實驗室生物安全培訓課件

實驗室生物安全培訓2021/10/10

1培

訓

人

：XXX·

實驗室生物安全的相關法律與規(guī)范·

管理體系·

病源微生物，危險品管理·

實驗室生物安全危害·

實驗室生物安全防護·

實驗室生物安全基本操作規(guī)程·

手衛(wèi)生2021/10/10

2目

錄實驗室生物安全的相關法律與規(guī)范2021/10/10

3WHO

一直非常重視生物安全問題在國際事務中的重要

性19

83年“實驗室生物安全手冊”

(

第

一

版

)

:將傳染性微生物根據(jù)其致病能力和傳染的危險程度等劃分為四類將生物實驗室根據(jù)其設備和技術條件等劃分為四級：

(BSL1-4)相應的操作程序也劃分為四級

(BSL1-4)對

四類微生物可操作的相應級別的實驗室及程序進行了規(guī)定在該手冊中，

WHO

鼓勵各國針對自己國內的微生物實驗室制定相應的生物安全條例，并愿為此提供指導世界衛(wèi)

生組織

(WHO)●●

●2021/10/1041、國家法律：《中華人民共和國刑法修正案》

中華人民共和國主席令(第51號

)2006.6.29《中華人民共和國傳染病防治法》

中華人民共和國主席令(第17

號)2004.12.12、

國務院條例《病原微生物實驗室生物安全管理條例》

中華人民共和國國務院令(第424號)2004.11.12《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應急條例》

中華人民共和國國務院令(第376號)2003.5.9《醫(yī)療廢物管理條例》

中華人民共和國國務院令(第380號)2003.6.6中國實驗室生物安全相關法律法規(guī)2021/10/10

5《實驗

室

生物安全通用要求》

中華人民共和國國家標準(GB19489-

2008)2008.12.26《生物安全實驗室建筑技術規(guī)范》

中華人民共和國國家標準(GB50346-2004)2004.9.1《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則》中華人民共

和國衛(wèi)生行業(yè)標準

(WS233-2002)2003.8.1《

生

物

安

全

柜

》

中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準

(YY0569-2005)2008.6.

1《

生

物

安

全

柜

》中華人民共和國建筑工業(yè)行業(yè)標準

(JG170-2005)2005.6.13、

國家標準及行業(yè)標準2021/10/10

6

4、部門規(guī)章《

人

間

傳

染

的

病

原

微

生

物

名

錄

》中華人民共和國衛(wèi)生部文件(衛(wèi)科教發(fā)[2006]15號)2006.2.1《人間傳染的高致病性病原微生物實驗室和實驗活動生物安全審批管理辦法》

中華人民共和國衛(wèi)生部令(第50號)2006

.

8

.

1《病原微生物實驗室安全環(huán)境管理辦法》國家環(huán)境保護總局令(第32號)2006.5.1《醫(yī)療衛(wèi)生機構醫(yī)療廢物管理辦法》

中華人民共和國衛(wèi)生部令(第35號)2003.10.15《醫(yī)療廢物管理行政處罰辦法》

中華人民共和國衛(wèi)生部、環(huán)境保護總局令(第21號)2004.6.1《醫(yī)療廢物分類目錄》

中華人民共和國衛(wèi)生部、環(huán)境保護總局(衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2003]287號)2003.10.10《醫(yī)療廢物專用包裝物、容器標準和警示標識規(guī)定》

環(huán)境保護總局(環(huán)發(fā)[2003]188號

)2003.11.20《醫(yī)療廢物集中處置技術規(guī)范》

環(huán)境保護總局(環(huán)發(fā)[2003]206號)2003.12.26《

人

間

傳

染

的

病

原

微

生

物

菌

(

毒

)

種

保

藏

機

構

管

理

辦法

》

中華人民共和國衛(wèi)生部令

(第68號)2009

.

7

.

18地方性：

《江西省病原微生物實驗室生物安全管理辦法》2018.4.252021/10/10

7

《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定》華人民

共和國衛(wèi)生部令(第45號)2006

.

2

.

1《實驗室

生物安全通用要求》國家標準《實驗室生物安全通用要求》

(GB

19489-2004)

國家標準于2004年4月5日審定通過，2004年10月1日正式實施。

2008年修訂，目前實施的是《實驗室

生物安全通用要求》

(GB

19489-2008)該標準的發(fā)布是我國實驗室安全管理、公共衛(wèi)生體系建設以及認證認可體系建設具有里程碑意義的一件大事，它標志著我國實驗室生物安全管理和實

驗室生物安全認可工作步入了科學、規(guī)范和發(fā)展的新階段。

2021/10/10

8《江西省病原微生物實驗室生物安全管理辦法》共8章41條第

一

章總則(1

-

3條):

目的、適用范圍、原則(預防為

主、依法管理、明確職責、科學處置)第二章組織管理(48條):

省市縣級衛(wèi)計委、實驗室第三章病原微生物管理(9-

14條):

