吉林省松原市油田第十一中學(xué)2024屆高三最后一卷生物試卷含解析

吉林省松原市油田第十一中學(xué)2024屆高三最后一卷生物試卷注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下圖表示某細(xì)菌細(xì)胞中部分氨基酸的代謝過程。V至Z代表不同的酶，①至⑥代表不同的氨基酸。每一種氨基酸對該細(xì)菌都是必需的。野生型的細(xì)菌只需要從環(huán)境中攝取氨基酸①便可存活，而此細(xì)菌的某變異種只有在培養(yǎng)基中同時提供①③④氨基酸才能生存，該變異種細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)不存在的酶是（）A．X、W B．V、W C．X、Y D．V、Z2．如圖表示人體通過體液免疫清除破傷風(fēng)桿菌外毒素（抗原）的過程，下列敘述正確的是（）A．細(xì)胞1中的溶酶體能合成和分泌多種酸性水解酶B．圖中①②③過程都與細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)有關(guān)C．細(xì)胞2和細(xì)胞3中所含的遺傳物質(zhì)不同D．進行二次免疫時細(xì)胞5可快速產(chǎn)生大量的物質(zhì)a3．在美國亞利桑那州北部的凱巴伯森林地區(qū)，人們?yōu)榱吮Ｗo鹿而大量捕殺鹿的天敵--狼。下列說法正確的是（）A．狼從鹿獲得的能量最終來自該生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者固定的太陽能B．鹿和狼之間的信息傳遞對鹿不利，使該生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性受到破壞C．若消滅了狼，可使鹿的種群數(shù)量按照J(rèn)型曲線持續(xù)增長D．大量捕殺狼使生態(tài)系統(tǒng)的能量流動方向發(fā)生改變4．下列關(guān)于遺傳物質(zhì)的探索的敘述，正確的是（）A．將加熱殺死的S型菌與R型活菌混合后注射到小鼠體內(nèi)，小鼠體內(nèi)的S型菌都由R型菌轉(zhuǎn)化而來B．將S型菌的DNA、蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)分別與R型活菌混合培養(yǎng)，培養(yǎng)基中均有R型菌C．赫爾希和蔡斯的實驗中，離心后細(xì)菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌體都帶有35SD．用B型TMV（煙草花葉病毒）的RNA和A型TMV的蛋白質(zhì)重組而成的病毒感染煙草，會得到2種子代病毒5．“天街小雨潤如酥,草色遙看近卻無。”小草種子在萌發(fā)的過程中代謝速率逐漸增強，據(jù)此分析細(xì)胞內(nèi)自由水與結(jié)合水的相對含量變化是A． B．C． D．6．大型肉食性動物遷入一個新的生態(tài)系統(tǒng)后，會對生活在其中的低營養(yǎng)級肉食動物和植食動物有捕食和驅(qū)趕作用。下列情況最不可能出現(xiàn)的是（）A．綠色植物固定太陽能的總量增加B．某些植食性動物的環(huán)境容納量增大C．該大型肉食性動物至少能獲得流入該生態(tài)系統(tǒng)能量的10%D．該生態(tài)系統(tǒng)的食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)更復(fù)雜，自我調(diào)節(jié)能力更強二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）科研人員對獼猴(2n=42)的酒精代謝過程進行研究，發(fā)現(xiàn)乙醇進入機體內(nèi)的代謝途徑如下圖所示。乙醇積累使得獼猴喝酒易醉，乙醛積累則刺激血管引起獼猴臉紅，兩種物質(zhì)都不積累的獼猴喝酒不臉紅也不醉。請回答問題：（1）一個獼猴種群中的個體多數(shù)是喝酒不醉的，種群中偶爾出現(xiàn)喝酒易醉或喝酒臉紅的個體，可能的原因是_______________，種群中某一代突然出現(xiàn)了多只喝酒易醉或喝酒臉紅的個體，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的條件是_________________。（2）然而此種群或其它種群中從未出現(xiàn)過既喝酒易醉又喝酒臉紅的個體，請解釋可能的原因_______________。（3）一只易醉獼猴與野生型獼猴雜交，子一代都是野生型，子一代互交，子二代出現(xiàn)三種表現(xiàn)型，其比例是9:3:4，這三種表現(xiàn)型分別是________________，易醉獼猴親本的基因型是___________（酶1相關(guān)基因用A/a表示，酶2相關(guān)基因用B/b表示）。（4）為了進一步研究乙醇積累對代謝的影響，研究人員在野生型獼猴中轉(zhuǎn)入了D基因，并篩選獲得了純合體，將此純合轉(zhuǎn)基因獼猴與一只非轉(zhuǎn)基因的純合易醉獼猴雜交，子一代互交后，子二代易醉與非易醉個體的比例為13:3，請據(jù)此推測D基因的作用是____________。（5）在日常生活中，有的人平常不喝酒，但酒量較大，有的人本來酒量很小，但經(jīng)常喝酒之后酒量變大，這說明_____________。8．