糧油檢驗 大米直鏈淀粉含量的測定 編制說明

1《糧油檢驗大米直鏈淀粉含量的測定》編制說明根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會下達的項目（編號為20153546-T-449）對現(xiàn)行《大米直鏈淀粉含量的測定》國家標(biāo)準(zhǔn)進行修訂，由湖北省糧油食品質(zhì)量2015年立項擬修訂的GB/T15683-2008《大米直鏈淀粉含量的測先后出版了2017版、2019版（征求意見）和2020版。為了標(biāo)準(zhǔn)的穩(wěn)定性，特米直鏈淀粉含量的測定》，因標(biāo)準(zhǔn)修訂期間，ISO6647-1/2:2017和ISO6647-1/2:2019（征求意見稿）版本反復(fù)修改，ISO6647-1/2:2020版正式發(fā)布實施，針對以上的變化，標(biāo)準(zhǔn)修訂工作在2020年后又再次22015年立項修訂GB/T15683-2008《大米直鏈淀粉含量的測定》2023年6月—至今，最終確定了標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容，編寫標(biāo)準(zhǔn)文本和編制說表1標(biāo)準(zhǔn)主要起草人及其所做的工作參與人員承擔(dān)工作熊寧全面負責(zé)標(biāo)準(zhǔn)的修訂工作，制訂標(biāo)準(zhǔn)修訂工作方案，提出實驗的方向和內(nèi)容等劉堅、孫婷琳、劉利負責(zé)文本、編制說明的編寫、修改完善，3征求意見的收集整理等劉堅、劉利、孫婷琳實驗方案的制定、檢測試驗劉利、吳莉莉、孫婷琳、劉堅、許詩堯、秦時聰負責(zé)查閱文獻、收集樣品、檢測試驗、數(shù)據(jù)匯總分析等國家糧食和物資儲備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心徐廣超和張艷、南京財經(jīng)大學(xué)袁建對現(xiàn)行國際標(biāo)準(zhǔn)、實驗方案等進行技術(shù)指導(dǎo)河南工業(yè)大學(xué)周顯青對ISO標(biāo)準(zhǔn)進了了翻譯指導(dǎo)其他單位和參與人員參與標(biāo)準(zhǔn)的實驗驗證、方案優(yōu)化、文本及編制說明的修改按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則—2008相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，另外新增了第二法，第一法主要技檢測波長的選擇會導(dǎo)致檢測結(jié)果的差異，實驗表明，樣品在檢測波長720nm、4當(dāng)前，國際和國內(nèi)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)情況比較如下。一是現(xiàn)行的國家標(biāo)準(zhǔn)。GB/T15683-2008《大米直鏈淀粉含量的測定》是等同采用了ISO6647-1:2007，將二是現(xiàn)行的國際標(biāo)準(zhǔn)。國際標(biāo)準(zhǔn)分別在2007、2015、2017、2020年進行修訂。農(nóng)業(yè)部2014年發(fā)布NY/T2639-2014《稻米直鏈淀粉的測定分光光度法》，參5表1樣品未脫脂與甲醇抽提回流脫脂的比對試驗樣品編號樣品未脫脂，%樣品回流抽提脫脂，%121.825.2227.830.4331.633.6422.326.5523.525.7678越南大米13.42糯米2.102.3020.923.1大米20#表2不同脫脂處理方式大米樣品直鏈淀粉含量檢測結(jié)果樣品對照組（85%甲醇）100%甲醇超聲1225.224.3330.430.2433.632.2526.526.7625.725.3782.303.00注：1-8為8個不同直鏈淀粉含量的大米樣品表3不同脫脂方式測得直鏈淀粉含量的配對t檢驗結(jié)果6實驗條件均值標(biāo)準(zhǔn)差均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差分的95%置信區(qū)間上限下限上限側(cè))甲醇回流-甲醇超聲0.2500.7540.266-0.3800.8800.93870.3800.3800.05說明甲醇超聲法與甲醇回流法間無顯著差異，可以作為直鏈表4不同脫脂樣品量的直鏈淀粉檢測結(jié)果分析樣品編號不同脫脂樣品量直鏈淀粉含量相對相差δ重復(fù)性限值r0.5(g)1.0(g)超聲脫脂923.324.02.870.692.7021.221.30.472.14923.824.20.512.7121.521.30.892.13注：9、10、11為三份直鏈淀粉含量不同的大米樣品7樣品10(秈米)1(越南大米)2(糯米)3(高粱米)4(薏仁米)5(青稞)綜上所述，確定大米樣品的脫脂條件為：脫脂樣品量0.5g,超聲溫度50℃,超聲時間50分鐘。3.1.3分散方式的選擇選取14份樣品，樣品中直鏈淀粉含量在1.5%-26.8%(720nm測定值)。選取煮沸法、浸泡過夜法和磁力攪拌法三種不同的方法進行分散淀粉，在720nm波長下測定樣品值，結(jié)果如下圖1和表6,對表6中的檢測結(jié)果，運用SPSS軟件按照配對t檢驗進行分析，設(shè)臨界水平a=0.05,數(shù)據(jù)分析結(jié)果見表7。