非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座培訓(xùn)課件

非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座人類基因組計劃和國際癌癥基因組計劃——個體化醫(yī)療的奠基石于1990年在美國正式啟動的人類基因組計劃，要把人體內(nèi)約10萬個基因的密碼全部解開，同時繪制出人類基因的譜圖。2006年多國聯(lián)合啟動的國際癌癥基因組計劃，是人類基因組計劃后的又一重大科學(xué)研究。揭示更多地與癌癥相關(guān)的突變類型，獲得50種腫瘤的特定分子異常譜型，探尋DNA變異與腫瘤發(fā)生發(fā)展的機理。2非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座腫瘤治療存在的核心問題盲目治療過度治療個體化治療3非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座肺癌的傳統(tǒng)分類觀點小細(xì)胞肺癌(SCLC)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)

腺癌 鱗癌 大細(xì)胞癌腺癌鱗癌大細(xì)胞小細(xì)胞4非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座肺腺癌的分子亞型KRASEGFRHER2BRAFALKfusionPIK3CAMEK1ROSfusionPDGFRamp肺腺癌的分子分類腺癌鱗癌大細(xì)胞小細(xì)胞肺癌的傳統(tǒng)分類5非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座EGFR基因突變檢測在臨床應(yīng)用的意義IPASS:根據(jù)突變狀態(tài)的療效分析048121620Timefromrandomisation(months)0.00.20.40.60.81.0GefitinibEGFRM+(n=132)

GefitinibEGFRM-(n=91)

Carboplatin/paclitaxelEGFRM+(n=129)Carboplatin/paclitaxelEGFRM-(n=85)GefitinibEGFRM+(n=132)

GefitinibEGFRM-(n=91)

Carboplatin/paclitaxelEGFRM+(n=129)Carboplatin/paclitaxelEGFRM-(n=85)無進(jìn)展生存率對象有效率不加選擇的中國患者30％根據(jù)臨床特征選擇優(yōu)勢人群50％根據(jù)EGFR敏感基因選擇+耐藥基因選擇70-80%80-95%

Mok,Wu,Thomprastetal.NEJM,20090.46非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座EGFR突變檢測的應(yīng)用很好預(yù)測TKI藥物對NSCLC患者的療效HRM血漿突變檢測8非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座EML4-ALK融合基因ALK最早是在間變性大細(xì)胞淋巴瘤（ALCL)的一個亞型中被發(fā)現(xiàn)的，因此定名為間變性淋巴瘤激酶（anaplasticlymphomakinase，ALK）。靶向藥：XALKORI?膠囊（克唑替尼），輝瑞公司。NCCN與ESMO推薦ALK陽性NSCLC的一線治療首選克唑替尼?？傮w突變率：11.4%腺癌突變率：16.1%鱗癌突變率：0.7%優(yōu)勢人群：輕微/從未吸煙；與EGFR突變?nèi)巳合啾?，ALK融合人群年齡更輕；腺癌；EGFR/KRAS野生型；病理學(xué)特（含印戒細(xì)胞的黏液型或?qū)嵭韵侔┲?，ALK融合基因的發(fā)生率高于其他類型的肺腺癌(46．2％VS.8.0％）9非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座EML4-ALK融合檢測的意義無進(jìn)展生存期的概率(%)100806040200 0 5 10 15 20 25時間(月)

克唑替尼(n=173)化療(n=174)事件,n(%)100(58)127(73)中位數(shù),個月7.73.0HR(95%CI)0.49(0.37-0.64)P<0.0001Shawetal.,ESMO2012;AbstractLBA1_PRNEnglJMed2013;368:2385-9410非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座NCCN指南推薦11非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座靶向藥物檢測項目匯總藥物基因癌種樣本判斷標(biāo)準(zhǔn)重要程度吉非替尼/厄洛替尼/?？颂婺酔GFR非小細(xì)胞肺癌組織標(biāo)本、血漿、體液標(biāo)本突變敏感必檢KRAS突變耐藥推薦克唑替尼EML4-ALK組織標(biāo)本融合敏感必檢ROS1組織標(biāo)本融合敏感推薦12非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座鉑類藥物與ERCC1mRNA表達(dá)LordRVNetal,ClinCancerRes,2002,8:2286-91背景ERCC1（ExcisionRepairCrossComplementGroup1）是核酸外切修復(fù)家族中重要成員，參與DNA鏈的切割和損傷識別。ERCC1的表達(dá)量直接影響DNA修復(fù)的生理過程，DNA修復(fù)是鉑類化療耐藥性產(chǎn)生的主要機制之一。13非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座吉西他濱與RRM1mRNA表達(dá)背景

