臨床藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)-課件

臨床藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)ppt課件幽默來自智慧，惡語來自無能12345【實(shí)驗(yàn)步驟】1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備1.5mL

EP管7支，編號空白血漿0.5mL分別加入不同量的左氧氟沙星標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，配成濃度相當(dāng)于0.05、0.10、0.25、0.50、1.00、2.50、5.00μg/mL的血漿樣品經(jīng)預(yù)處理后，進(jìn)樣檢測測定峰面積值（A），以A與濃度C作線性回歸，求出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。6血漿樣品的采集健康志愿者口服200mg鹽酸左氧氟沙星膠囊分別在不同時(shí)間點(diǎn)抽取靜脈血3mL，放入肝素化試管0.25h、0.5h、0.75h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、4.0h、6.0h、9.0h、12.0

h、24.0h離心(3000轉(zhuǎn)/分×10

min)，取血漿待測7血漿樣品的處理（√）1.5mL

EP

2支，編號血漿樣品0.5mL70%高氯酸30μL旋渦振蕩20秒15000rpm離心10min取上清液20μL進(jìn)樣檢測8色譜條件色譜柱：ZORBAX

Eclipse

XDB-C18（4.6×150mm，5μm，Agilent，USA）保護(hù)柱：XDB-C18保護(hù)柱（4.6×12.5mm，5μm，Agilent，USA）流動相：乙腈-水-2%冰醋酸（18：12：70，V/V/V）流速：1.0mL/min，柱溫：20℃，檢測波長：294nm，參比波長：380nm，檢測靈敏度：0.1mAU。9【結(jié)果】根據(jù)測得的A值和標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出濃度。

全實(shí)驗(yàn)室匯總，以時(shí)間t為橫坐標(biāo)，濃度C和lgC為縱坐標(biāo)作圖。時(shí)間：0.25h、0.5h、0.75h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、4.0h、6.0h、9.0h、12.0

h、24.0h10【討論】左氧沙星樣品預(yù)處理方法和檢測方法藥時(shí)曲線11左氧沙星12廣譜抗菌作用：多數(shù)腸桿菌科細(xì)菌，金黃色葡萄球菌等革蘭陽性菌和肺炎支原體，肺炎衣原體。單劑量口服0.2g后，血藥峰濃度（Cmax）約為

1.6mg/L，達(dá)峰時(shí)間（Tmax）約為1小時(shí)。血消除半衰期（t1/2β）約為6小時(shí)。蛋白結(jié)合率約為30%～40%。組織和體液中的濃度與血藥濃度之比約在1.1～2.1之間。主要以原形自腎排泄，在體內(nèi)代謝甚少。生物樣品的預(yù)處理：溶劑萃取法：乙醚、乙酸乙酯、正己烷、苯，旋渦混合后轉(zhuǎn)移有機(jī)溶劑層并揮干，用流動相復(fù)溶后檢測。蛋白沉淀法：乙腈、甲醇、高氯酸、三氯醋酸（蛋白沉淀劑），旋渦混合后高速離心一定時(shí)間，上清液可直接檢測。13高效液相定量方法內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)法就是用在樣品中定量加入要分析的物質(zhì)，通過測得的實(shí)際樣品量和加入樣品量的比值來定量所要分析的樣品含量。外標(biāo)法:用待測組分的純品作對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和樣品中待測組分的響應(yīng)信號相比較進(jìn)行定量的方法稱為外標(biāo)法。外標(biāo)一點(diǎn)法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法。內(nèi)標(biāo)法＋標(biāo)準(zhǔn)曲線法14微生物檢測法和高效液相檢測法15實(shí)驗(yàn)二反相高效液相色譜法檢測人血漿中雙氯芬酸鈉的濃度16【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆崭咝б合嗌V內(nèi)標(biāo)法檢測血漿藥物濃度的原理了解高效液相色譜儀的原理及應(yīng)用?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備1.5mL

