課時(shí)跟蹤檢測(cè)（九）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體

課時(shí)跟蹤檢測(cè)（九）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體一、概念檢測(cè)1．判斷正誤，正確的畫“√”，錯(cuò)誤的畫“×”。(1)動(dòng)物細(xì)胞融合過程中既有細(xì)胞膜融合也有核的融合。 (√)(2)與植物原生質(zhì)體融合相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒。 (×)提示：動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素為滅活的病毒。(3)用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后，從小鼠脾臟中只能得到一種B淋巴細(xì)胞。 (×)提示：免疫后的小鼠從脾臟中獲取的是多種B淋巴細(xì)胞。(4)單克隆抗體是單個(gè)B淋巴細(xì)胞增殖并產(chǎn)生的抗體。 (×)提示：單克隆抗體是雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體。(5)單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。 (×)提示：第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，而第二次篩選是為了獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。2．動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是 ()A．動(dòng)物細(xì)胞沒有識(shí)別能力B．動(dòng)物細(xì)胞易被病毒感染C．細(xì)胞膜具有流動(dòng)性D．動(dòng)物細(xì)胞膜易被擊穿解析：選C動(dòng)物細(xì)胞具有識(shí)別能力，誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)依賴細(xì)胞膜的流動(dòng)性，不需要識(shí)別，A錯(cuò)誤，C正確；病毒可以誘導(dǎo)細(xì)胞融合，電融合可以引起膜結(jié)構(gòu)的改變，二者均可以作為誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法，但不屬于誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理，B、D錯(cuò)誤。3．下列關(guān)于雜交瘤細(xì)胞的敘述，錯(cuò)誤的是 ()A．有雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)B．不能無限增殖C．可產(chǎn)生分泌特異性抗體D．可體內(nèi)外培養(yǎng)獲得單抗解析：選B雜交瘤細(xì)胞有雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，A正確；雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體，B錯(cuò)誤，C正確；體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞或者注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或者小鼠腹水內(nèi)就可以提取出大量的單克隆抗體，D正確。4．單克隆抗體與傳統(tǒng)的血清抗體相比，其最大的優(yōu)越之處在于 ()A．單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈”B．單克隆抗體的特異性強(qiáng)，靈敏度高，產(chǎn)量高C．單克隆抗體可以在體外制備D．單克隆抗體的制備過程簡單解析：選B單克隆抗體可用于治療疾病和運(yùn)載藥物，可制成“生物導(dǎo)彈”，屬于單克隆抗體的應(yīng)用，A不符合題意；單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備，B符合題意；雜交瘤細(xì)胞能注射到老鼠體內(nèi)和體外培養(yǎng)，屬于制備過程，即單克隆抗體可在體外制備，C不符合題意；單克隆抗體的制備過程涉及動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，過程復(fù)雜，D不符合題意。5．將小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與一種免疫B淋巴細(xì)胞融合，融合后的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后能產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是 ()A．骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖B．淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合才能產(chǎn)生抗體C．骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，且能產(chǎn)生抗體D．淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖，骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖解析：選D淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖，骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體，因此，將小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與一種免疫B淋巴細(xì)胞融合，融合后的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后能產(chǎn)生單克隆抗體。二、綜合遷移6．1975年鼠源性單克隆抗體的問世，標(biāo)志著現(xiàn)代免疫學(xué)時(shí)代的到來。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 ()A．鼠源性單克隆抗體的獲得是以雜交瘤技術(shù)為基礎(chǔ)的B．鼠源性單克隆抗體可用于檢測(cè)某些腫瘤、病原體、激素等C．鼠源性單克隆抗體進(jìn)入人體后不會(huì)被免疫系統(tǒng)識(shí)別并清除D．轉(zhuǎn)基因技術(shù)開辟了生產(chǎn)全人源化單克隆抗體的新途徑解析：選C鼠源性單克隆抗體的獲得是以雜交瘤技術(shù)為基礎(chǔ)的，是將來源于免疫接種過的小鼠的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，繼而篩選出既能無限增殖又能分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)而進(jìn)行篩選、抗體制備和抗體純化，A正確；鼠源性單克隆抗體可用于檢測(cè)某些腫瘤、病原體、激素等，B正確；鼠源性單克隆抗體進(jìn)入人體后可能會(huì)被免疫系統(tǒng)識(shí)別并清除，C錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)基因技術(shù)開辟了生產(chǎn)全人源化單克隆抗體的新途徑，D正確。