動物源糞肥中獸藥抗生素污染防控技術(shù)規(guī)范

1動物源糞肥中獸藥抗生素污染防控技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了動物源糞肥中獸藥的管控技術(shù)。本文件適用于規(guī)?；B(yǎng)殖場、有機肥企業(yè)中動物源糞肥獸藥的綜合防控。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB18596—2001畜禽養(yǎng)殖業(yè)污染物排放標準GB20287—2006農(nóng)用微生物菌劑GB38400—2019肥料中有毒有害物質(zhì)的限量要求GB/T16569—1996畜禽產(chǎn)品消毒規(guī)范GB/T25246—2010畜禽糞便還田技術(shù)規(guī)范GB/T26622—2011畜禽糞便農(nóng)田利用環(huán)境影響評價準則GB/T27622—2011畜禽糞便貯存設(shè)施設(shè)計要求GB/T36195—2018畜禽糞便無害化處理技術(shù)規(guī)范NY/T1109—2017微生物肥料生物安全通用技術(shù)準則NY/T1168—2006畜禽糞便無害化處理技術(shù)規(guī)范NY/T1222—2006規(guī)模化畜禽養(yǎng)殖場沼氣工程設(shè)計規(guī)范NY/T3442—2019畜禽糞便堆肥技術(shù)規(guī)范3術(shù)語和定義3.1糞便manure畜禽的糞尿排泄物。3.2健康養(yǎng)殖healthybreeding指根據(jù)養(yǎng)殖對象的生物學特性，運用生態(tài)學、營養(yǎng)學原理指導養(yǎng)殖生產(chǎn)，將養(yǎng)殖效益、動物健康、環(huán)境保護和產(chǎn)品品質(zhì)等方面統(tǒng)籌考慮，實現(xiàn)動物養(yǎng)殖的全面、協(xié)調(diào)、可持續(xù)發(fā)展。3.3畜禽糞污資源化利用resourceutilizationofanimalmanure是指在畜禽糞污處理過程中，通過生產(chǎn)沼氣、堆肥、漚肥、沼肥、肥水、商品有機肥、墊料、基質(zhì)等方式進行合理利用。23.4安全使用safetyusing畜禽糞便作為肥料使用，應(yīng)使農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量、質(zhì)量和周邊環(huán)境沒有危險，不受到威脅，畜禽糞肥施于農(nóng)田，其有毒有害物質(zhì)的含量應(yīng)達到標準提出的要求。4投入品控制措施4.1飲水控制條件允許的情況下，選擇水質(zhì)較好的自來水作為飲水，或選擇無污染的河水或深井水作為水源，確定水源后應(yīng)采樣送檢，水質(zhì)達到標準或法律法規(guī)規(guī)定要求。禁止在動物飲水中使用禁用獸藥。確需通過飲水給藥治療的，不得超范圍、超劑量使用藥物，嚴格遵守休藥期等有關(guān)規(guī)定，對飲水給藥的藥物種類、劑量、療程等予以記錄，飲水治療后對飲槽、管路等及時進行沖洗。4.2飼料控制飼料產(chǎn)品質(zhì)量達到標準或法律法規(guī)規(guī)定要求，不在飼料中添加違禁藥物和非法添加物。確需通過飼料給藥治療的，不得超范圍、超劑量使用藥物，可在飼料中使用的藥物需嚴格遵守休藥期、配伍禁忌等有關(guān)規(guī)定，對飼料給藥的藥物種類、劑量、療程等予以記錄，治療后對料槽、管路等及時進行清理。4.3獸藥控制養(yǎng)殖場應(yīng)建立獸藥采購、儲存、使用等環(huán)節(jié)管理要求和操作規(guī)程，遵從獸用處方藥管理、分級管理、休藥期等獸藥安全使用制度，系統(tǒng)規(guī)范獸藥使用行為。養(yǎng)殖場應(yīng)按照規(guī)定進行動物疾病的防疫，盡量不使用獸藥。在確需要使用獸藥時，應(yīng)在獸醫(yī)指導下對癥用藥，嚴格按照說明書的使用劑量和范圍使用獸藥，不憑經(jīng)驗用藥，不亂用或濫用獸藥，嚴格執(zhí)行安全間隔期、休藥期等規(guī)定，在養(yǎng)殖期間禁止使用違禁獸藥。