生物技術實踐-2021屆高三生物模擬試卷分類匯編（10月刊）

專題19生物技術實踐

54.(黑龍江省實驗中學2020-2021學年高三8月階段測試生物試題)高溫淀粉酶在大規(guī)模

工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選出了能高效生產(chǎn)高溫淀粉酶的嗜熱菌，其

隨

活

匚＞

測

(1)I號培養(yǎng)基從物理狀態(tài)來看，屬于固體培養(yǎng)基，配制時要加入作為凝固劑，

平板冷凝后要將平板放置。

(2)配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是。

A.計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌

B.計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌

C.計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板

D.計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板

(3)溶化時，燒杯中加入瓊脂后要不停地,防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養(yǎng)基

滅菌的方法一般為o

(4)①過程是②過程所使用的接種方法是法。

(5)部分嗜熱菌在I號培養(yǎng)基上生長時可釋放分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍

形成透明圈，挑選相應的菌落，接種到n號培養(yǎng)基上進一步分離純化后，再對菌種進行擴大

培養(yǎng)。

(6)微生物的菌種保藏可以采用臨時保藏法——將菌種接種到試管的培養(yǎng)基上,

在e的冰箱中，每隔3-6個月轉接種。

【答案】(1).瓊脂(2).倒過來(3).C(4).攪拌(5).高壓蒸汽滅菌法

(6).稀釋(7).稀釋涂布平板(8).淀粉酶(9).固體斜面(10).4

【解析】

【分析】

1、分析題圖：①過程是梯度稀釋，②過程是稀釋涂布平板法接種，目的是篩選單菌落。從

功能上看，I號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)上來說，1號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。

2、微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接

種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng).在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，

菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋

后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】（1）I號培養(yǎng)基從物理狀態(tài)來看，屬于固體培養(yǎng)基，配制時要加入瓊脂作為凝固劑,

平板冷凝后要將平板倒過來放置，以防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。

（2）配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，C正確。故選C。

（3）溶化時，燒杯中加入瓊脂后要不停地攪拌，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養(yǎng)基滅

菌的方法一般為高壓蒸汽滅菌法。

（4）分析題圖可知，①過程是梯度稀釋，目的是對樣品進行稀釋；②過程是用稀釋涂布平

板法進行接種。

（5）分解淀粉的嗜熱菌在I號培養(yǎng)基上生長時可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌

落周圍形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越強，所以要從中挑出透明圈大的菌落，接種

到H號培養(yǎng)基上進一步分離純化后，再對菌種進行擴大培養(yǎng)。

（6）微生物的菌種保臧可以采用臨時保臧法——將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，

在4°C的冰箱中，每隔3-6個月轉接種。

【點睛】本題考查微生物選擇、培養(yǎng)、利用等相關知識，意在考查學生從材料中獲取相關的

生物學信息，并能運用這些信息，結合所學知識解決相關的生物學問題。

14.（湖南省長沙市長郡中學2020-2021學年高三入學摸底考試生物試題）玉米經(jīng)深加工后可

用于生產(chǎn)酒精、玉米胚芽油、葡萄糖等產(chǎn)品（流程如下）。下列相關敘述錯誤的是（）

K米

A.玉米胚芽油易溶于有機溶劑，可選用萃取法提取

B.水解玉米秸稈纖維素的醐是一種復合酶，其中Cx酶的作用是將纖維二糖分解成葡萄糖

C.探究水解玉米淀粉的酶的最適用量時，需保持溫度、pH、加入的淀粉量等無關變量相同

且適宜

D.纖維素分解菌可用于玉米秸稈還田，鑒別纖維素分解菌可用剛果紅染色法

【答案】B

【解析】

【分析】

1、剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的

多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。當我們在含

有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。纖維素

分解菌能分解纖維素，會形成以分解菌為中心的透明圈，這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透

明圈來篩選纖維素分解菌。

2、纖維素酶是一種復合酶，包括Ci酶、Cx酶、葡萄糖甘酶，其中Ci、Cx酶可使纖維素分

解為纖維二糖，葡萄糖甘酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。

【詳解】A、玉米胚芽油易溶于有機溶劑，可選用萃取法提取，A正確；

B、纖維素酶是一種復合酶，它至少包括三種組分，即Ci酶、Cx酶和葡萄糖甘酶，其中葡

萄糖甘酶的作用是將纖維二糖分解成葡萄糖，B錯誤；

C、為避免浪費，需對催化玉米淀粉水解的酶的最適用量進行探究，實驗的自變量是酶的用

量，淀粉的水解量為因變量，無關變量有溫度、pH、加入的淀粉量、反應時間等，C正確;