EP管7支，編號空白血漿0.5mL分別加入不同量的雙氯酚酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，配成濃度相當(dāng)于0.025、0.05、0.100、0.250、0.500、1.000、2.500、5.000mg/L血漿標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)預(yù)處理后，進(jìn)樣檢測測定峰面積值（A），以A與濃度C作線性回歸，求出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。172.給藥及血樣采集每人口服單劑量雙氯芬酸鈉栓劑100mg于給藥前，給藥后0.167h、0.333h、0.667h、1.0h、1.5h、2.0h、3.0h、4.0h、6.0h、8.0h、12.0

h靜脈取血3mL，放入肝素化試管離心(3000轉(zhuǎn)/分×10

min)，分離血漿注意：實(shí)驗(yàn)前晚禁食（禁食不禁水）12

h，次日7:00排空膀胱后服藥，給藥2h后方可飲水，4

h后進(jìn)統(tǒng)一餐18樣品處理10mL具塞試管：血漿0.5mL，加人2mol/LHCL100μL，40μL內(nèi)標(biāo)液（吉非羅齊or卡馬西平）。振蕩30秒，加乙醚5.0mL，混旋2min，靜置10min將有機(jī)相4mL轉(zhuǎn)移至10mL刻度離心試管中37°C水浴揮干，加流動相100μL復(fù)溶，進(jìn)樣20μL用內(nèi)標(biāo)法峰面積定量分析。194.色譜條件：20色譜柱:HypersilC18柱(4.6mm×250mm，5um，Agilent，USA);保護(hù)柱:ezs柱(大連依利特科學(xué)儀器有限公司)流動相：甲醇：1.5%冰乙酸(72.5:27.5，v/v)流速：0.9mL/min；檢測波長276nm；柱溫：室溫?！窘Y(jié)果】內(nèi)標(biāo)法定量匯總不同時(shí)間的血藥濃度DAS軟件處理21【討論】雙氯酚酸萃取法內(nèi)標(biāo)法藥動學(xué)特征22DAS系統(tǒng)23Drug

And

Statistics242526病例討論1患者男,75歲。有帕金森病史3年，服用美多巴超過半年。美多巴劑量早250mg、中、晚各125mg。入院前連續(xù)4個月無明顯誘因出現(xiàn)反復(fù)頭昏,心前區(qū)和胸骨后燒灼感,惡心,腹部飽脹不適,大便干結(jié),焦慮不安,失眠，每次發(fā)作幾小時(shí)至1d不等,可逐漸自行緩解。入院時(shí)檢查:T36.7℃,P

73次/min,R

20次/min,BP

130/80mmHg。焦慮病容,神清,慌張步態(tài),行動緩慢,上肢輕微靜止震顫,語聲低微,語速緩慢,肌肉僵直,頸略強(qiáng)直,雙肺未聞及干濕鳴,心界不大,HR73次/min,律齊,各瓣膜聽診區(qū)未聞及雜音,腹部平軟,無壓痛,反跳痛,肝、脾肋下未及,腸鳴音5次/min,雙腎區(qū)無叩痛,雙下肢不腫,病理征未引出。入院后三大常規(guī)正常,肝、腎功,電解質(zhì)、血脂正常。胸片:心肺未見異常;B超:前列腺明顯腫大;床旁心電圖:竇性心律,電軸不偏,P波略低平,無ST-T的改變。胃鏡:淺表性胃炎,Hp,陰性。入院后患者無規(guī)律地反復(fù)出現(xiàn)上述癥狀,對癥治療：胃粘膜保護(hù)、增強(qiáng)胃動力、通便、抗抑郁等，均無效。后調(diào)整美多巴劑量：美多巴

總量500mg/d不變,平分1次/6h服用；總量調(diào)整為375mg/d，1次/8h平分服用，上述癥狀消失兩日后又復(fù)發(fā)；總量375mg/d，1次/4h平分服用,以上癥狀消失,持續(xù)7d未再出現(xiàn)?；颊咻p微震顫等PD癥狀無加重。好轉(zhuǎn)出院。27分析：1.帕金森病是一種慢性進(jìn)行性疾病,主要癥狀為震顫,肌肉僵直,運(yùn)動障礙和語言、姿勢方面的改變,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。主要的病理機(jī)制是黑質(zhì)紋狀體系統(tǒng)多巴胺神

