食用菌母種的分離課件

食用菌母種的分離制備食用菌母種的分離一、母種培養(yǎng)基的制備及接種培養(yǎng)（一）母種培養(yǎng)基制作：1.用具、設(shè)備：手提消毒滅菌鍋、鋁鍋、試管、電爐、棉花、漏斗、PH試紙、接種箱或超凈工作臺(tái)、培養(yǎng)箱等。

食用菌母種的分離2.培養(yǎng)基配方：①去皮馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸二氫鉀0.5克，磷酸氫二鉀0.1克，硫酸鎂0.5克，蛋白胨2克，水1000亳升，PH值自然（也可根據(jù)不同食用菌品種進(jìn)行調(diào)節(jié)，如草菇PH值7.5-8）。食用菌母種的分離②.去皮馬鈴薯100克，玉米粉30克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸二氫鉀0.5克，磷酸氫二鉀0.1克，硫酸鎂0.5克，蛋白胨2克，水1000亳升，PH值自然。③.去皮馬鈴薯100克，玉米粉15克，麩皮15克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸二氫鉀0.5克，磷酸氫二鉀0.1克，硫酸鎂0.5克，蛋白胨2克，水1000亳升，PH值自然。食用菌母種的分離3.工藝流程：稱量→煮制→分裝→滅菌→排斜面→無(wú)菌檢驗(yàn)食用菌母種的分離培養(yǎng)基的分裝及排斜面示意圖

食用菌母種的分離1．組織分離法制母種（無(wú)性繁殖）將子實(shí)體、菌核、菌索等一小塊組織放于斜面培養(yǎng)基上，使其萌發(fā)為純菌絲的方法，稱為組織分離。該法具有簡(jiǎn)便、易成功、能保持原菌種性狀等優(yōu)點(diǎn)，但重復(fù)多，易退化，應(yīng)與孢子分離交替進(jìn)行。組織分離法適用于絕大多數(shù)食用菌

（二）、母種的接種與培養(yǎng)食用菌母種的分離種菇選擇：在出菇場(chǎng)要選擇肉厚肥大、鮮嫩，出菇早、菇形整齊、菌柄短且無(wú)病害的做種。表面消毒：將種菇表面用清水沖洗干凈，放在接種箱（或無(wú)菌室內(nèi)）進(jìn)行表面消毒。用鑷子將種菇放在培養(yǎng)皿內(nèi)，用另一反鑷子夾75%酒精棉球（或0.1%升汞棉球）對(duì)種菇進(jìn)行表面消毒，然后移入另一培養(yǎng)皿內(nèi)再用無(wú)菌水反復(fù)洗滌三次，洗凈殘留的消毒劑。

實(shí)驗(yàn)方法食用菌母種的分離菌柄與菌蓋交界處取組織塊用解剖刀或鮮剖剪蘸酒精進(jìn)行火焰消毒，冷卻后把自己消毒的種菇縱切開，然后用菌蓋筆菌柄交界處，切取長(zhǎng)寬的0.3~0.5厘米的菌肉組織塊，用接種針移到斜面培養(yǎng)基上，置24℃恒溫箱中培養(yǎng)。

檢查篩選每天檢查試管斜面菌落生長(zhǎng)情況，如從分離的菌肉組織塊上長(zhǎng)出正常的白色菌絲，即分離成功，及時(shí)將生長(zhǎng)出來(lái)的菌絲轉(zhuǎn)移新的試管斜面。若在組織塊附近或其他地方出現(xiàn)其他顏色雜菌生長(zhǎng)應(yīng)予以淘汰。純化培養(yǎng)將菌絲塊移入PDA平板培養(yǎng)若純：四周輻射狀生長(zhǎng)，外緣整齊一致否則：邊緣參差不齊，色素分布不均勻?qū)⑤^一致的菌絲的前端，切割→新培養(yǎng)皿食用菌母種的分離

菌肉組織分離示意圖菌核組織分離示意圖食用菌母種的分離2．孢子分離法（有性繁殖）孢子分離有單孢分離和多孢分離兩種方法。單孢分離由于技術(shù)難度大，主要用于雜交育種的研究，生產(chǎn)上較少采用，一般采用多孢分離法。食用菌母種的分離