分1、2、3、4類，致

病性由高至低，1、2類為高致病性，運送要不少2位受訓

人員參與，專用運輸容器、專用交通工具，運輸要審批。

第四章實驗室管理(15-25條):

分1、2、3、4級，安全

等級由低到高，使用前1個月內備案，5年有效期，到期3

個內再申請備案，要在相應安全等級內開展實驗活動。人

員要考核培訓，有健康檔案，監(jiān)督生物安全管理體系的運

行，定期安全自查，人員定期體檢，廢物符合環(huán)境保護法律法規(guī)，有專人處置。2021/10/10

9《

江

西

省

病

原

微

生

物

實

驗

室

生

物

安

全

管

理

辦

法

》第五章實驗活動管理(26-31條):

實驗活動應備案且在

相應安全等級的實驗室開展，高致病性病原微生物實驗活動應有2名以上的工作人員共同進行，樣本處理要符合生物安全要求且有記錄?！?/p>

第六章實驗室感染控制(31-37條):

高致病性病原微生

物菌(毒)種或者樣本在實驗活動、運輸、儲存中被盜、

被搶、丟失、泄漏的，應當按照《病原微生物實驗室生物

安全管理條例》規(guī)定報告、處理；發(fā)生感染應及時報告并

救治，評估危害程度；發(fā)生安全事件應啟動應急處置預案·

第七章監(jiān)督管理與法律責任(38-40條):

衛(wèi)計行政部門

負責監(jiān)督檢查，上級部門督導檢查；對違反本辦法的行為進行處罰、追責。·

第

八

章

附

則

(

4

1

條

)

:

自公布之日起實施，省衛(wèi)計委負

2021/10/責解釋。

10管理體系2021/10/10

11建立健全實驗室生物安全管理體系的重要性·

如果缺乏健全和行之有效的管理體系，無論多么高級的實驗室硬件設施，都難以發(fā)揮其安全作用。·

據(jù)不完全統(tǒng)計，國內外絕大多數(shù)生物安全實驗室的感染事件和遺漏事故都是由管理不善而導致的。2021/10/10

12生物安全管理組織體系4個層面構成·

江西省衛(wèi)計委·

區(qū)市衛(wèi)計委·

縣級衛(wèi)計委·

實驗室所在單位、實驗室實施分類、分級管理，統(tǒng)一標準2021/10/1013實驗室生物安全組織體系法八責任部門實驗室負責人實驗至生物安全管理員人

物142021/10/10實驗室負責人為實驗室生物安全的第一責任人實驗室負責人應當任命一名實驗室生物安全負責人指定

專人監(jiān)督檢查實驗室技術規(guī)范和操作規(guī)程的落實情

況。實驗室生物安全負責人應為●

微生物學家或專業(yè)人員有基礎物理學、生物科學的技術背景有與行政、技術、后勤的有效溝通協(xié)調2021/10/10

15實驗室實驗室生物安全負責人的工作(1)生物安全、生物安全保障以及技術規(guī)章方面的咨詢工作。(2)就技術方法、程序和方案、生物因子、材料和設備進行定期的內部安全檢查。(3)與有關人員討論違反生物安全方案或程序的情況。(4)核實所有工作人員都接受了適當?shù)纳锇踩嘤枴?5)進行生物安全繼續(xù)教育。(6)對于所有牽涉到潛在感染性物質或有毒物品泄露等意外事故進行調查，并將調

查結果以及處理意見向實驗室主任和生物安全委員會報告。(7)就可能的實驗室感染與醫(yī)務人員進行協(xié)調。(8)在出現(xiàn)涉及感染性物質溢出或其他事故時，要確保清除了污染。(9)確保廢棄物的正確管理。(10)確保對所有設備在修理或維護之前已經(jīng)過適當?shù)南咎幚怼?11)經(jīng)常了解社區(qū)對衛(wèi)生和環(huán)境問題的態(tài)度。(12)要根據(jù)國家規(guī)定，針對病原體運入、運出實驗室制訂適當?shù)某绦颉?13)對所有涉及感染性物質研究工作的計劃、方案以及操作程序，均要在具體操

作實施以前進行生物安全審查。(14)組織應急系統(tǒng)。2021/10/1016體系文件(1)實驗室生物安全管理的方針和目標(2)管理手冊(3)程序文件(4)說明及操作規(guī)程(5)安全手冊(6)記錄(7)標識系統(tǒng)《實驗室生物安全通用要求》

