凱氏定氮儀指南

凱氏定氮操作指導(dǎo)凱氏定氮的操作分為消化和定氮兩步：一、 消化用微分天平準(zhǔn)確稱(chēng)取一定質(zhì)量的樣品，置于消化管底部。對(duì)于固體或是半固體等可用稱(chēng)量紙稱(chēng)量的樣品，可將稱(chēng)量紙置于消化管中（稱(chēng)量紙不含氮，不會(huì)影響結(jié)果）。每個(gè)樣品2—3個(gè)平行。設(shè)置2—3個(gè)空白實(shí)驗(yàn)（不加樣品）。注：因操作不當(dāng)殘留在管壁上的樣品，在加入硫酸的時(shí)候需用硫酸將其沖入消化管底部，否則將造成測(cè)定結(jié)果偏低。加入0.3克的催化劑。加入一定量的濃H2SO4，在通風(fēng)櫥中操作，蓋上小漏斗。舉例，蛋白質(zhì)含量20%左右的干酪0.6g所加濃H2SO4量為5ml。注：濃h2so4的添加量要考慮樣品組成對(duì)消耗酸量的影響。酸量小，樣品消化不完全，測(cè)定結(jié)果偏低；酸量大，定氮過(guò)程中與堿中和后酸過(guò)量，游離氨不能被蒸餾出來(lái)，嚴(yán)重影響測(cè)定結(jié)果。開(kāi)始消化過(guò)程：在220。。預(yù)消化1h，然后將溫度升高到400OC下進(jìn)行消化全溶液澄清。注：a.預(yù)消化的目的是讓樣品和硫酸先緩慢的反應(yīng)。不預(yù)消化，濃硫酸將和樣品在高溫下劇烈反應(yīng)，造成炭化，測(cè)定結(jié)果將偏低；炭化造成的顆粒還將會(huì)在排廢過(guò)程中堵塞管路，造成儀器不能正常工作；b.消化管中液體冷卻后不返黃為消化終點(diǎn)，否則需繼續(xù)消化。二、 定氮用蒸餾水將小漏斗的內(nèi)壁潤(rùn)一下，使吸附在內(nèi)壁上的液體進(jìn)入消化管中，以備定氮所需。但是，蒸餾水用量不能過(guò)大，否則蒸餾水中的氮會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。檢查蒸餾水、堿液、指示劑的量，保證各個(gè)溶液能夠滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)所需。堿液配制：堿液的濃度為33%—35%，一瓶未開(kāi)封的NaOH（500g）加入1L水；注：NaOH溶液在配制時(shí)會(huì)釋放大量的熱，應(yīng)在通風(fēng)櫥中操作。用大塑料杯子配制，先在杯子中加入水，將杯子放入冷水浴中，邊攪拌邊加入NaOH固體。待冷卻之后，再倒入塑料桶中。酸液配制：根據(jù)稱(chēng)取樣品質(zhì)量，確定所配酸液的濃度，確保定氮所用酸量在15—25ml。舉例，蛋白質(zhì)含量20%左右的干酪0.6g所需HCl濃度為0.1mol/L。0.1mol/L的HCl溶液配制：9.0ml濃鹽酸，稀釋到1L。0.1mol/L的HCl溶液標(biāo)定：三角瓶中加入0.1g左右Na2CO3（微分天平稱(chēng)量，準(zhǔn)確記錄讀數(shù)），加入50ml蒸餾水，用配制的HCl溶液滴定。根據(jù)滴定體積，計(jì)算HCl準(zhǔn)確濃度（精確到小數(shù)點(diǎn)后第四位）。將冷卻水開(kāi)關(guān)打開(kāi)。進(jìn)入到凱氏定氮儀界面，顯示“R”。先按手動(dòng)操作，再按手動(dòng)選擇，出現(xiàn)的參數(shù)分別代表：HB：硼酸； HA：堿；HD：蒸餾水；HT：酸液；HE：廢液6.換酸操作：將白色的管子擰下來(lái)，將其中的HCl倒掉后再裝上；注：擰管子的時(shí)候要注意，不能將管子擰得太緊或是太松，太松容易漏液對(duì)儀器造成污染，太緊則不容易下次操作。要掌握好力度。按手動(dòng)選擇，選擇“HT”，按手動(dòng)操作，讓新?lián)Q的酸液在管中潤(rùn)洗兩次。開(kāi)始定氮操作，按手動(dòng)選擇，選擇“AUTO”，按參數(shù)設(shè)置，出現(xiàn)的參數(shù)分別代表：No：樣品號(hào)； M：滴定所用酸濃度； K：1.0000（常數(shù)，不用設(shè)置）；A：加堿液時(shí)間； C：定氮系數(shù)（奶制品設(shè)置為6.38,蛋制品設(shè)置為6.25）；W：樣品質(zhì)量； V0：空白滴定體積（三次空白實(shí)驗(yàn)消耗酸液的平均值）；注：加堿液時(shí)間，空白實(shí)驗(yàn)不用設(shè)置，樣品組設(shè)為4s或5s，需保證加堿正?；蜻^(guò)量。正常時(shí)為土黃色，過(guò)量時(shí)為藍(lán)色。，首先進(jìn)行空管實(shí)驗(yàn)，參數(shù)設(shè)置完成后，按自動(dòng)測(cè)定。一般一次定氮實(shí)驗(yàn)的時(shí)間為4—5min。完成后，打開(kāi)蓋，帶著厚手套，將其中的液體倒入廢液缸中?？展軐?shí)驗(yàn)是為了檢測(cè)儀器的穩(wěn)定程度。當(dāng)前后3次滴定酸值穩(wěn)定時(shí)，可認(rèn)為儀器穩(wěn)定。儀器穩(wěn)定后，開(kāi)始空白管實(shí)驗(yàn)，更改參數(shù)后，拉下蓋子即開(kāi)始滴定實(shí)驗(yàn)?？瞻讓?shí)驗(yàn)是為了排除加入試劑的干擾。定氮結(jié)束后，記錄所用酸值。并將三次空白實(shí)驗(yàn)的滴定酸值取平均，作為空白滴定體積v0。樣品溶液的凱氏定氮，方法依舊。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，關(guān)上開(kāi)關(guān)，關(guān)掉冷卻水，并將廢液缸中的液體倒入廁所。三、含氮量計(jì)算含氮量計(jì)算公式：N(%)=1.401xMx(V