【高效液相色譜-紫外檢測(cè)法檢測(cè)奶茶添加劑實(shí)驗(yàn)探究2700字（論文）】

高效液相色譜-紫外檢測(cè)法檢測(cè)奶茶添加劑實(shí)驗(yàn)探究目錄TOC\o"1-2"\h\u阿44091材料與試劑 254521.1樣品來(lái)源 2195461.2試劑 299961.3器材 2313142實(shí)驗(yàn)方法 2280612.1溶液配置 2181352.2樣品前處理 3293152.3液相色譜分析條件 45983注：流動(dòng)相中，A為甲醇，B為乙酸銨溶液（0.02mol/L） 418843實(shí)際樣品測(cè)定結(jié)果 4228194結(jié)論與分析 5奶茶飲品口感香甜可口，且不同的品種口味層出不窮，是當(dāng)代年輕人群的心頭好，如此美味的奶茶，其中也必然含有多種食品添加劑，如防腐劑、甜味劑以及咖啡因等。食品防腐劑是指為防止食品因微生物污染導(dǎo)致腐敗變質(zhì)，而加入食品中的人工合成的化學(xué)物質(zhì)或天然的化合物。目前，苯甲酸及苯甲酸鈉是眾多防腐劑里，我國(guó)各大食品加工廠中最常用的。苯甲酸在進(jìn)入細(xì)胞后，通過(guò)電離酸化堿儲(chǔ)，降低呼吸酶系的活性，阻止乙酰輔酶A的縮合反應(yīng)，從而達(dá)到食品防腐的目的。但超過(guò)限定劑量的苯甲酸具有一定的生物毒性，應(yīng)嚴(yán)格規(guī)范其使用。糖精鈉的甜度為蔗糖的三百到五百倍，作為甜味劑中的一種，其作用除了在味覺(jué)上帶來(lái)的甜蜜感以外，本身并不具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，當(dāng)攝入量較大時(shí)，會(huì)干擾消化酶的正常分泌，削弱小腸的吸收能力，同時(shí)導(dǎo)致食欲不振，致使青少年出現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良的癥狀?？Х纫蜃鳛橐环N中樞神經(jīng)興奮劑，不僅能解除疲勞、還可以促進(jìn)人體血液循環(huán)，但劑量過(guò)大后，容易提高致突變和致畸的幾率，還會(huì)引起局部缺血性心臟病。這些添加劑在規(guī)定范圍和用量?jī)?nèi)使用是不會(huì)對(duì)人體造成影響的，但若是高頻率地?cái)z入，長(zhǎng)期以往則會(huì)導(dǎo)致各類添加劑在體內(nèi)蓄積，成為危害身體健康的一大隱患。因此，檢測(cè)食品中的苯甲酸、糖精鈉、咖啡因等對(duì)維護(hù)廣大消費(fèi)者群體的健康具有重要意義。材料與試劑樣品來(lái)源購(gòu)自嘉興市各個(gè)縣區(qū)的不同奶茶店，包括但不限于一點(diǎn)點(diǎn)、古茗、coco、茶百道等眾多奶茶品牌的不同品種茶飲料。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，共有50份市售奶茶樣品，分別標(biāo)記編號(hào)，冷藏保存。試劑甲醇（HPLC，批號(hào)：20150608），咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品（BW0130-15-1，濃度1000μg/mL），苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品（BW（E）100006，濃度：100.0μg/mL），糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品（GBW（E）100008，濃度：100.0μg/mL），超純水，冰乙酸，甲酸，亞鐵氰化鉀（分析純，批號(hào)：20190220），乙酸鋅（分析純，批號(hào)：20190712），乙酸銨（分析純，批號(hào)：20170913）器材1260高效液相色譜儀帶DAD檢測(cè)器（購(gòu)自美國(guó)Agilent公司），Milli-Q超純水系統(tǒng)（購(gòu)自美國(guó)Millipore公司），XW-80A旋渦混合器（購(gòu)自中國(guó)精科實(shí)業(yè)有限公司），KQ5200DA型數(shù)控超聲波清洗器（購(gòu)自昆山市超聲儀器有限公司），LG10-2.4A高速離心機(jī)（購(gòu)自中國(guó)北京醫(yī)用離心機(jī)廠），0.22μm水相微孔濾膜（13mm×0.22μm，購(gòu)自中國(guó)上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司），一次性無(wú)菌注射器（5mL，購(gòu)自岳陽(yáng)民康醫(yī)用材料有限公司，批號(hào)：190125），50mL塑料離心管，電子天平（購(gòu)自賽多利斯科學(xué)儀器有限公司），抽濾裝置，一次性吸管，移液槍，一次性槍頭。實(shí)驗(yàn)方法溶液配置試劑配制亞鐵氰化鉀溶液（92g/L）：稱取106g亞鐵氰化鉀（K4Fe(CN)6），加入適量純水溶解，用純水定容至1000mL。乙酸鋅溶液（183g/L）：稱取220g乙酸鋅[(CH3COO)2Zn]，加入少量純水溶解，加入冰乙酸30mL，純水定容至1000mL。乙酸銨溶液（20mmol/L）：稱取1.54g乙酸銨（CH3COONH4），適量水溶解后，用純水定容至1000mL，經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾后備用。甲酸-乙酸銨溶液（1：10）：稱取1.54g乙酸銨，少量水溶解后，加入75.2μL甲酸（HCOOH），純水定容至1000mL，過(guò)0.22μm濾膜后備用（存在干擾峰時(shí)使用）。