傳染病類膠體金試紙課件

傳染病項目HIVHCVTP乙肝兩對半（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）傳染病類膠體金試紙傳染病產品人類免疫缺陷病毒抗體檢測試劑盒梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒丙型肝炎病毒抗體檢測試劑盒乙肝表面抗原檢測試劑盒乙肝表面抗體檢測試劑盒乙肝兩對半檢測試劑盒傳染病類膠體金試紙一、人類免疫缺陷病毒抗體檢測傳染病類膠體金試紙艾滋病簡介獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS，艾滋?。?，分為兩型：HIV-1型和HIV-2型，是人體感染了“人類免疫缺陷病毒”（HIV-humanimmunodeficiencyvirus）（又稱艾滋病病毒）所導致的傳染病。HIV是一種能攻擊人體免疫系統(tǒng)的病毒。它把人體免疫系統(tǒng)中最重要的T4淋巴組織作為攻擊目標，大量破壞T4淋巴組織，破壞人的免疫平衡，使人體成為各種疾病的載體。HIV本身并不會引發(fā)任何疾病，而是當免疫系統(tǒng)被HIV破壞后，人體由于抵抗能力過低，并感染其它的疾病導致各種復合感染而死亡。人不會死于艾滋病，而是會死于與艾滋病相關的疾病。傳染病類膠體金試紙1、HIV實驗室檢測的進展血清學實驗HIV核酸檢測基因芯片技術的應用早期的診斷，主要通過血清學試驗檢測抗HIV抗體，間接地診斷HIV感染，至今為止血清學試驗依然是HIV診斷的主要依據(jù)。

近年來，分子生物學技術的發(fā)展，HIV檢測也在變化，PCR、實時熒光定量PCR和基因芯片的運用傳染病類膠體金試紙2、血清學試驗血清學試驗分為初篩和確認試驗，最常用的初篩試驗和確認試驗分別是酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）和免疫印跡試驗（WesternBlot）初篩的試劑經過了第一代、第二代、第三代后已經發(fā)展到第四代檢測試劑第一代：1985年，主要以病毒裂解物和部分的純化的病毒抗原包被反應板，檢測血清中的抗體，由于包被抗原不很純，假陽性率較高。第二代：1990年，使用基因工程方法得到重組抗原和合成肽包被反應板，由于純化抗原的使用，特異性有了很大的提高。第三代：使用雙抗原夾心法檢測抗體，進一步提高靈敏度。第四代：在第三代的基礎上進一步增加了P24抗原的檢測，同時檢測HIV抗體和P24抗原進一步縮短“窗口期”。傳染病類膠體金試紙3、HIV檢測試劑的發(fā)展一、朝著簡便快速方向發(fā)展二、朝著提高敏感性、特異性，縮短窗口期方向發(fā)展4、公司膠體金免疫層析法進展一、第三代試劑的研制使用HIV-I型重組gp41抗原和HIV-II型gp36抗原包被NC膜，HIVI+II型重組抗原標記膠體金，快速的檢測血清中HIV-I和II型抗體二、P24抗原的檢測同時檢測P24抗原和HIV-I+II聯(lián)合檢測，可以提高試劑的敏感性減少急性感染者的窗口期診斷。傳染病類膠體金試紙二、梅毒螺旋體抗體檢測傳染病類膠體金試紙梅毒簡介梅毒螺旋體（TreponemaPallidun）是梅毒的病原體，因其透明，不易著色，故又稱蒼白螺旋體。梅素螺旋體對溫度、干燥均特別敏感，離體干燥1-2小時死亡，41℃中1小時死亡，對化學消毒劑敏感，1-2%石炭酸中數(shù)分鐘死亡，對青霉素、四環(huán)素、砷劑等敏感。人是梅梅毒的唯一傳染源，由于感染方式不同可分先天性梅毒和后天性梅毒。先天性梅毒：也稱胎傳梅毒。螺旋體通過患病孕婦經胎盤進入胎兒血循環(huán)，引起胎兒的全身性感染。梅毒螺旋體在胎兒的肝、脾、腎上腺等器官大量繁殖導致流產、早產、死胎或出生活的梅毒兒。早期病變有梅毒性鼻炎，梅毒性天皰瘡和斑丘疹：晚期呈現(xiàn)鋸狀形牙、先天性耳聾和間質性角膜炎等。獲得性梅毒：又稱后天梅毒。主要經性接觸傳染，少數(shù)也可通過接吻、哺乳和接觸有傳染性損害的病人帶菌的日常用品而傳染。此外，輸帶菌的新鮮血也可傳染。獲得性悔毒反復穩(wěn)伏與再發(fā)為其特點，整個病程分為3期。一、二期梅毒又統(tǒng)稱為早期梅毒，此期傳染性強而破壞性小。三期梅毒又稱為晚期梅毒，該期傳染性小，病程長、而破壞性大。傳染病類膠體金試紙梅毒的檢測1、病原體的檢測直接觀察分泌物中的梅毒螺旋體，如見到運動的蒼白螺旋體可直接診斷梅毒，是最特異、最準確的診斷方法，但是靈敏度低。2、梅毒血清學試驗

