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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)三:體驗(yàn)細(xì)胞膜的制備方法

知識鏈接

1.材料新鮮的哺乳動(dòng)物血液

2.用具離心機(jī),離心管,滴管,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,吸水紙,小燒杯。

3.試劑檸檬酸鈉或肝素(抗凝劑),生理鹽水(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液),蒸儲(chǔ)水或清水。

4.操作要點(diǎn)

準(zhǔn)備一定量的新鮮的哺乳動(dòng)物血液,如羊血或豬血,在冰箱中靜置一晝夜。用滴管將上清液吸去。再

吸取1mL的沉淀物,放入離心管中,加入生理鹽水2mL,在2000r/min條件下離心5min。去除上清液,

在沉淀中再加入生理鹽水2mL,再離心一次,去除上清液,留沉淀備用。以上操作的目的是洗去血漿成分,

避免血漿對血細(xì)胞的緩沖作用,從而使紅細(xì)胞的溶血現(xiàn)象更加明顯。

學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作如下。

(1)取一個(gè)5mL的小燒杯,加入生理鹽水2?3mL。

(2)用滴管在沉淀的下層吸取一小滴血細(xì)胞,滴入小燒杯的生理鹽水中,以達(dá)到稀釋紅細(xì)胞的目的,

以免觀察時(shí),由于細(xì)胞密度太大,影響觀察效果。

(3)取另一個(gè)滴管,在小燒杯中輕輕攪拌,然后吸取少量的血細(xì)胞稀釋液,在載玻片的中央滴很小的

一滴,加蓋玻片。

(4)先在低倍鏡下觀察紅細(xì)胞的正常形態(tài),可見其邊緣完整發(fā)亮。

(5)在蓋玻片的一側(cè)加一滴蒸儲(chǔ)水或清水,在另一側(cè)非常小心地用吸水紙慢慢地吸引,防止把紅細(xì)胞

全部吸入吸水紙中而影響觀察。邊加水邊觀察,注意紅細(xì)胞的形態(tài)變化。紅細(xì)胞會(huì)隨著水流向一側(cè)漂移,

觀察時(shí)注意移動(dòng)玻片。紅細(xì)胞體積逐漸變大,變得非常鼓脹,在視野中可以找到少數(shù)脹破的紅細(xì)胞,它們

已失去完整發(fā)亮的邊緣,變成彌散狀。

選材:豬(或牛、羊、人)的新鮮的紅細(xì)胞稀釋液zfflk

1一?

制作裝片:用滴管取一滴紅細(xì)胞稀釋液滴在載玻片!

上,虹蓋玻片

觀察:用顯微鏡觀察紅細(xì)胞的形態(tài)(由低倍鏡一

高布)

滴蒸溜水:在蓋玻片的?側(cè)滴一滴蒸?水,在另一側(cè)用吸水紙

吸引(引流法)

I

結(jié)果:凹陷消失,細(xì)胞體積增大,細(xì)胞破裂.內(nèi)容物流出.

獲得細(xì)胞膜

5.需要注意的幾個(gè)問題

(1)制作臨時(shí)裝片時(shí).,紅細(xì)胞必須稀釋,而且取紅細(xì)胞的量要少。

(2)在高倍鏡下觀察,待觀察清晰時(shí),在蓋玻片的一側(cè)滴加蒸鐳水,同時(shí)在另一側(cè)用吸水紙吸引。上

述操作均在載物臺(tái)上進(jìn)行,并隨時(shí)調(diào)整鏡筒高度,持續(xù)觀察細(xì)胞的變化。在蓋玻片一側(cè)滴加蒸儲(chǔ)水的量要

少,不能讓蓋玻片處于漂浮狀態(tài);同時(shí)在另一側(cè)用吸水紙吸引時(shí)要小心,不要將血細(xì)胞吸走。

(3)要想取得好的觀察效果,所用顯微鏡的放大倍數(shù)應(yīng)在400倍以上。

(4)操作中要認(rèn)真觀察才能看到連續(xù)的變化過程。

典例引領(lǐng)

例1.生物體細(xì)胞內(nèi)的膜具有一定的選擇透過性,即水分子可以自由通過,細(xì)胞要選擇吸收的離子和小分子

也可以通過,而其他粒子、小分子和大分子則不能通過。請根據(jù)以下所提供的條件,驗(yàn)證細(xì)胞內(nèi)膜的選擇

透過性。

實(shí)驗(yàn)材料和用具:①新鮮的紅玫瑰②燒杯③玻璃鉛筆④質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸⑤清水⑥量筒

(1)紅玫瑰的紅色與細(xì)胞的哪一結(jié)構(gòu)有關(guān)?。

(2)完善下列實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),驗(yàn)證活細(xì)胞的膜具有選擇透過性

第一步:選兩只相同的燒杯,用玻璃鉛筆標(biāo)上A和B

第二步:.