加強獸藥使用記錄管理，建立獸藥使用檔案，使用者需如實、及時記錄使用獸藥的時間、品種和數(shù)量，記錄留存時間不少于規(guī)定要求。鼓勵使用安全、高效、低殘留的中獸藥、低聚糖、微生態(tài)制劑、噬菌體等抗菌藥物替代產(chǎn)品，促進生態(tài)養(yǎng)殖發(fā)展，從源頭減少獸用抗菌藥物使用量。5飼養(yǎng)管理措施5.1產(chǎn)量控制管理統(tǒng)籌考慮養(yǎng)殖效益、動物健康、環(huán)境承載力，通過調(diào)控動物飼養(yǎng)密度在一定程度上進行畜禽養(yǎng)殖數(shù)量控制，提高動物抗病力，減少獸藥使用量，實現(xiàn)養(yǎng)殖場畜禽健康養(yǎng)殖，確保優(yōu)質(zhì)、安全、健康、營養(yǎng)的畜禽產(chǎn)品供給，以及減少畜禽糞便中抗生素含量。5.2舍內(nèi)環(huán)境管理適宜的養(yǎng)殖環(huán)境對畜禽生長質(zhì)量、減少疾病發(fā)生和獸藥使用至關(guān)重要，應(yīng)根據(jù)畜禽養(yǎng)殖特點，通過光照、通風、取暖降溫等設(shè)備設(shè)施，合理規(guī)劃和控制養(yǎng)殖舍內(nèi)光照、溫濕度、氨氣、硫化氫、二氧化碳、懸浮顆粒物等影響因素，降低不良因素的刺激。3如條件允許可以安裝養(yǎng)殖環(huán)境智能控制系統(tǒng)，對養(yǎng)殖舍內(nèi)環(huán)境的光照、溫濕度、氨氣、硫化氫、二氧化碳、懸浮顆粒物濃度進行監(jiān)控，實現(xiàn)對舍內(nèi)環(huán)境數(shù)據(jù)監(jiān)測、預警分析、調(diào)控管理的智能化和信息化。如條件允許可以建設(shè)自動喂料、自動飲水、自動清糞等現(xiàn)代化裝備，利用節(jié)水、節(jié)料等清潔養(yǎng)殖工藝和干清糞等實用技術(shù)，實現(xiàn)畜禽糞便的源頭減量。合理利用養(yǎng)殖新技術(shù)，從生產(chǎn)端營造良好的養(yǎng)殖環(huán)境，提升動物生活質(zhì)量、增強動物機體免疫能力，減少獸藥的使用。5.3消毒防疫管理養(yǎng)殖場應(yīng)制定科學合理的消毒和防疫程序。對畜禽養(yǎng)殖場的畜禽、生產(chǎn)區(qū)域、生產(chǎn)和運載工具、工作人員等進行滅菌消毒時，要根據(jù)不同病原特征和消毒對象選擇不同消毒劑，按照說明書的使用方式和使用劑量進行使用，注意消毒劑之間的配伍禁忌，不宜頻繁更換不同類型的消毒劑，不得隨意加大劑量，當發(fā)生疫情時，應(yīng)適當增加消毒頻次。養(yǎng)殖場應(yīng)主動實施程序化免疫，疫苗選擇經(jīng)國家批準使用的疫苗，冷鏈運輸和保存，按照說明書推薦方式使用。養(yǎng)殖場應(yīng)建立消毒和免疫檔案，如實、及時記錄使用的時間、品種和數(shù)量，記錄留存時間不少于規(guī)定要求。5.4人員管理養(yǎng)殖場建立人員管理規(guī)范，強化養(yǎng)殖與獸醫(yī)從業(yè)人員養(yǎng)殖標準化和科學合理用藥培訓，鼓勵將養(yǎng)殖場的信息化學習系統(tǒng)對接獸藥管理機構(gòu)與協(xié)會的新媒介，充分利用專業(yè)機構(gòu)的科技和制度優(yōu)勢，學習養(yǎng)殖新技術(shù)和管理經(jīng)驗，以及安全用藥知識，持續(xù)提高從業(yè)人員素養(yǎng)，規(guī)范獸藥的用藥行為。6糞便處理措施6.1糞便分類處置對受到獸藥污染的畜禽糞便進行分類收集處理。將治療期間的畜禽糞便與常規(guī)飼養(yǎng)產(chǎn)生的糞便分別收集，沒有獸藥殘留的畜禽糞便通過厭氧或者好氧處理后利用；治療期間的畜禽糞便，應(yīng)在正式處理前開展預處理，包括但不限于將畜禽糞便與其他一同發(fā)酵的干物質(zhì)混合對高濃度獸藥殘留進行稀釋（降低殘留初始濃度增加糞便的光照或紫外線暴露，或添加降解菌等多種方式，充分利用光解、溫度、微生物等非生物和生物活動，促進糞便中殘留藥物的降解和去除。