是梅毒診斷的最主要的實驗室檢查方法，根據(jù)所用抗原不同分為兩類：非梅毒螺旋體抗原血清試驗（非特異性抗體檢測試驗）和梅毒螺旋體抗原血清試驗梅毒螺旋體含有表面抗原，能刺激機體產生兩類抗體。一類為抗螺旋體的特異性抗體；另一類抗體能與廣泛分布于生物組織中的類脂抗原發(fā)生非特異性反應，這類抗體成為反應素，為非特異性抗體非梅毒螺旋體抗原血清試驗：用心磷脂做抗原檢測血液中的心磷脂抗體，即反應素。目前多數(shù)醫(yī)院將此試驗作為梅毒常規(guī)篩選試驗，由于治療后反應素會轉陰或消失，因此此類試驗可觀察療效、復發(fā)和再感染，其靈敏度高但特異性低，此類試驗適用于Ⅱ期梅毒，而不適用于Ⅰ期和Ⅲ期梅毒，包括潛伏梅毒和神經梅毒。梅毒螺旋體抗原血清試驗：這種試驗敏感性和特異性均高,一般用作確認試驗

。這種試驗是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG或IgM抗體,這種抗體即使患者經過足夠治療,仍能長期存在,甚至終身不消失,血清反應持續(xù)存在陽性,因此,不能用于觀察療效。傳染病類膠體金試紙3、基因診斷技術檢測梅毒螺旋體（TP-PCR）TP-PCR檢測梅毒螺旋體DNA，特異性很強，敏感性很高，是目前診斷梅毒螺旋體的先進方法。4、腦脊液檢查用于診斷神經性梅毒傳染病類膠體金試紙梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒

使用TP重組抗原包被NC膜，TP重組抗原標記膠體金，快速的檢測血清中TP抗體。傳染病類膠體金試紙三、丙型肝炎病毒抗體檢測傳染病類膠體金試紙丙型肝炎簡介丙型病毒性肝炎是由丙肝病毒（HCV）所引起，是通過輸血或血制品、血透析、單采血漿還輸血球、腎移植、靜脈注射毒品、性傳播、母嬰傳播等傳染引起的。傳播途徑類似乙型肝炎，但由于體液中HCV含量較少，且為RNA病毒，外界抵抗力較低，其傳播方式較乙型肝炎局限，傳染力也較乙肝病毒為弱。（1）輸血及血制品傳播（2）注射、針刺、器官移植、血液透析傳播（3）生活密切接觸傳播（4）性傳播（5）母嬰傳播傳染病類膠體金試紙丙型病毒性肝炎的檢測（一）血常規(guī)、尿常規(guī)（二）肝功能檢查（三）其他生化指標檢測（四）病原學檢查1、抗HCVIgM和抗HCVIgG2、HCVRNA（五）影像學檢查傳染病類膠體金試紙丙型肝炎病毒抗體檢測目前診斷主要依靠抗HCV2IgG及HCV2RNA的檢測，IgM類抗體的檢測主要用于一些臨床研究?？笻CV2IgGELISA試劑自1989年問世以來,包被抗原已從單純的病毒NS3區(qū)發(fā)展到包括C區(qū)、NS3區(qū)、NS4區(qū)、NS5區(qū)抗原的第3代試劑HCV各片段抗體檢出的臨床意義

