第7章 G-球菌課件

第七章革蘭陰性球菌奈瑟菌屬（淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌）莫拉菌屬（卡他莫拉菌）第7章G-球菌第一節(jié)奈瑟菌屬共性1、G–

雙球菌；2、有菌毛，無鞭毛和芽胞；3、氧化酶（+），觸酶（+）；4、除淋病奈瑟菌寄居于泌尿生殖道粘膜外，其它均位于鼻咽腔粘膜第7章G-球菌臨床意義—腦膜炎奈瑟菌致病物質(zhì)莢膜—抗吞噬作用菌毛—粘附易感細(xì)胞表面內(nèi)毒素—主要致病物質(zhì)IgA1蛋白酶—破壞粘膜表面特異性IgA1第7章G-球菌細(xì)菌的釋放裂解腎上腺小血管毛細(xì)血管皮膚瘀斑腎上腺出血DIC中毒性休克內(nèi)毒素大量第7章G-球菌所致疾病腦膜炎奈瑟菌飛沫鼻咽部多數(shù)少數(shù)普通型爆發(fā)型慢性敗血癥鼻咽炎或帶菌狀態(tài)敗血癥穿過血腦屏障第7章G-球菌傳染源——帶菌者和病人從潛伏期末開始至發(fā)病10天內(nèi)具有傳染性傳播途徑——病原菌存在于患者或帶菌者的鼻咽分泌物中，借飛沫傳播易感者——任何年齡均可發(fā)病，從2～3個月開始，6個月至2歲發(fā)病率最高，以后隨年齡增長逐漸下降流行季節(jié)——從前1年11月份開始，次年3、4月份達(dá)高峰，5月份開始下降臨床表現(xiàn)——突起高熱、頭痛、嘔吐、皮膚粘膜瘀點(diǎn)、瘀斑（在病程中增多并迅速擴(kuò)大），腦膜刺激征

第7章G-球菌免疫性以體液免疫為主患病、帶菌狀態(tài)免疫接種其它奈瑟菌交叉抗原群特異性莢膜多糖抗體

補(bǔ)體型特異性外膜蛋白抗體殺傷病原菌第7章G-球菌致病物質(zhì)內(nèi)毒素—炎癥反應(yīng)菌毛—粘附人類尿道粘膜外膜蛋白PⅠ破壞中性粒細(xì)胞膜PⅡ細(xì)胞間的粘附作用PⅢ抑制殺菌抗體活性IgA1蛋白酶—破壞粘膜表面特異性IgA1臨床意義—淋病奈瑟菌第7章G-球菌所致疾病自然宿主傳播途徑臨床表現(xiàn)人類是唯一宿主

性接觸（最主要）間接接觸垂直傳播尿道炎、宮頸炎等第7章G-球菌尿道炎前列腺炎精囊炎輸精管炎附睪炎尿道炎前列腺炎、精囊炎、輸精管炎、附睪炎男性不育臨床表現(xiàn)男性第7章G-球菌臨床表現(xiàn)子宮頸炎子宮內(nèi)膜炎輸卵管炎輸卵管閉鎖子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎、輸卵管閉鎖女性不孕尿道、宮頸炎女性第7章G-球菌免疫性人類無天然抵抗力細(xì)胞免疫和體液免疫（免疫力不持久）再感染、慢性患者普遍第7章G-球菌

生物學(xué)特性形態(tài)與染色G-雙球菌，腎形或豆形兩菌接觸面平坦或略向內(nèi)陷腦脊液—多位于中性粒細(xì)胞內(nèi)，形態(tài)典型急性淋病膿標(biāo)本—多位于中性粒細(xì)胞內(nèi)慢性淋病病人標(biāo)本—多分布在細(xì)胞外

第7章G-球菌無鞭毛，無芽胞，新分離菌株大多有菌毛和莢膜第7章G-球菌腦膜炎奈瑟菌（油鏡）第7章G-球菌腦膜炎奈瑟菌電鏡圖第7章G-球菌第7章G-球菌淋病奈瑟菌第7章G-球菌營養(yǎng)要求高：巧克力色平板、BAP專性需氧，初次分離需要5%-7%的CO2和高濕度刺激生長最適生長溫度為35~37℃，低于30℃不生長，淋球菌高于38.5℃生長也停止★細(xì)菌抵抗力弱，對冷、熱、干燥等均敏感；腦膜炎奈瑟菌可產(chǎn)生自溶酶，培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)及時接種（床邊接種）

