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文檔簡介

特異性強(qiáng)：采用熱啟動酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增。所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光水2.引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的PCR產(chǎn)物長度為560bp。發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其wan全溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm離心10分鐘。此時離心④RNA清洗移去上清液，每1mITRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙⑤RNA干燥小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。⑥溶解RNA沉淀溶解RNA時，先加入無RN全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。1⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)，這對酶切分析2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；4)樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用

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