D、鑒別纖維素分解菌時用剛果紅染色法，培養(yǎng)基上的菌落周圍會形成透明圈，D正確。

故選Bo

【點睛】本題考查纖維素分解菌篩選的原理、酶最適用量的探究實驗等知識，意在考查考生

對所學知識的識記和理解能力。

20.（湖南省長沙市長郡中學2020-2021學年高三入學摸底考試生物試題）表中生物工程實驗

選擇的材料與實驗目的搭配合理的是（）

組

實驗目的實驗材料材料特點

別

獲得生產(chǎn)人生長激素的轉基因

A乳腺細胞分泌乳汁將相應產(chǎn)物排出體外

動物

分生區(qū)附近病毒極少，甚至不含病

B獲得脫毒苗莖尖

毒

C獲得植物突變體愈傷組織細分裂能力強，易誘發(fā)突變

胞

囊胚內細胞

D胚胎干細胞培養(yǎng)能分化形成各種組織和器官

團

A.AB.BC.CD.D

【答案】BCD

【解析】

【分析】

囊胚的內細胞團細胞屬于胚胎干細胞，具有很強的分裂能力，可以用胚胎干細胞培養(yǎng)；采用

基因工程技術培養(yǎng)乳腺生物反應器時，受體細胞是受精卵，因為受精卵全能性最高。

【詳解】A、采用基因工程技術培養(yǎng)乳腺生物反應器時，受體細胞是受精卵而不是乳腺細胞,

因為受精卵全能性最高，A錯誤；

B、植物分生區(qū)附近(如莖尖)含病毒極少，甚至不舍病毒，因此可采用莖尖組織培養(yǎng)技術

獲得脫毒苗，B正確；

C、愈傷組織分裂能力強，易發(fā)生突變，容易獲得突變體，C正確；

D、囊胚的內細胞團細胞具有很強的分裂能力，可以用于胚胎干細胞培養(yǎng)，進而誘導培養(yǎng)成

各種組織和器官，D正確。

故選BCD。

25.近期冷泉港實驗室專門為城市農(nóng)業(yè)培育了像葡萄一樣的小番茄，這種小番茄也適合在太

空種植?？茖W家利用基因突變將控制生長的終止基因(SP)改造為SP1基因，利用基因敲

除(將同源DNA片段導入受體細胞，使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段)的

方法使小番茄的成熟期縮短為40天。如圖為SP基因兩端的序列和質粒中相關的序列，已知

限制酶I的識別序列和切點是一G2ATCC,限制酶II的識別序列和切點是-GATC。

CCTA<M""'E"E""CTAG

力,.?陋Cicnc1和《knell衣東四種標記選岡

Gene肉后#"腌0|Q-示奴制“儀」的識別序列放大

回答下列問題：

(1)除限制酶以外，基因工程中常用的工具還有__________。在上述實例中，為了便于重

組和篩選，需使用分別切割目的基因和質粒0質粒中標記基因的作用是

(2)利用物理因素和化學因素處理SP基因可，使篩選出SPi基因的概率增大。

可利用技術擴增SPi基因，將搭載SPi基因的重組質粒導入植物細胞的方法有

____________(答出兩種)。

(3)利用SPi基因敲除SP基因屬于生物變異中的,SPi基因成功表達的個體

生物學水平鑒定標準為。

【答案】(D.DNA連接酶、運載體⑵.限制酶I［和限制酶I⑶.鑒別受體細胞

中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來(4).誘發(fā)SP基因突變

(5).PCR(6).農(nóng)桿菌轉化法、基困槍法、花粉管通道法(7).基因重組(8).小番

茄的成熟期約為40天

【解析】

【分析】

基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目

的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定。

在獲取目的基因時，需要用到限制酶；構建基因表達載體時，還需要用到DNA連接酶和運

載體。作為運載體，要有合適的限制酶切割位點，具有復制原點，有啟動子和終止子，還需

要有標記基因。

將目的基因導致受體細胞時，依據(jù)操作對象不同而采用不同的方法，對于植物采用農(nóng)桿菌轉

化法、基因槍法、花粉管通道法，對于動物常用顯微注射法，對微生物常用Ca2+處理然后

再進行轉化。

目的基因的檢測與鑒定分三個方面：一是用DNA分子雜交檢測目的是否導入受體細胞；二

是檢測目的基因是否轉錄，用DNA-RNA分子雜交；三是個體水平的檢測，檢測受體生物

是否表達出相應的性狀。

【詳解】⑴基因工程的工具有限制酶、DNA連接酶、運載體。限制酶I的識別序列和切點

是一G2ATCC,限制的II的識別序列和切點是一IGATC,限制酶II能識別并切割限制前I

的識別序列，所以切割質粒時，只能用限制酶I,因為限制前II能將質粒切割成兩段。切割

目的基因里，需要將兩端都切割，選用限制酶n即可。標記基因可隨重組運載體一起進入

受體細胞，使受體細胞獲得標記基因所控制的性狀，根據(jù)標記基因的有無，可將含有重組運

載體(即含有目的基因)的受體細胞篩選出來。

⑵物理因素和化學因素處理SP基因可導致發(fā)生基因突變。增加目的基因時，可采用PCR技

術擴增目的基因。將重組質粒導入植物細胞的方法有農(nóng)村菌轉化法、基因槍法和花粉管通道

法。

⑶利用SP|基因敲除SP基因，并未改變基因的結構，而是將整個基因插入，使目的基因與

染色體上原有基因進行了重新組合，屬于基因重組。SP1基因能夠縮短縮短小番茄的成熟時

間，若成功表達，則小番茄的成熟期約為40天。

【點睛】在構建基本的表達載體時，必須選擇合適的限制酶。要能夠將運載體切開，形成與

目的基因連接的缺口，但要注意不能將運載體切成兩段，會導致目的基因無法與運載體正確

連接。選擇限制酶時，要保證至少保留一個完整的標記基因以便進行篩選。

45.（吉林省白城市通榆縣一中2020-2021學年高三上學期第一次月考生物試題）某科研小組

研究發(fā)現(xiàn)，若長期使用殺蟲劑S（一種有機磷農(nóng)藥）可造成其在土壤中嚴重殘留，而木霉能

有效將其降解。請分析回答下列問題：

（1）木霉可用加入作為唯一碳源的（按用途分）培養(yǎng)基

加以分離。

（2）配制培養(yǎng)基還需滿足木霉對pH的需求，應在滅菌_____________（填“前”或"后”）調

節(jié)pH。探究木霉降解殺蟲劑S的適宜pH,可向含有等量木霉、不同pH的培養(yǎng)基中分別加

入等量殺蟲劑S,幾天后檢測O

（3）配制好的培養(yǎng)基應在適宜的環(huán)境中放置一段時間，觀察培養(yǎng)基上______________,以

判別培養(yǎng)基是否被污染。欲測定木霉的數(shù)目，可用計數(shù)板直接計數(shù)。若將

100mL含木霉的土壤樣液稀釋1伊倍，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基表面，測

得菌落數(shù)的平均值為121個（空白對照組無污染），則原來的100mL樣液中含有木霉

個，而原土壤樣液中的實際值與計算值相比會。（偏大、偏小

或相等）

【答案】（1）.殺蟲劑S（2）.選擇（3）.前（4）.殺蟲劑S的殘留量（5）.是

否產(chǎn)生菌落（6）.血細胞（血球）（7）.1.21x1010（8）.偏大

【解析】

【分析】

1.選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某理化因素抗性的原理而設

計的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長，而同時抑制或阻止其他微生物生長的功能。

2.微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，

劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)

逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，

均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。其中，稀釋涂布平板法可用于計數(shù)活菌。

【詳解】（1）要分離出能降解殺蟲劑S的木霉，需要以殺蟲劑S作為唯一碳源培養(yǎng)基，在

該培養(yǎng)基上只有能降解殺蟲劑s的木霉能生存，其它微生物都不能生存，因此該培養(yǎng)基屬

于選擇培養(yǎng)基。

（2）培養(yǎng)基在滅菌前應調節(jié)pH值。探究木霉降解殺蟲劑S的適宜pH?？上蚝械攘磕久?

不同pH的培養(yǎng)基中分別加入等量殺蟲劑S,該實驗的自變量是pH值，因變量是殺蟲劑S

的含量，所以幾天后檢測殺蟲劑S的殘留量。

（3）判別培養(yǎng)基是否被污染需要將空白培養(yǎng)基在在適宜的環(huán)境中放置一段時間，觀察培養(yǎng)

基上是否有菌落產(chǎn)生，若沒有菌落產(chǎn)生則培養(yǎng)基沒有被污染，否則被污染。測定木霉的數(shù)目，

可用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)，也可以使用稀釋涂布平板法計數(shù)。根據(jù)題干信息可知100mL

樣液中木霉的數(shù)目為121+0.1x100x105=1.21x101。個，培養(yǎng)基上的菌落可能是由兩個或多個

細胞繁殖的后代形成的，所以原土壤樣液的實際值一般會比計算值偏大。

【點睛】本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的基本成分、種類及功能;

識記接種微生物常用的兩種方法，掌握微生物計數(shù)的方法。

11.（吉林省長春外國語學校2020-2021學年高三上學期期初考試生物試題）請回答以下與微

生物實驗室培養(yǎng)有關的問題：

（1）上圖是利用法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步

分散到培養(yǎng)基的表面。

（2）在制備固體培養(yǎng)基時需加入的常用凝固劑是,若培養(yǎng)基需調節(jié)pH,則應

在滅菌之（填"前"或"后"）調節(jié)。

（3）在培養(yǎng)過程中，關鍵。

（4）如圖為接種后的示意圖，在劃線接種的整個操作過程中，對接種環(huán)至少需要進行

次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋，將平板放入恒溫箱中培養(yǎng)，這樣放置的

目的是o

（5）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)目時，每隔一個“時間間隔”統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，最后選

取作為結果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落

的數(shù)目。

【答案】（1）.平板劃線（2）.稀釋（3）.瓊脂（4）.前（5）.防止外來雜菌的

污染（6）.6（7）.倒置（8）.避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)（9）.

菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄

【解析】

【分析】

圖中接種的方式是平板劃線法.平板劃線法是將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中制成平板，

用接種環(huán)沾取少量待分離的材料，在培養(yǎng)基表面平行或分區(qū)劃線，然后，將培養(yǎng)皿放入恒溫

箱里培養(yǎng).在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最

后可能形成純種的單個菌落。

培養(yǎng)基配置的步驟：計算-稱量-溶解-滅菌-倒平板.

【詳解】（1）上圖使用了接種環(huán)，所以采用平板劃線法進行接種；把聚集的菌種逐步稀釋分

散到培養(yǎng)基表面。

（2）固體培養(yǎng)基中常用凝固劑是瓊脂；應該在滅菌之前調節(jié)pH。

（3）微生物的培養(yǎng)過程中，關鍵是要做到防止外來雜菌的污染。

（4）圖中一共劃線5個區(qū)域，每次劃線之后都要灼燒接種環(huán)，同時接種之前也要灼燒，所

以一共進行6次灼燒；為了防止培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)，所以培養(yǎng)時需要

將平板倒置放入恒溫箱中。

（5）統(tǒng)計菌落數(shù)目時，需要選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時作為記錄的結果。

【點睛】本題以培養(yǎng)基的配方為載體，考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生掌

握微生物分離與純化的兩種方法和培養(yǎng)基配置的步驟。

（欽州一中2021屆高三8月月考理科綜合）11.回答與胡蘿卜有關的問題：

（1）胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，根據(jù)將胡蘿卜素分為三類，最主要的是P?胡

蘿卜素，該胡蘿卜素在人體內可以轉變成兩分子o

（2）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和,以提高萃取

效率：水蒸氣蒸儲法不適合胡蘿卜素的提取，原因是。

（3）現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應選用其中的作為胡蘿卜素的萃取劑，萃

取的效率主要取決于。

（4）鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通常可采用法。

【答案】（1）.碳碳雙鍵（2）.維生素A（3）.干燥（4）.水蒸氣蒸儲法適用于分

離揮發(fā)性物質，而胡蘿卜素為非揮發(fā)性物質，不能隨水蒸氣蒸儲出（5）.乙酸乙酯（6）.