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制苯甲酸、糖精鈉、咖啡因標(biāo)準(zhǔn)中間溶液：取適量苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液和咖啡因標(biāo)準(zhǔn)溶液，用超純水配制成標(biāo)準(zhǔn)混合液，混勻待用。苯甲酸、糖精鈉、咖啡因標(biāo)準(zhǔn)混合液：取適量苯甲酸、糖精鈉、咖啡因標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，加入超純水進(jìn)行稀釋，分別配制成濃度為1.00μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，顛倒混勻后，過(guò)0.22μm濾膜于進(jìn)樣小瓶中，待測(cè)。樣品前處理待測(cè)樣品取50支50mL塑料離心管，每管進(jìn)行編號(hào)，將樣品奶茶顛倒混勻，用吸管準(zhǔn)確吸取2.0g奶茶液體于離心管中，加入2mL甲醇溶液，用超純水定容至50mL，試使用旋渦混合器對(duì)定容好的樣品管進(jìn)行振蕩混勻，持續(xù)2min后，繼續(xù)對(duì)其超聲5min。超聲結(jié)束，取出離心管，放入高速離心機(jī)中，8000r/min離心5min。一次性注射器吸取適量上清液，過(guò)0.22μm濾膜于進(jìn)樣小瓶中，待測(cè)。加標(biāo)樣品隨機(jī)選擇一份空白樣品，添加一定標(biāo)準(zhǔn)混合溶液后制成標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)含量分別為0.05g/kg、0.10g/kg、0.50g/kg的加標(biāo)樣品，按上述步驟同步進(jìn)行前處理操作后，過(guò)濾待測(cè)。液相色譜分析條件色譜柱：AgilentPoroshell120EC-C18柱（3mm×150mm，2.7μm）；柱溫：35℃；流動(dòng)相：甲醇-乙酸銨溶液（0.02mol/L）洗脫方式：梯度洗脫，具體程序見(jiàn)表2-1；進(jìn)樣量10μL；流速：1.0mL/min；紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)：240nm。表2-1梯度洗脫條件時(shí)間（min）流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）0595740609208012595注：流動(dòng)相中，A為甲醇，B為乙酸銨溶液（0.02mol/L）實(shí)際樣品測(cè)定結(jié)果該實(shí)驗(yàn)中共檢測(cè)市售奶茶50份，取樣后對(duì)樣品1：1加入甲醇沉淀劑沉淀離心，分離效果均良好，根據(jù)檢測(cè)得到的色譜圖，按保留時(shí)間定性、峰面積定量，經(jīng)計(jì)算，待測(cè)的三種添加劑成分各有一定程度的檢出，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表3-3。檢測(cè)的50份市售奶茶飲品中，有6份檢測(cè)出苯甲酸，含量在0.0988～0.197g/kg之間；有4份檢測(cè)出糖精鈉，含量在0.0550～0.176g/kg之間；有12份檢測(cè)出咖啡因，含量在0.0195～0.483g/kg之間。表3-3樣品中苯甲酸、糖精鈉、咖啡因含量檢測(cè)結(jié)果組分檢出數(shù)（份）檢出范圍（g/kg）苯甲酸60.0988～0.197糖精鈉40.0550～0.176咖啡因120.0195～0.483結(jié)論與分析上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，除苯甲酸檢測(cè)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)較低、線性較差外，糖精鈉及咖啡因所對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線均線性良好，相關(guān)系數(shù)在0.9999以上。分析可能存在原因是，在制作標(biāo)準(zhǔn)混合溶液時(shí)，未能準(zhǔn)確控制好苯甲酸的加入量，導(dǎo)致實(shí)際濃度與坐標(biāo)上對(duì)應(yīng)點(diǎn)的濃度不符。檢測(cè)結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)中使用的樣品預(yù)處理方式更加便捷，沉淀分離后去除雜質(zhì)的效果也更好，優(yōu)化后的色譜檢測(cè)條件也具有更好的分離度及精確度，適用于奶茶飲品中苯甲酸、糖精鈉及咖啡因的同時(shí)檢測(cè)，為這三種食品添加劑的定量分析及監(jiān)管提供了技術(shù)支持。經(jīng)過(guò)對(duì)市售奶茶中三種添加劑的定量分析表明，各個(gè)品種奶茶中雖各有部分添加劑檢出，但都未超過(guò)國(guó)家食品安全檢測(cè)中對(duì)這三種物質(zhì)規(guī)定的劑量標(biāo)準(zhǔn)，但若長(zhǎng)期頻繁攝入，仍具有較低風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)，因部分奶茶中本就以茶湯作為原材料，而茶葉中本就含有部分咖啡因，因此在50份市售奶茶中咖啡因的檢出份數(shù)較多且含量也略高。本次實(shí)驗(yàn)僅檢測(cè)了50份市售奶茶中的三種添加劑，并不能代表奶茶中的全部添加劑種類及含量，且樣本量較小，不能涵蓋市面上所有的奶茶品牌及種類，僅能作為參考而不具有很大的代表性。奶茶雖然好喝，但市售奶茶中并無(wú)太多對(duì)人體有益的成分，極少數(shù)添加純奶，大多奶茶店都選擇加入奶精及其他調(diào)味劑來(lái)