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文檔簡介
磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定一、實驗?zāi)康?.掌握磺胺類藥物血漿藥物濃度的測定方法2.掌握藥物半衰期的計算方法3.了解藥物血漿半衰期測定及計算的臨床意義磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定二、實驗原理1.多數(shù)藥物在體內(nèi)按一級動力學規(guī)律消除,靜脈注射后,如以血漿藥物濃度的對數(shù)值為縱坐標,時間為橫坐標,其時量關(guān)系常呈直線。
2.藥物血漿半衰期(halflife,T1/2)為:Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定二、實驗原理3.呈色原理:
磺胺類藥物在酸性溶液中,與亞硝酸鈉起重氮反應(yīng),生成重氮鹽。此重氮鹽在堿性溶液中與酚類化合物起偶聯(lián)反應(yīng),生成橙紅色的偶氮化合物。偶氮化合物的顯色深淺與磺胺的濃度有關(guān)。
磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定三、實驗動物家兔(體重2.5Kg左右)磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定四、實驗器材和藥品1.器材:分光光度計、離心機、兔手術(shù)臺、手術(shù)器械、動脈夾、動脈插管、磅秤、注射器、移液管、離心管、試管等
分光光度計離心機磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定四、實驗器材和藥品2.藥品:20%磺胺嘧啶鈉溶液、1%肝素鈉溶液、
0.02%磺胺嘧啶鈉溶液(標準液)、7.5%三氯醋酸溶液、0.5%亞硝酸鈉溶液、0.5%麝香草酚溶液、20%NaOH溶液、20%烏拉坦溶液、蒸餾水磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定五、實驗步驟(一)動物基本操作(二)測定液和標準液的配制(三)比色管的配制(四)比色與計算磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定(一)動物基本操作(血液標本的采集)1.抓取家兔1只,稱重,用20%烏拉坦溶液5mL/kg行耳緣靜脈麻醉,然后固定于手術(shù)臺上?;前粪奏もc藥物代謝動力學參數(shù)測定2.氣管插管手術(shù)區(qū)剪毛,沿正中線剪開頸部皮膚,鈍性分離皮下組織及肌肉,找出并游離氣管,穿一根線備用。確定甲狀軟骨的位置,在其下3——4環(huán)裝軟骨處切一倒“T”形切口,插管固定。磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定(一)動物基本操作(血液標本的采集)3.游離頸總動脈:分開肌肉層后,找出一側(cè)頸總動脈并分離約2~3cm左右,在其下穿線兩根線備用?;前粪奏もc藥物代謝動力學參數(shù)測定(一)動物基本操作4.全身肝素化:耳緣靜脈注射肝素5ml。線1結(jié)扎遠心端,待血管充盈后,動脈夾夾閉近心端遠心端剪一“V”形口,動脈插管,線2結(jié)扎固定(二次固定)5.動脈插管(肝素潤洗)磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定(一)動物基本操作6.取血:打開動脈夾取空白血樣2ml置于用肝素浸過的試管中待用;然后由耳緣靜脈注射20%磺胺嘧啶鈉溶液2ml/kg,于給藥后10min及40min各取血2ml,分別置于同上試管中待用磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定(二)測定液和標準液的配制測定液的配制:用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml,置于已盛有5.8ml
7.5%三氯醋酸溶液的玻璃試管中,充分搖勻,然后以1500r/min,離心5min待用。標準液的配制:取0.02%磺胺嘧啶鈉溶液0.2ml,加入已裝有5.8ml
7.5%三氯醋酸溶液試管中,搖勻待用?;前粪奏もc藥物代謝動力學參數(shù)測定成分空白管(mL)標準管(mL)測定管(mL)給藥前給藥10min給藥40min測定液//1.51.51.5標準液/1.5///蒸餾水1.5////0.5%NaNO2
0.50.50.50.50.50.5%麝香草酚1.01.01.01.01.0(三)各比色管的配制磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定蒸餾水0.02%NaSD②1組標本各取0.2ml加入2組①2組各試管先加三氯乙酸5.8ml③2組測定液各取1.5ml清液加入3組④加0.5mlNaNO2⑤加1ml麝香草酚
標本(1組)
測定液(2組)
比色液(3組)空白管標準管給藥前藥后10′藥后40′取13支試管分別用記號筆標記磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定(四)比色與計算用722型分光光度計進行比色,選波長520nm,以空白管調(diào)“0”點,讀出標準管及各測定管光密度,并記錄。
磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定六、實驗結(jié)果標準管測定管給藥前給藥后10min給藥后40min光密度值1.各比色管的光密度值磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定六、實驗結(jié)果2.計算Ke及T1/2Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1CNaSD=C標/OD標×(OD給藥后-OD給藥前)
磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數(shù)測定七、注意事項1.麻醉時一定把握好速度。2.每次取血之前要先將殘血放掉。3.各盛血的試管及動脈插管要用肝素浸潤,動脈插管前要先注射肝素(全身肝素化)。4.將血樣加
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