萃取劑的性質和用量（7）.紙層析

【解析】

【分析】

1.提取胡蘿卜素的提取流程為：胡蘿卜-粉碎-干燥-萃取-過濾-濃縮-胡蘿卜素。胡蘿卜素常

用來總量因缺乏維生素A引起的疾病。

2.胡蘿卜素的提?。?/p>

（1）胡蘿卜素的性質：胡蘿卜素是橘黃色結晶，化學性質比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙

醇，易溶于石油酸等有機溶劑。

（2）胡蘿卜素的提取來源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提取；二是從

大面積養(yǎng)殖的巖藻中荻得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn).

（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油酸。

（4）實驗流程：胡蘿卜一粉碎一干燥一萃取（石油酸）一過濾_一濃縮一胡蘿卜素一鑒定

（紙層析法）。

（5）胡蘿卜素常用來治療因缺乏維生素A引起的疾病；還是常用的食品色素；還具有使癌

變細胞恢復為正常細胞的作用。

【詳解】（1）胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，根據(jù)碳碳雙鍵，胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，最主要

的是胡蘿卜素，該胡蘿卜素在人體內可以轉變成兩分子維生素A,后者缺乏會引起人在

弱光下視物不清的病癥，該疾病稱為夜盲癥，胡蘿卜素是非揮發(fā)性物質。

（2）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干燥，以提高萃取效率:

水蒸氣蒸儲法不適合胡蘿卜素的提取，原因是水蒸氣蒸播法適用于分離揮發(fā)性物質，而胡蘿

卜素為非揮發(fā)性物質，不能隨水蒸氣蒸播出。

（3）現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應選用其中的乙酸乙酯作為胡蘿卜素的萃取劑，乙酸

乙酯沸點比較高，萃取的效率主要取決于萃取劑的性質和用量。

（4）鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通?？刹捎眉垖游龇?。

【點睛】本題考查植物有效成分的提取的有關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知

識要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結構的能力；能運用所學知識，準確判斷問題

的能力。

(桂林十八中18級高三第一次月考考試試卷理科綜合)11.枯草芽抱桿菌產(chǎn)生的蛋白酶在

醫(yī)藥和化工等領域具有重要的價值。為篩選蛋白酶產(chǎn)量高的枯草芽泡桿菌菌株，分別將浸過

不同菌株的提取液(a-e)及無菌水⑴的無菌圓紙片置于平板培養(yǎng)基表面，在37七恒溫箱中放

置2-3天，結果如圖1。請回答問題：

⑴在篩選枯草芽抱桿菌蛋白酶高產(chǎn)菌株時，培養(yǎng)基營養(yǎng)成分應包括水、無機鹽、生長因子、

葡萄糖、一。培養(yǎng)枯草芽抱桿菌時，常用搖床進行振蕩培養(yǎng)，目的是o

(2)a-e中蛋臼酶產(chǎn)量最高的菌株是—(用字母回答)，判斷依據(jù)是一。

涂上蛋白,經(jīng)煮沸的

滅*后郎界”中而法度的膜的皎片洗衣希溶液

蛋白質導致培養(yǎng)“不透明

圖1圖2

(3)利用凝膠色譜法分離提取到部分蛋白質時，等樣品完全進入凝膠層后，加入pH為7.0、

濃度為20mmol/L的到適當高度進行洗脫，結果先洗脫出來的是的

蛋白質。

(4)質監(jiān)局為了檢驗標有含該蛋白酶的加酶洗衣粉質量，設計了如圖2所示實驗。如果實驗

結果是一，則說明該洗衣粉中含有蛋白醐。若用該實驗來判斷此酶活性大小可通過觀察

一實現(xiàn)。

【答案】(1).蛋白質(酪蛋白)(2).增加培養(yǎng)液中的溶氧量并使菌株與培養(yǎng)液充分

接觸，有利于目的菌的生長繁殖(3).a(4).a周圍的透明圈最大，說明其產(chǎn)生的蛋白

酶數(shù)量多或活性高(5).磷酸緩沖液(6).相對分子質量較大(7).A組膠片上的蛋

白膜消失，B組膠片上的蛋白膜未消失(8).膠片上的蛋白膜消失所需時間的長短(相同

時間內蛋白膜消失的面積)

【解析】

【分析】

培養(yǎng)基的成分：水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子。

分離蛋白質的方法：凝膠色譜法，是根據(jù)相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法。相對

分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部，路程較短，移動速度較快。

加酶洗衣粉指含有酶制劑的洗衣粉，常見的酶制劑有蛋白醒、脂肪酶、淀粉前和纖維素酶。

【詳解】(1)蛋白酶高產(chǎn)菌株可以分解蛋白質，在篩選枯草芽抱桿菌蛋白的高產(chǎn)菌株時，培養(yǎng)

基營養(yǎng)成分應包括水、無機鹽、生長因子、葡萄糖、蛋白質。培養(yǎng)枯草芽抱桿菌時，為了增

加培養(yǎng)液中的溶氧量并使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，有利于目的菌的生長繁殖，常用搖床進行

振蕩培養(yǎng)。

(2)由圖1可知，菌株a的透明圈最大，說明其蛋白酶含量高或活性高，故a的蛋白酶的產(chǎn)量

最高。

(3)利用凝膠色譜法分離提取到的部分蛋白質時，等樣品完全進入凝膠層后，加入pH為7.0、

濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液到適當高度進行洗脫，由于相對分子質量較大的蛋白質無法