（10分）VNN1基因（1542bp）與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān)，GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應(yīng)波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進行鼠源GFP-VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究，回答下列問題：（l）為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列，并設(shè)計引物。上游引物：5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點），下游引物：5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?（下劃線為BamHI酶切位點），之后進行PCR擴增，PCR的原理是________。擴增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接，需用________（填具體酶）切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用________酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。（2）GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________，其作用是________。用之前相同的限制酶對GFP-VNNI重組質(zhì)粒切割后，進行電泳鑒定時得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明________。（3）IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應(yīng)的受體結(jié)合，激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對細(xì)胞分泌IL-6的影響，由此說明________________，同時發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。9．（10分）玉米是世界三大糧食作物之一，也是需水較多、對干旱比較敏感的作物。培育轉(zhuǎn)基因抗旱玉米新品種是解決玉米生產(chǎn)問題的重要途徑。為增加玉米抗旱性，研究者從某微生物找到一種抗旱基因ApGSMT2，將其移入到玉米中，終于培育出抗旱玉米，請回答下列相關(guān)問題：（1）將抗旱基因ApGSMT2插入質(zhì)粒得到重組質(zhì)粒需要的工具酶有_______________。（2）單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化法是___________________。（3）將導(dǎo)入抗旱基因ApGSMT2的玉米幼胚組織細(xì)胞培養(yǎng)成植株時，要用人工配制的培養(yǎng)基培養(yǎng)，為防止感染，器皿、培養(yǎng)基與植物組織等必須進行_______________處理。在植物組織培養(yǎng)的再分化過程中，若要將愈傷組織誘導(dǎo)出根，則植物生長調(diào)節(jié)劑的含量配比應(yīng)為：生長素含量______________（填“大于”、“小于”或“等于”）細(xì)胞分裂素含量。（4）篩選出抗旱的轉(zhuǎn)基因玉米，既可以采用_________方法來鑒定抗旱基因ApGSMT2是否表達，又需要進行個體水平檢測，方法是_________________________。（5）與雜交育種相比，基因工程育種的優(yōu)點是___________________。10．（10分）癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細(xì)胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是_________________________。11．（15分）某湖泊部分區(qū)域爆發(fā)水華（大量藍(lán)藻占據(jù)水面），科研人員對該湖泊進行調(diào)查，結(jié)果如下表。區(qū)域水深（m）pH總磷含量（mg/L）總氮含量（mg/L）沉水植物鮮重（kg/m2）未爆發(fā)水華的區(qū)域0.977.840.041.1666.53爆發(fā)水華的區(qū)域0.937.790.704.4136.06請回答：（1）藍(lán)藻和沉水植物在生態(tài)系統(tǒng)中的成分屬于____________。（2）據(jù)表可知，水華的爆發(fā)主要與__________有關(guān)。爆發(fā)水華的區(qū)域，沉水植物鮮重明顯減少，主要原因是____________。（3）已知四大家魚中的鰱魚、草魚和青魚分別以藍(lán)藻、沉水植物和底棲動物為主要食物，則應(yīng)在該湖泊投放_______（選填“鰱魚”、“草魚”或“青魚”）防治水華。測算表明，該魚每生長1公斤可消耗近40公斤藍(lán)藻，從能量流動的角度分析，二者比例懸殊的主要原因是_________。當(dāng)?shù)卣@種“保水漁業(yè)”措施達到了以魚護水、以水養(yǎng)魚、以魚富民的目的，實現(xiàn)經(jīng)濟效益與生態(tài)效益的統(tǒng)一。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解題分析】