抗體臨床意義CHCV感染后出現(xiàn)很早，陽性率也很高；在抗-HCV檢測中發(fā)揮重要作用NS3

抗原的免疫原性很強，相應的抗體滴度也很高，HCV感染后出現(xiàn)很早，同C區(qū)抗體一樣在抗-HCV的檢測中發(fā)揮重要作用NS4HCV感染后出現(xiàn)延遲，持續(xù)陽性可能與疾病的慢性化有關NS5HCV感染后出現(xiàn)較早，可用于急性期感染的診斷傳染病類膠體金試紙丙型肝炎病毒抗體檢測試劑盒原理

使用HCV重組抗原（包括C區(qū)、NS3區(qū)）包被NC膜，HCV重組抗原標記膠體金，快速的檢測血清中HCV抗體傳染病類膠體金試紙四、乙型病毒性肝炎檢測傳染病類膠體金試紙乙型病毒性肝炎的簡介乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一種世界性疾病。發(fā)展中國家發(fā)病率高，據(jù)統(tǒng)計，全世界無癥狀乙肝病毒攜帶者(HBsAg攜帶者)超過2.8億，我國約占1.3億。多數(shù)無癥狀，其中1/3出現(xiàn)肝損害的臨床表現(xiàn)。目前我國有乙肝患者3000萬。乙肝的特點為起病較緩，以亞臨床型及慢性型較常見。無黃疸型HBsAg持續(xù)陽性者易慢性化。本病主要通過血液、母嬰和性接觸進行傳播。乙肝疫苗的應用是預防和控制乙型肝炎的根本措施。傳染病類膠體金試紙?zhí)禺愋栽\斷指標及其臨床意義一、乙肝表面抗原（HBsAg）HBsAg血清中HBsAg陽性是HBV感染的標志。本身具有抗原性，無傳染性。但由于HBsAg常與HBV同時存在，故認為是傳染性標志之一。二、乙肝表面抗體（HBsAb）抗-HBs為感染HBV或接種乙肝疫苗后產生的一種保護性抗體?？?HBs在初次感染HBV后6～23周出現(xiàn)，約20%在感染早期出現(xiàn)。抗-HBs陽性表示已獲得免疫。定量檢測抗-HBs的效價，認為抗-HBs效價≥10IUml表示有保護性。三、e抗原（HBeAg）和e抗體（HBeAb）HBeAg為HBV復制的重要指標。e抗體為病毒復制停止標志。病毒復制減少，傳染性較弱，但并非完全沒有傳染性傳染病類膠體金試紙?zhí)禺愋栽\斷指標及其臨川意義四、HBcAg及抗-HBCHBcAg為HBC復制指標。外周血中無游離的HBcAg，所以血清中一般測不出。抗-HBc為HBV感染的標志?？?HBcIgM陽性是急性或近期HBV感染的指標，提示有病毒復制。其效價高代表急性期，效價低代表為慢性HBV感染或無癥狀HBsAg攜帶者。抗-HBcIgG陽性表示為既往感染HBV的指標。五、HBV-DNAHBV-DNA陽性是表示HBV復制的最可靠指標。HBV標志出現(xiàn)的順序為：