第三步:。

結(jié)果預(yù)測:0

原因分析:0

(3)此實(shí)驗(yàn)主要能驗(yàn)證哪些膜的選擇透過性?。

【答案】液泡在A、B兩只燒杯中,分別加入等量的15%的鹽酸和清水選等量的紅色玫瑰花瓣,

分別放入A、B兩只燒杯中,經(jīng)過一段時(shí)間后觀察水中的花瓣仍為紅色,水為無色;鹽酸中的花瓣顏色

逐漸變淺,而鹽酸溶液變紅鹽酸將細(xì)胞殺死,膜喪失其選擇性,而清水對細(xì)胞活性無傷害作用細(xì)

胞膜和液泡膜

【解析】

試題分析:根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循的單一變量原則、對照原則等,圍繞題意準(zhǔn)確定位該實(shí)驗(yàn)是探究性實(shí)驗(yàn)還是

驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)以及實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,?jù)此找出實(shí)驗(yàn)變量(自變量、因變量、無關(guān)變量),進(jìn)而完善實(shí)驗(yàn)步驟并得出相

應(yīng)的結(jié)論。

(1)紅玫瑰的紅色與液泡中含有的色素有關(guān)。

(2)依題意可知:本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證活細(xì)胞的膜具有選擇透過性,因此該實(shí)驗(yàn)的自變量是細(xì)胞是否有活性,

因變量是細(xì)胞所處的水溶液是否變紅,其它對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響的因素均為無關(guān)變量,應(yīng)控制相同且適宜。

依據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循的原則、己經(jīng)給出的實(shí)驗(yàn)材料和用具以及不完整實(shí)驗(yàn)步驟可知:第二步,應(yīng)在A、B兩只

燒杯中,分別加入等量的15%的鹽酸和清水;第三步,選等量的紅色玫瑰花瓣,分別放入A、B兩只燒杯

中,經(jīng)過一段時(shí)間后觀察。

結(jié)果預(yù)測:因該實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),其實(shí)驗(yàn)結(jié)論是已知的,所以預(yù)測的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:水(B燒杯)中的花瓣

仍為紅色,水為無色;鹽酸(A燒杯)中的花瓣顏色逐漸變淺,而鹽酸溶液變紅。

原因分析:鹽酸對活細(xì)胞具有很強(qiáng)的傷害作用,將細(xì)胞殺死而使其細(xì)胞膜失去選擇透過性,而清水對細(xì)胞

活性沒有傷害作用。

(3)存在于液泡中的色素,若進(jìn)入溶液中,需經(jīng)過液泡膜和細(xì)胞膜,所以此實(shí)驗(yàn)主要能驗(yàn)證細(xì)胞膜和液泡膜

的選擇透過性。

【點(diǎn)睛】解答此題時(shí)需抓住問題的實(shí)質(zhì):植物花瓣的顏色由液泡中含有的色素決定,活細(xì)胞的細(xì)胞膜和液

泡膜具有選擇透過性,液泡中的色素分子不能透過細(xì)胞膜和液泡膜,溶液不變色;當(dāng)細(xì)胞死亡后,細(xì)胞膜

和液泡膜的選擇透過性喪失,液泡中含有的色素分子能夠進(jìn)入溶液而導(dǎo)致溶液變色;鹽酸可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

在此基礎(chǔ)上,圍繞題意找準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)變量并根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循的原則,既可對相關(guān)問題作出解答。

例2.下列有關(guān)細(xì)胞膜制備及觀察的敘述,正確的是()

A.家雞的紅細(xì)胞是最佳的實(shí)驗(yàn)材料

B.若選用洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞應(yīng)先用蛋白酶去除細(xì)胞壁

C.制備細(xì)胞膜應(yīng)先利用吸水漲破法,再利用差速離心法獲取

D.可以用高倍鏡直接進(jìn)行觀察

【答案】C

【解析】家雞的紅細(xì)胞為正常細(xì)胞,有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器,因此不能用家雞的紅細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料,A錯(cuò)

誤;去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁需使用纖維素酶和果膠酶,B錯(cuò)誤;哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞放在清水中吸水漲破,再離

心時(shí)將血紅蛋白和細(xì)胞膜分離,C正確;用顯微鏡觀察時(shí),需先在低倍鏡下找到要觀察的目標(biāo),然后再用高

倍鏡觀察,D錯(cuò)誤。

熱點(diǎn)專練

1、研究細(xì)胞膜常用的材料是()

