藍(lán)莓組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

1藍(lán)莓組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了藍(lán)莓組培育苗的術(shù)語(yǔ)和定義、外植體的采集和處理、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、移植、出圃分級(jí)、包裝、檢疫和運(yùn)輸。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T8321.10農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（十）DB21/T3693—2023藍(lán)莓苗木3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1外植體藍(lán)莓外植體blueberryexplants用于無(wú)菌培養(yǎng)的藍(lán)莓器官或組織。3.2藍(lán)莓組培苗blueberrytissueculturedplantlets利用藍(lán)莓外植體，通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的苗木。3.3初代培養(yǎng)primaryculture利用外植體作為材料進(jìn)行的第一代組織培養(yǎng)過(guò)程。3.4繼代培養(yǎng)subculture利用初代培養(yǎng)獲得的材料，轉(zhuǎn)接在繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)生長(zhǎng)的過(guò)程。3.5組培穴盤苗tissuecultureholedishplantlets移栽在穴盤中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間培育后的組培生根苗。4外植體的采集與處理4.1外植體的采集采集生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的當(dāng)年生帶芽藍(lán)莓枝條作為外植體。4.2外植體消毒2使用洗潔精清洗采集的外植體，流水沖洗20min-30min。在超凈工作臺(tái)上，使用75%的乙醇溶液浸泡30s，用無(wú)菌水洗凈，放入0.1%HgCl2溶液中浸泡10min，用無(wú)菌水沖洗5次-8次。5初代培養(yǎng)5.1初代培養(yǎng)基使用WPM培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，添加植物激素玉米素3.0mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂6.0g/L，調(diào)pH值至5.2±0.1。5.2接種用無(wú)菌的手術(shù)刀和剪刀將嫩枝分割成0.5cm-0.8cm的帶芽小段，接種于初代培養(yǎng)基上，無(wú)菌密封。置于光照培養(yǎng)架上20天-30天。5.3培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度25℃±2℃,光照時(shí)間12h/d-16h/d，光照強(qiáng)度1500Lux-2500Lux。6繼代培養(yǎng)6.1繼代培養(yǎng)基使用WPM培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，添加植物激素玉米素1.0mg/L，吲哚丁酸0.1mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂6.0g/L，調(diào)pH值至5.2±0.1。6.2轉(zhuǎn)接將長(zhǎng)大的藍(lán)莓幼苗剪成1.5cm-2cm的小段，轉(zhuǎn)接于繼代培養(yǎng)基上，無(wú)菌密封。置于關(guān)照培養(yǎng)架上30天-50天。繼代次數(shù)宜在15代以內(nèi)。6.3培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度25℃±2℃,光照時(shí)間12h/d-16h/d，光照強(qiáng)度2500Lux-3500Lux。7壯苗培養(yǎng)7.1壯苗培養(yǎng)基使用WPM培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，添加植物激素玉米素0.1mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂6.0g/L，調(diào)pH值至5.2±0.1。7.2轉(zhuǎn)接將繼代的藍(lán)莓苗剪成1.5cm-2cm的小段，轉(zhuǎn)接于壯苗培養(yǎng)基上，無(wú)菌密封。置于關(guān)照培養(yǎng)架上40天-60天。7.3培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度25℃±2℃,光照時(shí)間12h/d-16h/d，光照強(qiáng)度3000Lux-4000Lux。38移植8.1基質(zhì)使用苔蘚或泥炭土、珍珠巖和蛭石等體積混合物作為基質(zhì)，用0.5g/L多菌靈溶液或0.1%-0.2%高錳酸鉀殺菌消毒，調(diào)pH值至4.5-5.5。8.2煉苗將壯苗后的藍(lán)莓苗置于溫室自然散射光下，先密封煉苗5天-7天，后少許開(kāi)口煉苗1天-2天，溫度25℃8.3移植將煉苗結(jié)束后的藍(lán)莓苗用鑷子輕輕取出，浸蘸0.5mg/L萘乙酸+0.5mg/L吲哚丁酸生根劑后插入穴盤基質(zhì)中。置于溫室中培養(yǎng)。8.4管理溫度保持15℃-30℃,光照，濕度95%以上，常通風(fēng)換氣。每隔10天-15天葉面噴施一次0.1%復(fù)合肥，N:P:K=20:10:20。病蟲(chóng)害防治所用