8表6不同樣品溶液制備方式的直鏈淀粉含量檢測結(jié)果樣品編號直鏈淀粉含量/（%）煮沸法浸泡過夜法磁力攪拌法625.925.124.2782.302.6024.626.125.56.607.707.109.9026.826.225.123.824.325.524.025.625.1平α=0.05，數(shù)據(jù)分析結(jié)果見表7。煮沸法、浸泡過夜法、磁力攪拌法三組直鏈淀粉檢測結(jié)果之間，兩兩為一組的配對t檢驗，顯著性P值均大于0.05，說明表7不同樣品溶液制備方式測得直鏈淀粉含量的配對t檢驗結(jié)果實驗條件均值標(biāo)準(zhǔn)差均值的標(biāo)準(zhǔn)差差分的95%置信區(qū)間t下限上限煮沸法-過夜法-0.4421.0320.275-1.0380.153-1.600.132煮沸法-磁力攪拌法-0.6141.2430.332-1.330.103-1.840.087過夜法-磁力攪拌法-0.171.9100.243-.6970.354-0.7040.494取14份大米樣品，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和樣品在同一波長進行檢測，現(xiàn)選取720nm、表8不同分光光度計使用波長的直鏈淀粉檢測結(jié)果樣品編號直鏈淀粉含量/（%）720nm680nm620nm625.924.525.6625.924.59782.3024.66.609.9026.823.824.03.0024.97.4026.624.424.53.8027.32.309.8027.727.027.1對上表中的檢測結(jié)果，運用SPSS軟件按照配對t檢驗進行分析，設(shè)臨界于0.05，表明三種不同檢測波長間兩兩存在顯著差異?？紤]在后續(xù)的研究中，表9不同分光光度計使用波長測得直鏈淀粉含量的配對t檢驗結(jié)果實驗條件均值標(biāo)準(zhǔn)差均值準(zhǔn)差差分的95%置信區(qū)間t下限上限720nm-680nm-0.4140.4160.111-0.654-0.1737-3.720.003620nm-680nm1.7500.2981.1042.3955.850.000720nm-620nm-2.1640.387-3.002-1.326-5.580.00030min的烘箱平衡方式可快速實現(xiàn)樣品中水分平衡，與ISO6647-1方法中的靜表10樣品平衡水分試驗樣品編號水分含量，%樣品編號水分含量，%樣品編號水分含量，%12121212121212121212121212121212平均值平均值平均值原始水分原始水分原始水分表11直鏈淀粉檢測方法一驗證試驗技術(shù)路線技術(shù)路線脫脂方式水分平衡方式分散方式檢測波長測試樣品備注1甲醇回流熱分散720nm粉末現(xiàn)行國標(biāo)方法2甲醇回流磁力攪拌冷分散720nm粉末分散方式改進3甲醇回流烘箱平衡熱分散720nm粉末水分平衡方式改進4甲醇回流烘箱平衡磁力攪拌冷分散720nm粉末法改進5超聲脫脂熱分散720nm粉末脫脂方式改進6超聲脫脂磁力攪拌冷分散720nm粉末進7超聲脫脂烘箱平衡熱分散720nm粉末式改進8超聲脫脂烘箱平衡磁力攪拌冷分散720nm粉末脫脂、水分平衡、分散方法改進條技術(shù)路線用自制馬鈴薯直鏈淀粉與Sigma試劑制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，其他步驟按照ISO6647-1：2020方法進行直鏈淀粉檢測，每條技術(shù)路線每個樣品平行測試6表12檢測結(jié)果樣品編號標(biāo)準(zhǔn)品路線1路線2路線3路線4路線5路線6路線7路線8平均相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）23001sigma0.60.723002sigma21.422.924.522.121.822.721.823.323.222.422.722.520.421.523003sigma24.025.728.025.025.023.227.527.525.725.525.125.625.723.024.325.824.725.023005sigma22.425.626.525.824.223.427.226.925.324.425.924.326.522.324.624.424.224.623009sigma0.923022sigma25.325.828.926.325.722.825.727.826.027.525.725.527.023.623.925.724.925.523028sigma20.020.221.420.00.723036sigma21.221.220.120.02.023037sigma20.123.724.224.321.620.821.722.022.321.923.922.124.420.221.922.222.0先用格拉布斯（Grubbs）法判斷表12數(shù)=2.032。