6.2糞便處理途徑規(guī)模養(yǎng)殖場、畜禽糞污處理企業(yè)或區(qū)域性糞污集中處理中心，根據(jù)其配置的糞便處理設(shè)施設(shè)備條件，選擇適宜的糞便處理方式，優(yōu)先選擇農(nóng)業(yè)主管部門在畜禽糞污資源化利用主推技術(shù)中的糞污能源化方式、糞便堆肥方式、糞水肥料化方式等處理途徑，鼓勵應(yīng)用先進的糞便處理技術(shù)。其中：糞污能源化方式：對養(yǎng)殖場的糞便和糞水集中收集，利用沼氣工程，進行厭氧發(fā)酵，產(chǎn)生的沼渣和沼液經(jīng)過好氧再次處理后，分別生產(chǎn)有機肥利用、進行農(nóng)田利用或達標排放。糞便堆肥方式：對養(yǎng)殖場的糞便集中收集，采用條垛式、槽式、筒倉式、發(fā)酵床等堆肥方式，經(jīng)好氧發(fā)酵高溫處理，就地農(nóng)田利用或生產(chǎn)有機肥。4糞水肥料化方式：養(yǎng)殖場產(chǎn)生的糞水進行厭氧發(fā)酵和好氧處理等組合工藝進行深度處理，通過氧化塘貯存，在施肥季節(jié)進行農(nóng)田利用。6.3生物菌劑利用通過在畜禽糞便處理過程中添加適宜的生物菌劑來調(diào)節(jié)處理效果，提高糞肥的處理溫度，延長高溫持續(xù)的時間，提高糞肥中獸藥的降解率，顯著降低獸藥和抗性基因污染物的含量，實現(xiàn)畜禽糞便安全高效利用。6.4獸藥臨時限量為推進畜禽糞便的資源化利用，提高商品有機肥價值，保障糞肥產(chǎn)品、農(nóng)產(chǎn)品以及生態(tài)環(huán)境安全，依據(jù)糞肥中獸藥風險評估結(jié)果證明存在安全隱患的，標準管理部門可以提出糞肥中獸藥的臨時限量值，作為生產(chǎn)經(jīng)營和監(jiān)督管理的依據(jù)。7畜禽糞便中獸藥監(jiān)測7.1測定方法動物源糞肥中獸藥測定參照本規(guī)范中附錄A、GB/T32951-2016、NY/T3167-2017的規(guī)定執(zhí)行。7.2產(chǎn)品質(zhì)量對于糞便處理后形成的糞肥產(chǎn)品，產(chǎn)品標準對獸藥含量有要求的應(yīng)符合該產(chǎn)品標準的要求；當產(chǎn)品標準對獸藥含量沒有規(guī)定，而制定了獸藥含量的臨時限量時，含量應(yīng)符合臨時限量的要求；既沒有產(chǎn)品標準規(guī)定，又沒有臨時限量要求，產(chǎn)品中獸藥含量規(guī)定可參照預警值。產(chǎn)品中其他有毒有害物質(zhì)含量應(yīng)符合GB38400-2019的限量要求。7.3預警值當產(chǎn)品中獸藥含量達到預警值100μg/kg時，應(yīng)立即查找原因，消除污染源和改善控制措施。8防控記錄及存檔收集、記錄、整理畜禽糞便獸藥污染防控過程中的各類信息和資料，建立專門檔案，妥善保存。主要信息和資料包括獸藥使用的時間、方式、用量、采取的防控措施和防控效果等。5（資料性）畜禽糞肥中磺胺類、氟喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類和酰胺醇類獸藥的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本方法規(guī)定了畜禽糞肥中5類18種獸藥殘留測定的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法。包括：磺胺類：磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉氟喹諾酮類：恩諾沙星、環(huán)丙沙星、達氟沙星、沙拉沙星；大環(huán)內(nèi)酯類：阿奇霉素、替米考星和泰樂菌素；四環(huán)素類：四環(huán)素、土霉素、金霉素、多西環(huán)素；酰胺醇類：甲砜霉素、氟苯尼考。