GB

19489-20087.42021/10/10

17以四層次劃分為例手冊

第一層次文件安全、技術記錄、表格、標識

第四層次文件2021/10/10

18實

驗

室

生

物

安

全

管

理

體

系

文

件標準操作規(guī)范，標準

第三層次文件程序文件

第二層次文件病源微生物，危險品管理2021/10/10

19生

物

危

害

程

度

的

分

級根據(jù)對個體和群體的危害性分四級：I

級：指危害性最低的病毒、細菌、真菌和寄

生蟲等生物因子；Ⅱ

級：指中等危害的生物因子，多為條件致病

菌或機會致病菌；Ⅲ

級：指能引起個體的嚴重感染，但不易在人群中傳播擴散的生物因子；可用抗生素治療IV級：指能引起個體和群體嚴重感染，難治療2021/10/10

20序號病毒名稱危害

程度

分類實驗活動所需生物安全實驗室級別運輸包裝分類備注病毒培養(yǎng)

ψ動物感染實驗未經(jīng)培養(yǎng)的感

染材料

的操作滅活材料的操

作即無感染性材料

的操作A/B?UN編號英文名中文名分類學地位1Aastim

virus類天花病毒痘病毒科?第一類BSL-44ABSL-44BSL-34BSL-24BSL-1+A4UN281442Crimean-Congohemorrhagic

fever

wirus

(Xinjiang

hemorrhagic

jever

virus)克里米亞一剛果出血熱病毒(新疆出

血熱病毒)?布尼亞病毒科?第一類BSL-34ABSL-34BSL-30BSL-20BSL-1ρA?UN2814e《

人間傳染的病原微生物名錄》表1.病毒分類名錄2021/10/10

21病原體危害程度分類實驗活動BSL級別各類腸道致病菌3類(VC

2類)BSL-2各類呼吸道致病菌3類(TB

2類)BSL-2各類條件致病菌3類BSL-2乙型肝炎病毒3類BSL-2丙型肝炎病毒3類BSL-2愛滋病病毒2類BSL-2梅毒螺旋體3類BSL-2根據(jù)以上實際情況，臨床微生物實驗室及免疫學病原體篩檢的防護標準應該是2021/10/10

22第1類爆炸品第2類氣體第3類易燃液體第4類易燃固體第5類氧化劑和有機過氧化物第6類毒害品和感染性物質第7類放射性物品第8類腐蝕品第9類雜項危險品2021/10/10

23危險物品共分為九大類實驗室生物安全危害2021/10/10

24(二)、氣溶膠與實驗室感染(一)、實驗室生物安全事件2021/10/10

25污染源情況暴露途徑利器類型47

HIV

血

液45

針刺或割傷41

中空針頭1

HIV帶血體液5

黏膜暴露2

破玻璃1

HIV

其他體液1

針刺+黏膜1

解剖力3

HIV病毒液(實驗室)1

不清1

不清(

一)、

實驗室生物安全事件1

、美國CDC醫(yī)務人員感染HIV數(shù)據(jù)統(tǒng)計前車之鑒2021/10/10

26(

一)、實驗室生物安全事件2、

我國實驗室生物安全事件事例中國CDC實驗人員感染非典病毒事故2004年4月中國CDC病毒所腹瀉病毒室兩名研究生在做病毒實驗時感染sars

病毒。事故調查：事故起因系該所實驗人員多次違規(guī)將未完全滅活的sars病毒從P3

實驗室?guī)С鲋疗胀▽嶒炇也僮鞫稹Ｅ_灣實驗人員感染非典病毒事故2003年12月臺灣一位實驗人員在

P3

實驗室做病毒實驗時，因清理廢棄物操作疏忽，安全程序處理不當而感染病毒。浙江省中醫(yī)院一名醫(yī)師因違規(guī)操作，致5名治療者感染艾滋病病毒2017年初，浙江省中醫(yī)院一檢驗科主管技師因操作"封閉抗體治療"服務項目中淋巴

細胞的收集、提純時，嚴重違反"

一

人

一

管

一拋棄"的職業(yè)操作“鐵律”,多

次使用同一根吸管交叉吸取、攪拌、提取所操作批次人員的淋巴細胞，致5名婦女

感染HIV

病毒，其中兩人已懷孕。2018年5月28日，杭州市上城區(qū)法院于2017年12月12日判決該名醫(yī)生犯醫(yī)療事故罪，判處有期徒刑二年六個月。2021/10/10

