DB1509-T 0001-2023 奶綿羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

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1509 DB

1509/T

0001—2023奶綿羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程Technical

regulations

for

the

production

of

dairy

sheep

frozen

seme 烏蘭察布市市場(chǎng)監(jiān)督管理局??發(fā)

布DB

1509/T

00012023 本文件按照GB/T

1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則

第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定DB

1509/T

00012023

GB

4789.2

GB/T

GB

motility

abnormal

percentage

bacteria

acrosome

plasma

membrane

frozen

經(jīng)特殊方法處理超低溫冷凍后在液氮中（-196

c)精子密度≥2×10

DB

1509/T

00012023

c)精子密度≥2×10

適量40

℃～45

時(shí)，利用假陰道迅速采集精液并將其置于38

a)

b)

d)

A液：Tris

2.71

g、檸檬酸1.4g、果糖1g、

M199

mL、大豆卵磷脂1

g、青霉素10000

素10

g，加超純水至100

B液：取A液90

mL，甘油10

mL。稀釋密度大于等于1.2×10

DB

1509/T

00012023稀釋密度大于等于1.2×10

38

30

10

min

10

min

10

38

℃冰箱中平衡

用無(wú)菌0.25

mL細(xì)管分裝，兩端封口應(yīng)嚴(yán)密，管內(nèi)無(wú)氣泡。細(xì)管橫向標(biāo)識(shí)順序從左到右依次為：羊

制作凍精的設(shè)備為適用0.25

℃～-10

-10

℃～-100

60℃/min）；-100

℃～-140

20

30

30

當(dāng)溫度下降至-140

30

貯存凍精的低溫容器應(yīng)符合GB/T

5458的要求；及時(shí)補(bǔ)充液氮，每年補(bǔ)充液氮；取放凍精時(shí)，凍精離開液氮不應(yīng)超過(guò)10

℃～40

氣中放置15

DB

1509/T

00012023

GB

GB

細(xì)菌數(shù)≤800

GB

4789.2

DB

1509/T

00012023A.1

A.2

解凍3管冷精于1.5

mL離心管中，加入1

mL洗精液并混勻；1500

rpm離心5

min，棄上清，留約20

min。

向精液中加入PBS

mL，1500

rpm離心5

mL

PBS

FITC-PSA

熒光顯微鏡下觀察，共計(jì)數(shù)至少200個(gè)精子來(lái)統(tǒng)計(jì)凍后精子頂體完整性，若精子頭部均染成明亮的

C=C1/S×100%............................... （A.1）CC1SDB

1509/T

00012023 B.1

B.2

吸取200μL精液加到1

mL低滲溶液中。放入恒溫水浴鍋里38

℃，30

min。