhǎng)度測(cè)量。常用的量具是目鏡測(cè)微尺和載物臺(tái)測(cè)微尺。

5.1

目鏡測(cè)微尺又稱目鏡量尺或目微尺。是放在目鏡內(nèi)的一種標(biāo)尺，為一個(gè)直徑18~20mm的圓形玻璃片，中央刻有精確等距離的平行線刻度。

目鏡測(cè)微尺是用以直接測(cè)量物體用的，使用前必須用載物臺(tái)測(cè)微尺來(lái)標(biāo)定。

5.2

載物臺(tái)測(cè)微尺又稱鏡臺(tái)測(cè)微尺或臺(tái)微尺。為一種特制的載玻片，中央粘有一小圓形玻片，上刻有將lmm精確等分為100小格的細(xì)線，每一小格長(zhǎng)為10μm，用以標(biāo)定目鏡測(cè)微尺。2021/5/9567.4.1

細(xì)胞及其內(nèi)含物的測(cè)量方法

將欲測(cè)目的物的顯微制片置顯微鏡載物臺(tái)上，對(duì)光，調(diào)焦，移動(dòng)載片，使需測(cè)量的目的物置于目鏡量尺范圍內(nèi)，調(diào)清物象，用目鏡測(cè)微尺測(cè)量目的物的小格數(shù)，乘以上述每一小格相當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度（μm），即得。2021/5/9577.4.2顯微測(cè)量注意事項(xiàng)1)

通常在高倍鏡下進(jìn)行測(cè)量，結(jié)果較為準(zhǔn)確。但欲測(cè)量較長(zhǎng)的目的物為纖維、導(dǎo)管、非腺毛等，在低倍鏡下測(cè)量較為方便。2021/5/958

7.4.2

顯微測(cè)量注意事項(xiàng)2)

應(yīng)記錄每次測(cè)量數(shù)據(jù)，并分析數(shù)據(jù)的最小量值、最大量值和多見(jiàn)量值(μm)。如浙貝母粉粒直徑為有少量略高于或低于規(guī)定的數(shù)值。6~56μm，表示最小量值和最大量值；如為6~40~56μm，中間的數(shù)值表示多見(jiàn)量值。測(cè)量直徑時(shí)，應(yīng)以物體中部為準(zhǔn)。3)

測(cè)量時(shí)，如大小與規(guī)定有差異時(shí)，允許有少數(shù)低于或超出規(guī)定范圍的數(shù)值。2021/5/9597.5顯微鑒別法