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湖北省宜昌縣域高中協(xié)同發(fā)展共合體2024屆高三下第一次測(cè)試生物試題考生須知:1.全卷分選擇題和非選擇題兩部分,全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂;非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2.請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.圖為某哺乳動(dòng)物(基因型為AaBbDd)體內(nèi)一個(gè)細(xì)胞的分裂示意圖。據(jù)圖分析,下列說(shuō)法正確的是()A.該細(xì)胞分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞可能是精細(xì)胞或卵細(xì)胞B.該細(xì)胞形成過(guò)程中發(fā)生了基因重組、染色體數(shù)目變異和染色體結(jié)構(gòu)變異C.與該細(xì)胞來(lái)自同一個(gè)親代細(xì)胞的另一個(gè)細(xì)胞中最多含有8條染色體D.該細(xì)胞中含有同源染色體,正處于有絲分裂后期2.下列有關(guān)構(gòu)成細(xì)胞的元素和化合物的敘述,正確的是()A.在雞蛋清中加入一些食鹽,會(huì)看到白色的絮狀物,這是蛋白質(zhì)變性的結(jié)果B.相同質(zhì)量的脂肪和糖類氧化分解,糖類氧化分解供能多于脂肪C.細(xì)胞骨架與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、分裂、分化及物質(zhì)運(yùn)輸、能量轉(zhuǎn)換和信息傳遞有關(guān)D.缺Fe導(dǎo)致人患鐮刀型細(xì)胞貧血癥,則Fe是構(gòu)成人體細(xì)胞的大量元素3.同一生物體內(nèi),不同組織中的細(xì)胞在形態(tài)上存在一定的差異,下列關(guān)于這些細(xì)胞的敘述錯(cuò)誤的是A.通常情況下,這些不同形態(tài)的細(xì)胞中的核遺傳物質(zhì)是相同的B.遺傳信息的執(zhí)行情況不同導(dǎo)致了細(xì)胞形態(tài)的不同C.每種細(xì)胞具有的特定形態(tài)與其執(zhí)行特定功能相適應(yīng)D.不同細(xì)胞間形態(tài)的差異是在細(xì)胞分裂完成時(shí)產(chǎn)生的4.下列有關(guān)生物技術(shù)工程的說(shuō)法正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的液體培養(yǎng)基需要高壓蒸汽滅菌B.PCR體系中應(yīng)該加入解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶C.核移植獲得的克隆動(dòng)物只具有供體親本的遺傳性狀D.植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)到愈傷組織即可獲得細(xì)胞分泌物5.研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞分裂素可解除頂端優(yōu)勢(shì)。為探究細(xì)胞分裂素的作用部位及效果,研究人員用適宜濃度的細(xì)胞分裂素溶液、若干生長(zhǎng)狀況相同的幼苗為材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。你認(rèn)為應(yīng)該設(shè)置幾組實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)的處理方法為()選項(xiàng)組數(shù)處理方式A一在①②處同時(shí)涂抹細(xì)胞分裂素溶液B二一組在①處,另一組在②處涂抹細(xì)胞分裂素溶液C三一組不作處理,一組切除②,一組在①處涂抹細(xì)胞分裂素溶液D四一組不作處理,一組切除②,另兩組處理方式同B選項(xiàng)A.A B.B C.C D.D6.將大腸桿菌放在含有15N標(biāo)記的NH4C1培養(yǎng)液中培養(yǎng)后,再轉(zhuǎn)移到含有14N的普通培養(yǎng)液中培養(yǎng),8h后提取DNA進(jìn)行分析,得出含15N的DNA占總DNA的比例為1/8,則大腸桿菌的分裂周期是A.4h B.2hC.1.6h D.1h7.科研人員對(duì)一個(gè)被污染湖泊中某種魚(yú)類的出生率(Ⅰ)和死亡率(Ⅱ)進(jìn)行了研究,得到如下曲線。由圖可知,該種魚(yú)的數(shù)量達(dá)到最大的時(shí)刻是()A.a(chǎn) B.b C.c D.d8.(10分)如圖為高等動(dòng)物的一組細(xì)胞分裂圖象,圖中的A、a、B、b、C分別表示染色體。下列分析判斷正確的是()A.丙細(xì)胞一定是次級(jí)精母細(xì)胞B.a(chǎn)和B染色體上的基因可能會(huì)發(fā)生交叉互換C.甲、乙、丙三個(gè)細(xì)胞中均含有兩個(gè)染色體組,但只有丙中不含同源染色體D.丙細(xì)胞產(chǎn)生子細(xì)胞的過(guò)程中發(fā)生了等位基因的分離和非等位基因自由組合二、非選擇題9.