中藥復方灰兜巴對糖尿病小鼠模型糖代謝的影響

中藥復方灰兜巴對糖尿病小鼠模型糖代謝的影響

糖尿病是一種常見的慢性代謝性疾病。據現(xiàn)有數據統(tǒng)計，中國有大約5600名糖尿病患者，每年增長約200萬。糖尿病已成為影響人類健康的第三類非感染性疾病。尋找有效的治療方法尤為重要。中藥灰袋巴已經在流行于糖尿病的治療中已經使用了數百年，但它對糖尿病的治療效果沒有得到科學的驗證。因此，通過建立糖尿病動物模型，我們觀察到了中藥復方灰袋巴對血糖、體重、糖持久和尿量的影響，以及中藥復方灰袋巴對糖尿病的影響。1材料和方法1.1實驗動物中心提供SPF級昆明種小鼠,雌雄各半,由中國科學院上海實驗動物中心提供,合格證編號:SLAC.KMNo.00030001SPF級SD大鼠,雌雄各半,由中國科學院上海實驗動物中心提供,合格證編號:SLAC.SDNo.00040021.1.2試劑和培養(yǎng)基中藥復方灰兜巴由西南民族大學藥理實驗室提供;四氧嘧啶、鏈脲佐菌素購自Sigma-Aldrich公司;GenuineONETOUCH?血糖試紙購自強生公司;糖尿樂膠囊購自河南輔仁堂制藥有限公司.酸度計(METTLERTOLEDO公司,美國);Millipore-Q超純水系統(tǒng)(Millipore公司,美國);強生OneTouch?穩(wěn)捷基礎型血糖儀(強生公司,美國)1.3方法1.3.1糖尿病模型動物的制備取體重在23~33g的昆明小鼠,雌雄各半.造模前禁食16小時(自由飲水)后腹腔注射四氧嘧啶160mg/kg取體重在200~250g的SD大鼠,雌雄各半.造模前禁食12小時(自由飲水)后腹腔注射鏈脲佐菌素70mg/kg注射72小時后,禁食6h,斷尾取血測定各實驗動物血糖,取血糖值大于11.1mmol/L者作為糖尿病模型動物.1.3.2各組和給藥、糖凝膠電泳取已成模的小鼠(血糖值≥11.1mmol/L)60只,分成陽性對照組、小、中、高劑量組、模型組和預防組,每組10只,按照小劑量組30mg/ml、中劑量組80mg/ml、高劑量組130mg/ml每日3次,每次1ml灌胃給予中藥復方灰兜巴治療,陽性對照組按照糖尿樂的用藥說明,換算成小鼠劑量灌胃給藥,正常對照組和模型組不予治療.各組連續(xù)給藥15天,分別于第7天、第15天禁食6h后用血糖儀斷尾采血測定血糖及體重.糖耐量實驗在成模后第10天禁食8h后,取對照組、模型組、小、中、高劑量組各10只,按照3g/kg的劑量,灌胃給予50%的葡萄糖,并用血糖儀斷尾取血的方法,記錄0min(灌胃前)、30min、60min和120min的血糖值.1.3.3中藥復方灰兜底巴治療取已成模的大鼠40只,分成對照組、小、中、高劑量組和模型組,每組8只,按照小劑量組30mg/ml、中劑量組80mg/ml和高劑量組130mg/ml每日3次,每次2ml灌胃給予中藥復方灰兜巴治療,記錄各組大鼠入組、成模后第七天及治療后第15天在24小時內的尿量,并計算尿量增長率.2結果2.1各組隨機血糖、糖耐量、隨機血糖的比較實驗組經過中藥復方灰兜巴治療15天后,陽性對照組、預防組、小劑量組和中劑量組的隨機高血糖顯著低于模型組(P<0.001),實驗數據見表1.在控制體重減輕上,小劑量組、中劑量組與陽性對照組的體重均高于模型組(P<0.05),見表2.糖耐量實驗數據見表3,2.2表4顯示了中藥和灰袋巴對糖尿病大鼠模型尿量的影響3糖尿病模型大鼠血糖控制效果血糖是糖尿病臨床診斷的一個主要指標,在實驗過程中,治療組灌胃給予中藥復方灰兜巴15天后,各實驗組的隨機高血糖值均有所下降,陽性對照組、預防組、小劑量組和中劑量組的隨機高血糖顯著低于模型組(P<0.001),高劑量組的隨機高血糖低于小劑量組和中劑量組(P<0.05),陽性對照組與高劑量組無顯著差別(P=0.051),高劑量組的治療效果也優(yōu)于小劑量組和中劑量組(P<0.05),高劑量組與陽性對照組無顯著性差別(P=0.051),說明采用糖尿樂膠囊的陽性對照組和高劑量組在血糖控制上具有近似相同的效果,各治療組的血糖值均得到很好的控制.糖尿病典型的臨床表現(xiàn)為“三多一少”,即多飲、多食、多尿和體重減輕,各實驗組經治療后,小劑量組、中劑量組與陽性對照組的體重均高于模型組(P<0.05),高劑量組的體重高于小劑量組(P<0.05),但與中劑量組(P=0.492)和陽性對照組(P=0.346)相比無顯著差異,模型組的體重則進行性下降,說明在對糖尿病小鼠體重減輕程度的控制上,中劑量組為最佳的有效劑量,與市售的陽性對照藥相比,也達到了近似的效果.糖尿病模型大鼠的尿量增加經治療后也有一定程度的控制,中劑量組大鼠7到14天的尿量增長率與入組到第7天相比,從23.60%下降到-0.4%,出現(xiàn)負增長,高劑量組也從20.08%下降到2.25%,接近正常對照組2.80%的正常增長率除對照組外,各組增長率B與模型組相比,均小于模型組(P<0.05).糖耐量試驗是一種葡萄糖負荷試驗,目的是了解胰島β細胞功能和機體對糖的調節(jié)能力.當胰島β細胞功能正常時,機體在進食糖類物質后,通過調節(jié)機制在2h~3h內可恢復到正常血糖水平,此為耐糖現(xiàn)象.通過對實驗數據分析發(fā)現(xiàn),高劑量組與中劑量組在30min、60min和120min均低于模型組(P<0.05),高劑量組的餐前平均高血糖為11.11mmol/L;餐后120min平均高血糖為11.73mmol/L,血糖基本可以維持平穩(wěn)