根據(jù)上述方法計算|vi|的表13實驗測定結(jié)果的Grubbs計算結(jié)果表樣品編號標(biāo)準(zhǔn)品λ23001sigma0.30.90.20.50.50.10.10.70.70.70.20.80.00.40.42300223003230052300923022230282303623037sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制0.40.52.90.20.00.72.00.62.20.10.00.10.30.10.70.20.20.70.22.42.70.92.30.60.30.22.90.00.80.42.00.10.30.70.70.50.60.30.80.12.02.42.03.30.72.02.30.10.30.02.70.72.92.02.50.70.02.03.22.10.70.42.30.10.00.80.20.10.30.30.22.20.32.50.60.20.90.30.40.30.60.80.72.50.32.33.73.93.72.03.52.42.23.72.82.83.94.13.23.3性。因此自制標(biāo)準(zhǔn)品與sigma試劑分別配制的標(biāo)量之間不存在顯著性差異，其差異幅度Cohen'sd值均小于編號平均值±標(biāo)準(zhǔn)差tPCohen'sd11.250±0.67411.638±0.555-0.99970.3510.35321.525±1.90821.763±1.771-0.22870.8260.08124.963±0.95025.738±1.768-0.9470.3790.33224.575±1.24925.250±1.739-0.99470.3530.35114.988±1.07615.038±0.938-0.26770.7970.09525.475±1.35526.038±1.8000.57370.5850.20318.663±0.69119.163±1.4491.11470.3020.39417.688±2.00018.663±1.9321.17970.2770.4172303722.3±1.58622.038±1.602-0.49370.6370.174進行正態(tài)性檢驗。配對差值正態(tài)性檢驗見表15中S-W、偏度、峰度結(jié)果。由表15呈現(xiàn)顯著性，因此數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布。序號9、17、18、20、28五組配對差值的絕對值小于3。結(jié)合正態(tài)分布直方圖，正態(tài)圖基本上呈現(xiàn)出鐘形（中間高，兩端），說明每組配對樣本之間不存在顯著性差異。如果配對樣本T檢驗呈現(xiàn)顯著性，可借助效應(yīng)量化Cohen'sd值對差異性進行量化分析。Cohen'sd值＜0.2表示差異幅度非常??；0.2≤Cohen'sd值＜0.5表示差異幅度較??；0.5≤Cohen'sd值<表15配對差值正態(tài)性檢驗結(jié)果及配對T檢驗結(jié)果S-W偏度峰度PCohen'sd1技術(shù)1配對技術(shù)20.3-0.592-10.0590.7962技術(shù)1配對技術(shù)30.61-0.386-0.8740.2750.2833技術(shù)1配對技術(shù)40.0550.0590.5114技術(shù)1配對技術(shù)50.9090.024-0.6220.041**0.5575技術(shù)1配對技術(shù)60.812-0.324-0.6680.028**0.6066技術(shù)1配對技術(shù)70.081-0.734-0.610.280.287技術(shù)1配對技術(shù)80.614-0.4-0.7080.340.2468技術(shù)2配對技術(shù)30.529-0.810.5110.7410.0849技術(shù)2配對技術(shù)40.002***0.7140.093技術(shù)2配對技術(shù)50.7980.218-0.5270.007***0.774技術(shù)2配對技術(shù)60.620.425-0.2270.000***1.114技術(shù)2配對技術(shù)70.4550.6790.6750.107技術(shù)2配對技術(shù)80.8630.311-0.410.6290.123技術(shù)3配對技術(shù)40.8920.311-0.5370.8810.038技術(shù)3配對技術(shù)50.7570.3890.1630.000***1.279技術(shù)3配對技術(shù)60.829-0.5340.3980.021**0.645技術(shù)3配對技術(shù)70.006***-0.833.2870.9490.016技術(shù)3配對技術(shù)80.000***3.4670.9310.022技術(shù)4配對技術(shù)50.821-0.016-0.1110.001***1.099技術(shù)4配對技術(shù)60.026**0.001***0.995技術(shù)4配對技術(shù)70.135-0.9240.20.8490.048技術(shù)4配對技術(shù)80.18-0.8350.5560.8510.048技術(shù)5配對技術(shù)7技術(shù)5配對技術(shù)8技術(shù)6配對技術(shù)7技術(shù)6配對技術(shù)8技術(shù)7配對技術(shù)8注：***、**、*分別代表1%、5%、性P值為0.041**,水平上呈現(xiàn)顯著性，因此技性差異。其差異幅度Cohen'sd值為：0.557,差異幅度中等?