(10分)癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后,可抑制T細(xì)胞活性并啟動(dòng)其凋亡,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對(duì)“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定,為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見(jiàn)圖1、幾種常用限制酶名稱及識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)見(jiàn)圖2:α鏈:5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈:5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1(1)首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板;設(shè)計(jì)含有不同的限制酶切點(diǎn)的α和β序列為引物,通過(guò)____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。(2)選用圖1中的兩種名稱分別為_(kāi)___________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?!陛d體進(jìn)行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成,除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外,還必須具有____________________等。(3)而后一定溫度下,與經(jīng)過(guò)處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌,繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。(4)將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時(shí)間后,為確定PD-1基因是否表達(dá),檢測(cè)細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能,則可裂解293T細(xì)胞,提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”。研究中還會(huì)有一步驟,只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞,其目的是_________________________。10.(14分)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來(lái)提取和分離血紅蛋白。根據(jù)材料回答下列問(wèn)題:(1)以哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料的原因:________________。(2)提取血細(xì)胞時(shí),首先進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌,洗滌次數(shù)、離心速度與離心時(shí)間十分重要。洗滌次數(shù)過(guò)少,________;離心速度________和時(shí)間________會(huì)使血細(xì)胞等一同沉淀。(3)蛋白質(zhì)分離方法中常用凝膠色譜法,該方法是根據(jù)________分離蛋白質(zhì)。(4)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù),將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,在電泳過(guò)程中,影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的________、________以及分子本身的大小等。11.(14分)據(jù)報(bào)道,一產(chǎn)婦因“捂月子”中暑身亡。嚴(yán)重的中暑又稱“熱射病”,是指高溫引起人體體溫調(diào)節(jié)功能失調(diào),從而引發(fā)神經(jīng)器官受損,死亡率很高。請(qǐng)結(jié)合所學(xué)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的相關(guān)知識(shí),回答下列體溫調(diào)節(jié)的相關(guān)問(wèn)題。(1)夏季,高溫刺激皮膚和黏膜處的_____________,通過(guò)神經(jīng)傳輸,引起皮膚____________和汗腺分泌增強(qiáng),導(dǎo)致散熱加快以維持體溫的相對(duì)恒定。(2)機(jī)體大量出汗導(dǎo)致失水較多,刺激滲透壓感受器,引起垂體釋放_(tái)___________,促進(jìn)_____,以維持體內(nèi)的水鹽平衡。(3)夏季空調(diào)房溫度過(guò)低會(huì)使人易患感冒。若人感冒發(fā)燒,體溫維持在39℃高溫,此時(shí)機(jī)體的產(chǎn)熱____________(填大于、等于或小于)散熱,在感冒發(fā)燒的過(guò)程中,即使身處溫暖環(huán)境,仍可能覺(jué)得寒冷,這種感覺(jué)的產(chǎn)生部位是____。(4)熱射病的病理生理機(jī)制十分復(fù)雜,涉及多臟器、多系統(tǒng)的相互作用。目前研究較多的機(jī)制之一是“直接熱損傷”。發(fā)生熱射病時(shí),過(guò)高的體溫可以使細(xì)胞中_______________,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞代謝的紊亂;高溫也會(huì)損害細(xì)胞膜,使其通透性_______________________(填升高或降低),最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡或壞死。