經(jīng)元退行性病變，膽堿能神經(jīng)相對占優(yōu)勢，多巴胺能和膽堿能系統(tǒng)功能失平衡。目前

的藥物治療主要是著眼于重建紋狀體遞質(zhì)

的平衡，即提高DA水平（擬多巴胺藥）或降低Ach水平（抗膽堿藥）。282.美多巴為L-多巴與外周多巴脫羧酶抑劑芐絲肼的復(fù)方制劑。目前仍是治療PD的有效、常用藥物之一。L-多巴為體內(nèi)合成多巴胺等的前體物質(zhì)，本身并無藥理作用，通過血腦屏障進(jìn)入中樞，經(jīng)多巴脫羧酶作用轉(zhuǎn)化成DA而發(fā)揮藥理作用。改善肌強(qiáng)直和動作遲緩效果明顯，持續(xù)用藥對震顫、流涎、姿勢不穩(wěn)及吞咽困難亦有效。對輕、中度病情者效果較好，重度或老年病人效果差。芐絲肼為外周多巴脫羧酶抑制劑。L-多巴有95%在肝臟轉(zhuǎn)化為DA，合用芐絲肼可減少在外周的轉(zhuǎn)化，使進(jìn)入中樞的量增多，提高療效并減少外周

DA引起的副作用。293.L－多巴常見的不良反應(yīng)：①胃腸道反應(yīng)有惡心，嘔吐、食欲不振，見于治療初期，約80％病人出

現(xiàn)癥狀。②用藥3個月后可出現(xiàn)不安、失眠、幻覺精神癥狀，此外尚有體位性低血壓、心律失常

及不自主運(yùn)動等。應(yīng)注意調(diào)整劑量，必要時(shí)停藥。③“開關(guān)”現(xiàn)象（患者突然多動不安為“開”，而后又出現(xiàn)肌強(qiáng)直運(yùn)動不能為“關(guān)”）見于年齡較輕的病人，約在用藥后8個月左右出現(xiàn)。可采用減少劑量或靜注本品扭轉(zhuǎn)或控制這一現(xiàn)象。本例PD患者是典型的服用美多巴后出現(xiàn)消化系統(tǒng)癥狀及焦慮、抑郁等精神癥狀。304.本例患者經(jīng)過減少日劑量或日劑量不變,改為少量多次服用后不良反應(yīng)消失。說明美多巴可通過少量多次服用相同日劑量來減少其引起的不良反應(yīng)。5.其他注意事項(xiàng)：與維生素B6或氯丙嗪等合用療效降低；禁與單胺氧化酶抑制劑、麻黃堿、利血平及擬腎上腺素藥合用；消化道潰瘍、高血壓、精神病、糖尿病、心律失常及閉角型青光眼患者禁用。31病例分析232患者男,30歲。行為異常、多疑6年,因近10個月少語,睡眠差入院,診斷為“有精神病狀的抑郁癥”。檢查:T36.8℃,P

96次/min，BP132/82mmHg,既往體健,無藥物過敏史，無血壓病史。入院后給予氯氮平片,中午150mg,晚225mg,用藥期間監(jiān)測血壓正常。氯氮平治療

13d后加用氟西汀分散片,20mg。聯(lián)合用藥第2天患者血壓升高到150/105mmHg,

36.2℃,

P 94次/min，血常規(guī)檢查正常，患者主訴輕微頭昏，無惡心嘔吐、頭痛及其他不適。33入院第21天，氯氮平減:中午125 mg,晚200

mg;氟西汀分散片加量:早40 mg。劑量調(diào)整后,血壓升高到160/110 mmHg?；颊甙察o合作,情緒偏低,當(dāng)日多次監(jiān)測血壓，波動于130～160/80～110mmHg,未給予抗高血壓治療。次日停用氟西汀分片,氯氮平進(jìn)一步減量:中午100mg,晚175mg。2d后血恢復(fù)至130/80mmHg,患者自