進入凝膠內部，路程較短，移動速度較快，故最先洗脫出來。

(4)圖2中，自變量是洗衣粉是否煮沸，因變量是觀察蛋白膜的消失時間。若洗衣粉中含有

蛋白酶，加熱煮沸后會導致蛋白酶變性失活，蛋白膜不會消失，故結果是A組膠片上的蛋

白膜消失，B組膠片上的蛋白膜未消失。本實驗可以通過觀察膠片上的蛋白膜消失所需時間

的長短來判斷酶活性的大小，酶活性越強，蛋白膜消失所需的時間越短。

【點睛】蛋白酶分解菌培養(yǎng)在含蛋白質的培養(yǎng)基中，蛋白酶的含量越高，活性越強，則分解

蛋白質產(chǎn)生的透明圈越大。

(欽州一中2021屆高三開學摸底考試理科綜合)11.某興趣小組為了檢測某品牌酸奶中乳

酸桿菌數(shù)量，進行了如圖所示的實驗操作?；卮鹣铝袉栴}。

(1)配制培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基中的碳源是指。對未倒

平板前的空培養(yǎng)皿進行滅菌的常用方法是法。

(2)圖示實驗中進行接種的方法叫做法，①過程中10g酸奶相當于被稀釋了

,倍。若培養(yǎng)基滅菌合格，培養(yǎng)適宜時間后A、B、C三個培養(yǎng)皿中的乳酸菌菌落數(shù)依次

為45、48、42個，則該品牌酸奶中每10g樣品中的乳酸桿菌數(shù)量約為個。

（3）接種過程應在酒精燈火焰旁進行，目的是o

（4）培養(yǎng)乳酸桿菌時，培養(yǎng)皿需置于無氧環(huán)境中培養(yǎng)，原因是。

【答案】（1）.能為微生物的生長提供碳元素的物質（2）.干熱滅菌（法）（3）.稀

釋涂布平板（法）（4）.10（5）.4.5x108（6）.防止雜菌污染（7）.乳酸菌是厭

氧菌，需在無氧條件中才能生存（受氧氣抑制）

【解析】

【分析】

據(jù)圖分析，圖示為利用稀釋涂布平板法對某品牌酸奶中乳酸桿菌數(shù)量進行計數(shù)的過程，圖

中顯示酸奶樣品一共稀釋了5次，每一次稀釋10倍，最后取0.1mL涂布于A、B、C三個

平板上，據(jù)此分析答題。

【詳解】（1）微生物培養(yǎng)基的主要成分包括碳源、氮源、水和無機鹽，其中碳源指的是能為

微生物的生長提供碳元素的物質。

（2）圖示為稀釋涂布平板法的操作過程，根據(jù)以上分析已知，酸奶樣品一共稀釋了5次，

每一次稀釋10倍，且三個培養(yǎng)皿的平均菌落數(shù)=（45+48+42）+3=45個，則每克樣品中的

活菌數(shù)=平均菌落數(shù)x稀釋倍數(shù)+涂布所用稀釋液體積=45x105+0.1=4.5x107個，因此10g樣品

中的總活菌數(shù)=4.5x107x10=4.5x108個。

（3）為了防止雜菌污染，接種過程應在酒精燈火焰旁進行。

（4）乳酸菌是厭氧菌，需在無氧條件中才能生存（受氧氣抑制），所以培養(yǎng)乳酸菌時，培養(yǎng)

皿需置于無氧環(huán)境中。

【點睛】解答本題的關鍵是掌握微生物的培養(yǎng)與分離的相關知識點，了解微生物培養(yǎng)基的成

分、常用的接種方法，能夠利用公式和題干數(shù)據(jù)計算乳酸菌的數(shù)量，并能夠解釋實驗過程中

的無菌操作。

（河北省唐山市路北區(qū)H■?一中2020-2021學年高三入學檢測）25.I回答下列與細菌培養(yǎng)相

關的問題。

（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是（填蛋白陳、

葡萄糖或NaNCh）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調節(jié)培養(yǎng)基的pH,其

原因是。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上（填能夠或不能）生長，原因是

（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板（填倒置或正置）。

（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征

來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是o

n培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}。

①②③④⑤⑥

（1）利用胡蘿卜根段進行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細胞可以培養(yǎng)成完整的

植株，這是因為植物細胞具有。

（2）從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是。在新的培養(yǎng)基上愈

傷組織通過細胞的過程，最終可形成試管苗。

（3）步驟⑥要進行照光培養(yǎng)，其作用是。

（4）經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的,這種繁殖方式屬于

繁殖。

【答案】（1）.蛋白陳（2）.不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同（3）.能夠

（4）.硝化細菌可以利用空氣中的C02作為碳源（5）.倒置（6）.在一定的培養(yǎng)條件下，

不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征（7）.全能性（8）.誘導愈傷組織形成和誘

導愈傷組織分化形成試管苗所需的生長素和細胞分裂素的比例不同（9）.分化（或答：再

分化）（10）.誘導葉綠素的形成，使試管苗能夠進行光合作用（11）.遺傳特性（12）.

無性

【解析】

【分析】

本題主要考察了微生物的實驗室培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的過程。微生物培養(yǎng)需要提供水、碳源、

氮源和無機鹽等，同時還需要滿足某些微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質和氧氣的需求。植物組

織培養(yǎng)利用了細胞的全能性，已經(jīng)分化的細胞會經(jīng)過脫分化和再分化，從而形成幼苗。

【詳解】I。）葡萄糖只含有C、H、O,它只能提供碳源，NaNCh可以提供氮源，蛋白豚

可以同時提供碳源、氮源；不同的細菌生長繁殖所需的最適pH不同，因此配制培養(yǎng)基時需

要調節(jié)培養(yǎng)基的pH；硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上能夠生長；其是一種自養(yǎng)型生物，可