27實驗室感染途徑親

切

握

手

-

-

手口傳播熱

烈

交

談

-

-

空氣傳播粗

心

與

意

外

-

-

針刺、器皿破碎、離心、穿拖鞋穿白褂到處走戴手套隨意開手柄

臺面/器皿不清潔

不做善后工作潔區(qū)與污染區(qū)不分無

知

最

危

險2021/10/10清28(二)、氣溶膠與實驗室感染相關文獻報道：

對3921例實驗室相關感染

統(tǒng)計分析結果發(fā)現(xiàn)，已知原因的實驗室感染

只占全部感染的18%,不明原因的實驗室感

染卻高達82%。對不明原因的實驗室感染的

研究表明，大多數(shù)可能是病原微生物形成的

感染性氣溶膠在空氣擴散，實驗室內工作人

員吸入了污染的空氣感染發(fā)病的。2021/10/10

29>生物氣溶膠無色無味、無孔不入，不易發(fā)現(xiàn)，

實驗人員在自然呼吸中不知不覺

吸入而造成感染。若治療控制不及時會

造成嚴重后果。>呼吸道傳播的傳染病的微生物特別是高

致病性病毒常常發(fā)生變異，尤其是其抗

原性、致病性都可能發(fā)生改變，在空氣中存活力增強。>

可以遠距離或較遠距離傳播，這是其與

其他傳播途徑的顯著區(qū)別，

也是氣溶膠傳播難以預防的另一重要原因。2021/10/10

30氣溶膠的特點

輕度(<10個顆粒)中度(11～100個顆粒)重度(>100個顆粒)?玻片凝集試驗；

?傾倒毒液；4火焰上灼熱接種環(huán)；顱內接種；

?接種雞胚或抽取培養(yǎng)液；

?腹腔接種動物，局部不涂消毒劑；

?實驗動物尸體解剖；

?用乳缽研磨動物組織；

?離心沉淀前后注入、傾到、混懸毒液；毒液滴落在不同表面上；

?用注射器從安瓿中抽取毒液：

?接種環(huán)接種平皿、試管或三角燒瓶等；打開培養(yǎng)容器的螺旋瓶蓋；摔碎帶有培養(yǎng)物的平皿；

?離心時離心管破裂；

?打碎干燥菌種安瓿；

?打開干燥菌種安瓿；

?攪拌后立即打開攪拌器蓋，小白鼠鼻內接種；

?注射器針尖脫落噴出毒液，刷衣服、拍打衣服；

?可產(chǎn)生各種嚴重程度微生物氣溶膠的實驗室操作2021/10/10

312021/10/10

32實驗室空氣傳播與感染主要有三個過程：◆

一是微生物氣溶膠的產(chǎn)生◆

二是微生物氣溶膠的擴散◆

三是微生物氣溶膠人體暴露和吸入因此，要控制或減少實驗室空氣傳播和感染，要有相應得生物安全措施，以控制實驗室微生物氣溶膠感染的三個過程。2021/10/10微生物氣溶膠的控制33微生物氣溶膠的控制

·

安全操作·

規(guī)范和改進操作過程和操作技術，

盡量避免操作失誤。例如：用冷卻接種環(huán)沾取菌液進行接種------氣溶

膠減少效果可達91%。2021/10/10

34各種產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作盡量在生物安全柜內操作。正確使用生物安全柜，

以有效

地減少實驗室獲得性感染和由于氣溶膠暴露而

導致的培養(yǎng)物的交叉感染，并能保護環(huán)境。使用生物安全柜

2021/10/10

35個人防護與實驗室通風系統(tǒng)實驗室工作人員在進行微生物檢驗時，應進行個人防護。操作時應穿戴防護服、口罩、面罩、帽子和手套。對實驗室以外區(qū)域應形成

一

個相對密閉的系統(tǒng)，對實驗室內部則是一個氣流定向流動的系統(tǒng)，清潔區(qū)、緩沖區(qū)、低污染區(qū)、嚴重污染區(qū)，

每個區(qū)域之間保持一定壓差，防止空氣倒

流。

2021/10/10

362021/10/10

37實驗室生物安全防護2021/10/10

38√實驗室生物安全的目的意義√不同生物安全等級實驗室的介紹√安全防護的基本要求√防護設備設施√個人防護用品√

醫(yī)療垃圾處量2021/10/10

39實驗室生物安全的目的意義2021/10/1040實驗室分級處理對象一級對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人，動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康或人、動物和環(huán)境不會造成嚴重危害。有有效的預防和治療措施三級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人傳染上嚴重的甚**致命疾病，或對動植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預防治療措施四級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，或未知的、危險的致病因子、沒有預防治療措

施

。(

一

)不同生物安全等級實驗室的介紹2021/10/10

41BSL-1

實驗室BSL-2

實驗室一級ABSL-1

實驗室二級ABSL-2

實驗室三

級ABSL-3

實

驗

室風淋室余壓閥(使?jié)崈羰业膬韧獠顗哼M行調整)潔凈工作臺中效過濾器保持HEPA

過濾性能的預先過濾)BSL-

4

實驗室過濾器(

用HEPA過濾器使空氣爭化，分為內部有風扇和無風扇兩種機型)(在潔凈室的入口處

傳遞窗層流革(設置、移動。簡便的潔凈室)對入室者噴出潔凈氣體)空氣調節(jié)器回風窗BSL-

4

實驗室2021/在

進

行

可

能

接

觸

到

血

液

、

體

液

以

及

其

他

具

有

潛在感染性的材料的操作時

，

應戴上合適的

手套。手套用完后，應先消毒再摘除，隨后

必須洗手。在

處

理

完

感

染

性

實

驗

材

料

后

，

以

及

在

離

開

實

驗

室

工

作

區(qū)