7．單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是 ()A．特異性強(qiáng)、靈敏度高B．與細(xì)胞毒素結(jié)合可實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷C．體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D．由免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌解析：選C單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可以大量制備，A正確；利用單克隆抗體的特異性，使其與細(xì)胞毒素相結(jié)合，可實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，B正確；B淋巴細(xì)胞分化程度較高，體外培養(yǎng)難以大量增殖，由免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞，能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖，并分泌單克隆抗體，C錯(cuò)誤，D正確。8．已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基蝶呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。將這兩種細(xì)胞在含氨基蝶呤的試管中混合，加聚乙二醇促融，則試管中細(xì)胞的種類數(shù)和能增殖的細(xì)胞種類數(shù)分別是(不考慮三個(gè)及以上細(xì)胞融合) ()A．3和1 B．5和3C．5和1 D．3和3解析：選C骨髓瘤細(xì)胞和人淋巴細(xì)胞融合形成3種雜交細(xì)胞，則試管中有5種細(xì)胞，即人淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、未發(fā)生融合的人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞。鼠骨髓瘤細(xì)胞能不斷分裂增殖，因此骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞和未發(fā)生融合的骨髓瘤細(xì)胞能增殖，但由于鼠骨髄瘤細(xì)胞增殖的D途徑被氨基蝶呤阻斷，故在含氨基蝶呤的試管中只有雜交瘤細(xì)胞能增殖，C正確。9．如圖為實(shí)驗(yàn)小組同學(xué)根據(jù)細(xì)胞融合技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)操作過程。下列敘述錯(cuò)誤的是 ()A．①從脾臟收集B淋巴細(xì)胞B．②促進(jìn)兩兩細(xì)胞的融合C．③促進(jìn)細(xì)胞分化為雜交瘤細(xì)胞D．④篩選產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞解析：選C據(jù)題圖分析可知，①過程表示從脾臟中提取已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；②過程是促進(jìn)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，B正確；③過程是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，目的是挑選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，C錯(cuò)誤；④過程是篩選產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞用于大量培養(yǎng)，D正確。10．為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 ()A．實(shí)驗(yàn)前必須將病毒A注射到小鼠甲的體內(nèi)B．常用滅活的病毒誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合C．篩選2需用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，其原理與篩選1不相同D．實(shí)驗(yàn)通常需用胰蛋白酶處理剪碎的小鼠脾臟組織，以制備單細(xì)胞懸液解析：選C實(shí)驗(yàn)前必須將病毒A注射到小鼠甲的體內(nèi)，以誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生特異性的B淋巴(漿)細(xì)胞，A正確；動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇(PEG)等誘導(dǎo)，B正確；細(xì)胞融合后，需用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選(篩選1)，經(jīng)篩選獲得的細(xì)胞產(chǎn)生的抗體還不能確定是單克隆抗體，還需要運(yùn)用抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性的原理進(jìn)行多次篩選(篩選2)，以獲取能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液，D正確。11．研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段?；卮鹣铝袉栴}：(1)取該小鼠的脾臟中的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有____________________________________________________________________________________________________________________________________________等三種。不同動(dòng)物細(xì)胞能夠進(jìn)行融合的基本原理是______________________________________。(2)將完成誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞，用特定的________培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，可以獲得雜交瘤細(xì)胞。將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行________________________，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)使用抗H蛋白單克隆抗體治療乳腺癌時(shí)，有兩種使用方法，一種是將抗H蛋白單克隆抗體直接注射到病人體內(nèi)，抗體在乳腺癌病人體內(nèi)發(fā)揮的作用是________________________，另一種是______________________形成“生物導(dǎo)彈”，輸入體內(nèi)殺死癌細(xì)胞。解析：(1)取該小鼠的脾臟中的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等三種。