培養(yǎng)特性第7章G-球菌巧克力色平板上菌落腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌：灰褐色、光滑、透明/半透明小菌落血平板上菌落第7章G-球菌巧克力色平板上淋病奈瑟菌菌落第7章G-球菌氧化酶（+）觸酶（+）-延長奈瑟菌除外

對糖分解能力、硝酸鹽還原能力和DNA合成酶不同，常作為菌種間的鑒別依據(jù)腦膜炎奈瑟菌氧化分解葡萄糖和麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣

淋球菌只分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解其他糖類卡他莫拉菌對糖類均不分解

生化反應(yīng)第7章G-球菌

腦膜炎奈瑟菌：莢膜多糖群特異性抗原——目前國外已分成A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135和L等10個血清群。我國建立了H、I、K3個新血清群，故總計13個血清群，95%以上是A群,其中以C群致病力最強(qiáng)

抗原結(jié)構(gòu)與分類第7章G-球菌外膜蛋白型特異性抗原——根據(jù)外膜蛋白組分不同，腦膜炎奈瑟菌各血清群又可分為若干血清型。但A群除外，其所有菌株的外膜蛋白相同第7章G-球菌脂寡糖抗原（LOS)——由外膜上糖脂組成，有抗原性，我國把A群分為L9、L10、L11三型，是腦膜炎球菌的主要致病物質(zhì)第7章G-球菌淋病奈瑟菌：①外膜蛋白抗原：包括PI、PII和PIII。PI為主要的外膜蛋白，占淋病奈瑟菌外膜總重量的60%以上，是淋病奈瑟菌分型的主要基礎(chǔ)，可分成A~H、N、R~V、W和X等18個不同血清型，有助于流行病學(xué)調(diào)查②菌毛蛋白抗原③脂寡糖抗原第7章G-球菌很弱，對干燥、熱力、消毒劑等均敏感。室溫中3h即死亡；55℃5min內(nèi)被破壞。1%石炭酸、75%乙醇或0.1%新潔爾滅均可迅速使之死亡卡他莫拉菌抵抗力較強(qiáng)。在干痰中能存活27d，耐65℃30min對青霉素敏感但近年來由質(zhì)粒介導(dǎo)的β內(nèi)酰胺酶所致的耐藥在淋病奈瑟菌中產(chǎn)生較多

抵抗力第7章G-球菌

微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集：CSF、血液、瘀點(diǎn)滲出液等,帶菌者檢查可取鼻咽拭子分泌物、尿液

立即送檢或床邊接種平板需預(yù)溫第7章G-球菌

2、標(biāo)本直接檢查（1）直接涂片檢查男性尿道口膿液涂片WBC內(nèi)見G-雙球菌——早期診斷

第7章G-球菌CSF沉渣瘀點(diǎn)滲出液涂片革蘭染色亞甲藍(lán)染色WBC內(nèi)、外見G-雙球菌初步報告第7章G-球菌

（2）抗原檢查：腦膜炎奈瑟菌抗原檢測——膠乳凝集試驗、對流免疫電泳、SPA協(xié)同凝集試驗ELISA檢測淋球菌抗原在檢測男性尿道分泌物標(biāo)本時和涂片染色具有相同的敏感性和特異性第7章G-球菌

3、分離培養(yǎng)與鑒定：血液、CSF用血清肉湯增菌BAP、巧克力平板選擇性培養(yǎng)基（MTM、NYC等）

37℃，5%~7%CO2環(huán)境觀察72h后無生長方可報告（-）第7章G-球菌腦膜炎奈瑟菌直徑1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落涂片為G-雙球菌、氧化酶（+）初步確定為奈瑟菌屬進(jìn)一步進(jìn)行葡萄糖和麥芽糖分解試驗陽性、其他糖類分解陰性可確定為腦膜炎奈瑟菌用分型血清確定血清型別