1.基因控制性狀包括兩種方式：一是通過控制酶的合成控制代謝過程，間接控制生物體的性狀，二是通過控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接控制生物的性狀；2、題圖分析，酶V能將氨基酸①轉(zhuǎn)化成氨基酸②，酶W能將氨基酸②轉(zhuǎn)化成氨基酸④，酶Y能將氨基酸④轉(zhuǎn)化成氨基酸⑥，酶X能將氨基酸②轉(zhuǎn)化成氨基酸③，酶Z能將氨基酸④轉(zhuǎn)化成氨基酸⑤?！绢}目詳解】由題意可知“細(xì)菌的變種只有在培養(yǎng)基中提供氨基酸①③④才能生存”說明該變種細(xì)菌無合成氨基酸①③④的酶，必須直接提供氨基酸①③④；培養(yǎng)基中需提供氨基酸③④說明培養(yǎng)基中不存在將氨基酸②轉(zhuǎn)化成氨基酸③④的酶X和W，而氨基酸①是培養(yǎng)該細(xì)菌必須要提供的，根據(jù)分析可知該突變菌細(xì)胞內(nèi)不存在的酶是X和W，即A正確。故選A。2、B【解題分析】

圖為體液免疫的過程，抗原①進入血液，細(xì)胞1吞噬細(xì)胞②呈遞給細(xì)胞2——T細(xì)胞，T細(xì)胞將抗原③傳遞給細(xì)胞3——B細(xì)胞，細(xì)胞4為漿細(xì)胞，細(xì)胞5為記憶細(xì)胞，物質(zhì)a為抗體?！绢}目詳解】A、細(xì)胞1為吞噬細(xì)胞，其中的溶酶體中的酸性水解酶是由核糖體合成的，A錯誤；B、圖中①②③過程都與細(xì)胞膜上的受體有關(guān)，而受體的本質(zhì)為蛋白質(zhì)，B正確；C、細(xì)胞2和細(xì)胞3中的遺傳物質(zhì)都相同，由于基因選擇性表達導(dǎo)致了性狀表現(xiàn)不同細(xì)胞，C錯誤；D、進行二次免疫吋細(xì)胞記憶細(xì)胞5可快速增殖分化產(chǎn)生細(xì)胞4漿細(xì)胞，由細(xì)胞4漿細(xì)胞快速產(chǎn)生大量的物質(zhì)a抗體，D錯誤。故選B?！绢}目點撥】答題關(guān)鍵在于根據(jù)示意圖分析體液免疫的過程，并與細(xì)胞器的功能和細(xì)胞分化有關(guān)知識建立聯(lián)系。3、A【解題分析】

1、信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用（1）個體：生命活動的正常進行，離不開信息的作用；（2）種群：生物種群的繁衍，離不開信息傳遞；（3）群落和生態(tài)系統(tǒng)：能調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系，經(jīng)維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。2、能量流動的特點：單向流動、逐級遞減?！绢}目詳解】A、該森林生態(tài)系統(tǒng)存在的一條食物鏈為綠色植物→鹿→狼，狼獲得的能量來自鹿，而鹿同化的能量來自該生態(tài)系統(tǒng)生產(chǎn)者通過光合作用固定的太陽能，A正確；B、鹿和狼之間存在信息傳遞，這種信息傳遞能調(diào)節(jié)種間關(guān)系，有利于維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，B錯誤；C、由于人為地消滅了狼，鹿的種群數(shù)量會在短時間內(nèi)增加，當(dāng)鹿的種群數(shù)量超過了森林的環(huán)境容納量，種群數(shù)量又開始減少，C錯誤；D、大量捕殺狼生態(tài)系統(tǒng)的能量流動方向不會發(fā)生改變，D錯誤。故選A。4、B【解題分析】

肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實驗與噬菌體侵染細(xì)菌實驗的比較：肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實驗噬菌體侵染細(xì)菌實驗不同點方法不同直接分離：分離S型細(xì)菌的DNA、多糖、蛋白質(zhì)等，分別與R型菌混合培養(yǎng)同位素標(biāo)記：分別用32P和35S標(biāo)記DNA和蛋白質(zhì)結(jié)論不同證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)證明DNA是遺傳物質(zhì)，不能證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)（因蛋白質(zhì)沒有進入細(xì)菌體內(nèi)）相同點①均使DNA和蛋白質(zhì)區(qū)分開，單獨處理，觀察它們各自的作用；②都遵循了對照原則；③都能證明DNA是遺傳物質(zhì)，但都不能證明DNA是主要的遺傳物質(zhì)【題目詳解】A、將加熱殺死的S型細(xì)菌與R型活菌混合后注射到小鼠體內(nèi)，小鼠體內(nèi)的S型細(xì)菌一部分是由S型細(xì)菌轉(zhuǎn)化而來，一部分是由轉(zhuǎn)化后的R型細(xì)菌分裂而來，A錯誤；B、將S型細(xì)菌的DNA、蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)分別與R型活菌混合培養(yǎng)，培養(yǎng)基中均有R型菌，B正確；C、赫爾希和蔡斯的實驗中，離心后細(xì)菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌體都不含35S，C錯誤；D、用B型TMV（煙草花葉病毒）的RNA和A型TMV的蛋白質(zhì)重組而成的病毒感染煙草，會得到B型TMV一種病毒，D錯誤。故選B。5、B【解題分析】