不同動(dòng)物細(xì)胞能夠進(jìn)行融合的基本原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(2)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞有多種類型，將完成誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞，用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，該培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞才能生長。但雜交瘤細(xì)胞有多種類型，還需要利用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行篩選，將篩選所得到的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)使用抗H蛋白單克隆抗體治療乳腺癌時(shí)，有兩種使用方法，一種是將抗H蛋白單克隆抗體直接注射到病人體內(nèi)，抗體在乳腺癌病人體內(nèi)發(fā)揮的作用是與乳腺癌細(xì)胞特異性結(jié)合并殺死癌細(xì)胞，另一種是單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合形成“生物導(dǎo)彈”，輸入體內(nèi)殺死癌細(xì)胞。答案：(1)PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法細(xì)胞膜的流動(dòng)性(2)選擇克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)(3)與乳腺癌細(xì)胞特異性結(jié)合并殺死癌細(xì)胞單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合三、應(yīng)用創(chuàng)新12．為了解決雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來自B淋巴細(xì)胞的染色體丟失的問題，研究者增加了一個(gè)步驟，除了抗原刺激之外，還用EBV(一種病毒顆粒)感染動(dòng)物B淋巴細(xì)胞，并使之成為“染色體核型穩(wěn)定”的細(xì)胞株。上述細(xì)胞株能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但其對(duì)烏本苷(Oua)敏感。如圖為該實(shí)驗(yàn)操作示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．骨髓瘤細(xì)胞無法在HAT選擇培養(yǎng)基中存活B．雜交瘤細(xì)胞染色體丟失可能導(dǎo)致抗體產(chǎn)生能力下降C．B淋巴細(xì)胞來源于抗原刺激后動(dòng)物的淋巴結(jié)和脾臟等D．該實(shí)驗(yàn)最終目的是篩選出能產(chǎn)生抗EBV抗體的雜交瘤細(xì)胞解析：選D據(jù)題圖分析可知，骨髓瘤細(xì)胞在HAT選擇培養(yǎng)基中死亡，A正確；抗體是由漿細(xì)胞分泌的，由題干信息可知，雜交瘤細(xì)胞可能丟失來自(效應(yīng))B細(xì)胞的染色體，可能導(dǎo)致抗體產(chǎn)生能力下降，B正確；B淋巴細(xì)胞在骨髓中發(fā)育成熟，可分布于淋巴結(jié)和脾臟等，故B淋巴細(xì)胞可來源于抗原刺激后動(dòng)物的淋巴結(jié)和脾臟等，C正確；該實(shí)驗(yàn)最終目的是獲得能產(chǎn)生可與抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體，D錯(cuò)誤。13．下圖為單克隆抗體的制備過程(圖中的抗原表位指抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán))，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．小鼠經(jīng)抗原多次免疫后取其脾臟，獲取B淋巴細(xì)胞，1號(hào)試管內(nèi)可能含有多種B細(xì)胞B．骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制，因此細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶處理C．3號(hào)試管的雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量增殖又能合成和分泌特異性抗體D．雜交瘤細(xì)胞經(jīng)篩選并克隆化培養(yǎng)獲得的4種抗體都能與抗原特異性結(jié)合解析：選B由于抗原上有多種抗原表位，不同的抗原表位可以結(jié)合不同的B淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致增殖和分化，因此1號(hào)試管內(nèi)可能含有多種B細(xì)胞，A正確；普通的體細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象，而骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖，故其培養(yǎng)時(shí)不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；3號(hào)試管的雜交瘤細(xì)胞是特定的抗原表位刺激產(chǎn)生的效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的，既能迅速大量增殖又能合成和分泌特異性抗體，C正確；雜交瘤細(xì)胞經(jīng)篩選并克隆化培養(yǎng)獲得的4種抗體，在抗原上都存在相應(yīng)的抗原表位，因此4種抗體都能與抗原特異性結(jié)合，D正確。14．某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。回答下列問題：(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠，理由是________________________________________________________________________。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有________________________________________(僅考慮細(xì)胞之間的兩兩融合)，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是________________________________________________________。(3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是________條。解析：(1)由圖分析可知，第4次免疫時(shí)，Y和Z的血清抗體效價(jià)已達(dá)到要求，即16000以上，而前3次免疫后，3只小鼠的血清抗體效價(jià)均未達(dá)到要求，從第3次開始，Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高，所以Y小鼠最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，該融合體系中有5種