覺情緒低落有明顯改善。改氯氮平+碳酸鋰治療,氯氮平劑量:中午25

mg,晚125

mg;碳酸鋰劑量:中午0.5g,晚0.5g。血壓無明顯波動，2個月好轉(zhuǎn)出院。34討論351．抑郁癥的藥物治療：氟西汀，氯氮平2.判斷藥物不良反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)患者既往無高血壓病史,治療前血壓正常。氟西汀聯(lián)合氯氮平治療后,患者出現(xiàn)頭暈,血壓升高到

150/105mmHg。氯氮平減量、氟西汀增量后,血壓繼續(xù)升高至160/110

mmHg。停用氟西汀,氯氮平進(jìn)一步減量,2

d后患者血壓恢復(fù)正常,因此考慮患者的血壓升高與氟西汀及氯氮平均有關(guān)系。合并氟西汀1

d后即發(fā)現(xiàn)血壓升高;氟西汀加量、氯氮平減量后血壓繼續(xù)升高;停用氟西汀、繼續(xù)服用氯氮平,血壓正常,故認(rèn)為氟西汀分散片致高血壓的可能性大,但也不排除兩藥聯(lián)用所致。3.是否為5-羥色胺綜合征氟西汀為選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑,可以引起5-羥色胺綜合征,其典型表現(xiàn)有心動過速、高血壓和高熱等。該患者體溫、心率正常,可排除由氟西汀片引起的5-羥色胺綜合征的可能。4.結(jié)論：氟西汀分散片和(或)氯氮平片引起血壓升高明顯,但其機(jī)制不明,有待進(jìn)一步研究。36病例分析3患者男，59歲，2年前起無明顯誘因出現(xiàn)呼困難,伴全身大汗、乏力,雙下肢水腫.去年起出現(xiàn)呼吸難伴意識喪失,全身紫紺,機(jī)械通氣治療好轉(zhuǎn)。今年初呼吸困難再次加重入院。既往有高血壓病、2型糖尿病、混型高脂血癥、酒精肝、腎功不全、腎結(jié)石等病史。檢查:血壓正常,口唇紫紺,頸靜脈充盈,鞏膜黃染,雙下肺叩診呈實(shí)音,呼吸音減弱,腋前線以外可聞及濕羅音.心界向左下擴(kuò)大,心率71次/分,律齊,各瓣膜聽診區(qū)未聞及病理性雜音。腹部平軟,肝肋下4 cm,質(zhì)中,脾肋下未及,腎區(qū)無叩擊痛,移動性濁音陰性,雙下肢重度水腫,雙側(cè)足背動脈搏動消失.超聲提示雙側(cè)胸腔積液。37考慮主要診斷:①冠心病,不穩(wěn)定型心痛,心功能不全,心功能3～4級；②胸腔積液原因待查(心能不全?腫瘤?結(jié)核?

)入院后經(jīng)改善心肌供血及心功,降壓、降糖、調(diào)脂等治療,上述癥狀好轉(zhuǎn)。住院20天突發(fā)吸困難伴意識喪失,經(jīng)簡易呼吸器輔助呼吸好轉(zhuǎn)。10天后再次無誘因出現(xiàn)上述癥狀,緊急氣管插管、機(jī)械通氣、吸氧后有好轉(zhuǎn)，但仍有呼吸困難。經(jīng)詳細(xì)詢問病史,患者因腎絞痛口服鹽酸曲馬多150～250 mg/d長達(dá)4年，于今年初自行停用。此后每次呼吸困難時(shí),給予鹽酸曲馬多25～50 mg口服,約3 min內(nèi)癥狀緩解。同時(shí)聯(lián)合應(yīng)用硝普鈉、多巴胺以及利尿、強(qiáng)心等措施控制心衰,癥狀好轉(zhuǎn)。后家屬強(qiáng)烈要求聽從戒毒科會診意見，減少鹽酸曲馬多用量，患者戒斷癥狀控制不佳，最終死于感染性休克引起的多臟器功能衰竭。38討論391.曲馬多：成癮性與戒斷癥狀鹽酸曲馬多是一種臨床上常用的麻醉性鎮(zhèn)痛處方藥.正常人每日服用曲馬多200

mg,約半年后會產(chǎn)生藥物依賴;如每日服用300~