SN-T 3585-2013出口活魚克林霉毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范

中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)出口活魚克林霉素檢測(cè)技術(shù)規(guī)范國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局I本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中華人民共和國(guó)山東出入境檢驗(yàn)檢疫局。1出口活魚克林霉素檢測(cè)技術(shù)規(guī)范1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了出口活魚中克林霉素殘留液相色譜、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)規(guī)范。本標(biāo)準(zhǔn)適用于出口活魚中克林霉素殘留的檢測(cè)。2規(guī)范性引用文件3試劑和材料3.8乙腈-水溶液(1+1,體積比):50mL乙腈與50mL水混合后振蕩搖勻。3.12克林霉素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：移取適量標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，用樣品空白提取液定容至1.0mL,配制4.1高效液相色譜儀。24.7離心機(jī)。5抽樣與樣品制備5.1檢測(cè)批和抽樣數(shù)量5.2樣品制備5.3試樣的保存將試樣于一18℃冷凍保存。在抽樣及樣品制備的操作過程中，應(yīng)防止樣品受到污染。6.1提取稱取5g均勻試樣(精確到0.01g)于50mL離心管中，加入15mL乙腈，渦旋混勻1min,振蕩10min,在4℃下以8000r/min轉(zhuǎn)速離心5/min,取上清液于另一離心管中，殘?jiān)?0mL乙腈洗滌，渦旋30s后以8000r/min離心5min,合并上清液。加人15mL乙腈飽和正己烷，振蕩10min,離心上述溶解液過OasisHLB柱，依次用3mL水，3mL'20%甲醇水溶液淋洗，再用5mL甲醇洗脫，洗脫液于40℃氮?dú)獯蹈伞Ｓ?mL乙腈水(1+1,體積比)溶解殘?jiān)?，過0.22μm濾膜，供高效液相色譜或高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。3按照液相色譜條件對(duì)樣液及標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)樣品定量，測(cè)定樣液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測(cè)化合物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測(cè)定的線性范圍內(nèi)。如果待測(cè)樣品溶液中被測(cè)物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測(cè)物的保留時(shí)間偏差在土2.5%之內(nèi)，中圖A.1。 (1)本方法克林霉素的回收率為：82.9%～94.5%,不同活魚基質(zhì)的添加回收及精密度參見附錄B中液相色譜條件如下：4035788.1d)其他質(zhì)譜條件參見附錄C。樣液和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件下進(jìn)樣，以基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量，測(cè)定樣液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中克林霉素的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測(cè)定的線性范圍內(nèi)。在上述色譜條件下，克林霉素的參考保留時(shí)間為4.3min,標(biāo)準(zhǔn)溶液的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)色譜圖參見附錄D中圖D.1。按照液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜條件測(cè)定樣液和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。如果待測(cè)樣品中被測(cè)物的保留時(shí)間與基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中保留時(shí)間偏差在士2.5%之內(nèi)；且樣液中被測(cè)物定性離子相對(duì)豐度與濃度相接近的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液中相應(yīng)的定性離子相對(duì)豐度進(jìn)行比較，偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中存在對(duì)應(yīng)的待測(cè)物。士20用色譜數(shù)據(jù)處理或按式(2)分別計(jì)算供試樣品中的克林霉素殘留量，計(jì)算結(jié)果需扣除空白值。c——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣液中克林霉素的濃度，c?——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白試驗(yàn)中克林V——樣液最終定容體積，單位為升(L);m——最終樣液代表的試樣質(zhì)量，單位為千克(kg)。5本方法克林霉素回收率為：81.1%～98.4%,不同活魚基質(zhì)的添加回收及精密度參見表B.2。67(資料性附錄)化合物序號(hào)基質(zhì)當(dāng)添加濃度為當(dāng)添加濃度為100pg/kg時(shí)當(dāng)添加濃度為平均可收率-相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)·偏差相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差平均回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差平均回收率1鯽魚92.592.52鯉魚85.592.892.33草魚84.592.992.14黃顙魚82.992.394.55石蝶魚85.292.394.36白鰱魚92.494.4表B.2高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)回收率化合物序號(hào)基質(zhì)當(dāng)添加濃度為當(dāng)添加濃度為10.0pg/kg.時(shí)當(dāng)添加濃度為15.0μg/kg時(shí)平均回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差平均回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差平均回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1鯽魚2鯉魚98:43草魚4黃顆魚5石蝶魚6白鰱魚8(資料性附錄)質(zhì)譜/質(zhì)譜儀參考質(zhì)譜條件!e)其他質(zhì)譜參數(shù)見表C.1。表C.1其他主要參考質(zhì)譜參數(shù)測(cè)定物質(zhì)