細(xì)胞中水的存在形式有自由水和結(jié)合水，自由水與結(jié)合水的比值升高，代謝加強，反之，代謝減弱。【題目詳解】自由水的相對含量越高，細(xì)胞代謝越強；小草種子萌發(fā)過程中細(xì)胞的新陳代謝活動逐漸增強，這表明自由水相對含量升高，結(jié)合水相對含量降低，綜上所述：ACD錯誤，B正確。故選B?！绢}目點撥】本題的知識點是水的存在形式和功能，對于細(xì)胞內(nèi)水的存在形式和作用的理解，并應(yīng)用相關(guān)知識解釋生活中生物問題的能力是本題考查的重點。6、C【解題分析】

在一個生態(tài)系統(tǒng)中，低營養(yǎng)級肉食動物和植食動物一般處于第二或第三營養(yǎng)級，當(dāng)大型肉食性動物遷入，一般所處的營養(yǎng)級較高，其從食物鏈和食物網(wǎng)中獲得的能量最少，是上一營養(yǎng)級的10%~20%左右。一般生態(tài)系統(tǒng)的組分越多，食物鏈和食物網(wǎng)越復(fù)雜，自我調(diào)節(jié)能力越強?！绢}目詳解】A、題干信息描述，大型食肉動物遷入以后，植食性動物會出現(xiàn)被捕食和被驅(qū)趕的現(xiàn)象，有可能一定程度上有利于植物的生長，固定太陽能的總量增加，A正確；B、某些低營養(yǎng)級肉食動物和植食動物被捕食和驅(qū)趕，可能有利于某些植食性動物的生長，造成其環(huán)境容納量增大，B正確；C、該大型肉食性動物至少能獲得上一營養(yǎng)級能量的10%，C錯誤；D、該題中引入新的物種，食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)更復(fù)雜，自我調(diào)節(jié)能力更強，D正確；故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、控制合成酶1或酶2的相關(guān)基因突變，不能產(chǎn)生有足夠活性的酶1或酶2，導(dǎo)致乙醇或乙醛積累相關(guān)突變基因的頻率足夠高酶1突變則導(dǎo)致乙醇積累，不產(chǎn)生乙醛；若酶1正常而酶2突變，則酶1仍能將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，導(dǎo)致乙醛積累，因此不會發(fā)生乙醛和乙醇同時積累的情況。不醉：臉紅：易醉aabbD基因通過抑制A基因表達或者抑制酶1活性而使酒精積累表現(xiàn)型受到基因和環(huán)境共同影響【解題分析】