12.下圖是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)EcoRⅤ酶切位點(diǎn)為,EcoRⅤ酶切出來(lái)的線性載體P1為_(kāi)______末端。(2)用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得目的基因片段,其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸,載體P1用酶處理,在兩端各添加了一個(gè)堿基為_(kāi)______的脫氧核苷酸,形成P2,P2和目的基因片段在_______酶作用下,形成重組質(zhì)粒P3。PCR技術(shù)中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶,其最主要的特點(diǎn)是_____________________________________。
(3)PCR技術(shù)可以臨床用于診斷感染性疾病、腫瘤及遺傳病等,它是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),其標(biāo)準(zhǔn)步驟為_(kāi)______、退火、__________。(4)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了___________________。若該目的基因是從cDNA文庫(kù)中分離獲取的蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中,然后在_______為唯一含碳營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng),以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè)。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解題分析】
識(shí)圖分析可知,圖中染色體的著絲點(diǎn)分裂,且只有A、a等位基因所在的一對(duì)同源染色體,其它染色體均為非同源染色體,故該細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂的后期。圖中細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)了A、a等位基因所在的同源染色體是由于減數(shù)第一次分裂的后期A、a所在的同源染色體移向一極導(dǎo)致的,圖中B基因所在的染色體的一段移接到了A所在的染色體上,因此發(fā)生了染色體結(jié)構(gòu)的變異中的易位。【題目詳解】A、根據(jù)以上分析可知,該細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂的后期,由于細(xì)胞質(zhì)均等分裂,因此該細(xì)胞分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞可能是精細(xì)胞或極體,A錯(cuò)誤;B、由于該細(xì)胞經(jīng)過(guò)了減數(shù)第一次分裂,在減數(shù)第一次分裂的后期發(fā)生了非同源染色體上的非等位基因自由組合,即基因重組,由于細(xì)胞中A、a所在的同源染色體移向一極,因此發(fā)生了染色體數(shù)目變異,由于B基因所在的染色體的一段移接到A所在的非同源染色體上,因此發(fā)生了染色體結(jié)構(gòu)變異中的易位,B正確;C、根據(jù)以上分析可知,該細(xì)胞發(fā)生了染色體數(shù)目的變異,正常情況下該細(xì)胞內(nèi)此時(shí)含有6條染色體,因此與該細(xì)胞來(lái)自同一個(gè)親代細(xì)胞的另一個(gè)細(xì)胞中最多含有4條染色體,C錯(cuò)誤;D、根據(jù)以上分析可知該細(xì)胞中含有同源染色體是由于減數(shù)第一次分裂后期有一對(duì)同源染色體移向一極導(dǎo)致的,該細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂的后期,D錯(cuò)誤。故選B。2、C【解題分析】
蛋白質(zhì)在鹽析中結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變;相同質(zhì)量的脂肪和糖類氧化分解,脂肪供能多;Fe是構(gòu)成人體細(xì)胞的微量元素?!绢}目詳解】A.在雞蛋清中加入一些食鹽,會(huì)看到白色的絮狀物,這是蛋白質(zhì)鹽析的結(jié)果,蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變。A錯(cuò)誤。B.相同質(zhì)量的脂肪和糖類氧化分解,糖類氧化分解供能少于脂肪,因?yàn)樘穷愔袣涞谋壤鄬?duì)小。B錯(cuò)誤。C.細(xì)胞骨架與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、分裂、分化及物質(zhì)運(yùn)輸、能量轉(zhuǎn)換和信息傳遞有關(guān)。C正確。D.人患鐮刀型細(xì)胞貧血癥是由于基因突變,F(xiàn)e是構(gòu)成人體細(xì)胞的微量元素。D錯(cuò)誤。故選C?!绢}目點(diǎn)撥】本題文重在識(shí)記細(xì)胞的元素和化合物的組成和功能等知識(shí)。3、D【解題分析】