域

前

，

都

必

須

洗

手

。為了防止眼睛或面部受到噴濺物的污染、碰

撞

或

人

工

紫

外

線

輻

射

的

傷

害

，

必

須

戴

合

適

的

安全眼鏡、面罩(面具)或其他防護設備。(

二

)安全防護的基本要求在

實

驗

室

工

作

時

，

必

須

穿

著

合

適

的

工

作

服

或防護服

。2021/10/10

48(

二

)安全防護的基本要求嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室工作區(qū)域O不得在實驗室內穿露腳趾的鞋。禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。在實驗室內用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內。2021/10/10

49(三)防護設番設施·

生物安全柜·

壓力蒸汽滅菌器·

可移動紫外燈·

紅外加熱滅菌器·

酒精燈·

洗眼沖淋裝置2021/10/10

50202生物安全柜

主要的保護屏障，防止生物有害氣溶膠

逃逸.●

保護操作人員-負壓

保

護

周

邊

環(huán)

境

-HEPA

可以保護樣品-層流2021/10/10

52生物安全柜實驗室操作都可能產(chǎn)生感染性氣溶膠。直徑小于5μm的氣溶膠、直徑為5～100μm的微小液滴亦可能產(chǎn)生吸入或交叉污染工作

臺面的其他材料。正確使用生物安全柜—將有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養(yǎng)物交叉

污染。

2021/10/10

53CLASSⅡ

二級生物安全柜層

流

負

壓

柜CLASSII

級生物安全柜適用于1、2、3級

生

物(30%排在實驗室內

)

B1

(70%接管道外排)B2

(100%接管道外排)B3

(30%接管道外排)安

全

水

平

的

實

驗

。

它

們

可

以

安

全

的

保

護

樣

品、

人

員

和

環(huán)

境

。CLASS

II

級

生

物

安

全

柜

根

據(jù)

結

構

以

及

氣

流分HEPA

(高效微粒子空氣，能99

.

99%地去除0

.3微

米

以

上

顆

粒配

的

不

同

，

主

要

是

外

排

氣

流

，

分

為

：2021/10/10

54A

型B

型生物安全保護的不同產(chǎn)品區(qū)別安全三兄弟超凈臺保護樣品安全2021/10/10生物實全柜保護操件者也保

護樣品安全55通風櫥保護操作者安全在生物安全柜上工作理想的工作臺擺放原則(清潔

→

污染區(qū))在工作臺面上的實驗操作應該按照從清潔區(qū)到污染

區(qū)的方向進行2021/10/10

56·在生物安全柜上操作·避免使用明火，用適當?shù)臏缇胧け苊馐褂酶蓴_安全柜內層流的實驗手段·

如使用中有遺灑，所有物品被拿走前必須經(jīng)去污染處理·

安全柜必須處于操作狀態(tài)時，才能徹底消毒內壁明火：在生物安全柜內所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中應避免使用明火。--使用明火會對氣流產(chǎn)生影響--特別在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時，也易造成危險--在對接種環(huán)進行滅菌時，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應使用明火。2021/10/10

57安全柜的維護保養(yǎng)·

用消毒劑清潔所有內壁，待其干燥·

定期抬起工作面清潔下面的區(qū)域；洗凈抹布·

每天關機后，打開安全柜內部的紫外燈消毒60分鐘·

安全柜每年需要進行性能檢測·

第三方機構(個體防護能力、樣品保護能力、交叉污染防護能力)2021/10/10

58·--BSL-2實驗室在必要時應有應急噴淋裝置?！?-BSL-3實驗室應設置淋浴裝置(清潔區(qū)),必要時在半污染區(qū)設置應急消毒噴淋裝置。2、

要求

：保持管道的通暢、必須告知工作人員應急消毒。噴淋裝置的擺放位置、培訓其操作方法。應急消毒噴淋裝置。在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗時間至少需要20

分鐘。如果為化學物品濺出污染，用大量急水沖洗。當使用緊急淋浴裝置后必須立刻填寫事故報告單并立即報告主管領導。淋浴裝置和應急消毒噴淋裝置1、

規(guī)定

：2021/10/10

59(四)個人防護用品·

護目鏡·

口罩、帽子·

防護衣(實驗服、隔離衣)·

手套·

鞋套

2021/10/10

60BSL-1

實驗室：·

工作人員在實驗時應穿工作服，

戴醫(yī)用口罩?！すぷ魅藛T手上有皮膚破損或皮疹時應戴

手套。2021/10/10

61個體防護的配備原則BSL-2

實驗室：除符合BSL-1

的要求外，還應該符合下列條件：在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室

時，防護服必須脫下并留在實驗室內。不得穿著外出。

用過的工作服應先消毒，

然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當手可能接觸感染材料、

污染的表面或設備時應戴手套

。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套

。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結束后方可除去

手套。一

次性手套不得清洗和再次使用。個體防護的配備原則2021/10/10

622021/10/10

63正確使用手本1、手套的選擇：

生物安全實驗室一般使用乳膠橡膠或聚腈類或聚氯乙烯手套用于對強酸、強堿、有機溶劑和生物危害物質的防護。2

、手套的檢查：

在使用手套前應該檢查手套是否退色、穿孔

(漏損)或有裂縫。可以通過充氣試驗，將其浸入水中觀察是否有汽泡來檢查手套的質量。3、手套的使用：

乳膠手套

聚脂手套a)

