西瓜全雌基因連鎖的SRAP分子標(biāo)記的開(kāi)題報(bào)告

西瓜全雌基因連鎖的SRAP分子標(biāo)記的開(kāi)題報(bào)告開(kāi)題報(bào)告1.研究背景西瓜是我國(guó)重要的瓜類作物之一，近年來(lái)隨著人們生活水平的提高，西瓜的市場(chǎng)需求逐年增加。然而，西瓜的生長(zhǎng)適應(yīng)性并不強(qiáng)，且易受到氣候因素、病蟲(chóng)害的影響，因此，提高西瓜的產(chǎn)量和品質(zhì)一直是西瓜育種的重點(diǎn)任務(wù)。而實(shí)現(xiàn)西瓜高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)、節(jié)約成本的目標(biāo)，需要對(duì)西瓜遺傳育種進(jìn)行深入研究。西瓜性別的遺傳機(jī)制是影響西瓜產(chǎn)量和品質(zhì)的一個(gè)重要因素。西瓜雄花和雌花都出現(xiàn)在植株上，但花表現(xiàn)出的性別差異仍不清楚。雌雄異株與雌雄同株的形態(tài)、生理和生殖上的差異都是由基因控制的，而與性別有關(guān)的雄／雌相持基因位于第一對(duì)染色體上。基因型A_/AA個(gè)體表現(xiàn)為雄性，A_/A_個(gè)體表現(xiàn)為雌性，但由于單倍型控制的方式復(fù)雜，所以基因互作等復(fù)雜情況的影響，本來(lái)應(yīng)表現(xiàn)為雌性的ＡＡ基因型可能也存在野生雄性變異現(xiàn)象。對(duì)于西瓜而言，選擇全雌基因型則能有效提高種植效果和經(jīng)濟(jì)效益，因此，全雌基因型的分子標(biāo)記研究具有重要意義。2.研究?jī)?nèi)容和目標(biāo)本研究旨在利用SRAP（Sequence-RelatedAmplifiedPolymorphism，序列相關(guān)擴(kuò)增多態(tài)性）技術(shù)，篩選出表達(dá)在全雌基因型中具有差異的DNA分子標(biāo)記，建立與全雌基因型相關(guān)的分子標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)，為西瓜育種提供科學(xué)依據(jù)。具體內(nèi)容：（1）提取全雌基因型西瓜的基因組DNA；（2）設(shè)計(jì)SRAP引物，進(jìn)行SRAP-PCR擴(kuò)增；（3）對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析，篩選差異性片段；（4）對(duì)差異性片段進(jìn)行克隆、測(cè)序和比對(duì)，鑒定片段的基因類型；（5）利用篩選出的分子標(biāo)記建立分子檢測(cè)方法，確認(rèn)分析結(jié)果。3.研究方法3.1DNA提取采用CTAB法提取西瓜全雌基因型的基因組DNA。3.2引物設(shè)計(jì)參考已有文獻(xiàn)，利用計(jì)算機(jī)軟件PRIMER5.0設(shè)計(jì)SRAP引物，并進(jìn)行體系的優(yōu)化。3.3PCR擴(kuò)增將提取的基因組DNA作為模板，利用設(shè)計(jì)好的SRAP引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，在PCR反應(yīng)中加入嵌段1和嵌段2，以增加擴(kuò)增效率。3.4電泳分析對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行PAGE（PolyacrylamideGelElectrophoresis）電泳分析，提取差異明顯的條帶用于進(jìn)一步分析。3.5片段克隆和測(cè)序?qū)Y選得到的差異條帶進(jìn)行克隆，測(cè)序并與GenBank上的序列進(jìn)行比對(duì)，以鑒定差異條帶的序列類型。3.6分子標(biāo)記確立使用篩選出的分子標(biāo)記進(jìn)行傳統(tǒng)PCR擴(kuò)增，尋找全雌基因型中特異性表達(dá)的分子標(biāo)記，確定分子標(biāo)記的確立。4.研究意義本研究的開(kāi)展，對(duì)于西瓜全雌基因型的分子標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)的建立以及育種技術(shù)的提高具有重要的研究意