酶1活性受到抑制的獼猴易醉，酶1正常、酶2活性受到抑制的獼猴易臉紅，酶1和酶2都正常的獼猴不容易醉。不醉的純種獼猴基因型為AABB。產(chǎn)生酶1和酶2的是顯型基因。這些都說明基因控制生物的性狀，但是表現(xiàn)型也會受到環(huán)境的影響。【題目詳解】（1）如果酶1基因突變而不能產(chǎn)生酶1，則獼猴會醉，如果酶2基因突變不能產(chǎn)生酶2，則獼猴會臉紅。如果相關(guān)突變基因的頻率足夠高，種群中某一代可能突然出現(xiàn)多只喝酒易醉或喝酒臉紅的個體。（2）酶1突變則導(dǎo)致乙醇積累，不產(chǎn)生乙醛；若酶1正常而酶2突變，則酶1仍能將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，導(dǎo)致乙醛積累，因此不會發(fā)生乙醛和乙醇同時積累的情況，故此種群或其它種群中從未出現(xiàn)過既喝酒易醉又喝酒臉紅的個體。（3）子二代表現(xiàn)型比例是9:3:4，說明子一代的基因型為AaBb，親本中野生型的獼猴是不醉的，說明其基因型是AABB，則易醉獼猴的親本基因型為aabb。9:3:4的比例中，9是雙顯性狀，為不醉，包括A_B_個體，4中含有雙隱性狀，已知aabb表現(xiàn)為易醉，所以4是易醉，包括aa__個體，則3為臉紅，包括A_bb個體。（4）純合轉(zhuǎn)基因獼猴為DDAA，非轉(zhuǎn)基因的純合易醉獼猴為ddaa，兩者雜交，子一代為DdAa，子二代易醉與非易醉個體的比例為13:3，除了ddA_為不醉個體外，D_A_、D_aa、ddaa為易醉個體，D_A_為易醉個體，ddA_為不醉個體說明D基因通過抑制A基因表達或者抑制酶1活性而使酒精積累。（5）表現(xiàn)型由基因型控制，也會受到后天環(huán)境的影響?！绢}目點撥】基因突變具有低頻性，但由于一個種群基因較多，因此突變基因的總量也不少，突變基因由于繁殖遺傳傳給后代，因此種群中突變基因容易保留，種群基因頻率的定向改變就會導(dǎo)致生物進化。9:3:4和13:3都是9：3：3：1的變式。8、DNA雙鏈復(fù)制HindⅢ酶和BamHⅠ酶DNA連接標(biāo)記基因鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中（合理即可）VNN1基因表達產(chǎn)物能促進細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6操作過程中對細(xì)胞的損傷（或用到的化學(xué)試劑對細(xì)胞具有一定的毒性作用），可以激活相應(yīng)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6【解題分析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。第二步：基因表達載體的構(gòu)建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。第四步：目的基因的檢測和表達?！绢}目詳解】（1）PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，為防止切割的質(zhì)粒環(huán)化，通常選擇兩種的限制酶進行切割，同時需要用相同的限制酶對目的基因進行處理，所以選擇HindⅢ酶和BamHI切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用DNA連接酶處理形成重組質(zhì)粒。（2）GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應(yīng)波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光，所以在重組質(zhì)粒中可以作為標(biāo)記基因；鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來；電泳條帶顯示分子量增加表明VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中。（3）從柱狀圖中看出VNN1組中IL-6的濃度增加，說明了VNN1基因表達產(chǎn)物能促進細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6；空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達有輕微升高，可能原因是操作過程中對細(xì)胞的損傷（或用到的化學(xué)試劑對細(xì)胞具有一定的毒性作用），可以激活相應(yīng)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6?！绢}目點撥】本題重點考查了基因工程的操作知識，考生需要數(shù)量掌握其操作步驟。9、限制酶、DNA連接酶基因槍法滅菌、消毒大于抗原—抗體雜交將轉(zhuǎn)基因玉米和不抗旱的非轉(zhuǎn)基因玉米一起培養(yǎng)在干旱條件下，觀察比較玉米的生長情況和產(chǎn)量能打破生物種屬的界限（或在分子水平上定向改變生物的遺傳特性或克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙）【解題分析】

基因工程的三個工具是：限制酶、DNA連接酶、運載體，常用的運載體是質(zhì)粒；轉(zhuǎn)基因技術(shù)是否成功關(guān)鍵就是看能否合成相應(yīng)的基因產(chǎn)物，分子水平上常用抗原抗體雜交技術(shù)，最簡便的是個體水平的檢測，看植株是否具有相應(yīng)的性狀?！绢}目詳解】（1）構(gòu)建基因表達載體（重組質(zhì)粒）的工具酶是限制酶和DNA連接酶。（2）基因槍法是單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本較高。（3）植物組織培養(yǎng)過程中應(yīng)營造無菌環(huán)境，為防止感染，器皿、培養(yǎng)基與植物組織等必須進行滅菌、消毒處理；生長素含量大于細(xì)胞分裂素含量時，利于生根。（4）鑒定抗旱基因ApGSMT2是否表達即要看相關(guān)的蛋白質(zhì)是否表達成功，可用抗原—抗體雜交技術(shù)；也可進行個體生物學(xué)水平的檢測，即將轉(zhuǎn)基因玉米和不抗旱的非轉(zhuǎn)基因玉米一起培養(yǎng)在干旱條件下，觀察比較玉米的生長情況和產(chǎn)量，若轉(zhuǎn)基因玉米長勢比非轉(zhuǎn)基因玉米好，可證明目的基因成功表達。（5）與雜交育種相比，基因工程育種的優(yōu)點是能打破生物種屬的界限（或在分子水平上定向改變生物的遺傳特性或克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙）?！绢}目點撥】本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握植物組織培養(yǎng)各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識分析作答。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解題分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)粒”載體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達載體。基因表達載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是