圖解抗原抗體反應類型和原理1課件

研究生課程抗原抗體反應類型(antigen–antibodyreaction)1可編輯課件PPT2可編輯課件PPT抗原抗體反應:指抗原與相應抗體之間

所發(fā)生的特異性結合反應。體內：體液免疫應答的效應作用體外：各種免疫學檢測技術包括本章講述的抗原抗體反應，主要是指抗原和抗體在體外結合所表現(xiàn)的反應3可編輯課件PPT第一節(jié)抗原抗體反應的原理第二節(jié)抗原抗體反應的特點第三節(jié)影響抗原抗體反應的因素第四節(jié)免疫學檢測技術的類型教學內容：

4可編輯課件PPT第一節(jié)抗原抗體反應的原理5可編輯課件PPT一、抗原抗體的親和力和親合力*親和力（affinity）：是抗體分子上一個抗原結合點與相應的抗原決定簇之間的相適應而結合的強度，是抗原與抗體間固有的結合力。6可編輯課件PPT7可編輯課件PPT親和常數(shù)（K）：K值越大?抗體的親和力越高?與抗原結合越牢固抗體與抗原結合是可逆的反應，在平衡時其8可編輯課件PPT親合力（avidity）：是指一個抗體分子與整個抗原表位之間結合的強度，與抗體結合價直接相關。另外也與親和力強弱有關。9可編輯課件PPT10可編輯課件PPT11可編輯課件PPT不形成牢固的共價鍵，通過非共價鍵結合這種弱的結合力涉及幾種分子間的作用力二、抗原抗體的結合力1、靜電引力2、范德華引力3、氫鍵4、疏水作用力12可編輯課件PPT一、靜電引力概念：抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團之間相互的引力。又稱庫倫引力。靜電引力的大小與兩個相互作用基團間的距離的平方成反比。13可編輯課件PPT

二、范德華引力概念：抗原和抗體相互接近時，各自所攜帶的原子與原子、分子與分子由于分子極化作用而出現(xiàn)的引力。

結合力的大小與兩個相互作用基團的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比。

作用力最小

作用大小取決于二者分子空間構型的互補性14可編輯課件PPT

概念：供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。

三、氫鍵結合力

供氫體：－COOH、－NH2和－OH

受氫體：氧、氮

氫鍵結合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比。最具特異性（必須供氫體和受氫體互補才能實現(xiàn)氫鍵的結合）15可編輯課件PPT四、疏水作用力（疏水鍵）

概念：兩個疏水基團在水溶液中相互接觸時，由于對水分子排斥而趨向聚集的力。

抗原決定簇與抗體上的結合點靠近，互相間正、負極性消失，親水層立即失去。

結合力最強，約占總結合力的50％。16可編輯課件PPT親水膠體疏水膠體轉化NaCl可見反應血清學反應條件下，抗原抗體均帶負電荷，使極化的水分子在其周圍形成水化層，成為親水膠體。

當抗原與抗體結合使表面電荷減少，水化層變薄，失去親水性能，抗原抗體復合物成為疏水膠體在電解質作用下，中和膠體粒子表面的電荷，使各疏水膠體之間靠攏，形成可見的抗原抗體復合物三、親水膠體轉化為疏水膠體17可編輯課件PPT

第二節(jié)抗原抗體反應的特點1.特異性2.比例性3.可逆性4.階段性18可編輯課件PPT一、特異性（specificity）1、概念：一種抗原分子通常只能與其刺激機體后產(chǎn)生的抗體結合，這種抗原與抗體結合反應的專一性稱為特異性。特異性示意圖

19可編輯課件PPT2、決定因素：由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結構的互補性決定的。3、應用：由于抗原抗體反應具有高度特異性，故可用已知的抗原（抗體）來檢測相應未知的抗體（或抗原）。20可編輯課件PPT概念：兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結構的抗原表位，可與彼此相應的抗血清發(fā)生反應。4、交叉反應（crossreactions）抗原抗體交叉反應示意圖B21可編輯課件PPT二、可逆性（reversibility)1、概念：是指抗原與相應抗體結合成復合物后，在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性稱為抗原抗體結合的可逆性。2、原因：抗原抗體的結合是分子表面的非共價鍵結合，因此形成的復合物不牢固。3、抗原抗體反應動態(tài)平衡式如下：22可編輯課件PPT4、決定抗原抗體解離的因素（1）抗體與相應抗原的親合力。親合力低的抗體與抗原形成的復合物較易解離。（2）環(huán)境因素對復合物的影響。

PH過高或過低、增加離子強度均可破壞靜電引力，使抗原抗體結合力下降，促使其解離。注意：解離后的抗原或抗體仍然保持其原有生物活性23可編輯課件PPT三、比例性（proportionality）1、比例性是指抗原與抗體發(fā)生可見反應遵循一定的量比關系。2、以絮狀沉淀實驗為例，受抗原抗體比例性的影響非常明顯。3、根據(jù)所形成的沉淀物及抗原抗體比例關系繪制反應曲線。24可編輯課件PPT看書上76表7-125可編輯課件PPT26可編輯課件PPT最適比(optimalratio)：是指形成沉淀物最多，上清液清晰，幾乎無游離抗原或抗體的抗原抗體濃度比。等價帶(equivalencezone)：形成沉淀物最多的抗原與抗體分子比例合適的范圍。帶現(xiàn)象：在等價帶前后，由于抗體和抗原過量，形成的沉淀物少，上清液中可測出游離的抗體或抗原的現(xiàn)象。前帶(prozone)抗體過量時稱為。后代(postzone）抗原過量時稱為。5、一組概念帶現(xiàn)象包括27可編輯課件PPT四、階段性第一階段：抗原與抗體發(fā)生特異性結合階段特點：反應快第二階段：反應可見階段特點：反應時間較長28可編輯課件PPT第三節(jié)抗原抗體反應影響因素一、反應物自身因素*抗原：理化特性、Ag決定簇數(shù)量和種類。

*抗體：1、來源（如：R型抗體>H型抗體）2、特異性與親和力（如：單克隆抗體）3、濃度29可編輯課件PPT2、酸堿度：一般抗原抗體反應以pH6～9為宜，有補體參與的反應以pH7.2～7.4為宜。二、環(huán)境因素：1、電解質：（1）作用：中和抗原抗體復合物表面電荷，使其靠攏聚集成出現(xiàn)大塊聚集復合物。（2）常用電解質：0.85%NaCl、各種緩沖液3、溫度：一般抗原抗體反應以15～40℃為宜，最適溫度為37℃。4、適當?shù)恼駬u或攪拌。30可編輯課件PPT

第四節(jié)抗原抗體反應類型1.沉淀反應2.凝集反應3.補體參與的反應4.中和反應5.標記免疫反應31可編輯課件PPT反應類型實驗技術結果判斷凝集反應直接凝集試驗觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗同上抗球蛋白試驗同上沉淀反應液相沉淀試驗觀察沉淀，檢測濁度免疫電泳技術觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與的反應補體溶血試驗觀察測定溶血現(xiàn)象補體結合試驗同上32可編輯課件PPT反應類型實驗技術結果判斷中和反應病毒中和試