醫(yī)學(xué)知識(shí)一單個(gè)核細(xì)胞

第十四章

免疫細(xì)胞的分離及其表面標(biāo)志檢測(cè)技術(shù)免疫細(xì)胞的分離外周血單個(gè)核細(xì)胞分離淋巴細(xì)胞的分離T細(xì)胞和B細(xì)胞的分離T細(xì)胞亞群的分離外周血單個(gè)核細(xì)胞分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheralmononuclearcells,PMNC）包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞（monocyte）。Ficoll分離液法主要用于分離外周血中的單個(gè)核細(xì)胞，是一種單次差速密度梯度離心的分離法。細(xì)胞分選和基本原理不同細(xì)胞密度不同不同細(xì)胞表面生物學(xué)特性不同不同細(xì)胞表面分化抗原不同不同細(xì)胞密度不同人的紅細(xì)胞密度為1.093

粒細(xì)胞密度為1.092

單個(gè)核細(xì)胞（淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞）的密度為1.076-1.090不同細(xì)胞密度不同用1.077±0.001的分層液可將細(xì)胞分離

密度梯度離心(Ficoll)離心淋巴細(xì)胞分離（去單核細(xì)胞）貼壁粘附法吸附柱過濾法磁鐵吸引法Percoll

分離液法（連續(xù)密度梯度離心）E花環(huán)沉降法尼龍毛柱分離法T細(xì)胞和B細(xì)胞的分離T細(xì)胞亞群的分離親和板結(jié)合分離法磁性微球分離法熒光激活細(xì)胞分離儀分離法細(xì)胞表面分化抗原（CD抗原）適用于T、B細(xì)胞的分離已知CD抗原細(xì)胞亞群的分離未知CD抗原細(xì)胞亞群的分離（陰性分選）磁珠大小可以選擇大小免疫磁珠分離細(xì)胞的特點(diǎn)比較

比較項(xiàng)目大磁珠小磁珠對(duì)細(xì)胞的影響對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械壓力，影響其生物學(xué)活性，不利于分離后培養(yǎng)。對(duì)細(xì)胞溫和，不影響分離細(xì)胞的后續(xù)培養(yǎng)。對(duì)流式細(xì)胞儀的影響阻塞流式細(xì)胞儀的噴嘴，影響散射光?？芍苯由狭魇郊?xì)胞儀檢測(cè)，不影響散射光。分離條件要求技術(shù)簡單，分離可在試管中完成。需要很強(qiáng)的磁場(chǎng)來分離細(xì)胞。收率得率高。得率不高。純度純度低。純度高。分離時(shí)間分離速度快。分離速度慢。分離成本成本低。需要很強(qiáng)的磁場(chǎng)來分離細(xì)胞，需要一次性的分離柱，不能在普通試管進(jìn)行。

免疫磁珠法細(xì)胞分選過程免疫磁珠細(xì)胞分選裝置全自動(dòng)細(xì)胞分選系統(tǒng)熒光激活細(xì)胞分離儀分離法

流式細(xì)胞分析儀淋巴細(xì)胞標(biāo)志及亞群分類常用于鑒定和檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志是簇分化抗原（Clusterofdifferentiation，CD）。

T細(xì)胞表面標(biāo)志及其亞群CD3+CD4+CD8-輔助性T細(xì)胞（helpTcell,Th）CD3+CD4-CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell,TcorCTL）CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatoryTcell,TrorTreg）B細(xì)胞表面標(biāo)志

SmIg、Fc受體、補(bǔ)體受體、EB病毒受體，部分CD分子是B細(xì)胞的重要表面標(biāo)志，其中以SmIg為B細(xì)胞所特有，是鑒定B細(xì)胞可靠的指標(biāo)。CD19/CD5分子：可將B細(xì)胞區(qū)分為B1細(xì)胞和B2細(xì)胞，B1細(xì)胞為CD19和CD5雙陽性，而B2細(xì)胞僅為CD19陽性，B2細(xì)胞為通常所指的B細(xì)胞。NK細(xì)胞表面標(biāo)志人類NK細(xì)胞表面標(biāo)志主要以CD16、CD56來認(rèn)定，臨床上將CD3-CD56+CD16+淋巴細(xì)胞認(rèn)定為NK細(xì)胞。T細(xì)胞及NK細(xì)胞抗原提呈類細(xì)胞免疫細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測(cè)抗體致敏細(xì)胞花環(huán)法免疫細(xì)胞化學(xué)法免疫熒光法流式細(xì)胞分析法淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測(cè)的臨床意義淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測(cè)是評(píng)價(jià)免疫功