以利用空氣中的CO2作為碳源；

（2）用平板培養(yǎng)細菌的時候需要將平板倒置，可以防止培養(yǎng)時的水珠滴落造成培養(yǎng)基的污

染等；

（3）在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此菌落的性狀、

大小、顏色等特征可以作為初步區(qū)分不同種微生物的依據(jù)：

II（1）從一個已經(jīng)分化的細胞，培養(yǎng)成完整的植株，者是植物細胞具有全能性的表現(xiàn)；

（2）誘導愈傷組織形成和誘導愈傷組織分化形成試管苗所需生長素和細胞分裂素的比例

不同，所以在愈傷組織培育完成后需要更換培養(yǎng)基；愈傷組織會經(jīng)歷細胞的再分化發(fā)育成試

管苗；

（3）步驟⑥屬于細胞再分化，需要形成葉肉細胞，而誘導葉綠素的形成需要光照，同時使

試管苗能夠進行光合作用；

（4）植物組織培養(yǎng)屬于無性繁殖；該繁殖過程不會改變親本的遺傳特性，保持親本的優(yōu)良

性狀。

【點睛】該題考察了兩個方向，其一是微生物的實驗時培養(yǎng)，重點側重在培養(yǎng)基的成分、培

養(yǎng)過程等，其次是植物組織培養(yǎng)，需要識記組培的原理、過程和優(yōu)點等知識點，考察較為基

礎。

（河南省部分學校2020-2021學年高三開學考試（一））30.形形色色的發(fā)酵食品在食品業(yè)

中占有重要地位，發(fā)酵食品的制作離不開微生物。請回答下列問題：

（1）為了提高果酒的品質、產(chǎn)量和節(jié)約生產(chǎn)成本，廠家提出了如下革新，請將其完善：

①榨汁時添加適量__________________以提高果汁的出汁率并使果汁變得澄清；

②使用培養(yǎng)基篩選出優(yōu)質酵母菌。

（2）在果酒的制作過程中，有時會出現(xiàn)“酒敗成酷'’的情況，其中導致釀酒失敗的微生物是

.在__________充足、溫度適宜的條件下，該微生物能將酒精轉變成乙醛,

進而轉變成醋酸。

（3）泡菜和腐乳因獨特的風味深受國人喜愛，腐乳的制作過程中，加鹽的作用有

_________________________（答出2點即可）。

（4）果酒的制作離不開酵母菌，傳統(tǒng)方法制作腐乳時也有酵母菌參與，制作腐乳時，酵母

菌的營養(yǎng)基質來自:以葡萄糖為底物制作果酒的過程中，酵母菌產(chǎn)生的二氧化碳量與

酒精量的比值大于1,原因是o

【答案】（1）.果膠酶（2）.選擇（3）.醋酸菌（4）.氧氣（5）.①析出豆腐中

的水分，使豆腐塊變硬，在后期制作過程中不會過早酥爛；②抑制微生物的生長，避免豆腐

塊腐敗變質（或調味）（6）.豆腐塊（7）.初期酵母菌進行有氧呼吸，產(chǎn)生二氧化碳不

產(chǎn)生酒精，無氧呼吸時產(chǎn)生的二氧化碳量與產(chǎn)生的酒精量相等

【解析】

【分析】

果酒制備的菌種是酵母菌，條件：溫度18-25C,缺氧、酸性。參與腐乳制作的微生物主要

是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將

豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】（1）果膠酶能分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層，將果膠分解成可溶性的半乳

糖醛酸，提高了果汁的出汁率并使果汁變得澄清；使用選擇培養(yǎng)基篩選出優(yōu)質酵母菌。

（2）導致釀酒失敗的微生物是醋酸菌；在氧氣充足、溫度適宜的條件下，該醋酸菌能將酒

精轉變成乙醛，進而轉變成醋酸。

（3）腐乳的制作過程中，加鹽的作用有析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期制作過

程中不會過早酥爛；抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質；調味。

（4）豆腐塊富含營養(yǎng)，制作腐乳時，酵母菌的營養(yǎng)基質來自豆腐塊；以葡萄糖為底物制作

果酒的過程中，初期酵母菌進行有氧呼吸，產(chǎn)生二氧化碳，不產(chǎn)生酒精，無氧呼吸時產(chǎn)生的

二氧化碳量與產(chǎn)生的酒精量相等，因此，制作果酒過程中，酵母菌產(chǎn)生的二氧化碳量與酒精

量的比值大于1。

【點睛】本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作，要求考生識記參與果酒、

果醋、腐乳和泡菜制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作原理及

條件，能結合所學的知識準確答題。

].（2020學年高三上學期8月執(zhí)信、廣雅、六中三校聯(lián)考試卷）某同學用新鮮的泡菜濾液

為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)

生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。請回答下列問題：

（1）為了縮短泡菜制作時間，有人會在冷卻的鹽水中加入少量陳泡菜液，推測加入陳泡菜

液的目的是。

（2）泡菜液中的乳酸來自乳酸菌的過程。在制作泡菜初期，泡菜壇水槽總是

有氣泡冒出的主要原因是。隨著泡制時間的延長，泡菜壇中亞硝

酸鹽的含量變化趨勢為。亞硝酸鹽和對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與

N-1蔡基乙二胺鹽酸鹽結合形成色染料，可用于亞硝酸鹽含量的檢測。

（3）從功能上，分離純化所用固體培養(yǎng)基屬于。為分離純化出優(yōu)質的乳酸菌,

應挑選的菌落作為候選菌.

（4）為長期保存純化得到的優(yōu)質乳酸菌，可以將培養(yǎng)的菌液與充分混勻后，

置于"C以下的冷凍箱中保存。

【答案】(1).增加乳酸菌數(shù)量(2).無氧呼吸(乳酸發(fā)酵)(3).混入的其它微生

物呼吸作用釋放了CO2(4).先增加后下降(5).玫瑰紅(6).鑒別培養(yǎng)基(7).