一般情況下，佩戴

一

副手套即可

(BSL-1

實

驗

室

)

,b)

若在生物安全柜中操作感染性物質時

(BSL-2和BSL-3實驗

室)應該佩戴兩副手套。2021/10/10

64c)

在操作過程中，外層手套被污染，立即用消毒劑噴灑手套

并脫下后丟棄在生物安全柜中的高壓滅菌袋中并立即戴上新手

套繼續(xù)實驗。d)

戴好手套后應完全遮住手及腕部，如必要可覆蓋實驗服袖4、

手套的清洗和更換：a)使用一次性手套，不可再次使用。用后立即進行高壓滅菌消毒然后丟棄。b)不得戴著手套離開實驗室區(qū)域。正確使用手本

2021/10/10

65戴手套注意要點：1)在實驗室工作中要一直保持戴手套狀態(tài)并選擇正確類型和尺寸的

手套；2)將手插入手套后將手套口遮蓋實驗服袖；手套的手要遠離面部。

2021/10/10

66◆用一手捏起另一近手腕部處的手套外緣，將手套從手上脫下并將

手套外表面翻轉入內；◆

用戴著手套的手拿住該手套；◆用脫去手套的手指插入另一手套腕部處內面；◆脫

下該手套使其內面向外并形成一個由兩個手套組成的袋狀；◆丟棄在高溫消毒袋中并進行消毒處理。脫手套過程及注意要點：2021/10/1067(五)醫(yī)療垃圾處量·

黃色垃圾袋

—

—

醫(yī)療垃圾·

黑色垃圾袋

—

—

生活垃圾·

紅色垃圾袋

—

—

放射性垃圾·

黃色銳器盒

—

—

損傷性垃圾68醫(yī)療廢物分類·感染性廢物·病理性廢物

·損傷性廢物

·藥物性廢物

·化學性廢物2021/10/10

69·

特

征

：攜帶病原微生物具有引發(fā)感染性疾病傳播危險的

醫(yī)療廢物?！?/p>

常見：

1、被病人血液。體液。排泄物污染的物品，包括：棉球、棉簽、

引流面條、紗布及其他各種敷料；

一

次性使用衛(wèi)生用品、

一次性使用醫(yī)療用品；

一次性醫(yī)療

器械；廢棄的被服；其它被病人血液、體液、排泄物污

染的物品。2、

醫(yī)療機構收治的隔離傳染病病人或者疑

似傳染病病人產(chǎn)生的生活垃圾。3、病原體的培養(yǎng)基、標本和菌種保存液。4、各種廢棄的醫(yī)學標本。5、廢

棄的血液、血清。2021/10/10感染性廢物

70●病理性廢物·

特

征

：診療過程中產(chǎn)生的人體廢棄物和醫(yī)學實驗動物尸體等?！?/p>

常見：

1、手術及其它診療過程中產(chǎn)生的廢棄的人體組

織、

器官等。2、

醫(yī)學實驗動物的組織、尸體。3、病

理切片后廢棄的人體組織、病理臘塊等。

2021/10/10

71·

特

征

：能夠刺傷或者割傷人體的廢棄的醫(yī)用銳器。·

常見：

1

、

醫(yī)用針頭、縫合針。2、各類醫(yī)用銳器，包括：解剖刀、手術刀、備皮刀、手術鋸等。3、載玻片、玻璃試管、玻璃安瓿等。損傷性廢物

2021/10/1072藥物性廢物·

特

征

：過期、淘汰、

變質或者被污染的廢棄的藥品o·

常見：

1、廢棄的一般性藥物，如：抗生素、

非處方類藥品等。2、廢棄的細胞毒性藥物和遺傳毒性藥物,包括：致癌性藥物，如環(huán)孢霉素、環(huán)磷酰胺等；可疑致癌性藥物，如：順鉑、絲裂霉素、阿霉素等；免疫抑制劑等。3、廢棄的疫苗、血液制品等。2021/10/1073●化學性廢物·

特

征

：具有毒性、腐蝕性、

易燃易爆性的廢棄的化學物品。·

常見：

1

、

醫(yī)學影像室、實驗室廢棄的化學試劑。2、廢棄的過氧乙酸、戊二醛等化學消毒劑。3、廢棄的錄血壓計、

汞溫度計。2021/10/1014醫(yī)療廢物嚴格按照分類分別置于黃色有警示標識的防滲漏、防破

裂、防穿孔的專

用垃圾袋/盒中，

并貼好標簽。2021/10/10

75醫(yī)