細(xì)胞分化指在個(gè)體發(fā)育中,由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代,在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程。細(xì)胞分化是一種持久性的變化,一般來(lái)說(shuō),分化了的細(xì)胞會(huì)一直保持分化了的狀態(tài),直到死亡?!绢}目詳解】除了哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞等一些特殊細(xì)胞外,同一生物體內(nèi)不同形態(tài)的細(xì)胞中,核遺傳物質(zhì)是相同的,A項(xiàng)正確;遺傳信息的執(zhí)行情況不同即基因的選擇性表達(dá),基因的選擇性表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞分化,細(xì)胞分化使得一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異,B項(xiàng)正確;生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)是與其功能相適應(yīng)的,C項(xiàng)正確;細(xì)胞分裂只是使細(xì)胞數(shù)目增加,不同細(xì)胞間形態(tài)的差異是在細(xì)胞分裂后經(jīng)細(xì)胞分化形成,D項(xiàng)錯(cuò)誤。故選D。【題目點(diǎn)撥】易錯(cuò)點(diǎn):細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),同一個(gè)體不同體細(xì)胞中遺傳物質(zhì)相同,但RNA和蛋白質(zhì)有所不同。4、D【解題分析】
本題考查的知識(shí)點(diǎn)涉及到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、PCR技術(shù)、核移植技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)等,回憶各個(gè)技術(shù)的原理、過(guò)程、結(jié)果與結(jié)論等,據(jù)此答題?!绢}目詳解】A、為了防止雜菌污染,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的液體培養(yǎng)基需要加入抗生素,A錯(cuò)誤;B、PCR體系中應(yīng)該加入耐高溫的DNA聚合酶,但是不需要加入解旋酶,B錯(cuò)誤;C、核移植獲得的克隆動(dòng)物的細(xì)胞核來(lái)自于供體,細(xì)胞質(zhì)來(lái)自于受體,而細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中都有遺傳物質(zhì),C錯(cuò)誤;D、植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)到愈傷組織即可獲得細(xì)胞分泌物,D正確。故選D。5、D【解題分析】
分析題干信息可知,該實(shí)驗(yàn)的目的是探究細(xì)胞分裂素的作用部位,實(shí)驗(yàn)原理是細(xì)胞分裂素可解除植物的頂端優(yōu)勢(shì),因此實(shí)驗(yàn)的自變量應(yīng)該是細(xì)胞分裂素作用的部位,即①部位和②部位,因變量是側(cè)芽的發(fā)育情況。【題目詳解】A、在①②處同時(shí)涂抹等量細(xì)胞分裂素溶液,沒(méi)有反應(yīng)出自變量,自變量應(yīng)該是細(xì)胞分裂素作用的部位,即①部位和②部位,A錯(cuò)誤;B、設(shè)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組,一組在①處,另一組在②處涂抹等量細(xì)胞分裂素溶液,②處自身產(chǎn)生的內(nèi)源細(xì)胞分裂素對(duì)實(shí)驗(yàn)有影響,缺空白對(duì)照,B錯(cuò)誤。C、實(shí)驗(yàn)組切除②,在①處涂抹細(xì)胞分裂素溶液,與對(duì)照組相比由2個(gè)自變量,C錯(cuò)誤;D、實(shí)驗(yàn)設(shè)置了空白對(duì)照,切除②,排除了尖端內(nèi)源細(xì)胞分裂素的影響,D正確。故選D?!绢}目點(diǎn)撥】根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼页龀鰧?shí)驗(yàn)的自變量和因變量是解題的突破口,對(duì)應(yīng)實(shí)驗(yàn)變量的控制是解題的關(guān)鍵。6、B【解題分析】
細(xì)胞周期:連續(xù)分裂的細(xì)胞,從一次分裂完成時(shí)開(kāi)始到下次分裂完成時(shí)為止;根據(jù)半保留復(fù)制可知,含15N的DNA分子有2個(gè),占總DNA分子的比例為1/32則一個(gè)DNA分子經(jīng)復(fù)制后得到64個(gè),復(fù)制6次得到的;復(fù)制6次耗時(shí)6小時(shí),則分裂周期是1小時(shí)?!绢}目詳解】由于DNA是半保留復(fù)制,形成子代DNA分子中含有親代鏈的DNA為2個(gè),則2/2n=1/8則n=4,說(shuō)明細(xì)胞分裂4次,則細(xì)胞周期=8÷4=2小時(shí)。故選:B?!绢}目點(diǎn)撥】本題的解題關(guān)鍵是能夠根據(jù)含15N的DNA占總DNA的比例計(jì)算出復(fù)制的次數(shù),進(jìn)而進(jìn)行相關(guān)計(jì)算。7、C【解題分析】