溶鈣圈(透明圈)大(8).滅菌的甘油(9).-20

【解析】

【分析】

泡菜發(fā)酵的實驗原理：

(1)乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸；

(2)利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化；

溫度過高，食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增

加.一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降；

(3)測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化

反應后，與N-1-蔡基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液目測

比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。

【詳解】(1)由于陳泡菜水中含有乳酸菌，在鹽水中加入陳泡菜水的目的是加進乳酸菌的菌

種，使乳酸菌的種群數(shù)量快速增加；

(2)泡菜中乳酸的發(fā)酵過程既是乳酸菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的過程，在制作泡菜初期，

泡菜壇水槽總是有氣泡冒出的主要原因是混入的其它微生物呼吸作用釋放了CO2,泡菜制作

過程中，隨著炮制時間的增加，亞硝酸鹽含量先升高后降低，亞硝酸鹽和對氨基苯磺酸發(fā)生

重氮化反應后，與N-1蔡基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，可用于亞硝酸鹽含量的

檢測；

(3)從功能上，分離純化所用固體培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因

含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，因此，分離純化時應挑

選出具有透明圈的菌落作為候選菌；

(4)微生物菌種的保藏有臨時保藏和長期保藏之分。對于需要長期保存的菌種，可以采用

甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉移到

甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。

【點睛】本題的知識點是泡菜制作原理，影響亞硝酸鹽含量的因素，在泡菜制作過程中乳酸

菌和雜菌的種群數(shù)量變化，對于泡菜制作過程這原理的掌握及影響種群數(shù)量變化因素的理解

是解題的關鍵。

2.（2021屆廣東省廣州市六區(qū)高三9月教學質量檢測（?））牛奶消毒不過關容易攜帶細菌。

根據(jù)國家標準（GB19645—2010）規(guī)定，每亳升合格的牛奶細菌總數(shù)不能超過50000個。某

興趣小組利用恒溫水浴鍋對新鮮牛奶進行消毒然后檢測消毒的效果，如下圖所示。

5mL生牛奶

IniLImL1niL1mL

養(yǎng)

培

數(shù)

計

阡

肉

牛

陳

口

蛋

養(yǎng)

培基

（1）圖中步驟①對牛奶的消毒的方法是,一般采用對牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進

行滅菌，蛋白陳的作用有（寫兩點）。

（2）步驟②將牛奶進行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表

面形成。步驟③的接種方法是，這種方法可以用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,

其原理是

（3）興趣小組通過步驟①?③接種了3個平板和1個未接種的平板放入恒溫培養(yǎng)箱，在適

宜的溫度條件下培養(yǎng)48h,然后統(tǒng)計出4個平板上的菌落數(shù)分別是57、53、55和9。根據(jù)這

樣的實驗結果（填“能''或"不能”）判斷該興趣小組消毒后的牛奶細菌超標，原因是

（4）如果要檢測牛奶中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入（填物質），觀察是

否出現(xiàn)黑色（或藍黑色）的菌落。

【答案】（1）.巴氏消毒（2）.高壓蒸汽滅菌（3）.提供碳源、氮源等（4）.單個

菌落（5）.稀釋涂布平板法（6）.當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌

落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中大約含有

多少活菌（7）.不能（8）.因為未接種的培養(yǎng)基上有菌落出現(xiàn)，說明培養(yǎng)基滅菌不徹

底，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不能表示牛奶中細菌數(shù)量（9）.伊紅美藍

【解析】

【分析】

（1）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、

實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、

灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。

（2）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微

生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體，即菌落。

【詳解】（1）圖中步驟①對牛奶的消毒方法是巴氏消毒，既可以殺滅牛奶中的微生物，又可

以使牛奶中的營養(yǎng)成分不會被破壞。對牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法，

蛋白陳含多種有機物，能為微生物提供碳源、氮源、維生素等。

（2）步驟②將牛奶進行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表

面形成單個菌落。步驟③的接種方法是稀釋涂布平板法，這種方法可以用來統(tǒng)計樣品中活菌

的數(shù)目，其原理是樣品稀釋度足夠高時，稀釋液中的一個活菌可在平板上長出一個單菌落，

通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

（3）由于未接種的平板上也有菌落，說明培養(yǎng)基滅菌不合格，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不

能表示牛奶中細菌數(shù)量，故不能由上述平板上菌落數(shù)計算消毒后的牛奶細菌是否超標。

（4）伊紅美藍可使大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，所以要檢測牛奶中是否含有大腸桿菌，需要

在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍，觀察是否出現(xiàn)黑色（或藍黑色）的菌落。

【點睛】本題考查無菌技術、微生物的接種方法以及微生物的計數(shù)等知識，意在考查考生對

所學知識的理解和應用能力。

3.（2021屆廣東省仲元中學、中山一中等七校聯(lián)合體高三上學期第一次聯(lián)考）為解決生活污

水中油脂對環(huán)境造成的污染?？蒲腥藛T要從污水中篩選出分解油脂能力最強的微生物。請分

析回答：

圖甲圖乙

（1）首先取生活污水，與特定液體培養(yǎng)基混合培養(yǎng)。取生活污水的目的是

,該液體培養(yǎng)基有什么特別之處?。這一輪培養(yǎng)的目的

是o

（2）圖甲和圖乙所代表的方法中能對微生物進行分離和計數(shù)的是法。用該方法統(tǒng)