吉西他濱是脫氧胞嘧啶核苷同系物，屬細(xì)胞周期特異性抗代謝類化療藥，主要作用于DNA合成期（S期）的腫瘤細(xì)胞，同時也阻斷細(xì)胞增殖由G1向S期過渡的進(jìn)程。臨床研究顯示低RRM1mRNA水平的肺癌患者對吉西他濱敏感性相對較高，藥物療效較好，中位生存期延長。而且，專家建議RRM1高表達(dá)的患者應(yīng)避免使用吉西他濱。RafaelRosell1.Oncogene(2003)22,3548–355314非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座抗微管類藥物與TUBB3mRNA表達(dá)背景抗微管類化療藥是作用于細(xì)胞微管，通過影響紡錘體形成，從而抑制細(xì)胞有絲分裂的一類廣譜化療藥。在多種臨床研究中，TUBB3mRNA表達(dá)水平與抗微管類化療的療效密切相關(guān)。低TUBB3表達(dá)水平的腫瘤患者接受紫杉醇類或長春堿類化療的效果較好，中位生存期較長。反之，TUBB3高表達(dá)的患者的抗微管類化療療效較差。RafaelRosell1.Oncogene(2003)22,3548–355315非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座氟類藥物與TYMSmRNA表達(dá)背景TYMS基因編碼的胸苷酸合成酶（TS）是嘧啶核苷酸合成的限速酶，是腫瘤生長的重要因子。5-FU的代謝物5-FdUMP與TS結(jié)合，阻礙TS的正常功能，從而抑制DNA合成。臨床研究表明，低TYMSmRNA水平的腫瘤患者接受氟類化療的效果較好，中位生存期較長。反之，TYMS高表達(dá)的患者對氟類療效較差。研究也發(fā)現(xiàn)培美曲賽的療效與TYMSmRNA表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。ByYoshinoriShirota,JournalofClinicalOncology,2001,19:4298-430416非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座化療藥物檢測項目（mRNA表達(dá)）類型藥物基因樣本評價mRNA表達(dá)卡鉑、順鉑奧沙利鉑ERCC1石蠟切片新鮮組織低表達(dá)敏感抗微管藥物TUBB3低表達(dá)敏感吉西他濱RRM1低表達(dá)敏感氟尿嘧啶培美曲賽TYMS低表達(dá)敏感17非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座樣本要求石蠟包埋腫瘤組織塊一般組織塊不小于5×5×5（mm），組織包于蠟塊正中央，處理完可歸還蠟塊（推薦）。送檢保存：常溫保存、運輸。新鮮腫瘤組織塊要求提供50mg左右的樣本，取癌組織的中心位置組織塊，5×5mm（綠豆大）以上，以PBS或生理鹽水清洗干凈，15分鐘內(nèi)放入RNAlater保存液或液氮中保存。送檢保存：常溫保存、運輸，取樣后24小時內(nèi)送檢。全血標(biāo)本使用枸櫞酸鈉（1：9）或EDTA-Na2抗凝的采血管，血液樣本2ml以上。禁忌：切勿使用肝素抗凝劑；切勿反復(fù)凍融。送檢保存：4℃冰箱保存，切不可置于-20℃中（血細(xì)胞在融解的時候易發(fā)生溶血）；當(dāng)天送檢，冰上運輸。18非小細(xì)胞肺癌基因檢測專業(yè)知識講座案例分析姓名：王女士年齡：46診斷：非小細(xì)胞肺癌樣品種類：穿刺組織檢測項目：EGFR突變檢測；EML4-ALK基因融合檢測；ERCC1表達(dá)量；TYMS表達(dá)量；RRM1表達(dá)量；TUBB3表達(dá)量檢測項目檢測結(jié)果臨床意義EGFR突變19外顯子突變