；诩夹g(shù)路線1與術(shù)路線6之間存在顯著性差異。其差異幅度Cohen'sd值為：0.608,差異幅度中同時，技術(shù)路線1、2、3、4、7、8與技術(shù)路線5,6兩兩之間，配對t檢驗結(jié)果顯著性P值均小于0.05,且Cohen'sd值均大于0.5,表明技術(shù)路線5、6的樣品4、7、8測得的樣品直鏈淀粉含量平均值與技術(shù)路線5、6的路線5,6的檢測結(jié)果較平均值普遍偏低。分析原因為超聲波的空化和乳化效應(yīng)，使超聲處理后的樣品中形成微小的“乳滴”,脂質(zhì)與常溫條件下徹底分離，導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低。此外廖雪勤等發(fā)現(xiàn)，超聲處理會理時，常添加表面活性劑以降低乳化效應(yīng)，本研究中烘箱平衡水分的步驟也起到了該功能。因此技術(shù)路線5、6相對其他組別檢測結(jié)果偏低。圖2平均值與技術(shù)路線5、6檢測結(jié)果比對3.2標(biāo)準(zhǔn)文本第二法新增的理由第二法中采用樣品和參考物質(zhì)不脫脂、不平衡、不同分散方式對直鏈淀粉含量的測定，設(shè)計如下實驗，見表16。表16直鏈淀粉檢測方法二驗證試驗技術(shù)路線路線檢測測試樣品備注9不脫脂不平衡熱分散不脫脂不平衡新增第二法是修改采用ISO6647-2:2020,將此法作為標(biāo)準(zhǔn)文本的第二法，由于檢測波長的選擇會導(dǎo)致檢測結(jié)果的差異，實驗表明，樣品在檢測波長720nm、其余步驟和實驗條件均與ISO6647-2:2020保持一致。第一法中技術(shù)路線1和第二法中技術(shù)路線9、10結(jié)果對比如下表17,通過數(shù)據(jù)看出，除了樣品23003的結(jié)果差異大外，其他樣品結(jié)果差異不大。編號平均值技術(shù)路線1-9技術(shù)路線1-10技術(shù)路線1技術(shù)路線9技術(shù)路線10絕對偏差絕對偏差表18標(biāo)準(zhǔn)方法驗證單位序號驗證單位名稱1湖北省糧油食品質(zhì)量監(jiān)督檢測中心2南京財經(jīng)大學(xué)3吉林省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院4國家糧食和物資儲備局科學(xué)研究院5深圳市計量質(zhì)量檢測研究院表19技術(shù)路線1的驗證結(jié)果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結(jié)果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量55555555接受的結(jié)果數(shù)量27232529平均值m/m，%11.0319.9925.6425.5714.9125.6118.9318.50重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（Sr）0.400.340.770.550.180.350.550.30重復(fù)性變異系數(shù)（CV）,%3.603.002.152.89重復(fù)性限值（r）0.962.150.490.990.85再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（SR）0.892.032.250.440.76再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%8.0510.165.908.812.972.986.819.20再現(xiàn)性限值（R）2.495.694.236.312.133.614.77表20技術(shù)路線2的驗證結(jié)果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結(jié)果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量44444345接受的結(jié)果數(shù)量23242424242227平均值m/m，%12.5021.6126.5026.5615.5026.8420.3721.25重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（Sr）0.170.600.640.640.420.670.210.53重復(fù)性變異系數(shù)（CV）,%2.792.402.422.682.512.49重復(fù)性限值（r）0.470.58再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（SR）0.642.50再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%5.114.944.795.167.614.066.1511.75再現(xiàn)性限值（R）2.993.563.843.303.053.516.99表21技術(shù)路線3的驗證結(jié)果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結(jié)果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