孢子收集器示意圖食用菌母種的分離

3、母種轉(zhuǎn)管接種與培養(yǎng)。

母種的接種必須在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行。否則將會(huì)造成嚴(yán)重污染，給生產(chǎn)造成造成巨大損失。然后將所有試管及接種器具放入接種箱里進(jìn)行消毒滅菌，力求滅菌徹底。在點(diǎn)燃酒精燈火焰上進(jìn)行操作，將菌種試管和接種用斜面培養(yǎng)基放在火焰旁。撥去棉塞，把消毒滅菌的接種針伸入菌種試管內(nèi)，挑小塊菌種放入斜面培養(yǎng)基中（見下圖）食用菌母種的分離斜面試管轉(zhuǎn)管接種食用菌母種的分離二、原種培養(yǎng)基的制備及接種培養(yǎng)（一）、原種常用培養(yǎng)基制作：1.用具、設(shè)備：高壓蒸汽滅菌鍋或常壓蒸汽滅菌鍋；鋁鍋、電爐；拌料機(jī)；裝袋機(jī)；無(wú)菌室、接種箱或超凈工作臺(tái)；培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室等。

食用菌母種的分離2.培養(yǎng)基配方：

①木屑培養(yǎng)基：木屑78%，麩皮或米糠20%，石膏1%，糖1%，水適量。適用于培養(yǎng)平菇、木耳、香菇、猴頭。

②棉子殼培養(yǎng)基：棉子殼99.5%，石膏0.3%，水適量。適用于培養(yǎng)平菇、猴頭、金針菇、雞腿菇。

食用菌母種的分離3.培養(yǎng)料的配制⑴木屑、棉籽殼培養(yǎng)料的拌料配制木屑、棉籽殼培養(yǎng)料按配方稱量后，堆制混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水中再拌入。拌料時(shí)要控制料的含水量在60﹪左右。食用菌母種的分離⑵

谷粒培養(yǎng)料的配制谷粒因其營(yíng)養(yǎng)較豐富，制作的菌種具有菌絲萌發(fā)早、吃料快、抗衰老能力強(qiáng)、產(chǎn)量高等優(yōu)點(diǎn)，在生產(chǎn)中應(yīng)用較多。一般是采用浸泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。

食用菌母種的分離4.裝袋或裝瓶

將培養(yǎng)料拌勻裝入菌種瓶（或袋）內(nèi)、裝料松緊適宜，上下一致，裝料高度以齊瓶（袋）肩為宜。然后用錐形木棒在瓶的中央向下插一個(gè)小洞，塞上棉塞。裝好的料瓶（袋）要當(dāng)天滅菌，以免培養(yǎng)料發(fā)霉變質(zhì)。

食用菌母種的分離5.培養(yǎng)基的滅菌

通常采用高壓蒸氣滅菌法和常壓蒸氣滅菌法以達(dá)到滅菌的目的。高壓滅菌2小時(shí)或常壓滅菌于100℃維持8-10小時(shí)，滅菌后培養(yǎng)基最好放在適溫下，空白培養(yǎng)5-7天，以檢查培養(yǎng)基滅菌的效果。如在此期間沒有出現(xiàn)任何雜菌，說(shuō)明滅菌效果良好。待其冷卻30℃以下可接種。食用菌母種的分離三、栽培種培養(yǎng)基的制備及接種培養(yǎng)

栽培種是直接用于生產(chǎn)的菌種。生產(chǎn)種的優(yōu)劣，對(duì)產(chǎn)量有著直接的影響。栽培種的培養(yǎng)基和接種方法，基本上和原種相同。栽培種是用培養(yǎng)好的原種進(jìn)行擴(kuò)大接種的。

食用菌母種的分離

栽培種制作示意圖食用菌母種的分離四、菌種質(zhì)量?jī)?yōu)質(zhì)菌種是食用菌栽培成功的重要保證。因此，在食用菌栽培中，既要了解各類菌種的貯藏保管方法，又要能正確選用菌種，識(shí)別菌種的真假與優(yōu)劣。食用菌母種的分離1、母種的保藏母種量少，一般保藏于冰箱里。2、原種與栽培種的保藏培養(yǎng)好的原種栽培種，如不能馬上使用，可保藏于冰箱里。但也以保藏于陰涼、干燥、干凈的保藏室里。室溫10-200C。溫度低，