HBsAg、HBeAg、抗-HBc-（抗-HBcIgM、抗-HBcIgG）、抗-HBe、抗-HBs，同時檢測以上各項可說明HBV感染所處的階段。傳染病類膠體金試紙判斷乙肝傳染性乙肝“三對”檢查大三陽（135陽性）：即表面抗原(HBsAg)、E抗原(HBeAg)、核心抗體(HBcAb)同時陽性，E抗原陽性是HBV復制的直接證據(jù)，這種情況出現(xiàn)，表示體內有HBV復制，傳染性強。小三陽（145陽性）：即表面抗原(HBsAg）、E抗體(HBeAb)、核心抗體（HBcAb)同時陽性，提示急性或慢性乙型肝炎，體內病毒復制，為乙型肝炎病毒復制狀態(tài)。小三陽通常是由“大三陽”轉變而來，是人體針對E抗原產生了一定程度的免疫力。單二陽：即只有表面抗體(HBsAb）為陽性，乙肝疫苗接種者，若僅此項陽性，應視為乙肝疫苗接種后正?，F(xiàn)象；感染乙肝病毒后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的人體內也會產生乙肝表面抗體，這是一種好現(xiàn)象傳染病類膠體金試紙判斷乙肝傳染性45陽性：

即E抗體(HBeAb)、核心抗體（HBcAb)同時陽性，(1)既往感染過HBV；(2)急性HBV感染恢復期；(3)少數(shù)標本仍有傳染性。15陽性：即表面抗原(HBsAg)、核心抗體(HBcAb)，(1)急性HBV感染；(2)慢性HBsAg攜帶者；(3)傳染性弱。245陽性：急性HBV感染后康復25陽性：既往感染過乙肝病毒，現(xiàn)病毒已基本清除，身體在康復。但也有個別病人仍出現(xiàn)肝功能異常、DNA陽性，考慮病毒是否有變異存在，仍要繼續(xù)治療，仍有免疫力。HBV感染，恢復期。傳染病類膠體金試紙傳染病類膠體金試紙乙型肝炎測定試劑盒原理乙肝表面抗原檢測試劑盒（雙抗體夾心法）預先包被在聚酯膜上的金標記抗HBs單抗SAB-3以及固定于NC膜上測試區(qū)（T）的抗HBS單抗SAB-24，如果血清中含有HBsAg，則最終在T線位置形成夾心結構顯色（SAB24——HBsAg——SAB3——Au），檢測人血中的HBsAg。乙肝表面抗體檢測試劑盒（雙抗原夾心法）預先包被在聚酯膜上的金標記抗人源性HBsAg以及固定于NC膜上測試區(qū)（T）的重組HBsAg，如果血清中含有HBsAb，則最終在T線位置形成夾心結構顯色（重組HBsAg——HBsAb——人源性HBsAg——Au），檢測人血中的HBsAb。乙肝e抗原檢測（雙抗體夾心法）預先包被在聚酯膜上的金標記抗HBe單抗HBe1以及固定于NC膜上測試區(qū)（T）的抗HBe單抗HBe2，如果血清中含有HBeAg，則最終在T線位置形成夾心結構顯色（HBe2——HBeAg——HBe1——Au），檢測人血中HBeAg。傳染病類膠體金試紙乙型肝炎測定試劑盒原理乙肝e抗體（HBeAb）檢測（競爭法）預先包被在聚酯膜上的金標記抗HBe單抗HBe1以及固定于NC膜上測試區(qū)（T）的抗HBe單抗HBe2，含有中和抗原HBeAg的玻纖膜樣品墊，如果血清中沒有HBeAb，則中和抗原HBeAg最終在T線位置形成夾心結構顯色（HBe2——HBeAg——HBe1——Au），如果血清中含有HBeAb，則先與玻纖膜樣品墊中的中和抗原HBeAg反應，不會在T線顯色。所以陽性不顯色、陰性顯色。吸水紙NC膜玻纖膜樣品墊金標墊CT二抗HBe2HBe1—AuHBeAg按照血清的流向，各個步驟的反應：陰性：4、C線：HBe1-Au+二抗→二抗-HBe1-Au（顯色）3、T線：HBeAg-HBe1-Au+HBe2→HBe2-HBeAg-HBe1-Au（顯色）2、金標墊：HBeAg+HBe1-Au→HBeAg-HBe1-Au1、樣品墊：無反應傳染病類膠體金試紙吸水紙NC膜玻纖膜樣品墊金標墊CT二抗HBe2HBe1—AuHBeAg按照血清的流向，各個步驟的反應：陽性：4、C線：HBe1-Au+二抗→二抗-HBe1-Au（顯色）3