A.變形蟲

B.受精卵

C.蛙成熟的紅細(xì)胞

D.哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞

【答案】D

【解析】研究細(xì)胞膜常用的材料是哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞,因?yàn)樗鼪]有細(xì)胞核及眾多的細(xì)胞器,故選D。

2、下列有關(guān)細(xì)胞膜的制備及觀察的敘述,正確的是()

A.家雞的紅細(xì)胞是最佳的實(shí)驗(yàn)材料

B.若選用洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞,應(yīng)先用鏡子去除細(xì)胞壁

C.制備細(xì)胞膜可先利用吸水漲破法,再利用離心法

D.用顯微鏡觀察時(shí),可直接用高倍顯微鏡找到目標(biāo)

【答案】C

【解析】家雞不屬于哺乳動(dòng)物,它的紅細(xì)胞中含有細(xì)胞核和眾多具膜結(jié)構(gòu)細(xì)胞器,不宜用于制備細(xì)胞膜,

A錯(cuò)誤;植物細(xì)胞太小,不能用鍛子去除細(xì)胞壁,B錯(cuò)誤;紅細(xì)胞吸水漲破后,經(jīng)過離心,細(xì)胞膜可與其他

成分分離開來,C正確;用顯微鏡觀察時(shí),應(yīng)先用低倍鏡找到目標(biāo),然后再換用高倍鏡進(jìn)行觀察,D錯(cuò)誤。

3.瘧原蟲可以寄生在紅細(xì)胞內(nèi),使人患瘧疾,要判斷一個(gè)人是否患瘧疾,應(yīng)取血樣放在什么溶液中制片檢查

A.質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液

B.清水

C.濃鹽水

D.質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的葡萄糖溶液

【答案】B

【解析】紅細(xì)胞在清水中易吸水而破裂。

4.下列關(guān)于制備細(xì)胞膜的敘述,錯(cuò)誤的是()

A.鳥類的紅細(xì)胞不是制備純凈細(xì)胞膜的理想材料

B.人的成熟紅細(xì)胞在生理鹽水中不會(huì)發(fā)生水分子的跨膜運(yùn)輸,細(xì)胞體積不變

C.葉肉細(xì)胞因有細(xì)胞壁的存在,使提取細(xì)胞膜更復(fù)雜

D.提取出的豬的成熟紅細(xì)胞的磷脂分子在空氣一水界面上的面積是紅細(xì)胞表面積的兩倍

【答案】B

【解析】鳥類的細(xì)胞有細(xì)胞核和各種具膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器,不是制備細(xì)胞膜的理想材料,A正確;人成熟紅

細(xì)胞在生理鹽水中也會(huì)發(fā)生水分子跨膜運(yùn)輸,但細(xì)胞體積不變,是因?yàn)檫\(yùn)輸達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,B錯(cuò)誤;植物葉

肉細(xì)胞有細(xì)胞壁,提取細(xì)胞膜前需要去除細(xì)胞壁,C正確;豬成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和各種具膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞

器,膜是由磷脂雙分子層組成,在空氣——水界面上的面積是紅細(xì)胞表面積的兩倍,D正確。

5.體驗(yàn)制備細(xì)胞膜的方法實(shí)驗(yàn)中,材料選用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞,關(guān)鍵原因是紅細(xì)胞()

A.是動(dòng)物細(xì)胞

B.有細(xì)胞核

C.有各種細(xì)胞器

D.無細(xì)胞核及各種細(xì)胞器

【答案】D

【解析】哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無核膜和各種細(xì)胞器的膜,只有細(xì)胞膜,容易提取純凈的細(xì)胞膜。

6.制備細(xì)胞膜時(shí),稀釋紅細(xì)胞的液體和使細(xì)胞漲破的方法分別是()

A.清水,將其放入生理鹽水中

B.9%的NaCl溶液,將其放入清水中

C.生理鹽水,將其放入清水中

D.清水,將其放入9%的NaCl溶液中

【答案】C

【解析】稀釋紅細(xì)胞應(yīng)用生理鹽水,以保持紅細(xì)胞的正常形態(tài);使紅細(xì)胞漲破應(yīng)用清水。

7.在制備細(xì)胞膜時(shí),顯微鏡下觀察紅細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化是()

①細(xì)胞破裂②凹陷消失③內(nèi)容物流出④細(xì)胞體積增大

A.②④①③

B.④②①③

C.④①③②

D.①③②④

【答案】B

【解析】制備細(xì)胞膜時(shí)用的是吸水漲破法,故紅細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化為④②①③。

8、科學(xué)家在進(jìn)行細(xì)胞膜化學(xué)成分的分析時(shí),需制備比較純凈的細(xì)胞膜,從真核細(xì)胞分離出比較純凈的細(xì)胞膜

較為困難,因?yàn)闀?huì)有核膜和細(xì)胞器膜的混雜。而哺乳動(dòng)物(或人)的成熟紅細(xì)胞,沒有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器,將

其作特殊處理就是比較純凈的細(xì)胞膜,在生物學(xué)上稱為“血影”。對“血影”的分析得知,其化學(xué)組成如下:蛋

白質(zhì)49%、脂質(zhì)43%、糖類8%。請回答:

(1)如何處理紅細(xì)胞才能使其發(fā)生溶血現(xiàn)象?