計樣本菌落數(shù)時（"需要''或"不需要”）設置空白對照組，原因是。

（3）科研人員按圖乙方法培養(yǎng)了3個平板，一段時間后得到的菌落數(shù)依次為485、501、523,

出現(xiàn)這樣的實驗結果，其可能的原因是。

（4）從實驗結果來看，確定分解油脂能力最強的微生物的方法是。

【答案】（1）.獲取分解油脂的微生物（2）,以油脂為唯一碳源（3）.增大分解油脂

的微生物濃度（4）.稀釋涂布平板（5）.需要（6）.因為需要判斷培養(yǎng)基是否被污

染（7）.菌液稀釋度不夠（8）.單菌落（面積）最大

【解析】

【分析】

微生物常見接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。

在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成

單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可

形成單個菌落。

據(jù)圖分析，圖甲表示平板劃線法，可以用于對菌種的分離；圖乙表示稀釋涂布平板法，可以

用于對菌種的分離和計數(shù)。

【詳解】（1）該實驗的目的是從污水中篩選出分解油脂能力最強的微生物，因此取生活污水

的目的是為了獲取分解油脂的微生物，使用的特定液體培養(yǎng)基應該以油脂為唯一碳源，這一

輪培養(yǎng)的目的是增大分解油脂的微生物濃度。

（2）根據(jù)以上分析已知，圖甲表示平板劃線法，圖乙表示稀釋涂布平板法，后者可以用于

菌種的計數(shù)；稀釋涂布平板法計數(shù)時需要設置空白對照，以判斷培養(yǎng)基是否被污染。

（3）微生物計數(shù)的范圍是30-300,若利用圖乙方法得到的菌落數(shù)依次為485、501、523,

說明菌液稀釋度不夠。

（4）該實驗的目的是從污水中篩選出分解油脂能力最強的微生物，單菌落（面積）最大的

應該是分解油脂能力最強的微生物。

【點睛】解答本題的關鍵是掌握微生物分罔與計數(shù)的相關知識點，了解微生物常見的兩種接

種方法，準確判斷圖中兩種接種方法的名稱，明確只有稀釋涂布平板法可以用于菌種的計數(shù)。

（大同市2021屆高三學情調研測試試題）30.隨著口罩需求的與日俱增，住建部對不同場所產(chǎn)

生的廢棄口罩提出了明確的處理要求?為加快廢棄口罩的處理，某科研團隊準備從土壤中篩

選能高效降解一次性口罩（熔噴布）的細菌，請回答下列問題。

（1）居民小區(qū)、辦公場所、商場產(chǎn)生的廢棄口罩可作為生活垃圾中的其他垃圾進行收集轉

運。為避免環(huán)境污染和病原體的傳播，廢棄口罩必須先進行嚴格的處理。

（2）細菌大多分布在距地表約3?8cm的潮濕土壤層，因此土壤取樣時，一般

。熔噴布主要成分為聚丙烯纖維（PP，組成僅含有C、H兩種元素），用

于篩選的固體培養(yǎng)基除需加入經(jīng)過處理的聚丙烯粉末外，還應加入。對培養(yǎng)基滅菌常

用法。在接種到鑒別培養(yǎng)基之前，可以通過的方法增加目的菌的

濃度。

（3）在培養(yǎng)基中加入能與PP結合而顯色的染色劑，可使目的菌落周圍會出現(xiàn)透明圈，如

下圖所示，D表示透明圈直徑，d表示菌落直徑。為保證篩選出的細菌分解PP的能力最強,

應當選擇的菌落作為目的菌群。

（4）已知目的菌分解PP需要多種酶的共同參與，工廠化降解PP時,常采用

法來固定目的菌，采用該方法的原因_______________。

【答案】（1）.滅菌（2）.鏟去表層土（3）.水、氮源、無機鹽和瓊脂（4）.高壓

蒸汽滅菌（5）.選擇培養(yǎng)（6）.D/d比值最大（或d/D比值最?。?）.包埋法（8）.

體積大的細胞難以被吸附或結合，不易從包埋材料中漏出

【解析】

【分析】

1、微生物的實驗室培養(yǎng)關鍵做到無菌操作，培養(yǎng)基的滅菌常用高壓蒸汽滅菌法，培養(yǎng)皿常

用干熱滅菌法。

2、固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內的技術，包

括包埋法、化學結合法和物理吸附法。一般來說，酶更適合采用化學結合法和物理吸附法固

定，而細胞多采用包埋法固定化，這是因為細胞個大，而酶分子很?。簜€大的細胞難以被吸

附或結合，而個小的酶容易從包埋材料中漏出。

【詳解】（1）為避免環(huán)境污染和病原體的傳播，廢棄口罩必須先進行嚴格的滅菌處理。

（2）絕大多數(shù)細菌分布在距地表約3?8cm的土壤層，因此，土壤取樣時一定要鏟去表層

土壤。除了聚丙烯纖維外，要配制用于篩選的固體培養(yǎng)基還需要加入瓊脂以及基本的水、氮

源和無機鹽。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。在液體培養(yǎng)基中選擇培養(yǎng)的目的是

增加目的菌的濃度。

（3）從圖中可以看出，D/d比值越大，菌株降解PP的能力越強，因此應當選擇D/d比值最

大的菌落作為目的菌群。

（4）固定目的菌株常用的方法是包埋法，原因是體積大的細胞難以被吸附或結合，不易從

包埋材料中漏出。

【點睛】本題是對用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方及營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、常

用的接種方法、無菌操作技術、固定化技術等相關知識的綜合性考查，回憶微生物培養(yǎng)的培

養(yǎng)基的配方和營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、常用的接種方法的具體操作和目的，無菌

操作技術、常用的固定化技術后結合問題進行解答。

（山東省2021屆高三開學質量檢測）13.我國利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史

悠久，在多種文獻中均有記載：

①《齊民要術》中記載：“作鹽水，令極咸，于鹽水中洗菜，即內雍中。”

②《北山酒經(jīng)》中記載：“每壇加蠟三錢，竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口?！?/p>

③《齊民要術》中記載了二十三種利用谷物釀制食醋的工藝。其經(jīng)歷的三個主要發(fā)酵過程為:

糖化一酒化一醋化。

④《本草綱目拾遺》中記述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌過酒糟或醬制者，味咸甘心?！?/p>

下列說法錯誤的是（）

A.①介紹的是泡菜制作技術，配制的鹽水要煮沸冷卻后使