療

垃

圾

的

收

集

處

置醫(yī)療垃圾由衛(wèi)生員

收集，并填寫相應醫(yī)療

垃圾收集處置登記本，再由指定的人員轉

運至醫(yī)院醫(yī)療垃圾儲存處。微生物培養(yǎng)基、鑒定藥敏卡、

菌毒株等醫(yī)療垃圾移交前需進行預處理(高壓滅菌)

血液、血清以及體液等標本移交前需用有

效氯2000mg/L

的消毒液浸泡30分鐘以上。針頭、玻片等損傷性垃圾要放入黃色銳器盒中。76>>>2021/10/10實驗室生物安全基本操作規(guī)程2021/10/10

77、實驗室工作人員的資格和培訓1、

實驗室的工作人員必須是受過專業(yè)教育的技術

人員。在獨立進行工作前還需在中高級實驗技術

人員指導下進行上崗培訓，達到合格標準，方可

開始工作；2

、實驗室的工作人員必須被告知實驗室工作的潛在危險并接受實驗室安全教育，

自愿從事實驗室

工作；3

、實驗室的工作人員必須遵守實驗室的所有制度、

規(guī)定和操作規(guī)程。4

、三級和四級生物安全防護實驗室的工作人員在

開始工作前必須留本底血清進行有關檢測，以后

定期復檢。如有疫苗必須進行免疫注射。2021/10/10

781.禁止非工作人員進入實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負責人批準后方可進入?！?/p>

2.接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗

室前要洗手。·

3.禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物?！?/p>

4.以移液器吸取液體，禁止口吸。·

5.制定尖銳器具的安全操作規(guī)程。·

6.按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。·

7.每天至少消毒一次工作臺面，活性物質濺出后要隨時消毒?！?/p>

8.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高壓滅活。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉容器內。·

9.

制定有效的防鼠防蟲措施。二、

I

級生物安全防護實驗室安全操作規(guī)程2021/10/10

79常規(guī)微生物操作規(guī)程中的安全操作要點·

1.同一級生物安全防護實驗室安全操作規(guī)程1-9。·

2.實驗室入口處須貼上生物危險標志，內部顯著位置須貼上有關

的生物危險信息，包括使用傳染性材料的名稱，負責人姓名和電

話號碼。2021/10/10

80三、Ⅱ級生物安全防護實驗室安全操作規(guī)程四、Ⅱ級生物安全防護實驗室特殊的安全操作規(guī)程1.進行感染性實驗時，禁止他人進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負責人同意后方可進入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工

作人員必須經(jīng)實驗室負責人同意方可在實驗室或動物房內工作。2.實驗室入口處須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安

全級別、需要的免疫、負責人姓名和電話、進入實驗室的特殊

要求及離開實驗室的程序。3.工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、

卡介苗等)。·

4.

并根據(jù)需要定期收集血清樣本，應有檢測報告，如有問題及

時處理。·

5.

將生物安全程序納入標準操作規(guī)范或生物安全手冊，由實驗室負責人專門保管，工作人員在進入實驗室之前要閱讀規(guī)范并

按照規(guī)范要求操作。·

6.

工作人員要接受有關的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓。

·

7.嚴格遵守下列規(guī)定，防止利器損傷：2021/10/10

81四、Ⅱ級生物安全防護實驗室

特殊的安全操作規(guī)程7.1

除特殊情況(腸道外注射和靜脈切開等)外，禁止

在實驗室使用針、注射器及其他利器。盡可能使用

塑料器材代替玻璃器材。7.2

盡可能應用一次性注射器，用過的針頭禁止折彎、

剪斷、折斷、重新蓋帽、從注射器取下，禁止用手直接操作。用過的針頭必須直接放人防穿透的容器

中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特

定區(qū)域消毒，最好進行高壓消毒。7.3

盡可能使用無針注射器和其他安全裝置。7.4

禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利

器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。2021/10/10

82四、Ⅱ級生物安全防護實驗室特殊的安全操作規(guī)程·

8.培養(yǎng)基、組織、體液及其他具有潛在危險性的廢棄物須放在防漏的容器中儲存、運輸及消毒滅菌?！?/p>

9.實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒?！?/p>

10.人員暴露于感染性物質時，及時向實驗室負責人匯報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案?！?/p>

11.禁止將無關動物帶入實驗室。2021/10/10

83五、

樣本運送·

非高致病性的病原微生物菌(毒)種和

生物樣本的運送應由專人負責，專車運

送，運送人員應經(jīng)過培訓取得相關資質，

不得通過公共交通工具運送，運送過程

應采取相應的防護措施。運輸過程中發(fā)