鑒定第7章G-球菌淋病奈瑟菌可疑菌落直徑0.5~1mm，灰褐色、光滑、半透明呈露滴狀凸起的菌落確認(rèn)菌落涂片，見G-雙球菌氧化酶和觸酶試驗（+）葡萄糖分解試驗（+），其它糖類（-）第7章G-球菌氧化酶試驗陽性原理：具有氧化酶的細(xì)菌，首先使細(xì)胞色素C氧化，再由氧化型細(xì)胞色素C使對苯二胺氧化，生成有色的醌類化合物試劑：1%鹽酸四甲基對苯二胺1%鹽酸二甲基對苯二胺方法：菌落法、濾紙法、試劑紙片法結(jié)果：細(xì)菌與試劑接觸10秒內(nèi)呈深紫色（+）第7章G-球菌腦膜炎奈瑟菌的檢驗程序腦脊液離心上清液莢膜多糖抗原直接凝集沉淀涂片染色初步報告瘀點(diǎn)穿刺液、鼻咽部分泌物、拭子、漿膜腔穿刺液分離培養(yǎng)挑選可疑菌落BAP巧克力血液增菌培養(yǎng)葡萄糖肉湯鑒定試驗涂片鏡檢氧化酶試驗糖分解試驗莢膜多糖抗原直接凝集試驗PCR第7章G-球菌淋病奈瑟菌檢驗程序直接涂片鏡檢初報分泌物、膿液、關(guān)節(jié)液分離培養(yǎng)BAP、巧克力選擇性培養(yǎng)基挑選可疑菌落鑒定試驗染色鏡檢氧化酶試驗觸酶試驗糖類分解

免疫學(xué)方法分子生物學(xué)方法抗原檢測核酸檢測藥敏第7章G-球菌本節(jié)復(fù)習(xí)要點(diǎn)：形態(tài)與染色G-雙球菌，腎形或豆形，新分離株多有菌毛和莢膜，無鞭毛，無芽胞培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高，巧克力色平板、BAP專性需氧，初次分離需要5%-7%的CO2和高濕度刺激生長最適生長溫度為35~37℃，低于30℃不生長，淋球菌高于38.5℃生長也停止抵抗力弱，腦膜炎奈瑟菌可產(chǎn)生自溶酶

第7章G-球菌生化反應(yīng):氧化酶（+）觸酶（+）腦膜炎奈瑟菌氧化分解葡萄糖和麥芽糖淋球菌只分解葡萄糖腦膜炎奈瑟菌——莢膜多糖群特異性抗原分13個血清群，95%以上是A群,其中以C群致病力最強(qiáng)淋病奈瑟菌——外膜蛋白抗原（PI）分18個血清型第7章G-球菌微生物學(xué)檢驗標(biāo)本直接涂片檢查——早期診斷分離培養(yǎng)與鑒定：血液、CSF用血清肉湯增菌BAP、巧克力平板、MTM、NYC等35℃，5%~7%CO2環(huán)境G-雙球菌、氧化酶、觸酶、葡萄糖、麥芽糖分解試驗、血清學(xué)分型第7章G-球菌第二節(jié)卡他莫拉菌可存在于健康人群的上呼吸道導(dǎo)致中耳炎、鼻竇炎、慢性阻塞性肺炎在免疫抑制和ICU的患者可導(dǎo)致菌血癥是社區(qū)呼吸道感染的主要病原體之一毒力主要與內(nèi)毒素有關(guān)該菌β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生率高達(dá)90%以上

第7章G-球菌卡他莫拉菌在痰液中也常呈腎形雙球菌狀，存在于吞噬細(xì)胞內(nèi)/外。無鞭毛，無芽胞，一般無莢膜卡他莫拉菌的菌體比一般的奈瑟菌大，是相互區(qū)別的一個特征第7章G-球菌卡他莫拉菌營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上即可生長，需氧，最適生長溫度為35℃

菌落直徑為1~3mm大小，灰白色/淺紅棕色，不透明，干燥，菌落可隨接種環(huán)在培養(yǎng)基表面移動

第7章G-球菌從中耳炎或鼻竇炎患者穿刺抽取標(biāo)本呼吸道感染患者應(yīng)采取合格痰標(biāo)本或支氣管灌洗液口