由圖可知,湖泊被污染后,該種魚(yú)類的出生率下降,死亡率上升;種群的增長(zhǎng)率=出生率?死亡率。【題目詳解】由于種群的增長(zhǎng)率=出生率?死亡率,增長(zhǎng)率>0時(shí),種群數(shù)量一直在增長(zhǎng),當(dāng)增長(zhǎng)率=0時(shí)(c點(diǎn)),種群數(shù)量達(dá)到最大,增長(zhǎng)率<0時(shí),種群數(shù)量減少,C正確。故選C。【題目點(diǎn)撥】本題主要考查了學(xué)生對(duì)知識(shí)的分析和理解能力。種群密度是種群最基本的數(shù)量特征;出生率和死亡率對(duì)種群數(shù)量起著決定性作用。8、C【解題分析】
分析題圖:乙細(xì)胞中含有同源染色體,且著絲點(diǎn)都排列在赤道板上,處于有絲分裂中期,因此甲→乙表示有絲分裂;丙細(xì)胞不含同源染色體,且著絲點(diǎn)分裂,處于減數(shù)第二次分裂后期,因此甲→丙表示減數(shù)分裂?!绢}目詳解】A、丙細(xì)胞不含同源染色體,且著絲點(diǎn)分裂,處于減數(shù)第二次分裂后期,細(xì)胞質(zhì)均等分裂,該細(xì)胞可能為次級(jí)精母細(xì)胞或者第二極體,A錯(cuò)誤;B、交叉互換發(fā)生在同源染色體的非姐妹染色單體之間,a和B所在染色體為非同源染色體,不可以發(fā)生交叉互換,B錯(cuò)誤;C、甲為正常體細(xì)胞、乙處于有絲分裂中期、丙處于減數(shù)第二次分裂后期,三個(gè)細(xì)胞中均含有兩個(gè)染色體組,但只有丙中不含同源染色體,C正確;D、等位基因的分離和非等位基因自由組合發(fā)生在減數(shù)第一次分裂后期,而丙細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂后期,D錯(cuò)誤。故選C。二、非選擇題9、cDNAPCRXhoIEoRI啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對(duì)照【解題分析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!绢}目詳解】(1)基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)(cDNA)。其中基因組文庫(kù)包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫(kù)只包含某種生物的部分基因,可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA;由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理,所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時(shí)間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。(2)分析圖1中堿基序列,α鏈上有“—CTCGAC—”識(shí)別序列,β鏈上有“—GAATTC—”堿基識(shí)別序列,與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識(shí)別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?!陛d體進(jìn)行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建基因表達(dá)載體?;虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。(3)根據(jù)第(2)題可知,基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因,因此一定溫度下,與經(jīng)過(guò)Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。(4)基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì),一段時(shí)間后,為確定PD-1基因是否表達(dá),可以檢測(cè)細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能,可采用抗原—抗體雜交技術(shù),即從裂解293T細(xì)胞中,提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”。為了增加實(shí)驗(yàn)的可信度,還需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn),只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞,因?yàn)椴缓琍D-1基因,所以“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”不會(huì)阻斷?!绢}目點(diǎn)撥】題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié),能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)在新的情景材料下分析運(yùn)用。10、成熟的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和細(xì)胞器無(wú)法除去血漿蛋白過(guò)高過(guò)長(zhǎng)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分子帶電性質(zhì)的差異分子的形狀【解題分析】
1、凝膠色譜法:
