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B15/19湖南省植物保護(hù)學(xué)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/SPPHN
單核苷酸多態(tài)性和侵染性克隆法鑒定蔬菜抗病毒病抗性技術(shù)規(guī)程Rule
for
evaluation
of
vegetables
resistance
against
viral
diseases-single
polymorphism
and
viral
infectious
clone
method11-20
發(fā)布 11-20
實(shí)施湖南省植物保護(hù)學(xué)會(huì)
發(fā)布學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SPPHN
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Solanum
)和辣椒(Capsicum
3.1
黃瓜花葉病毒(Cucumber
mosaic
virus,
Cucumovirus性降低。3.2
煙草花葉病毒(Tobacco
mosaic
virus,TMV)Tobamovirus),病毒粒子為桿狀結(jié)構(gòu)。可通過蚜蟲、種子、水、土壤、機(jī)械和嫁接傳播,寄主范圍廣,侵染葫蘆3.3
黃瓜花葉病毒病(Cucumber
mosaic
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003-2023學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載畸形,植株矮化,花和果實(shí)易脫落,導(dǎo)致減產(chǎn);果實(shí)畸形,從而失去商品性。3.4
煙草花葉病毒病(Tobacco
mosaic
畸形,果實(shí)著色不均勻或畸形,商品性嚴(yán)重下降。3.5
分子標(biāo)記(Molecular
3.6
CMV、TMV
infectious
cDNA
clones
of
CMV
orTMV
cDNA
3.7
disease
nursery的抗病水平。
4.1
CTAB
70
ddH
20
8.0)0.5
200
30
4.2
1.5%
1.5
100
504.3
50×TAE
242
57.1
37.2
ddH
4.4
SYBR
99
ddH
4.5
pH8.0
800
ddH
121
8.050
8.050
50%4.6
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003-2023學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載4.7
MS
4.43
30
5.8121
30
4.2
YEP
10
10
950
pH7.0
121
30
固體培養(yǎng)基添加瓊脂粉
4.3
100
500
的一次性注射器中,經(jīng)孔徑0.22
100
℃長(zhǎng)期保存。
50
250
利福平先用少量無水乙醇渦旋振蕩以溶解,再用無離子水定容至
,然后在超凈臺(tái)內(nèi)用一次性注射器和一次性0.22
濾膜過濾除菌,即配成50
利福平母液。分裝到個(gè)滅菌的
4.4
100
mmol/L
98.1
00
mmol/L
4.5
CMV、TMV
侵染性克隆農(nóng)桿菌菌株,采用該病毒的特異性引物和方法,擴(kuò)增出病毒基因組的全序列后,將擴(kuò)增產(chǎn)物克隆中,克隆進(jìn)行選和測(cè)定再利用限酶切法把基因全長(zhǎng)
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003-2023學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載6.1
10
6.2
Solanum
lycopersicum
Solanum
lycopersicum
Zuanhong
號(hào)(
6.3
70%30
20%0.1%15
5~66.4
131
℃,30~50
28
30
18
20
苗的子葉或第
7.1
7.2
DNA
7.2.1
100
107.2.2
0.2
15
12
000
10
7.2.3
20
7.2.4
12
000
10
7.2.5
75%
次;12
000
10
7.2.6
3050
ddH2O
7.3
PCR
7.3.1
20
μL10
μL10
μL
μL
μLddH2O15
μL學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SPPHN
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檢測(cè)反應(yīng)體系
94
35
94
30
30
72
72
10
7.5
7.5.1
擴(kuò)增產(chǎn)物10
μL
1.5%80
30
7.5.2
7.5.3
7.6
8.1
將凍存的
侵染性克隆農(nóng)桿菌菌株接種至含卡那霉素
100
mg/L
和利福平
50
28
24
48
50
100
50
28
200
xw學(xué)兔兔www.bzf.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SPPHN
003-2023xw學(xué)兔兔www.bzf.com標(biāo)準(zhǔn)下載
000
10
,隨即用
100
1.0
8.2
“6.2
子葉完全伸展和長(zhǎng)至第
0.1
辣椒植株置于防蟲溫室里,進(jìn)行正常的肥水管理。
9.1
周后觀察鑒定植株的發(fā)病癥狀,
30
9.2
引起花葉病毒病的病情級(jí)別劃分病情級(jí)別,并計(jì)算每份鑒定材料的病情指數(shù)(),取三次重復(fù)病情指數(shù)的平均值?!疲?/p>
100 ..………….………(1)
Highly
20
2040
40
Susceptiblezfwww.bxw兔學(xué)兔.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SPPHN
003-2023zfwww.bxw兔學(xué)兔.com標(biāo)準(zhǔn)下載
10
10.1
茄科作物材料對(duì)黃瓜花葉病毒病和煙草花葉病毒病抗性的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)10.2
茄科作物材料對(duì)黃瓜花葉病毒病和煙草花葉病毒病抗性的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)10.2
10.3
茄科作物材料抗黃瓜花葉病毒?。ū?/p>
年茄科作物材料抗黃瓜花葉病毒病鑒定結(jié)果記載表
年茄科作物材料抗煙草花葉病毒病鑒定結(jié)果記載表學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SPPHN
003-2023學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載10.4
5’-3’
556235723055
、
、
、
、
、
、
15651617657001819
CTTTCC
CTC
TCC55950
569
20
CTTTCC
CCT下準(zhǔn)om標(biāo)xw.czf學(xué)兔兔www.b載T/SPPHN
003-2023下準(zhǔn)om標(biāo)xw.czf學(xué)兔兔www.b載
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A.1.1
Cucumovirus),病毒粒子為二十面體球狀結(jié)構(gòu),是一種正單鏈植物病毒。煙草花葉病毒病的病原為煙草花葉病毒,屬于帚狀病毒科()煙草花葉
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