A.2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T1.1-2009標準化工作導則第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則GB/T6682分析實驗室用水規(guī)則和試驗方法A.3原理樣品采用甲醇、乙腈、Na2EDTA-mcllvaine緩沖液等組合提取試樣中的待測物，用水稀釋后過濾，濾液過Strata-X固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，外標法定量。A.4試劑和材料以下所用的試劑，除特別注明者外均為分析純試劑；水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。對照品：磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、達氟沙星、沙拉沙星、四環(huán)素、土霉素、金霉素、多西環(huán)素、阿奇霉素、替米考星、泰樂菌素、甲砜霉素、氟苯尼考對照品，純度均≥97%；乙腈：色譜純；甲醇：色譜純；甲酸：色譜純；正己烷；0.1mol/L檸檬酸溶液：取檸檬酸21.01g，用水溶解并稀釋至1000mL；0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液：取磷酸氫二鈉28.41g，用水溶解并稀釋至1000mL；6Mcllvaine緩沖溶液：取0.1mol/L檸檬酸溶液1000mL、0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液625mL，混勻，用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)pH至4.0±0.05；0.1mol/LNa2EDTA-Mcllvaine緩沖溶液：取乙二胺四乙酸二鈉60.5g，加Mcllvaine緩沖溶液1625mL，溶解，混勻，根據(jù)需要用NaOH或HCl調(diào)pH值4.0和6.0備用；10%乙腈水溶液：取乙腈10mL，加水90mL，混勻；0.1%甲酸水溶液：取500μL甲酸，加水500mL，混勻；標準儲備液（1.0mg/mL分別精密稱取藥物對照品適量，置容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，分別配制成1mg/mL的標準儲備液。于-20℃下避光保存，有效期6個月；混合標準中間工作液（10.0μg/mL）：分別準確吸取標準儲備液各100μL，置10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，配制成10μg/mL的混合標準中間工作液。于2℃~8℃避光保存，有效期1個月；混合標準工作液：準確量取混合標準中間工作液適量，用10%乙腈水溶液稀釋，制得濃度為5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL和200ng/mL的系列標準工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用；Strata-X固相萃取柱，200mg/6mL，或相當者。A.5儀器和設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（配電噴霧離子源）、離心機、多管渦旋振蕩器、超聲波清洗器、固相萃取裝置、氮吹儀A.6樣品的制備與保存A.6.1糞便樣品制備取適量空白或供試糞便樣品，冷凍干燥后研磨，過0.45mm孔徑的分析篩?！⊙心サ墓┰嚇悠罚鳛楣┰囋嚵?。——取研磨的空白樣品，作為空白試料。——取研磨的空白樣品，添加適宜濃度的標準溶液，作為空白添加試料。A.6.2試料的保存糞便樣品-20℃以下保存。A.7分析步驟A.7.1提取準確稱取試樣3.0g于50mL離心管中，加入15.0mL0.1mol/LNa2EDTA-Mcllvaine緩沖溶液（pH=4.0），渦旋30s，振蕩10min，超聲20min，8000r/min離心5min。移取上清液至另一離心管中，重復提取兩次，合并上清液。加入10mL正己烷，振蕩5min，10000r/min離心5min，移取下層溶液備用。