(2)“血影”的化學(xué)成分中,脂質(zhì)主要是哪一類?

⑶紅細(xì)胞溶血后,溶出到細(xì)胞外的物質(zhì)應(yīng)該是,這種物質(zhì)的特性是

__________________________________________。因此,紅細(xì)胞具有的功能。

【答案】(1)放在蒸儲(chǔ)水中(2)磷脂(3)血紅蛋白容易和氧結(jié)合,又容易與氧分離運(yùn)輸氧

【解析】紅細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)具有一定的濃度。如果把細(xì)胞放在清水里或蒸儲(chǔ)水里,水會(huì)進(jìn)入細(xì)胞,使細(xì)胞

漲破,細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)流出來,從而出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,通過該種方法所得到的細(xì)胞膜較純凈。血影實(shí)際上就是

細(xì)胞膜,細(xì)胞膜的主要成分是脂質(zhì)和蛋白質(zhì),脂質(zhì)中磷脂含量最豐富。紅細(xì)胞溶血后,溶出到細(xì)胞外的物

質(zhì)是血紅蛋白,血紅蛋白容易與氧結(jié)合,又容易與氧分離,因此,紅細(xì)胞具有運(yùn)輸氧氣的功能。

9.為獲得純凈的細(xì)胞膜用于研究其結(jié)構(gòu)與功能,請完成下列實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并分析有關(guān)問題:

(1)應(yīng)選取人體下列哪種細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)()

A.成熟紅細(xì)胞B.神經(jīng)細(xì)胞

C.白細(xì)胞D.口腔上皮細(xì)胞

(2)選用該材料的理由是_____________________________________________________

(3)將選取的上述材料放入中,一段時(shí)間后細(xì)胞將破裂。

(4)經(jīng)過(3)的實(shí)驗(yàn)步驟后,可用下列哪兩種方法獲得純凈的細(xì)胞膜(多選)()

A.靜置B.加熱

C.離心D.過濾

(5)通過有關(guān)方法,測得多種膜的化學(xué)成分,如下表:

質(zhì)種類脂質(zhì),%

蛋白質(zhì)必糖類/%

膜的類(主要是瓊脂)

變形蟲細(xì)胞瞑54424

小鼠肝細(xì)胞膜44524

人紅細(xì)胞膜49438

線粒體內(nèi)膜76240

菠菜葉綠

體片層膜70300

①依據(jù)上表數(shù)據(jù),請分析構(gòu)成細(xì)胞膜與細(xì)胞器膜的化學(xué)物質(zhì)組成上的共同點(diǎn)是:

②化學(xué)物質(zhì)組成的主要區(qū)別是:_______________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________0

【答案】(1)A(2)細(xì)胞核和許多細(xì)胞器也有膜,這些膜若與細(xì)胞膜混在一起就無法得到較純凈的細(xì)胞膜,

而成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器(3)清水(4)CD(5)①都有脂質(zhì)和蛋白質(zhì)②細(xì)胞膜除了

有脂質(zhì)和蛋白質(zhì)外,還有少量的糖類,而細(xì)胞器膜則不含糖類

【解析】人和其他哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞除細(xì)胞膜外無其他膜結(jié)構(gòu),通過吸水漲破,從而得到較純凈的細(xì)

胞膜。細(xì)胞吸水漲破后先離心,將細(xì)胞膜與細(xì)胞質(zhì)中的其他物質(zhì)分開,再過濾可得到較純凈的細(xì)胞膜。

10.為獲得較純凈的細(xì)胞膜,以研究其結(jié)構(gòu)與功能,請你幫助完成下列實(shí)驗(yàn)分析并回答相關(guān)問題。

(1)最好選取豬的哪種細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)()

A.成熟紅細(xì)胞B.神經(jīng)細(xì)胞

C.白細(xì)胞D.口腔上皮細(xì)胞

(2)你選擇該材料的原因是。

(3)將選取的材料放入中,一段時(shí)間后細(xì)胞將破裂.

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