量54555555接受的結(jié)果數(shù)量292426292827平均值m/m，%11.9721.1627.6526.9515.9126.9320.2019.23重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（Sr）0.250.350.200.370.470.260.280.30重復(fù)性變異系數(shù)（CV）,%2.050.712.920.95重復(fù)性限值（r）0.690.970.550.710.790.83再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（SR）0.400.750.960.772.11再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%8.482.725.326.054.693.8010.95再現(xiàn)性限值（R）2.842.104.012.703.542.155.90表22技術(shù)路線4的驗證結(jié)果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結(jié)果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量43354454接受的結(jié)果數(shù)量2428242223平均值m/m，%12.2421.6226.1125.4215.0825.7719.1816.90重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（Sr）0.430.230.290.430.540.280.290.42重復(fù)性變異系數(shù)（CV）,%3.473.572.48重復(fù)性限值（r）0.630.820.780.81再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（SR）0.512.370.840.40再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%12.342.375.969.347.853.286.602.36再現(xiàn)性限值（R）4.234.366.653.312.373.55表23技術(shù)路線7的驗證結(jié)果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結(jié)果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量55555555接受的結(jié)果數(shù)量272928平均值m/m，%11.3620.4726.0125.7214.3824.9418.9918.54重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（Sr）0.400.500.600.160.240.310.410.48重復(fù)性變異系數(shù)（CV）,%3.552.422.290.612.172.59重復(fù)性限值（r）0.440.670.88再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（SR）0.79再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%9.945.194.904.785.477.587.529.74再現(xiàn)性限值（R）3.162.973.573.452.205.294.005.05表24技術(shù)路線8的驗證結(jié)果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結(jié)果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量34555555接受的結(jié)果數(shù)量21272927平均值m/m，%11.8122.9026.1426.1314.1723.6318.9519.13重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（Sr）0.340.180.540.560.330.300.570.47重復(fù)性變異系數(shù)（CV）,%2.870.802.052.132.343.022.44重復(fù)性限值（r）0.950.520.930.84再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（SR）2.290.92再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%9.2010.015.195.4610.353.887.328.30再現(xiàn)性限值（R）3.046.423.803.994.112.563.894.44表25技術(shù)路線9的驗證結(jié)果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結(jié)果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量34344444接受的結(jié)果數(shù)量21212121平