凝膠色譜法也稱做分配色譜法,是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。2、電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán),在一定的pH下,這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。在電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。
電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。
3、紅細(xì)胞的洗滌要點(diǎn):
洗滌次數(shù)、離心速度與離心時(shí)間十分重要。洗滌次數(shù)過(guò)少,無(wú)法除去血漿蛋白;離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果?!绢}目詳解】(1)因?yàn)槌墒斓牟溉閯?dòng)物紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和細(xì)胞器,為了獲得純度較高的血紅蛋白,經(jīng)常選用哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料來(lái)提取血紅蛋白。(2)提取血細(xì)胞時(shí),首先進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌,洗滌次數(shù)、離心速度與離心時(shí)間十分重要。洗滌次數(shù)過(guò)少,獲得的血紅蛋白質(zhì)中會(huì)有較多的血漿蛋白;離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使血細(xì)胞等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果。(3)由分析可知蛋白質(zhì)分離方法中常用凝膠色譜法,該方法的原理是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的。(4)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù),將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,在電泳過(guò)程中,蛋白質(zhì)分子的分子因?yàn)閹щ娦再|(zhì)的差異、分子的形狀以及分子本身的大小等不同而產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)的分離?!绢}目點(diǎn)撥】熟知蛋白質(zhì)分離和提純的原理以及相關(guān)的技術(shù)要點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵!11、溫覺(jué)感受器毛細(xì)血管舒張抗利尿激素腎小管、集合管重吸收水分等于大腦皮層酶的活性降低或失活升高【解題分析】
人是恒溫動(dòng)物,恒溫動(dòng)物在低溫環(huán)境中要減少散熱,增加產(chǎn)熱,而在高溫環(huán)境中,要減少產(chǎn)熱,增加散熱,這樣才能維持體溫相對(duì)穩(wěn)定。溫度感受器接受體內(nèi)、外環(huán)境溫度的刺激,通過(guò)下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞的活動(dòng),相應(yīng)地引起內(nèi)分泌腺、骨骼肌、皮膚血管和汗腺等組織器官活動(dòng)的改變,從而調(diào)整機(jī)體的產(chǎn)熱和散熱過(guò)程,使體溫保持在相對(duì)恒定的水平。皮膚是主要的散熱器官,在寒冷的刺激下,皮膚溫度感受器產(chǎn)生反射性的血管收縮反應(yīng),皮膚溫度下降,散熱量減少;在溫?zé)岬拇碳は拢碳てつw中另一種溫度感受器產(chǎn)生反射性的血管舒張反應(yīng),血流量增加?!绢}目詳解】(1)皮膚和黏膜處有溫度感受器,包括冷覺(jué)感受器和溫覺(jué)感受器,夏季,高溫刺激溫覺(jué)感受器。皮膚和汗腺都是神經(jīng)調(diào)節(jié)的效應(yīng)器,高溫刺激引起皮膚毛細(xì)血管舒張,血流量加快,且汗腺分泌增強(qiáng),出汗增多,最終導(dǎo)致散熱加快以維持體溫的相對(duì)恒定。(2)機(jī)體大量出汗導(dǎo)致失水較多,機(jī)體滲透壓升高,刺激滲透壓感受器,引起垂體釋放抗利尿激素。抗利尿激素促進(jìn)腎小管、集合管重吸收水分,滲透壓下降,以維持體內(nèi)的水鹽平衡。(3)體溫維持在39℃高溫,說(shuō)明產(chǎn)熱和散熱平衡,因此此時(shí)機(jī)體的產(chǎn)熱等于散熱。感覺(jué)中樞在大腦皮層。(4)酶容易受高溫影響,過(guò)高的體溫可以使細(xì)胞中酶的活性降低或失活,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞代謝的紊亂。細(xì)胞膜的主要成分是磷脂和蛋白質(zhì),高溫也會(huì)損害細(xì)胞膜,使其通透性升高,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡或壞死?!绢}目點(diǎn)撥】理解、識(shí)記體溫調(diào)節(jié)的過(guò)程及影響因素是解答本題的關(guān)鍵。12、平胸腺嘧啶(T)DNA連接酶耐高溫變性延伸鑒別和篩選含目的基因的細(xì)胞蔗糖【解題分析】
1、基因表達(dá)載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等。其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,
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