A.7.2凈化7Strata-X或者WatersOasisHLB固相萃取柱依次用6mL甲醇、6mL0.1mol/LNa2EDTA-Mcllvaine緩沖溶液（pH=4.0）活化，移取全部備用液過柱，控制流速≤3mL/min，水10mL淋洗，抽干。甲醇8mL洗脫，收集洗脫液，于40℃下氮氣吹干，加入流動相1.00mL溶解殘余物，超聲2min，混勻后過0.22μm濾頭供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定。A.7.3基質(zhì)匹配標準曲線的制備取空白樣品，按步驟7.1~7.2操作，洗脫液氮氣吹干后，分別移取5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、400ng/mL和800ng/mL的混合標準工作液各1.0mL溶解殘余物，10000r/min離心5min，上清液供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定。以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標，基質(zhì)匹配標準溶液濃度為橫坐標，繪制基質(zhì)匹配標準曲線。A.7.4測定A.7.4.1液相色譜參考條件色譜柱：C18柱，柱長100mm，柱內(nèi)徑2.1mm，粒度1.7μm，或相當?shù)姆治鲋Ｖ鶞兀?0℃。流速：0.30mL/min。進樣量：20μL。流動相系統(tǒng)1：A相：甲醇、B相：0.1%甲酸溶液，梯度洗脫，梯度見表1。表1流動相、流速及梯度洗脫條件1A相（%）B相（%）/2980.52984.025757.060407.19558.0955298流動相系統(tǒng)1：A相：甲醇、B相：0.1%甲酸溶液，梯度洗脫，梯度見表1。表2流動相、流速及梯度洗脫條件2A相（%）B相（%）/903.5905.0907.0908A.7.4.2質(zhì)譜參考條件離子源：電噴霧離子源（ESI+/ESI-）。檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。電離電壓：4.0kV（ESI+）；3.0kV(ESI-)。源溫：150℃。霧化溫度：500℃。錐孔氣流速：50L/h。霧化氣流速：1000L/h。定性離子對、定量離子對及對應(yīng)的碰撞能量參考值見表3。表3定性、定量離子的保留時間、錐孔電壓和碰撞能量藥物名稱掃描模式流動相系統(tǒng)保留時間min定性離子對m/z錐孔電壓V碰撞能量eV磺胺嘧啶ESI+13.62251.021>155.904*251.021>91.998224磺胺二甲嘧啶ESI+1279.052>185.968*279.052>91.989228磺胺甲惡唑ESI+15.66254.02>92.064*254.02>155.9073226磺胺間甲氧嘧啶ESI+15.72281.031>155.89*281.031>91.992228磺胺喹噁啉ESI+1300.9>107.9*300.9>155.8*23環(huán)丙沙星ESI+15.43332.101>231.011*332.101>288.08230達氟沙星ESI+1358.7>341.2*358.7>315.2388恩諾沙星ESI+15.52360.133>316.104*360.133>245.0583824沙拉沙星ESI+15.86386.092>342.057*386.092>299.0232824泰樂菌素ESI+17.99916.423>174.058*916.423>772.3033628替米考星ESI+17.26869.47>174.067*869.47>696.3594438阿奇霉素ESI+16.86749.477>158.076*749.477>82.951444048四環(huán)素ESI+15.41445.185>410.109*445.185>427.20422金霉素ESI+16.5479.146>444.006*479.146>153.9934269土霉