生意外狀況，運送單位、運送人、接受

機構應按國家有關規(guī)定，采取必要的應

急措施。2021/10/10

84六、

生物安全柜操作注意事項生物安全柜運行正常時才能使用。生物安全柜在使用中打開的玻璃觀察擋板不能超過規(guī)定高

度。安全柜內應盡量少放器材或標本，不能影響后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán)。安全柜內不能使用明火，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。盡量減少操作者身后的人員活動。操作者不應反復移出或伸進手臂以免干擾氣流。不要使實驗記錄本、移液器以及其它物品阻擋空氣格柵。在安全柜內的工作開始前和結束后，安全柜的風機應至少

運行2～3分鐘。在生物安全柜內操作時，不能進行文字工作?！ぁぁ?/p>

··●●··2021/10/10

85七、離心機內破損樣本的處理·

若離心時發(fā)生試管破損，應立即關掉離心機電源開

關，三十分鐘后打開離心機蓋。·

如在離心機停止時才發(fā)現(xiàn)試管破損，亦需再關閉離

心機蓋三十分鐘?！?/p>

必須穿工作服，戴口罩、乳膠手套，小心把破損試

管移出離心機，可用鑷子檢起破碎的玻璃?！?/p>

破裂試管、玻璃碎片、離心機室，必須用75%的酒

精消毒，離心機消毒不可用次氯酸鹽溶液，以免造

成離心機損壞。2021/10/10

86八、

暴露事件的緊急處理"暴露事件"是實驗室人員在執(zhí)行本職工作時與潛在傳

染性物質的接觸(眼、嘴、其它黏膜、經(jīng)吸入方式

進入呼吸道、破損皮膚、或非腸道)。遭到已知的

或潛在暴露事件的工作人員必須按照以下相應暴露

事件的處理措施，盡快脫去手套并處理被污染部位。2021/10/10

871、

皮膚感染·

用抗菌皂液和溫水沖洗感染部位15

分鐘。·

必要時進行醫(yī)學處理。2021/10/10

882、

眼、面部飛濺·

用沖眼器沖洗或溫水沖洗感染部位15

分鐘?！け匾獣r進行醫(yī)學處理。2021/10/10

89·

屏住呼吸迅速離開房間，小心脫去個人

防護用品?！?/p>

當脫去個人防護用品時必須確保個人防

護用品暴露面朝里，用皂液和水仔細洗

手，實驗室排風(通風)至少1小時。3、

氣溶膠暴露2021/10/10

904、I

級生物安全實驗室溢出·

通知在這一區(qū)域的其他人預防污染?！?/p>

穿戴手套、實驗衣和面罩，用紙巾覆蓋

溢出物，把濃縮的消毒劑倒在溢出物區(qū)

域周圍并與溢出物混和，并維持適當?shù)?/p>

接觸時間?！?/p>

用鑷子撿起一些玻璃碎片并放在生物危

害高壓滅菌袋內待凈化后丟棄?！?/p>

用皂液和消毒洗手液洗手。2021/10/10

91·

迅速離開房間，避免吸入經(jīng)空氣傳播的物質。通知其他的人離開?！?/p>

關門并貼上警告標簽?！ひ迫ノ廴镜囊挛铮旁谏镂：Υ鼉?。·

用肥皂和水清洗所有暴露的皮膚。·

報告實驗室生物安全負責人，如果需要幫助，請咨

詢生物安全委員會。5、I

級生物安全實驗室溢出的處理2021/10/10

925、I級生物安全實驗室溢出的處理在進入實驗室所前，使氣溶膠彌散至少30

分鐘。備齊處理物(消毒劑，紙巾，生物危害袋和鑷子)?！?/p>

穿上防護衣(實驗外套，面罩，實驗手套，必要時穿上長統(tǒng)靴)。按溢出物的狀態(tài)，可以戴一個HEPA過濾呼吸罩以代替外科面罩。·

用消毒濕巾覆蓋污染區(qū)域，然后，小心地倒上消毒劑在溢出物的周圍。

避免擴大污染區(qū)域。因為要被溢出物稀釋所以要用更濃縮的消毒劑。允許至少20

分鐘的接觸反應時間?！?/p>

用鑷子撿起一些尖銳的物品丟棄在一個尖銳物存放器皿內，用消毒劑

浸泡?！?/p>

用消毒劑擦凈溢出物可能飛濺到的周圍區(qū)域?！?/p>

用消毒劑浸泡溢出物，并放在一個生物危害袋內。·

用10%家用漂白液噴霧這個區(qū)域和并空氣干燥，或在接觸反應10分鐘

后用消毒濕巾擦掉?！?/p>

用消毒劑或抗菌皂和水清洗手和暴露的皮膚部分。2021/10/10

932021/10/10

94手衛(wèi)生手衛(wèi)生·

手的清潔與消毒是控制醫(yī)院感染最重要

、最簡便的措施之一?！?/p>

全球洗手日

每年10月15日2021/10/10

95手衛(wèi)生無生命的環(huán)境是病原體的儲存庫!2021/10/10

96沾滿各種病原菌的雙手2021/10/10